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紫苏内生真菌代谢产物及其抗肿瘤抗氧化活性研究

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紫苏内生真菌代谢产物及其抗肿瘤抗氧化活性研究

作者：张琪金中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

植物内生真菌在高等植物中普遍存在,具有丰富的多样性,由于宿主与环境的不同,其代谢产物也呈现丰富的化学多样性并受到广泛关注,许多内生真菌代谢产物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、杀虫活性,是天然活性产物的重要来源。紫苏Perill... 详细信息

植物内生真菌在高等植物中普遍存在,具有丰富的多样性,由于宿主与环境的不同,其代谢产物也呈现丰富的化学多样性并受到广泛关注,许多内生真菌代谢产物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、杀虫活性,是天然活性产物的重要来源。紫苏Perilla frutescens（L.）Britt.是唇形科的一年生草本植物,广泛分布于中国、日本、韩国等东亚地区,其叶、茎、种子均可入药,紫苏叶还可食用。紫苏不仅具有抗过敏、抗抑郁、抗肿瘤和抗菌等多种生物活性,还具有较强的生长适应性和较好的重金属耐受性。多种内生真菌与紫苏存在共生关系,部分菌株具有促生、抗逆作用,并能产生具有生物活性的次生代谢产物。本研究以前期筛选得到的与抗逆相关的内生真菌菌株为研究对象,对其代谢产物及抗肿瘤、抗氧化生物活性进行研究,旨在明确其活性物质基础,对其代谢产物进行系统的分离和鉴定,为进一步开发利用紫苏功能菌株提供科学依据,同时也为深入解析植物与内生真菌之间的相互作用关系,丰富活性天然产物库以及药物开发和农业应用提供参考。本文研究内容主要分成以下三个部分:一、紫苏内生真菌抗肿瘤活性菌株筛选对从紫苏中分离得到的20株对重金属耐受性强的菌株制备发酵代谢产物并进行抗肿瘤活性筛选,初筛发现有11株菌株代谢产物对人肝癌细胞Hep G2的生长具有较强抑制活性。进一步复筛获得菌株ZP-J8、BC-J4和BC-G1代谢产物对Hep G2细胞和人前列腺癌细胞DU-145的增殖具有较强的抑制作用;3株菌株代谢产物对人乳腺癌细胞MCF-7、人肺腺癌细胞NCI-H1975和人结肠癌细胞HT-29的生长也有较好的体外抑制效果。结合形态学观察与分子生物学鉴定结果,将菌株ZC-J8鉴定为层出镰刀菌Fusarium proliferatum,菌株BC-J4鉴定为博宁炭疽菌Colletotrichum boninense,菌株BC-G1鉴定菜豆壳球孢Macrophomina phaseolina。对3株活性菌株代谢产物经过LC-MS检测分析显示,代谢产物中含有机酸类及其衍生物、氨基酸类和肽类、生物碱类及其衍生物、糖类、酚类、黄酮类、木脂素和新木脂素类、醌类、核苷类、萜类、香豆素类、脂肪酸类、嘌呤及其衍生物、嘧啶及其衍生物、酚酸类等多种成分。二、4株活性内生真菌代谢产物的分离鉴定及活性测试对筛选得到的3株具有抗肿瘤活性菌株以及1株课题前期筛选得到的具有抗菌活性菌株BP-Y6,通过大量发酵获得其代谢产物,利用MCI柱层析,Sephadex LH-20凝胶柱层析以及正相硅胶柱层析,再结合半制备液相色谱等分离技术对所得代谢产物进行分离,所得单体化合物利用核磁共振、质谱等技术鉴定其结构,总共鉴定出22个化合物。从菌株BC-J4代谢产物中分离得到8个化合物,分别鉴定为:环（4-羟基脯氨酸-亮氨酸）(1)、尿嘧啶（2）、环（丙氨酸-酪氨酸）(3)、对氨基苯乙酸（4）、曲霉毒素A（5）、2-（4-羟基苯）乙醇醋酸酯（6）、2-（4-羟基苯）乙醇（7）、环（脯氨酸-苏氨酸）(8);从菌株BC-G1代谢产物中分离得到5个化合物,分别鉴定为:环（脯氨酸-缬氨酸）(9)、4,5,8-三羟基-3-甲基异色原酮（10）、环（苯丙氨酸-丙氨酸）(11)、4-羟基蜂蜜曲菌素（12）、环（苯丙氨酸-酪氨酸）(13);从菌株ZC-J8代谢产物中分离得到5个化合物,分别鉴定为环（4-羟基脯氨酸-亮氨酸）(1)、环（脯氨酸-缬氨酸）(9)、环（苯丙氨酸-丙氨酸）(11)、环（脯氨酸-色氨酸）(14)、环（脯氨酸-苯丙氨酸）(15);从菌株BP-Y6代谢产物中分离得到8个化合物,分别鉴定为:尿嘧啶（2）、甲羟戊酸内酯（16）、胸腺嘧啶脱氧核苷（17）、5-羟甲基糠醛（18）、5-羟基己酸-4-内酯（19）、原儿茶酸（20）、N-（2-羟基丙酰基）-2-氨基苯甲酸酰胺（21）和对羟基苯乙酸（22）。通过虚拟筛选技术对分离得到的22个化合物与皮表生长因子受体（EGFR）进行分子对接,结果表明化合物3和14的对接结合能低于EGFR抑制剂厄洛替尼（erlotinib）,推测化合物3和14可能具有抑制肿瘤细胞生长活性。测试了部分分离所得化合物对Hep G2细胞和DU-145细胞增殖的作用效果,结果表明化合物3对DU-145的细胞增殖有抑制作用,与分子对接结果相符,首次发现环（丙氨酸-酪氨酸）具有体外抗肿瘤活性,可能通过作用于EGFR靶点发挥作用。三、紫苏内生真菌产胞外多糖分析及抗氧化活性研究内生真菌胞外多糖是内生真菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外渗于培养基中的一类糖类化合物,胞外多糖与真菌的环境适应性有关,并具有抗菌、抗氧化等生物活性。对紫苏中分离得到的20株对重金属耐受性强的菌株进行产胞外多糖筛选,通过观察菌落周围有粘稠分泌物为标准初步筛选

关键词：紫苏内生真菌代谢产物胞外多糖抗肿瘤抗氧化

思维导图应用于义务教育第三学段数学复习课的行动研究

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思维导图应用于义务教育第三学段数学复习课的行动研究

作者：康张琪重庆三峡学院

学位级别：硕士

复习课在帮助学生梳理单元知识、联系新旧知识、形成知识框架和发散数学思维等方面起着关键作用。目前,数学复习课时经常采用“知识-练-小结”的模式进行教学,这样复习方式会使学生的思维发展受抑制,教师需要改变传统复习方式,发挥学生... 详细信息

复习课在帮助学生梳理单元知识、联系新旧知识、形成知识框架和发散数学思维等方面起着关键作用。目前,数学复习课时经常采用“知识-练-小结”的模式进行教学,这样复习方式会使学生的思维发展受抑制,教师需要改变传统复习方式,发挥学生的主观能动性。思维导图作为一种教学工具,它由一个关键事物不断发散思维联想到更多相关的内容,帮助学生快速、准确的掌握知识,形成知识框架,再加上思维导图色彩鲜艳,符合学生的年龄特征,更能吸引学生的注意力,提高学习效率。本研究以重庆市W小学六年级学生为对象,开展三轮行动研究。首先,行动研究开展之前,笔者运用调查问卷和访谈了解该校六年级数学复习课现状,分析目前数学复习课存在的问题。其次,笔者在实验班共开展三轮行动研究,每轮行动研究包括以下四点:行动计划、行动实施、行动观察、存在问题与下一轮行动研究改进思路。最后,通过学生在第一次、第二次行动研究过程中的访谈和单元测试卷成句的分析,了解思维导图应用于义务教育第三学段数学复习课后学生知识掌握、解题能力和学习水平的变化。总结出应用思维导图的价值:一是激发学生学习兴趣,二是提高学生分析问题、解决问题的能力,三是满足学生个性化学习需求,四是创设教学资源。并提出了以下建议:一是更新观念;二是明确目的;三是及时反馈;四是循序渐进。本研究时间较短,样本偏少,且笔者缺乏教学经验,难免有不足之处。但从本次教学实践来看,效果还是明显的。对于本次研究的不严谨之处,还需笔者以后工作中进一步去探讨和完善。

关键词：义务教育第三学段思维导图数学复习课行动研究教学

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无托槽隐形矫治器导下颌向前的有限元分析

无托槽隐形矫治器导下颌向前的有限元分析

作者：陈张琪湖北医药学院

学位级别：硕士

背景:目前隐形功能矫治器导下颌向前越来越多的被运用在青少年II类下颌后缩错颌畸形的治疗中,但对于隐形功能矫治器的生物力学研究较少。有限元分析作为一种分析工具,可通过对真实口腔系统进行仿真建模,观察正畸治疗中的口颌系统各部分... 详细信息

背景:目前隐形功能矫治器导下颌向前越来越多的被运用在青少年II类下颌后缩错颌畸形的治疗中,但对于隐形功能矫治器的生物力学研究较少。有限元分析作为一种分析工具,可通过对真实口腔系统进行仿真建模,观察正畸治疗中的口颌系统各部分的应力应变变化情况。目的:通过位移载荷的方式,运用三维有限元分析方法,分析隐形矫治器在对青少年安氏II类错颌畸形进行功能矫形治疗时的口颌系统各部分的应力分布,为隐形功能矫治器导下颌向前提供生物力学理论依据。方法:基于一名II类错颌畸形青少年的口腔锥形束CT影像,建立包含隐形功能矫治器的三维有限元分析模型,通过在ANSYS有限元分析软件中对隐形矫治器咬合板处施加不同的位移载荷,获得对应位移载荷下隐形矫治器斜面导板处所产生的反应力。比较其位移时相关肌肉韧带的约束反力与隐形矫治器和下牙列各部分在下颌前伸时产生的等效应力分布与变形情况。结果:颞肌各组份、咬肌深层前份、咬肌深层后份、蝶下颌韧带、茎突下颌韧带的约束反力随着下颌矢状向与垂直向的位移增大而增大;颏舌肌、二腹肌前腹、下颌舌骨肌前份、下颌舌骨肌后份随着下颌矢状向位移的增大而增大,并随着垂直向位移的增大而减小,但下颌舌骨肌后份的约束反力较小;髁突等效应力最大值随着矢状向位移的增大而增大,随着垂直向位移的增大而减小;下颌升支与水平面的角度随着垂直位移的增加逐渐增大,并随着矢状位移的增加逐渐减小;随着矢状向与垂直向位移的增大,隐形矫治器斜面导板处的力反应也逐渐增大,且力的矢状与垂直分量受下颌位移载荷的影响而发生变化;隐形矫治器斜面导板与矫治器整体连接处为应力最大点,斜面导板的颊侧应力大于舌侧应力;当随着移位载荷增大而增大,应力集中区也逐渐增大;下切牙在不同位移载荷的条件下均存在唇向倾斜、远中倾斜与垂直向伸长的位移趋势;结论:口颌肌肉与韧带在功能矫治中下颌的不同颌位中收到不同的被动牵张力,对下颌骨的适应性改建发挥了作用;通过不同颌位的功能矫治器可调控各肌肉的改建情况,从而在改善矢状向不调的同时兼顾患者佩戴的舒适,并且有希望对患者的垂直向不调与咽部气道产生积极影响;下前牙在不同位移载荷下均表现为唇向的倾斜运动,以中切牙与侧切牙的运动较为明显,下颌后牙观察到向后运动的趋势,可能与隐形矫治器的形变有关;在隐形功能矫治器建立的不同颌位中,斜面导板均存在应力集中,使斜面导板形变,影响矫治效果;在矫治器的设计与制作中,特别是当患者的矢状向前导量较大时,应着重加强斜面导板与矫治器整体连接处。通过对隐形功能矫治器导下颌向前的三维有限元分析为隐形功能矫治器提供生物力学理论依据,并希望能够对隐形功能矫治器的临床使用与设计提供帮助。

关键词：有限元分析 Twin-block 隐形矫治器功能矫治器

卷积神经网络结合子域适应的低采样率肌电手势识别

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浙江大学学报（工学版） 2024年第10期58卷 2011-2019页

作者：周雕熊馨周建华宗静张琪昆明理工大学信息工程与自动化学院云南昆明650500

为了提升模型识别低采样率肌电手势的性能,提出新的识别方法.通过信息扩展层对预处理后的低采样率肌电信号信息进行扩展,增强关键特征的表示.在特征提取网络中,利用子域适应网络提取源域与目标域中的域不变特征后进行域不变特征分类.使... 详细信息

为了提升模型识别低采样率肌电手势的性能,提出新的识别方法.通过信息扩展层对预处理后的低采样率肌电信号信息进行扩展,增强关键特征的表示.在特征提取网络中,利用子域适应网络提取源域与目标域中的域不变特征后进行域不变特征分类.使用NinaPro数据库中的DB1和DB5子数据库对所提方法进行评估.实验结果表明,所提方法识别53种和52种手势的最高准确率分别为90.89%(DB1)、89.90%(DB5)和82.01%(DB1)、77.07%(DB5),能够降低电极移位、肌肉疲劳、皮肤阻抗的变化和肌肉相对电极的相对运动等因素对低采样率肌电手势识别的影响.

关键词：低采样率表面肌电手势识别子域适应信息扩展挤压与激励注意力机制

预防与控制:能源市场准入制度因应“双碳”目标的法律机理

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重庆大学学报（社会科学版） 2024年第4期30卷 198-211页

作者：张忠民张琪中南财经政法大学法学院湖北武汉430073 中南财经政法大学生态文明研究院湖北武汉430073

能源结构低碳化转型作为“双碳”目标推进的重要战略,需要一系列制度措施来促进“清洁用能”和“能源供给”兼备的能源结构格局之形成。市场机制是能源结构低碳化转型的主要驱动,而能源市场准入制度是发挥市场机制秩序稳定与风险防范作... 详细信息

能源结构低碳化转型作为“双碳”目标推进的重要战略,需要一系列制度措施来促进“清洁用能”和“能源供给”兼备的能源结构格局之形成。市场机制是能源结构低碳化转型的主要驱动,而能源市场准入制度是发挥市场机制秩序稳定与风险防范作用的重要约束和规制工具。因此,能源结构低碳化转型须构建完善的能源市场准入制度予以落实。传统能源市场准入制度对低碳治理的规制存在局限,革新的能源市场准入制度应当体现出维护能源市场秩序与气候公共利益实现的双重价值追求,功能定位在“预防—控制”的二元结构。“预防—控制”的功能定位呼唤能源市场准入制度明确更为科学的立法导向,该制度的规范建构须分别在“碳源”阶段与“碳流”阶段实施不同的功能分配、资源整合与立法策略:前者聚焦于调适能源开发利用中传统化石能源、清洁能源与可再生能源的比例,促进能源结构的低碳升级;后者注重能源产业的资质准入与行为监督,在保障能源合理供给的基础上强化低碳治理。由此切入,能源市场准入制度的革新应当按照统一性与差异性相结合的原则,从能源供给与低碳控制两个层面归纳所涉制度要素并对之定性,进一步完善准入标准、许可事务、准入审批与后续监管等要素的规范形态,充实规范内容与程序结构,提升制度能力。具言之,一是以协调能源供给与低碳控制为原则,注重不同能源准入情景下需要何种强度的资格准入、规模准入、项目审查等标准的实践性指向,形成具备稳定性与定量性的准入标准;二是以“能源供给的必要性”和“碳风险程度”为划分标准,根据不同能源开采企业与加工转换企业的特性来识别差异化的运营需求与行为要求,进而厘定各类能源产业的许可条件设定与事务分配;三是以准入审批与后续监管并重的结构化联结为理念,构建以“准入事务与标准的履行能力”为中心的专项审查模式与以“能源供给与低碳控制的义务履行实效”为中心的后续监管模式,强化被准入主体的能源服务供给与低碳义务的履行。

关键词：能源法 “双碳”目标市场准入能源结构行政许可

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白垩纪中期热室地球陆地古气候研究进展~

第四纪研究 2024年

作者：杨柳高远毋正轩张琪中国地质大学(北京)地球科学与资源学院

白垩纪中期(约125～80 Ma)是过去150 Ma以来温度最高的极端温室气候时期,也被称为“热室地球”时期。本研究对全球白垩纪中期陆地古气候研究进行了系统梳理,根据其研究内容及方法进行了分类。通过总结分析陆地温度、降水的定量重建数据... 详细信息

白垩纪中期(约125～80 Ma)是过去150 Ma以来温度最高的极端温室气候时期,也被称为“热室地球”时期。本研究对全球白垩纪中期陆地古气候研究进行了系统梳理,根据其研究内容及方法进行了分类。通过总结分析陆地温度、降水的定量重建数据,发现在约100 Ma时陆地温度开始上升,在Cenomanian末期达到温度最高值(中纬度约14～26℃;高纬度约8～18℃);而降水记录由于受地形等众多因素的影响,并没有显示出明显的趋势,仅能看出在Cenomanian期约100 Ma起,随着温度的逐渐升高,降水量也呈现增多的趋势。进一步与白垩纪中期全球海相温度记录进行对比,发现陆地气候与海相气候具有基本一致的变化趋势,即在Cenomanian初期约100 Ma时海-陆温度都具有明显上升,在Cenomanian-Turonian界限附近达到最高值。当前的白垩纪中期陆地古气候研究也存在一些不足,如定量古气候数据相对较少、缺乏连续和高分辨率陆地古气候记录等。松辽盆地国际大陆科学钻探获得了白垩纪约118～80 Ma累计约6000 m近乎连续的陆相岩芯,为研究热室地球陆地古气候变化提供了重要的地质资料,未来有望建立连续且高分辨率的白垩纪中期陆地古气候记录,探索热室地球气候运作机制。

关键词：白垩纪中期热室地球古气候陆相

嵌合抗原受体T细胞治疗后低丙种球蛋白血症的研究进展

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白血病．淋巴瘤 2024年第6期33卷 381-384页

作者：张琪肖毅华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科武汉430030

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗是血液肿瘤治疗领域的重大突破, 但CAR-T疗法在发挥强大疗效的同时伴随着一系列不良反应, 其中低丙种球蛋白血症较常见, 易增加患者感染风险, 探讨这一不良反应的发生机制及干预策略对于患者的预后有着重... 详细信息

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗是血液肿瘤治疗领域的重大突破, 但CAR-T疗法在发挥强大疗效的同时伴随着一系列不良反应, 其中低丙种球蛋白血症较常见, 易增加患者感染风险, 探讨这一不良反应的发生机制及干预策略对于患者的预后有着重要意义。文章就CAR-T治疗后发生低丙种球蛋白血症的机制、影响因素、预防和管理策略的研究进展进行综述。

关键词：低丙种球蛋白血症嵌合抗原受体T细胞静脉注射用免疫球蛋白免疫球蛋白G