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血管内皮生长因子反义寡核苷酸增强髓系白血病细胞对三尖杉酯碱敏感性

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中华血液学杂志 2005年第1期26卷 27-30页

作者：费嘉张洹暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸对急性髓系白血病(AML)、慢性粒细胞白血病(CML)细胞的三尖杉酯碱敏感性的影响及其可能的机制。方法采用以前实验筛选所获得的VEGF最优反义寡核苷酸A7,长度为20个脱氧核糖核苷酸,全硫代修饰... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸对急性髓系白血病(AML)、慢性粒细胞白血病(CML)细胞的三尖杉酯碱敏感性的影响及其可能的机制。方法采用以前实验筛选所获得的VEGF最优反义寡核苷酸A7,长度为20个脱氧核糖核苷酸,全硫代修饰;在低血清(2%)条件下,以脂质体介导转染细胞8h,调整培养液血清浓度至10%。24h后加入三尖杉酯碱继续培养至72h,用锥虫蓝拒染法计数活细胞,用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白的浓度,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分率。结果与随机对照序列联合三尖杉酯碱组相比,VEGF反义寡核苷酸与三尖杉酯碱联用可显著抑制AML、CML细胞存活(AML组存活细胞数下降38%,CML组存活细胞数下降25%),并下调VEGF蛋白的表达(AML组蛋白表达下降25.44%,CML组蛋白表达下降30.81%),增加三尖杉酯碱诱导的AML、CML细胞凋亡百分率(AML组凋亡细胞百分率增加48.29%,CML组凋亡细胞百分率增加52.76%)。结论VEGF反义寡核苷酸可提高AML、CML细胞对三尖杉酯碱的敏感性;白血病细胞分泌的内源性VEGF蛋白具有抵抗药物杀伤作用。

关键词：三尖杉酯碱 CML AML 反义寡核苷酸血管内皮生长因子 VEGF蛋白髓系白血病活细胞组蛋白凋亡细胞

胎肝干细胞抗原阳性细胞向肾脏细胞分化的研究

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中华医学杂志 2003年第19期83卷 1686-1690页

作者：廖继东张洹暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的　探讨小鼠胚胎肝组织中的 ,干细胞抗原 1阳性的细胞 (Sca 1+ 细胞 )向肾组织上皮细胞分化的潜能。方法　取 14 5d的小鼠胎肝 ,制作细胞悬液 ;用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca 1+ 细胞 ;用PCR鉴别Y-染色体性别决定区域 (SRY)... 详细信息

目的　探讨小鼠胚胎肝组织中的 ,干细胞抗原 1阳性的细胞 (Sca 1+ 细胞 )向肾组织上皮细胞分化的潜能。方法　取 14 5d的小鼠胎肝 ,制作细胞悬液 ;用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca 1+ 细胞 ;用PCR鉴别Y-染色体性别决定区域 (SRY)基因序列 ;将 2× 10 3 个雄性小鼠Sca 1+细胞输注给经 10Gy剂量60 钴全身照射的雌性小鼠体内 ;于移植后 2个月 ,处死受体小鼠 ,取肾脏组织固定 ,制片 ;用免疫组织化学染色和荧光原位杂交检测雌性受体小鼠肾脏组织内供体小鼠胎肝Sca 1+细胞的分布和横向分化情况。结果　在肾小管上皮内和肾小球边缘 ,分别发现存在Y染色体阳性的供体来源的细胞 ,同时呈现肾组织的部分特征 ,表型分别为RCA+ 、CYP+ 1A2 、CD4 5 -、F-4/ 80 和波形蛋白阳性、CD-45、F-4/ 80 。结论　小鼠胎肝Sca 1+ 细胞 (其中绝大部分是造血干细胞 ) 。

关键词：胎肝干细胞抗原阳性细胞细胞分化免疫组织化学荧光原位杂交法肾脏组织

半乳糖受体介导的c-myc反义寡核苷酸对人肝癌细胞的靶向投递作用

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癌症 2004年第11期23卷 1288-1293页

作者：蒋建伟张洹暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

背景与目的:c-myc反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)能抑制肝癌细胞的增殖,脂质体和腺病毒介导的c-mycASODN投递虽能显著抑制肝癌细胞的增殖,抑制荷肝癌小鼠肿瘤的生长,但这种投递缺乏靶向性;受体介导的药物投递具有... 详细信息

背景与目的:c-myc反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)能抑制肝癌细胞的增殖,脂质体和腺病毒介导的c-mycASODN投递虽能显著抑制肝癌细胞的增殖,抑制荷肝癌小鼠肿瘤的生长,但这种投递缺乏靶向性;受体介导的药物投递具有高效性和靶向性的特点,已被用于基因及ASODN的靶向投递。本实验以半乳糖(galactose,Gal)-聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)作为载体,介导c-mycASODN作用于人肝癌细胞Bel-7402,探讨c-mycASODN对Bel-7402细胞的靶向投递作用。方法:用流式细胞仪检测Bel-7402、U937细胞对荧光标记的Gal-PEI-c-myc-ASODN(简称Gal-PEI-ASODN)的摄取率及细胞内平均荧光强度;相差/荧光显微镜观察荧光标记的Gal-PEI-ASODN及c-myc-ASODN进入Bel-7402、U937、Raji细胞的形态;台盼蓝拒染法检测不同浓度Gal-PEI-ASODN对这三种细胞增殖的影响。结果:荧光标记的Gal-PEI-ASODN或ASODN与相应细胞孵育10min到4h,Gal-PEI-ASODN-Bel-7402细胞的荧光摄取率为88.25%～98.66%,细胞内平均荧光强度为38.64%～111.90%,与单纯c-mycASODN-Bel-7402细胞组、Gal-PEI-ASODN-U937细胞组相比,所有时间点的细胞荧光摄取率、胞内平均荧光强度均显著增高,经Poission分布检验,均有显著性差异(P<0.01)。相差/荧光显微镜观察到?

关键词： c-myc 反义寡核苷酸肝癌受体半乳糖

舍曲林联合经颅磁刺激治疗对抑郁症患者认知功能的影响

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中国科技期刊数据库医药 2023年第6期 35-38页

作者：张洹南昌大学医学院江西南昌330000

观察舍曲林联合经颅磁刺激治疗(TMS)对抑郁症患者认知功能的影响。方法选取成都棕南医院精神科于2022年4月至2022年12月收治的抑郁症患者96名,用随机数字表法将患者分为实验组和对照组,每组48名。对照组予以盐酸舍曲林治疗,研究组患者... 详细信息

观察舍曲林联合经颅磁刺激治疗(TMS)对抑郁症患者认知功能的影响。方法选取成都棕南医院精神科于2022年4月至2022年12月收治的抑郁症患者96名,用随机数字表法将患者分为实验组和对照组,每组48名。对照组予以盐酸舍曲林治疗,研究组患者则予以舍曲林联合经颅磁刺激治疗。抑郁症状使用蒙哥马利抑郁量表(MADRS)评分,认知功能则采用THINC-integrated tool (THINC-it)进行测评。结果实验组和对照组在年龄、教育水平、性别和MADRS分数上无明显差异(P>0.05)。两组在短时记忆上比较,差异无统计学意义(P>0.05);在认知缺陷自评表、注意力、信息处理能力、执行能力和总体认知功能比较上差异有统计学意义(P<0.05)。结论舍曲林联合经颅磁刺激治疗对抑郁症病人认知功能的疗效显著。

关键词：抑郁症认知功能舍曲林颅磁刺激治疗

β-ME和BHA体外诱导人胎肝CD34^+细胞向神经组织细胞分化研究

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中国应用生理学杂志 2004年第3期20卷 280-283,F006,F007页

作者：刘革修张洹暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的 :建立巯基乙醇 (β mercaptoethanol,β ME)和丁羟回醚 (butylatedhydroxyanisole ,BHA)体外诱导人胎肝 (fe talliver ,FL)干细胞向神经细胞分化模型。方法 :采用MACS试剂盒分离人胚胎肝CD34+ 细胞 ,以DMEM +10 %胎牛血清培养液培... 详细信息

目的 :建立巯基乙醇 (β mercaptoethanol,β ME)和丁羟回醚 (butylatedhydroxyanisole ,BHA)体外诱导人胎肝 (fe talliver ,FL)干细胞向神经细胞分化模型。方法 :采用MACS试剂盒分离人胚胎肝CD34+ 细胞 ,以DMEM +10 %胎牛血清培养液培养 ;第五代细胞待细胞融合达 80 %后 ,用DMEM +10 %胎牛血清 +1mmol/Lβ ME +0 .2mmol/LBHA诱导 2 4h ,PBS洗涤。然后在无血清培养基中培养 5h～ 5d。用免疫细胞化学方法分析诱导前后的细胞表型特点。结果 :经 β ME +BHA诱导处理后 ,细胞表现神经元样细胞形态 ,表达神经组织细胞特异蛋白 ,如neustin、NeuN、NF M、TuJ 1和NSE。统计显示 81%细胞NeuN染色阳性 ,75 %细胞TuJ 1染色阳性 ,4 7%染色NF M阳性 ,90 %染色NSE阳性。结论 :β ME和BHA能够诱导体外培养的人FLCD34+ 细胞分化为具有神经细胞特异性抗原和成分的神经样细胞 ;

关键词：人胎肝 CD34^+细胞分化神经细胞

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移植胎鼠间充质干细胞的抗衰老作用

生理学报 2010年第1期62卷 79-85页

作者：李军张洹刘革修暨南大学医学院血液病研究所广州510632

本文旨在研究BALB/c小鼠胎鼠源干细胞同种异体移植的抗衰老作用。采用无菌剖宫产取胎鼠,密度梯度离心法分离干细胞,贴壁培养法纯化扩增间充质干细胞,连续3次尾静脉注射P1代细胞植入15月龄雌性BALB/c小鼠体内。超声检查小鼠心脏,检查血... 详细信息

本文旨在研究BALB/c小鼠胎鼠源干细胞同种异体移植的抗衰老作用。采用无菌剖宫产取胎鼠,密度梯度离心法分离干细胞,贴壁培养法纯化扩增间充质干细胞,连续3次尾静脉注射P1代细胞植入15月龄雌性BALB/c小鼠体内。超声检查小鼠心脏,检查血清总超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量、谷胱甘肽过氧化物酶活力,各器官做解剖学检查以及组织学衰老程度比较、评分。结果显示,Y染色体原位杂交实验检测到移植后干细胞长期存活,移植后移植组小鼠存活日期明显长于对照组,移植3个月后评价心功能的各指标,心脏质量指数、脾脏质量指数,心脏、肾脏、肺脏、皮肤、结肠等器官组织学衰老程度评分结果以及血液生化指标,皆优于对照组(均P<0.05)。以上结果提示,移植小鼠胎鼠源干细胞能有效地延缓小鼠衰老进程。

关键词：胎鼠干细胞移植抗衰老

bcl-2反义药物的设计及其对白血病细胞生长的影响

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中国药理学通报 2002年第6期18卷 652-656页

作者：雷小勇张洹南华大学药物药理研究所衡阳421001 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的　通过计算机模拟bcl 2基因的mRNA二级结构 ,优化反义药物设计。方法　用计算机程序Mfold软件模拟mRNA的二级结构后 ,筛选出不稳定的二级结构区域 ,进行反义药物设计 ;用实验评价所设计反义药物的生物效应 ,筛选出的bcl 2反义寡核... 详细信息

目的　通过计算机模拟bcl 2基因的mRNA二级结构 ,优化反义药物设计。方法　用计算机程序Mfold软件模拟mRNA的二级结构后 ,筛选出不稳定的二级结构区域 ,进行反义药物设计 ;用实验评价所设计反义药物的生物效应 ,筛选出的bcl 2反义寡核苷酸对白血病细胞株HL 60、K5 62生物学活性的影响。结果　有 2个位点的反义寡核苷酸在计量为 10 μmol·L-1以上时 ,能明显抑制细胞的生长活性。结论　bcl

关键词： bcl-2基因反义核酸药物设计白血病基因治疗

“新工科”背景下智能制造专业产教融合育人模式探索与实践

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内燃机与配件 2024年第13期 153-155页

作者：陶能如陈诺言蔡颂张洹语白斌湖南第一师范学院智能制造学院湖南大学机械与运载工程学院

“新工科”作为中国工程教育的改革方向，注重培养学生的工程实践能力、创新能力和国际竞争力。近年来，智能制造专业人才需求剧增，且逐渐向复合型、应用型和创新型等方向发展。因此，亟需一种新的产教融合模式为智能制造专业人才培养... 详细信息

“新工科”作为中国工程教育的改革方向，注重培养学生的工程实践能力、创新能力和国际竞争力。近年来，智能制造专业人才需求剧增，且逐渐向复合型、应用型和创新型等方向发展。因此，亟需一种新的产教融合模式为智能制造专业人才培养提供良好的基础和条件，全面对接国家“新工科”对立德树人的新要求。通过“优化课程体系构建模式、实践教学校企结合、产业需求促教”的产教融合方式，与行业企业协同育人，解决理论学习与企业人才需求不对称的问题，培养学生实践能力、创新思维，提升人才培养质量。为深化应用型本科院校的教学改革和培养高素质应用型人才提供参考。

关键词：新工科智能制造产教融合育人模式

人胚胎骨髓间充质干细胞的增殖能力及其向三个胚层起源细胞分化的特性

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生理学报 2008年第3期60卷 425-430页

作者：王跃春张洹暨南大学医学院血液病研究所广州510632

为探讨人胚胎骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells from human fetal bone marrow,hfBM-MSCs)的增殖能力及其向三个胚层起源细胞分化的"类胚胎干细胞"特性,本文利用细胞差速贴壁生长特性分离纯化hfBM-MSCs,用流式细胞仪检测hfBM-M... 详细信息

为探讨人胚胎骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells from human fetal bone marrow,hfBM-MSCs)的增殖能力及其向三个胚层起源细胞分化的"类胚胎干细胞"特性,本文利用细胞差速贴壁生长特性分离纯化hfBM-MSCs,用流式细胞仪检测hfBM-MSCs的细胞周期和MSCs特异的表面标志;用免疫细胞化学方法和RT-PCR法分别在蛋白和RNA水平检测人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)和胚胎干细胞特异性抗原Oct4、SSEA-4的表达;用各种化学试剂诱导hfBM-MSCs向神经元、脂肪细胞和胰岛B细胞分化并加以鉴定。流式细胞仪检测结果显示,第4、5代hfBM-MSCs分别有92.3%和96.1%的细胞处于G0/G1期;这些细胞表达CD29、CD44和CD106,不表达造血细胞标志CD34和CD45,极低地表达与移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)相关的HLA-DR、CD40和CD80。免疫细胞化学和RT-PCR结果显示,hfBM-MSCs表达Oct4、SSEA-4等胚胎干细胞标志,hTERT也呈阳性表达。在特定诱导条件下,hfBM-MSCs可分化为神经元样细胞(外胚层)、脂肪样细胞(中胚层)和胰岛B样细胞(内胚层)。因此,人胚胎骨髓中含有丰富的MSCs,hfBM-MSCs具有胚胎干细胞的主要生物学特性,且免疫原性弱,是组织工程和细胞治疗较为理想的种子细胞。

关键词：胎儿骨髓间充质干细胞胚胎干细胞