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蓖麻株型性状QTL定位及关键基因挖掘

蓖麻株型性状QTL定位及关键基因挖掘

作者：张柳琴广东海洋大学

学位级别：硕士

蓖麻（Ricinus communis L.）是一种重要的工业用油作物,株型性状作为一种重要农艺性状,与蓖麻的光合速率、机械化收获和产量息息相关。本研究以蓖麻高、矮杆组合（9048×16-201）的后F、BC和S群体为研究对象,对株高、主穗位高、主茎节... 详细信息

蓖麻（Ricinus communis L.）是一种重要的工业用油作物,株型性状作为一种重要农艺性状,与蓖麻的光合速率、机械化收获和产量息息相关。本研究以蓖麻高、矮杆组合（9048×16-201）的后F、BC和S群体为研究对象,对株高、主穗位高、主茎节数、主茎节长、主穗长度、主穗有效穗长、主穗有效穗长比、叶长、叶宽、分枝茎粗、分枝夹角和单株有效穗数等12个株型性状展开了QTL定位,并对候选基因进行基因注释和q RT-PCR验证。主要研究结果如下:1.父本16-201对蓖麻株型的改良效果显著,F代的株高、主穗位高、主茎节长、主穗长度、主穗有效穗长、主穗有效穗长比、分枝茎粗、叶长和叶宽降低了13%-45.12%,分枝夹角和单株有效穗数分别增加了54.58%和149.5%。因此,16-201可以作为蓖麻株型改良的工具材料。2.蓖麻株型性状对株高影响的综合排序为:主穗位高>主穗长度>叶宽>分枝茎粗,线性回归方程为:株高=25.056+0.849主穗位高+2.278分枝茎粗+0.29叶宽+0.271主穗长度。3.主基因+多基因混合遗传模型分析表明,除主茎节长仅1对主基因,遗传率为20.24%,其余11个株型性状均由2对主基因控制,主基因遗传率在58.25%-97.2%之间,其中,仅主穗有效穗长比检测到多基因存在,多基因遗传率为8.34%。4.在F群体中共检测到25个单位点QTL,其中长度类株型性状15个,株高/主穗位高/主茎节长/主穗长度/主穗有效穗长分别检测到2/2/3/5/3个,单个QTL的贡献率在3.04%-8.7%,非长度类株型性状10个,主茎节数/分枝茎粗/叶长/叶宽/分枝夹角分别检测到3/1/2/2/2个,单个QTL的贡献率在3.65%-10.06%;在BC群体中共检测到7个单位点QTL,其中长度类株型性状6个,株高/主穗长度/主穗有效穗长/主穗有效穗长比分别检测到1/2/2/1个,单个QTL的贡献率在3.85%-14.6%,非长度类株型性状仅分枝夹角检测到1个,贡献率为4.1%;在S’群体（S群体10%的极端单株）中共检测到3个单位点QTL,其中主穗位高/主茎节长/分枝夹角分别检测到1/1/1个,单个QTL的贡献率为8.11%/7.95%/7.56%,进一步验证了F群体的定位结果。5.上位性QTL在F群体共检测到9对,株高/主穗有效穗长比分别检测到1/8个,每对互作QTL的贡献率在5.2%-10.52%;在BC群体共检测到16对,其中长度类株型性状15对,主茎节长/主穗长度/主穗有效穗长/主穗有效穗长比分别检测到3/1/1/10对,每对互作QTL的贡献率在1.38%-21.66%,非长度类株型性状仅主茎节数有1对,贡献率为4.27%。6.共定位QTL在F群体检测到5个,在BC群体中检测到1个;稳定QTL共检测到2个。对稳定且共定位QTL标记区间RCM915-RCM950加密标记后,进一步精细定位在2个物理距离较小的共定位QTL标记区间RCM915-RCM920和RCM922-RCM931。7.在上述6个共定位QTL标记区间共检索到88个开放阅读框,结合功能注释与前人研究,初步预测7个基因为株型性状候选基因,其中,LOC8276049、LOC8258569、LOC8259049、LOC8283458、LOC8283452编码参与GA、BR、IAA、CTK、ABA和CT等激素信号传导途径,q RT-PCR结果也证明这5个基因在高、矮秆材料间的时空表达具有显著差异。以上结果为蓖麻株型性状的遗传规律提供了新的见解,可为蓖麻矮化育种和宜机收、密植品种的研究提供参考。

关键词：蓖麻株型性状 QTL定位精细定位候选基因

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蓖麻高产宜机收杂交组合评价

广东农业科学 2024年第1期51卷 21-30页

作者：左金鹰陆建农殷学贵黄冠荣张柳琴林海虹张星语刘陆洲广东海洋大学滨海农业学院广东湛江524088

【目的】对蓖麻杂交组合进行联合评价,为筛选高产、宜机收蓖麻品种提供理论参考。【方法】联用灰色关联度分析、主成分分析和聚类分析对30个蓖麻杂交组合的产量性状、宜机收性状和光合性能3个方面进行综合评价。【结果】在灰色关联度分... 详细信息

【目的】对蓖麻杂交组合进行联合评价,为筛选高产、宜机收蓖麻品种提供理论参考。【方法】联用灰色关联度分析、主成分分析和聚类分析对30个蓖麻杂交组合的产量性状、宜机收性状和光合性能3个方面进行综合评价。【结果】在灰色关联度分析中,根据育种目标构建了理想品种;通过各组合与理想品种之间的加权关联度评选出N_(19)(0.768)、N_(7)(0.751)、N_(11)(0.727)、N_(10)(0.717)、N_(6)(0.713)和N_(13)(0.712)6个组合。其中,前4个组合的加权关联度优于淄蓖5号(0.714),后2个组合的加权关联度与淄蓖5号接近;主成分分析结果将10个性状归纳为株型因子、产量决定因子和光合与分枝夹角因子3个主成分,累计贡献率达67.07%。30个组合中,21个组合的综合得分均大于淄蓖5号(-0.699),且仅N_(18)(2.370)、N_(4)(1.848)、N_(19)(1.742)和N_(11)(1.019)4个组合的得分大于1,并以N19最为突出,其得分远高于其他材料;聚类分析结果显示,在欧氏距离值为22处可将30个组合划分为4个类群,第Ⅳ类群成员(包括N19、N11和N30)的整体表现与理想品种最为相似,但分枝夹角(59.10°)较大,仍需进一步改良。【结论】综合3种评价结果,避免了多余材料入选和优良材料丢失,最终筛选出N19和N112个产量高、株型好和光合速率高的蓖麻杂交组合,它们的综合表现均优于淄蓖5号,为品种改良方向提供参考。

关键词：蓖麻灰色关联度分析主成分分析聚类分析高产机械收获

可溶性PD-L1对Lewis肺癌移植瘤生长的影响及其在EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血中的表达特性

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可溶性PD-L1对Lewis肺癌移植瘤生长的影响及其在EGFR敏感突变中晚...

作者：张柳琴苏州大学

学位级别：硕士

肺癌是目前临床最常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率在全球范围内均居恶性肿瘤首位。肿瘤的免疫逃逸机制是近年来的研究热点,研究发现,共刺激分子在肿瘤免疫逃逸中发挥着非常重要的作用。其中,共刺激分子程序性死亡受体-1(Programmed d... 详细信息

肺癌是目前临床最常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率在全球范围内均居恶性肿瘤首位。肿瘤的免疫逃逸机制是近年来的研究热点,研究发现,共刺激分子在肿瘤免疫逃逸中发挥着非常重要的作用。其中,共刺激分子程序性死亡受体-1(Programmed death-1,PD-1)是CD28/B7超家族成员之一,程序性死亡配体-1(Programmed death ligand-1,PD-L1)是其配体之一。PD-1/PD-L1可介导负性共刺激信号,抑制T、B淋巴细胞的功能,该抑制途径在肿瘤发生的免疫机制研究中具有重要意义。研究证实,许多协同刺激分子不仅以细胞膜型形式存在,还以可溶性形式广泛存在,如sCD28、sOX40L、sTNFR和sCTLA-4等。这些可溶性分子的生物学意义及其与临床疾病的相关性有待研究。临床大量研究发现,机体内有些可溶性协同共刺激分子的表达水平具有疾病诊断或预后判断价值,肿瘤组织表达的PD-L1可作为某些肿瘤中抗PD-L1抗体临床疗效的标志物。我们在以往的临床研究中发现,肺癌患者血清中sPD-L1高表达,且与肺癌的分期及淋巴结转移有关。然而,体内研究如利用动物模型研究可溶性PD-L1(sPD-L1)分子对Lewis肺癌移植瘤生长的影响及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血sPD-L1的表达特性的研究报道在国内外尚不多见。鉴于此,在本研究中,我们建立了Lewis肺癌移植瘤小鼠模型,向小鼠体内腹腔注射sPD-L1蛋白,观察肿瘤的生长;同时在临床上检测EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者EGFR-TKI治疗后外周血sPD-L1水平并探讨其临床意义,分析EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者的外周血中sPD-L1水平与年龄、性别及TNM分期的相关性,通过ROC曲线分析外周血sPD-L1和癌胚抗原(CEA)对EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者的临床评估价值。一、可溶性PD-L1分子对Lewis肺癌移植瘤生长的影响【目的】利用C57BL/6小鼠肺癌模型,研究不同剂量的sPD-L1对肿瘤形成和生长的影响。【方法】应用流式细胞术测定Lewis肺癌细胞株表面PD-L1的表达和C57BL/6小鼠外周血及脾脏T淋巴细胞膜表面PD-1分子的表达,建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,向小鼠腹腔注射sPD-L1蛋白(sPD-L1Ig)(工作剂量:2.5、5、10μg/只),同时向小鼠腹腔注射sPD-L1对照蛋白作为对照,观察不同水平的可溶性PD-L1蛋白对Lewis肺癌移植瘤生长的影响。在瘤细胞接种后第18天,应用流式细胞术测定小鼠脾脏T淋巴细胞亚群。【结果】Lewis肺癌细胞株表面PD-L1呈阳性表达,表达阳性率为17.06%,C57BL/6小鼠脾脏T淋巴细胞表面PD-1分子呈阳性表达,表达阳性率为18.0%,其外周血T淋巴细胞表面PD-1分子的表达阳性率仅为2.9%;与对照组相比,sPD-L1Ig工作剂量为10μg/只时C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤体积更大(P0.05);未干预小鼠和sPD-L1对照蛋白小鼠脾脏T淋巴细胞CD4/CD8比值分别为1.92、1.87,而sPD-L1Ig10μg/只小鼠脾脏T淋巴细胞CD4/CD8比值为1.57。【结论】体内环境下,一定水平的可溶性PD-L1(工作剂量为10μg/只)可以促进C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长。二、可溶性PD-L1分子在EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血中的表达特性及临床意义【目的】检测表皮生长因子受体(EGFR)敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血中可溶性程序性死亡配体1(sPD-L1)的水平,探讨其临床意义。【方法】收集2015年5月至2016年7月苏州大学附属第二医院呼吸科门诊及病房收治的72例经EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗的EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者的外周血(EGFR突变组),同时选择性别、年龄、分期匹配的31例经气管镜或经皮穿刺肺活检小标本确诊、经EGFR-TKI治疗的中晚期EGFR野生型肺腺癌患者(EGFR野生组)作为对照。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测上述患者外周血中sPD-L1水平。EGFR-TKI治疗2月后评估临床效果,将EGFR突变组分为疾病进展组(PD组,36例)和疾病控制组(DC组,36例),观察其外周血中sPD-L1水平差异,分析EGFR突变组的外周血中sPD-L1水平与年龄、性别及TNM分期的相关性,同时通过ROC曲线分析外周血sPD-L1和癌胚抗原(CEA)对突变组患者的临床评估价值。【结果

关键词： sPD-L1 移植瘤肺腺癌 EGFR突变 EGFR-TKI 疗效

蓖麻根腐病抗性鉴定及其SSR标记的初步建立

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广西植物 2023年第7期43卷 1326-1334页

作者：刘海燕陆建农殷学贵顾帅磊谢钰张柳琴黄冠荣刘朝裕张肖肖左金鹰广东海洋大学滨海农业学院广东湛江524088

蓖麻根腐病是茄腐镰孢菌(Fusarium solani)引起的根部病害,严重影响蓖麻产量。抗源缺乏制约了抗病品种的选育。为寻找抗病种质、建立抗性分子标记,该研究对252份蓖麻材料的抗性进行了表型和分子标记鉴定。结果表明:(1)浓度为1×10^(6)个... 详细信息

蓖麻根腐病是茄腐镰孢菌(Fusarium solani)引起的根部病害,严重影响蓖麻产量。抗源缺乏制约了抗病品种的选育。为寻找抗病种质、建立抗性分子标记,该研究对252份蓖麻材料的抗性进行了表型和分子标记鉴定。结果表明:(1)浓度为1×10^(6)个·mL^(-1)的孢子悬浮液灌根是一种有效的接种方法;以接种后枯萎天数为基础的5级评价法,可作为鉴定标准。(2)鉴定出130份抗病材料,其中高抗为105份。(3)野生材料中抗病材料比率(66%)远高于栽培材料(35%),建议将野生材料,尤其是中国华南野生材料的研究利用作为今后抗病育种的重要方向。(4)初步建立了8个与抗性关联的SSR标记。该研究结果提供了有效的根腐病抗性鉴定方法和评价标准,筛选出了一批育种迫切需要的抗病基因资源,初步建立了可用于辅助选择的SSR标记,为蓖麻抗根腐病育种奠定了重要基础。

关键词：蓖麻根腐病抗病性鉴定茄腐镰孢菌孢子悬浮液 SSR

EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血中可溶性程序性死亡配体1的水平及其临床意义

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中华医学杂志 2016年第48期96卷 3870-3874页

作者：张柳琴陈颖潘雪邢玉斐施敏骅陈永井苏州大学附属第二医院呼吸内科 215004 苏州大学转化医学研究院

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血中可溶性程序性死亡配体1（sPD-L1）的水平及其临床意义。方法收集2015年5月至2016年7月苏州大学附属第二医院呼吸科收治的72例经EGFR-酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗的E... 详细信息

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血中可溶性程序性死亡配体1（sPD-L1）的水平及其临床意义。方法收集2015年5月至2016年7月苏州大学附属第二医院呼吸科收治的72例经EGFR-酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗的EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者（EGFR突变组），同时选择性别、年龄、分期匹配的31例经EGFR—TKI治疗的中晚期经气管镜或经皮穿刺肺活检小标本确诊的EGFR野生型肺腺癌患者（EGFR野生组）作为对照。酶联免疫吸附（ELISA）法检测两组患者外周血中sPD-L1水平。根据EGFR—TKI治疗2个月的临床效果将EGFR突变组分为疾病进展组（PD组，36例）和疾病控制组（DC组，36例），观察其外周血中sPD—L1水平差异，分析EGFR突变组的外周血中sPD—L1水平与TNM分期的相关性，同时通过ROC曲线分析外周血sPD—L1和癌胚抗原（CEA）对突变组患者的临床评估价值。结果经EGFR—TKI治疗2个月后EGFR突变组外周血sPD—L1水平显著低于EGFR野生组[0．75（0．15～2．78）比1．56（0．85～3．29）μg/L，P〈0．001]。EGFR突变组中PD组外周血sPD—L1水平显著高于DC组[1．175（0．62～2．78）比0．625（0．15～2．27）μg/L，P〈0．001]。外周血sPD—L1水平增高与淋巴结转移及远处转移相关（x。=10．985、4．662，均P〈0．05）。外周血sPD．L1和CEA的ROC曲线下面积分别为0．893（95％CI：0．830～0．956）和0．745（95％CI：0．652—0．839）。sPD—L1为0．815ng／L时，Youden指数最大，其灵敏度和特异度分别为77．8％、91．4％。结论经EGFR-TKI治疗后EGFR敏感突变中晚期肺腺癌患者外周血中sPD-L1降低，提示sPD-L1可能依赖EGFR信号通路的调控，sPD-L1水平可反映治疗的效果。

关键词：肺腺癌基因 erbB-1 可溶性程序性死亡配体1

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市场疲软与金融对策

广西经济研究 1990年第7期 21-23页

作者：赵玉山张柳琴

妇产科护理人员职业暴露危险因素分析与对策研究

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中国医药指南 2012年第9期10卷 293-294页

作者：苏银青张柳琴河源市源城区人民医院妇产科广东河源517000

目的对妇产科护理人员职业暴露的危险因素进行分析,探讨临床应对对策。方法从我院中随机选取23名妇产科护士,采用自行设计的问卷对其进行调查,问卷内容是否存在职业暴露的危险因素,如心理性危害、物理性危害、化学性危害、生物性危害等... 详细信息

目的对妇产科护理人员职业暴露的危险因素进行分析,探讨临床应对对策。方法从我院中随机选取23名妇产科护士,采用自行设计的问卷对其进行调查,问卷内容是否存在职业暴露的危险因素,如心理性危害、物理性危害、化学性危害、生物性危害等,加之护理人员的自我防护行为,根据危险因素分析防护对策。结果通过问卷调查分析得到,护士面临的众多的危害因素中,认为面临心理性危害的人数为16人,占69.57%,面临物理性危害7人,占30.43%,面临化学性危害12人,占52.17%,面临生物性危害17人,占73.9%,护理人员的自身防护意识不高,个人防护行为存在误区。结论生物性危害对护理人员的健康危害最显著,需要强护理人员相关防护知识的培训,使其了解职业危害带来的不良后果,增强自我防护意识对于降低职业危害意义重大。

关键词：妇产科护理人员职业暴露的危险因素

宫腔内水囊填塞对前置胎盘产后大出血的疗效观察

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中国医药指南 2013年第16期11卷 641-642页

作者：张艳萍李烨张柳琴广东省河源市源城区人民医院妇产科广东河源517000

目的观察宫腔内水囊填塞对前置胎盘产后大出血的疗效。方法对我院2008年10月至2012年12月收治的74例前置胎盘产后大出血患者的临床资料进行回顾性分析。结果与对照组相比,观察组患者的操作时间和出血时间明显较短,水囊压迫后12h后平均... 详细信息

目的观察宫腔内水囊填塞对前置胎盘产后大出血的疗效。方法对我院2008年10月至2012年12月收治的74例前置胎盘产后大出血患者的临床资料进行回顾性分析。结果与对照组相比,观察组患者的操作时间和出血时间明显较短,水囊压迫后12h后平均出血量明显较少,二者差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患者的治疗总有效率为100%,对照组患者的治疗总有效率为78.4%。和对照组相比,观察组患者的治疗总有效率明显较高,二者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论宫腔内水囊填塞对前置胎盘产后大出血具有良好的临床疗效,值得在临床广为推广。

关键词：宫腔内水囊填塞前置胎盘产后大出血疗效

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102例无痛分娩的观察与护理体会

赣南医学院学报 2013年第3期33卷 414-415页

作者：张柳琴黄彩彬广东省河源市源城区人民医院妇产科广东河源517000

目的:探讨产妇无痛分娩的有效护理方法。方法:对2008年3月至2012年12月期间在我院接受无痛分娩共102例产妇的临床资料进行回顾性分析与总结。结果:102例产妇均采取硬膜外麻醉无痛分娩术,围产期均给予了心理护理、产前及产后护理等多项... 详细信息

目的:探讨产妇无痛分娩的有效护理方法。方法:对2008年3月至2012年12月期间在我院接受无痛分娩共102例产妇的临床资料进行回顾性分析与总结。结果:102例产妇均采取硬膜外麻醉无痛分娩术,围产期均给予了心理护理、产前及产后护理等多项有效护理措施,所有产妇均顺利分娩,母婴平安,无1例出现分娩并症。结论:在有效无痛分娩术的同时采取心理护理和产前产后护理等多种有效护理措施是提高产妇生育质量的关键,可减轻产妇的痛苦,避免分娩并发症的发生,确保母婴平安。

关键词：无痛分娩产妇护理措施