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湖羊不同花纹皮肤组织差异表达基因的筛选

中国农业科学 2013年第2期46卷 376-384页

作者：孙伟倪蓉殷金凤丁家桐张有法陈玲吴文忠周洪扬州大学动物科学与技术学院苏州市畜牧兽医站徐州市睢宁县林牧渔业局

【目的】旨在了解中国特有的白色羔皮羊品种—湖羊不同花纹及其毛囊形成的分子遗传学机理。【方法】利用安捷伦基因芯片技术筛选初生湖羊大花和小花皮肤组织差异表达基因。【结果】差异表达分析显示,3对大花和小花组分别筛选出1 069、2 ... 详细信息

【目的】旨在了解中国特有的白色羔皮羊品种—湖羊不同花纹及其毛囊形成的分子遗传学机理。【方法】利用安捷伦基因芯片技术筛选初生湖羊大花和小花皮肤组织差异表达基因。【结果】差异表达分析显示,3对大花和小花组分别筛选出1 069、2 071和3 879个差异表达基因,共有137个共同基因;差异基因经GO分类显示,主要参与细胞分化、增殖、凋亡、发育、免疫应答、离子转运等生物学过程;另外,所验证的4个差异表达基因的荧光定量PCR结果与芯片结果基本一致。【结论】筛选出了BMP7、MMP2、SNAI1、SFXN1、CDKNIC、MT3、POU1F1等对湖羊大花、小花性状形成可能具有重要影响的候选基因。

关键词：湖羊毛囊基因芯片

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肉鸡传染性脑脊髓炎的诊断

中国兽医杂志 1997年第5期 24-25页

作者：盛水兴张有法顾咏梅刘国绶江苏省苏州市畜牧兽医站

肉鸡传染性脑脊髓炎的诊断盛水兴张有法顾咏梅刘国绶（江苏省苏州市畜牧兽医站，２１５１２８）１９９４年底，在吴县市某乡流行一种以发病突然、共济失调、瘫痪为主的家禽疾病，平均发病日龄为２７日龄。平均死亡率１５％左右，最高达... 详细信息

肉鸡传染性脑脊髓炎的诊断盛水兴张有法顾咏梅刘国绶（江苏省苏州市畜牧兽医站，２１５１２８）１９９４年底，在吴县市某乡流行一种以发病突然、共济失调、瘫痪为主的家禽疾病，平均发病日龄为２７日龄。平均死亡率１５％左右，最高达５０％，随发病日龄增大，死亡率明显...

关键词：鸡传染性脑脊髓炎盛水咏梅刘国江苏省苏州市畜牧兽医站发病日龄共济失调运动失调神经系统疾病

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肉用绵羊与湖羊杂交产羔性能的研究

畜牧与兽医 2003年第12期35卷 18-19页

作者：王元兴杨若飞张有法蒋琴兰陈玲南京农业大学动科院江苏南京210095 江苏省苏州市种羊场江苏苏州215000

湖羊是分布于我国江苏、浙江两省太湖周边地区的高繁殖力绵羊品种,以耐高温、高湿、性成熟早、四季发情、多胎、高产著称.我们曾对湖羊产区吴县东山镇、西山镇两地进行过湖羊繁殖性能的调查和繁殖率选育研究,湖羊的平均产羔率为232.20%... 详细信息

湖羊是分布于我国江苏、浙江两省太湖周边地区的高繁殖力绵羊品种,以耐高温、高湿、性成熟早、四季发情、多胎、高产著称.我们曾对湖羊产区吴县东山镇、西山镇两地进行过湖羊繁殖性能的调查和繁殖率选育研究,湖羊的平均产羔率为232.20%,东山湖羊资源保护区产羔率为252.8%,其中经选育保种的148头高繁殖力基础母羊,产羔率高达320.60%.收稿日期:2003-02-25

关键词：肉绵羊湖羊杂交产羔性能

绵羊YAP1基因全长cDNA克隆及生物信息学分析

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中国农业科学 2013年第8期46卷 1725-1735页

作者：孙伟李达苏锐马月辉关伟军张有法陈玲吴文忠周洪扬州大学动物科学与技术学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所苏州市畜牧兽医站徐州市睢宁县林牧渔业局

【目的】克隆绵羊YAP1基因cDNA并分析其序列及其蛋白的遗传特性及其在不同组织中不同程度的表达情况。【方法】以湖羊为研究对象,利用RT-PCR和RACE技术获得绵羊YAP1序列,并结合生物信息学方法对绵羊YAP1的序列进行深入分析。【结果】从... 详细信息

【目的】克隆绵羊YAP1基因cDNA并分析其序列及其蛋白的遗传特性及其在不同组织中不同程度的表达情况。【方法】以湖羊为研究对象,利用RT-PCR和RACE技术获得绵羊YAP1序列,并结合生物信息学方法对绵羊YAP1的序列进行深入分析。【结果】从湖羊背最长肌中克隆YAP1基因的全长cDNA序列;利用生物信息学技术,对绵羊YAP1基因与其它物种的同源性,蛋白质序列的跨膜区,亚细胞定位,亲水性,潜在信号肽剪切位点,糖基化位点,磷酸化位点,编码产物进行功能预测分析,及其编码蛋白的二级结构,三级结构等进行分析。【结论】克隆获得绵羊YAP1基因序列全长为1 712 bp,包括1 212 bp的编码区序列,编码403个氨基酸。同源性分析发现,绵羊YAP1核苷酸序列与推测氨基酸序列与灰仓鼠的同源性最高,分别达到78.77%和92.51%,而与人、黑猩猩的一致性差异较小。氨基酸序列分析发现该基因编码蛋白为水溶性蛋白,相对分子量为44079.0Da,理论等电点为4.91,无信号肽序列和跨膜区;亚细胞定位主要在细胞核,不属于分泌蛋白;预测含有33个磷酸化位点,7个糖基化位点,具有两个WW结构域,二级结构以无规则卷曲为主,三级结构显示,YAP1结构域区构成弯曲状螺旋结构。预测YAP1蛋白主要在调节功能过程中有着关键作用。以上研究为进一步探讨YAP1基因在肌肉生长过程中的功能研究奠定了遗传信息基础。

关键词：绵羊 YAP1 克隆生物信息学表达

绵羊YAP1基因的克隆及其真核表达载体和突变型载体的构建

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畜牧兽医学报 2013年第8期44卷 1198-1204页

作者：李达孙伟苏锐张占英马月辉张有法陈玲吴文忠周洪扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 保定市中华路小学保定071000 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 苏州市畜牧兽医站苏州215200 徐州市睢宁县林牧渔业局睢宁221200

本研究旨在克隆绵羊YAP1基因CDS序列,构建并鉴定其真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1,及其磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A。本研究利用RT-PCR技术,从湖羊背最长肌克隆YAP1基因编码区序列,T-A克隆到pMD 19-T载体中,进行测序。利用酶切和T4... 详细信息

本研究旨在克隆绵羊YAP1基因CDS序列,构建并鉴定其真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1,及其磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A。本研究利用RT-PCR技术,从湖羊背最长肌克隆YAP1基因编码区序列,T-A克隆到pMD 19-T载体中,进行测序。利用酶切和T4连接酶连接方法,将YAP1基因编码区克隆到pEGFP-C 1载体中,构建pEGFP-C 1-YAP1真核表达载体,以真核表达载体为模板,构建磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A,2种载体均进行PCR、BamHⅠ和XhoⅠ双酶切、BamHⅠ单酶切及测序鉴定。结果克隆出YAP1基因的全长cDNA序列,获得GenBank登录号JQ 714252,其长度为1 712bp,编码区1 212bp,编码403个氨基酸。重组质粒pEGFP-C1-YAP1经PCR、酶切、测序鉴定,证实YAP1基因CDS区已正确克隆入pEGFP-C1表达载体;经测序鉴定,YAP1第42位丝氨酸成功突变为丙氨酸。本研究成功克隆绵羊YAP1基因全长cDNA序列,并构建了重组真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1及磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A,为进一步研究YAP1蛋白表达及其生物学活性奠定基础。

关键词：绵羊 YAP1基因真核表达载体磷酸化位点突变体

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院校思想政治工作仍需换脑筋

政工导刊 1997年第3期 33-34页

作者：张有法第一军医大学南方医院政治部

江泽民同志讲:"解放思想,是党的十一届三中全会的一个非常重要的原则精种。思想不解放、脑筋不换,一切工作都很难推动。"对于思想政治工作来讲,只有敢于冲破传统思维定势的束缚.积极适应新形势的发

关键词：思想政治工作群众教研能力调动积极性外部环境客观世界教研水平

湖羊催乳素受体基因外显子10多态性及与其母性行为性状的关联分析

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畜牧兽医学报 2013年第5期44卷 673-680页

作者：孙伟张向楠左其生倪蓉王兰萍张有法陈玲吴文忠周洪扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 盐城师范学院盐城224002 苏州市畜牧兽医站苏州215200 徐州市睢宁县林牧渔业局睢宁221200

旨在研究催乳素受体(PRLR)基因在湖羊群体中的遗传多样性,以探讨其影响湖羊母性行为性状的可能性,为评价绵羊母性提供遗传学分析方法。以81只分娩母羊为研究对象(其中63只进行母性行为观察),采用PCR-SSCP技术检测湖羊PRLR基因外显子10... 详细信息

旨在研究催乳素受体(PRLR)基因在湖羊群体中的遗传多样性,以探讨其影响湖羊母性行为性状的可能性,为评价绵羊母性提供遗传学分析方法。以81只分娩母羊为研究对象(其中63只进行母性行为观察),采用PCR-SSCP技术检测湖羊PRLR基因外显子10基因序列的单链核苷酸多态性。运用正态分布检验、聚类分析及非参数检验法,研究湖羊母性行为分布规律和不同基因型的湖羊母性行为的差异性。结果显示,仅P3引物扩增片段存在多态性,所对应的基因型分别定义为AA、AB和BB,各基因型在群体中符合Hardy-Weinberg平衡;选取的4种母性行为:舔舐、哺乳、踩踏和拒绝哺乳的统计数据均不符合正态分布;各基因型与4种母性行为间的多个独立样本的非参数检验结果表明:舔舐、哺乳和踩踏3个母性行为在不同基因型个体间存在极显著差异(P0.05)。结果提示,PRLR基因外显子10部分序列存在多态性,且其与湖羊母性行为部分性状间存在一定的关联性。初步推断PRLR基因可作为湖羊母性行为的候选基因。

关键词：湖羊催乳素受体基因多态性母性行为

绵羊催乳素受体基因外显子10多态性及其与产羔数相关分析

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中国畜牧杂志 2012年第17期48卷 1-6页

作者：张向楠孙伟储明星张有法陈玲吴文忠周洪徐厚生扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室北京100193 苏州市畜牧兽医站江苏苏州215200 徐州市睢宁县林牧渔业局江苏睢宁221200

采用PCR-SSCP技术检测催乳素受体(PRLR)基因外显子10在湖羊、小尾寒羊、洼地羊和阿勒泰羊中的单核苷酸多态性,研究该基因与湖羊高繁殖力的关联性。结果表明:4个绵羊品种在P2引物扩增区域均符合Hardy-Wenberg平衡,但P3引物只有阿勒泰羊符... 详细信息

采用PCR-SSCP技术检测催乳素受体(PRLR)基因外显子10在湖羊、小尾寒羊、洼地羊和阿勒泰羊中的单核苷酸多态性,研究该基因与湖羊高繁殖力的关联性。结果表明:4个绵羊品种在P2引物扩增区域均符合Hardy-Wenberg平衡,但P3引物只有阿勒泰羊符合Hardy-Wenberg平衡。P2扩增片段的不同基因型分布频率在4个品种间差异不显著(P>0.05);而除阿勒泰羊P3扩增片段的基因型分布与其余3个品种间存在极显著差异(P0.05)。4个绵羊品种间产羔数存在极显著差异(P0.05);湖羊不同引物不同基因型产羔数的差异亦均不显著(P>0.05)。本研究表明,PRLR基因不能作为湖羊高繁殖力的候选基因。

关键词：催乳素受体基因多态性产羔数绵羊

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驴早期妊娠的超声显像诊断研究

中国畜牧杂志 1998年第1期34卷 32-33页

作者：论士春张有法何诚陈兆英胡文启中国农业大学动物医学院河北省大厂县家畜改良站

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驴早期妊娠的超声显像诊断研究＠论士春＠张有法＠何诚＠陈兆英￥中国农业大学动物医学院＠胡文启￥河北省大厂县家畜改良站驴早期妊娠的超声显像诊断研究论士春张有法何诚陈兆英（中国农业大学动物医学院北京１０００９４）胡文启（河北省大厂县家畜改良站大厂１０１７００）...

关键词：驴妊娠超声显像诊断