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TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征

济南大学学报（自然科学版） 2013年第3期27卷 258-263页

作者：范正伟张晾潘杰山东师范大学生命科学学院山东省动物抗性生物学重点实验室山东济南250014

分离培养肿瘤坏死因子α(TNF-α)缺失与野生(WT)型小鼠前脂肪细胞,诱导其成脂分化,观察成脂相关蛋白的时序性变化,探讨TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征。结果表明,TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞诱导后第14 d,油红O染色阳性细胞显著多... 详细信息

分离培养肿瘤坏死因子α(TNF-α)缺失与野生(WT)型小鼠前脂肪细胞,诱导其成脂分化,观察成脂相关蛋白的时序性变化,探讨TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征。结果表明,TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞诱导后第14 d,油红O染色阳性细胞显著多于WT小鼠细胞(p<0.05);成脂分化过程中,脂联素与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达水平逐渐上调,且TNF-α缺失小鼠前脂肪及成熟脂肪细胞表达量高于WT小鼠细胞。提示TNF-α缺失可上调前脂肪细胞分化过程中脂联素与PPARγ的表达,促进其成脂分化。

关键词： TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化脂联素 PPARγ

多不饱和脂肪酸饮食对载脂蛋白E缺失小鼠含载脂蛋白B100脂蛋白代谢的影响

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生物化学与生物物理进展 2015年第9期42卷 843-849页

作者：张晾张燕燕叶玲敏潘杰山东师范大学生命科学学院 “动物抗性生物学”省级重点实验室济南250014

探讨不同多不饱和脂肪酸饮食对载脂蛋白E(apoE)缺失小鼠含apoB100脂蛋白代谢的影响.2月龄雄性载脂蛋白E缺失小鼠添加2%紫苏籽油或红花油饮食干预6周,检测其血脂和血清apoB100水平;测定肝脏组织中HMG-Co A还原酶活性;使用实时定量PCR分... 详细信息

探讨不同多不饱和脂肪酸饮食对载脂蛋白E(apoE)缺失小鼠含apoB100脂蛋白代谢的影响.2月龄雄性载脂蛋白E缺失小鼠添加2%紫苏籽油或红花油饮食干预6周,检测其血脂和血清apoB100水平;测定肝脏组织中HMG-Co A还原酶活性;使用实时定量PCR分析肝组织中含apoB100脂蛋白代谢相关基因表达;蛋白质印迹(Western blot)检测PPARα蛋白表达;油红O染色检测肝细胞中脂质积累.结果显示,紫苏籽油饮食干预可降低血清LDL-C和apoB100水平,降低肝组织中HMG-Co A还原酶活性以及apoB100、FAS、HMG-Co AR、ACAT2、LRP、LDLR和SREBP-1c基因mRNA的表达,显著升高转录因子PPARα的mRNA和蛋白质水平,明显降低肝脏中脂质沉积.而红花油饮食干预后升高了小鼠血清甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇以及肝脏apoB100的mRNA表达水平,降低PPARα的mRNA和蛋白质水平,明显促进肝脏中脂质积累.结果提示在饮食中添加紫苏籽油可有效降低含apoB100脂蛋白的代谢,对动脉粥样硬化以及脂肪肝等疾病有更好的保护作用,对于正常人群以及家族性Ⅲ型高脂蛋白血症患者的日常膳食提供理论依据.

关键词：多不饱和脂肪酸载脂蛋白E缺失 apoB100 脂代谢

山楂对低密度脂蛋白受体基因敲除小鼠脂代谢的影响

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西安交通大学学报（医学版） 2014年第1期35卷 120-123页

作者：张玉颖张晾山东省动物抗性生物学重点实验室山东师范大学生命科学学院山东济南250014

目的利用低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLR-/-)小鼠作为高血脂动物模型,研究山楂对小鼠脂代谢的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将LDLR-/-小鼠随机分为正常对照组和山楂干预组(n=10只/组)。饮食干预20周后取血并解剖。采用氯仿(V)︰甲... 详细信息

目的利用低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLR-/-)小鼠作为高血脂动物模型,研究山楂对小鼠脂代谢的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将LDLR-/-小鼠随机分为正常对照组和山楂干预组(n=10只/组)。饮食干预20周后取血并解剖。采用氯仿(V)︰甲醇(V)(2︰1)混合液抽提肝脏总脂质,酶法分别测定甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量。利用快速蛋白层析(FPLC)法分离血清脂蛋白,酶法测定各馏分中TG和TC含量。Real-time检测HMG-CoAR、FAS、PPARα、SREBP-1c脂代谢相关基因的mRNA表达水平。结果山楂干预组小鼠血清中TG和TC含量,肝脏总脂质、肝脏中TG和TC含量均低于对照组(P<0.05)。与对照组比较,山楂干预组血清中的极低密度脂蛋白甘油三酯(VLDL-TG)、胆固醇(VLDL-C)和低密度脂蛋白/中密度脂蛋白甘油三酯(LDL/IDL-TG)、胆固醇(LDL/IDL-C)明显降低。山楂干预组的脂代谢相关基因mRNA表达水平与对照组相比均有统计学差异。结论山楂能调节脂质代谢,具有明显的降血脂作用。

关键词：山楂脂代谢低密度脂蛋白受体基因敲除小鼠脂代谢动脉粥样硬化

氯化锂对脂肪组织Wnt信号及PPARγ表达的影响

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济南大学学报（自然科学版） 2013年第1期27卷 87-91页

作者：张笑斐张晾潘杰山东师范大学生命科学学院山东济南250014

对肥胖小鼠腹腔注射剂量为100和200 mg/kg小鼠体质量的氯化锂水溶液,实验期间记录小鼠体质量,于注射3周后采用半定量PCR和Western blot方法检测小鼠腹股沟处内脏脂肪组织中,β-catenin和PPARγ的表达变化。结果表明:氯化锂处理后小鼠体... 详细信息

对肥胖小鼠腹腔注射剂量为100和200 mg/kg小鼠体质量的氯化锂水溶液,实验期间记录小鼠体质量,于注射3周后采用半定量PCR和Western blot方法检测小鼠腹股沟处内脏脂肪组织中,β-catenin和PPARγ的表达变化。结果表明:氯化锂处理后小鼠体质量增长速率略有下降,β-catenin的mRNA水平无明显改变(p>0.05),蛋白水平明显上升(p<0.05),PPARγ的mRNA和蛋白水平表达均下降(p<0.05)。提示氯化锂可能通过上调β-catenin蛋白水平,并抑制PPARγ表达影响小鼠早期肥胖发生。

关键词：氯化锂 β-catenin 过氧化酶体增殖物激活受体γ 早期肥胖

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内质网应激与糖尿病动脉粥样硬化

生命的化学 2010年第2期30卷 295-298页

作者：董晓光张晾潘杰山东师范大学生命科学学院山东省动物抗性生物学重点实验室济南250014

动脉粥样硬化是糖尿病常见的并发症,80%的糖尿病患者死于动脉粥样硬化。近年来内质网应激在糖尿病动脉粥样硬化发生、发展过程中的作用受到了广泛关注。本文就内质网应激及其在糖尿病促发动脉粥样硬化中的作用机制作一概述。

关键词：内质网应激(ERS) 糖尿病动脉粥样硬化

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菲律宾蛤仔外套膜组织原代培养的初步研究

海洋科学 2004年第3期28卷 79-80,F003页

作者：孙振兴张晾刘雪许昌磊烟台师范学院生命科学学院山东烟台264025

用E MEM培养基对菲律宾蛤仔(RuditapesphilippinarumAdamsetReeve)的外套膜组织进行了原代培养。实验结果表明,在E MEM培养基中添加L 谷氨酰胺、小牛血清、水解乳蛋白等成分 ,温度为26～27℃,pH为7.4的条件下 ,适合外套膜细胞的生 ,... 详细信息

用E MEM培养基对菲律宾蛤仔(RuditapesphilippinarumAdamsetReeve)的外套膜组织进行了原代培养。实验结果表明,在E MEM培养基中添加L 谷氨酰胺、小牛血清、水解乳蛋白等成分 ,温度为26～27℃,pH为7.4的条件下 ,适合外套膜细胞的生 ,培养3d时外套膜组织块周围出现迁出的细胞 ,培养至第8天时形成单层增殖细胞。

关键词：菲律宾蛤仔外套膜细胞原代培养组织培养单层增殖细胞

环状RNA:潜在的新型miRNA活性调控分子

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中国生物化学与分子生物学报 2015年第11期31卷 1158-1163页

作者：张燕燕任国诚张晾山东师范大学生命科学学院山东省动物抗性生物学重点实验室济南250014

环状RNA(circular RNA,circRNA)是近年来RNA领域最新的研究热点.它是一类由特殊的选择性剪切产生且在真核细胞中广泛表达的环形内源性RNA分子.研究发现,circRNA富含microRNA(miRNA)结合位点,可以发挥竞争性内源RNA作用,作为miRNA"海绵"... 详细信息

环状RNA(circular RNA,circRNA)是近年来RNA领域最新的研究热点.它是一类由特殊的选择性剪切产生且在真核细胞中广泛表达的环形内源性RNA分子.研究发现,circRNA富含microRNA(miRNA)结合位点,可以发挥竞争性内源RNA作用,作为miRNA"海绵"来解除对其靶基因的抑制效应.近年来,circRNA作为一种新型调控分子调控miRNA功能的发挥,受到众多研究者的青睐.本文综述circRNA的产生机制,及其调控miRNA的最新研究进展与研究方法等.

关键词：环状RNA 竞争性内源性RNA 微RNA

Tet-on系统诱导COX1基因在小鼠前脂肪细胞3T3-L1中的表达

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山东大学学报（医学版） 2013年第5期51卷 24-28页

作者：张玉颖张晾潘杰山东省动物抗性生物学重点实验室山东师范大学生命科学学院济南250014

目的利用Tet-On诱导表达系统,调控目的基因环氧化酶(COX)的表达,探讨COX对脂肪细胞分化的作用,为进一步深入研究肥胖的致病机制奠定理论基础。方法脂质体介导调控质粒pTet-On转染3T3-L1细胞,G418筛选单细胞克隆,RT-PCR法检测四环素反应... 详细信息

目的利用Tet-On诱导表达系统,调控目的基因环氧化酶(COX)的表达,探讨COX对脂肪细胞分化的作用,为进一步深入研究肥胖的致病机制奠定理论基础。方法脂质体介导调控质粒pTet-On转染3T3-L1细胞,G418筛选单细胞克隆,RT-PCR法检测四环素反应转录活化因子(rtTA)基因的整合;pTRE-Tight-Luc质粒瞬时转染含rtTA基因的细胞克隆,强力霉素(DOX)诱导表达后检测荧光素酶活性,筛选出高效表达的抗性克隆,命名为3T3-L1-Tet-On-26#;构建重组质粒pTRE-Tight-COX1,双酶切鉴定后测序,将测序正确的重组质粒瞬时转染3T3-L1-Tet-On-26#细胞克隆,免疫荧光检测COX1的表达。结果建立了3T3-L1-Tet-On细胞模型;成功构建了pTRE-Tight-COX1重组质粒,瞬时转染3T3-L1-Tet-On-26#,DOX诱导后COX1表达显著升高。结论诱导表达细胞株3T3-L1-Tet-On的建立为COX1功能基因的研究提供了平台。

关键词： 3T3-L1细胞 Tet-On诱导基因表达系统 COX基因强力霉素

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高脂饮食对非酒精性脂肪肝影响机制研究进展

实用肝脏病杂志 2010年第1期13卷 72-74页

作者：秦艳张晾潘杰山东师范大学生命科学学院山东省"动物抗性生物学"重点实验室济南市250014

本文从高脂饮食容易引起胰岛素抵抗,影响脂质代谢的关键核转录因子从而调控相关蛋白酶的表达和活性,以及氧化过程中可能导致的脂质过氧化三个方面,综述了高脂饮食对肝脏脂质氧化代谢的影响。

关键词：非酒精性脂肪肝胰岛素抵抗脂肪酸氧化脂质过氧化