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草莓根腐病病原菌的分离鉴定及拮抗菌株的筛选

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草莓根腐病病原菌的分离鉴定及拮抗菌株的筛选

作者：张方博内蒙古农业大学

学位级别：硕士

草莓根腐病是由多种病原真菌引起的草莓根部病害的统称,危害严重,防治困难。生物防治当下最符合农业绿色可持续发展战略,是目前植物病害防治的重要方法,也是未来病害防控的发展方向。本试验对草莓根腐病病原菌进行了分离与鉴定,从草莓... 详细信息

草莓根腐病是由多种病原真菌引起的草莓根部病害的统称,危害严重,防治困难。生物防治当下最符合农业绿色可持续发展战略,是目前植物病害防治的重要方法,也是未来病害防控的发展方向。本试验对草莓根腐病病原菌进行了分离与鉴定,从草莓根际土壤中分离细菌,从中筛选草莓根腐病拮抗菌和具有IAA分泌能力的菌株,最后将筛选的拮抗菌株在草莓植株上进行了初步的病害防治试验。主要研究结果如下:1.本试验在不同时期从北京市昌平区、大兴区及呼和浩特市现代农业园区草莓种植基地采集草莓根腐病病害样品,从中分离到真菌35株。通过柯赫氏法则验证,确定其中两种为根腐病病原菌,通过形态学鉴定,结合多基因分子生物学鉴定,明确了草莓根腐病的主要致病菌为胶胞炭疽菌复合种中的暹罗刺盘孢菌(Colletotrichum siamense)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),而暹罗刺盘孢菌侵染草莓引起根腐病尚属首次发现报道。2.从草莓根际土壤中分离到细菌400株,从中筛选到暹罗刺盘孢菌(Colletotrichum siamense)的拮抗菌 20 株,尖孢镰刀菌(Fusarium oxyporum)的拮抗菌16株,同时能够拮抗两种病原菌的细菌15株。筛选到具有IAA分泌能力的菌株240株,其中分泌量大于34.34 mg/L的有24株。3.对拮抗效果和促生效果较好的15株细菌进行16S rRNA初步鉴定,系统发育树显示其中7株属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.);6株属于泛菌属(Pantoea sp.);另外2株分别属于假单胞属(Pseudomonas sp.)和类芽孢杆属(Paenibacilus sp.)。4.针对暹罗刺盘孢菌(Colletotrichum siamense)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)各选出2株拮抗效果较好且兼具分泌IAA能力的菌株,进行初步盆栽试验防效验证,但结果显示,四株拮抗菌未能表现出有效的防治效果。

关键词：草莓根腐病病原鉴定拮抗菌筛选

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夏——致我们已经到来的高三

作文新天地(高中版) 2015年第6期 17-20页

作者：张方博湖北省荆门市龙泉中学岚光文学社

2012年的那个夏天,我清楚地记着,2012级的我们,纵使身边裹挟着令人顿生倦意的热风,却依然高昂着头小心地向四处探望这个我们在这座小城停留最后三年的地方。虽然年少的我们当时并没有意识到这一点。学霸高二前的最后一场考试过后,在球... 详细信息

2012年的那个夏天,我清楚地记着,2012级的我们,纵使身边裹挟着令人顿生倦意的热风,却依然高昂着头小心地向四处探望这个我们在这座小城停留最后三年的地方。虽然年少的我们当时并没有意识到这一点。学霸高二前的最后一场考试过后,在球场上结识了你,大家都叫你学霸,仿佛有一条充满正能量的江河在你的体内奔腾,时不时宣泄出来

关键词：大哥哥

蛭蛇通络胶囊治疗缺血性脑卒中潜在有效成分及作用机制的研究

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中国中药杂志 2021年第12期46卷 3024-3033页

作者：李煜田继祥徐核张方博杨洪军天津中医药大学天津301617 中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院北京100700

应用网络药理学和分子对接技术探讨蛭蛇通络胶囊治疗缺血性脑卒中的潜在有效成分和作用机制。利用TCMSP数据库、BATMAN-TCM数据库并结合文献查找蛭蛇通络胶囊各味中药化学成分,同时使用BATMAN-TCM数据库进行成分-靶点预测。在OMIM数据库... 详细信息

应用网络药理学和分子对接技术探讨蛭蛇通络胶囊治疗缺血性脑卒中的潜在有效成分和作用机制。利用TCMSP数据库、BATMAN-TCM数据库并结合文献查找蛭蛇通络胶囊各味中药化学成分,同时使用BATMAN-TCM数据库进行成分-靶点预测。在OMIM数据库和GeneCards数据库中以“cerebral stroke”“ischemic stroke”“cerebral ischemic stroke”等为关键词搜索缺血性脑卒中相关靶点,绘制中药化学成分靶点与缺血性脑卒中靶点的韦恩图。将共同靶点导入STRING数据库中构建靶点相互作用网络图,利用Cytoscape软件进行可视化处理,筛选出核心靶点。使用DVIAD数据库对靶点进行GO和KEGG富集分析。结果获得蛭蛇通络胶囊共193个潜在化学成分,985个药物靶点,6 035个疾病靶点。经Venny映射后,治疗缺血性脑卒中的潜在靶点共631个,筛选核心靶点44个,对应的有效潜在活性成分55个。GO富集分析条目主要涉及缺氧反应、ERK1和ERK2级联的正调节等。KEGG通路富集分析主要涉及胆碱能突触、cAMP信号通路和钙信号通路等。分子对接显示,TP53、EGFR、IL6、INS、TNF、SRC与其相对应的活性成分均有较好的结合能力。构建脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠巨噬细胞株RAW264.7损伤致炎模型,酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)表明蛭蛇通络胶囊可降低上清液中炎症因子IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α含量。结果表明蛭蛇通络胶囊可通过拮抗炎症而发挥治疗缺血性脑卒中的作用。

关键词：蛭蛇通络胶囊缺血性脑卒中网络药理学分子对接作用机制

基于网络药理学的芩暴红止咳口服液抗炎、止咳、祛痰、平喘的作用机制研究

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中国中药杂志 2021年第22期46卷 5902-5911页

作者：李煜张毅徐核王丽芳张方博杨洪军天津中医药大学天津301617 中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院医学实验中心北京100700

研究芩暴红止咳口服液抗炎、止咳、祛痰和平喘的药理作用,并通过网络药理学探究其作用机制。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验观察抗炎作用;小鼠氨水引咳法观察止咳作用;小鼠气管酚红排泌法观察祛痰作用;磷酸组胺和氯化乙酰胆碱联合致小鼠... 详细信息

研究芩暴红止咳口服液抗炎、止咳、祛痰和平喘的药理作用,并通过网络药理学探究其作用机制。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验观察抗炎作用;小鼠氨水引咳法观察止咳作用;小鼠气管酚红排泌法观察祛痰作用;磷酸组胺和氯化乙酰胆碱联合致小鼠哮喘观察平喘作用;采用TCMSP数据库及文献查找芩暴红止咳口服液各中药化学成分,利用BATMAN-TCM进行成分靶点预测。通过GeneCards数据库查询炎症、咳嗽、痰、哮喘相关疾病靶点。药物与疾病靶点相交集后,分别利用Metascape数据库进行GO生物过程分析和KEGG通路富集分析,并导入STRING数据库检索蛋白互作关系,筛选关键靶点。结果显示,芩暴红止咳口服液4.5、9.0 mL·kg^(-1)可显著降低右耳质量(P<0.05)和厚度(P<0.01),且减少两耳质量差(肿胀度)(P<0.05),明显延长咳嗽潜伏期(P<0.05),显著降低3 min内咳嗽次数(P<0.05),显著增加气管酚红排泌量(P<0.01);芩暴红止咳口服液2.3、4.5、9.0 mL·kg^(-1)可明显延长引喘潜伏期(P<0.05)。芩暴红止咳口服液共324个化学成分,1245个靶点,炎症、咳嗽、痰、平喘靶点分别为10272、4400、192、7533个,交集后,芩暴红止咳口服液抗炎、止咳、祛痰、平喘共同涉及调节离子运输、血液循环等GO生物过程和癌症相关信号通路、神经活性配体-受体相互作用等KEGG通路。通过实验验证和网络药理学分析,均证明芩暴红止咳口服液具有较好的抗炎、止咳、祛痰和平喘作用。

关键词：芩暴红止咳口服液抗炎止咳祛痰平喘网络药理学作用机制

脑心通胶囊肠吸收液保护过氧化氢致H9c2心肌细胞损伤的作用机制及有效药味筛选

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中国实验方剂学杂志 2019年第4期25卷 29-35页

作者：何子龙赵晔张毅李德凤张方博杨洪军中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:以肠吸收液为药物载体,利用拆方重组法筛选脑心通胶囊组方中发挥体外心肌保护作用的单味或多味中药,并丰富脑心通胶囊心肌保护作用的分子机制。方法:应用外翻肠囊法制备肠吸收液,体外构建过氧化氢(H2O2)损伤大鼠胚胎心肌细胞株(H9... 详细信息

目的:以肠吸收液为药物载体,利用拆方重组法筛选脑心通胶囊组方中发挥体外心肌保护作用的单味或多味中药,并丰富脑心通胶囊心肌保护作用的分子机制。方法:应用外翻肠囊法制备肠吸收液,体外构建过氧化氢(H2O2)损伤大鼠胚胎心肌细胞株(H9c2)模型,分为正常组、模型组、脑心通胶囊肠吸收液低、中、高剂量组(15.63,31.25,62.50 mg·L-1),每组3个复孔,实验重复3次。噻唑蓝(MTT)比色法检测心肌细胞的存活率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染结合流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测水通道蛋白1(AQP1)蛋白的表达;同时拆方或构建重组方,MTT比色法定位脑心通胶囊组方中发挥心肌保护作用的单味或多味中药。结果:与正常组比较,模型组AQP1的表达升高(P<0.01),心肌细胞凋亡数量增多(P<0.05)。与模型组比较,脑心通胶囊肠吸收液中、高剂量组均可下调AQP1的表达(P<0.05),脑心通胶囊肠吸收液高剂量组可抑制心肌细胞凋亡(P<0.05)。与脑心通全方组比较,丹参、地龙和全蝎这3种单味药心肌保护作用与脑心通全方组相当,此3味药重组方高剂量组心肌保护作用强于脑心通全方组(P<0.05),去3味药重组方心肌保护作用弱于脑心通全方组(P<0.05)。结论:脑心通胶囊通过抑制AQP1表达和细胞凋亡,发挥心肌保护作用;丹参、地龙和全蝎是组方中发挥心肌保护作用的主要药味。

关键词：脑心通胶囊肠吸收液心肌损伤过氧化氢有效药味筛选

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楼市在加速回归居住属性

中国证券期货 2015年第4期18卷 52-53页

作者：宣宇张方博财达证券东北财经大学金融学院

新常态下政策利好措施并不会引致房价普遍意义上的反转回升。库存仍是今年楼市整体主基调，局域分化趋势将更为显著。一些热点地区由于潜在刚需入市可能会促使量价回升。

关键词：楼市居住回归普遍意义转回房价利好库存

基于“肠外翻-心肌细胞”联用模型的益气活血方药效学作用评价及机制探讨

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中国中药杂志 2016年第20期41卷 3821-3827页

作者：耿亚杨洪军马月香张晶晶张毅李德凤张方博许海玉山东中医药大学基础医学院山东济南250355 中国中医科学院中药研究所北京100700

该研究首先建立过氧化氢(H2O2)诱导大鼠胚胎心肌细胞株(H9c2)氧化损伤模型,并筛选出益气活血方肠吸收液体外心肌保护作用的浓度范围,优选出4个剂量进行实验;通过考察益气活血方肠吸收液对H9c2的保护作用,从而为临床防治与氧化应激损伤... 详细信息

该研究首先建立过氧化氢(H2O2)诱导大鼠胚胎心肌细胞株(H9c2)氧化损伤模型,并筛选出益气活血方肠吸收液体外心肌保护作用的浓度范围,优选出4个剂量进行实验;通过考察益气活血方肠吸收液对H9c2的保护作用,从而为临床防治与氧化应激损伤相关心脏疾病提供参考;并通过对H9c2心肌细胞活力、细胞形态、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等指标进行考察,对益气活血方肠吸收液作用机制进行初步评价探讨。结果显示,益气活血方肠吸收液对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤具有较好的保护作用,且呈现出一定的浓度依赖性,可提高SOD的活性,减少MDA的释放,从而降低异常细胞的形成,增强心肌细胞抗氧化能力,提高细胞活力,具有一定的保护作用。

关键词：益气活血方心肌细胞氧化应激 MDA SOD

制梁场3%轨道纵坡条件下门式起重机走行机构的技术改造与应用

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机械研究与应用 2016年第2期29卷 83-86页

作者：张方博中铁一局集团桥梁工程有限公司重庆401121

山区公路建设项目由于地形条件限制,制梁场所用通用门式起重机轨道纵坡往往由于地形条件而大于2%,不符合通用门式起重机轨道纵坡应≤2%的规范要求[1],存在较大的生产安全隐患。针对项目生产实际情况,分析了大纵坡条件下门式起重机的受... 详细信息

山区公路建设项目由于地形条件限制,制梁场所用通用门式起重机轨道纵坡往往由于地形条件而大于2%,不符合通用门式起重机轨道纵坡应≤2%的规范要求[1],存在较大的生产安全隐患。针对项目生产实际情况,分析了大纵坡条件下门式起重机的受力情况及影响起重机制动的因素,提出将原有门式起重机的走行机构进行技术改造,增配相关部件、调整使用操作规程及安全防护措施以实现3%纵坡的安全使用。

关键词：通用门式起重机技术改造轨道纵坡生产安全

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土壤紧实胁迫下根系–土壤的相互作用

植物营养与肥料学报 2021年第3期27卷 531-543页

作者：张方博侯玉雪敖园园申建波金可默中国农业大学资源与环境学院/植物–土壤相互作用教育部重点实验室北京100193 中国农业大学国家农业绿色发展研究院北京100193

[目的]土壤紧实胁迫破坏土体理化性质,阻碍作物根系生长,降低作物产量,是限制农业生产力提高的世界性难题。根系形态结构决定了植物对土壤资源的探索能力及其对胁迫环境的适应性。讨论紧实胁迫下植物根系–土壤的相互作用,综述国内外关... 详细信息

[目的]土壤紧实胁迫破坏土体理化性质,阻碍作物根系生长,降低作物产量,是限制农业生产力提高的世界性难题。根系形态结构决定了植物对土壤资源的探索能力及其对胁迫环境的适应性。讨论紧实胁迫下植物根系–土壤的相互作用,综述国内外关于根系通过形态和生理改变等根系生物学潜力的发挥提高对紧实胁迫适应性的研究进展。[主要进展]土壤紧实胁迫增加根系穿透阻力,限制根系对土壤水分和养分的获取。植物根系会从形态和解剖结构方面对土壤紧实胁迫做出一系列适应性改变,充分利用土壤中的孔隙拓展生长空间。此外,根系也会对紧实胁迫做出生理响应,通过大量释放分泌物,影响根际土壤微结构,改变根土界面微域环境,降低根系生长的机械阻力。[展望]土壤紧实胁迫作为产量限制因素被长期忽视。通过发挥根系自身的生物学潜力,提高根系在紧实土壤中的适应性,对于最大限度地保证其在紧实胁迫下的正常生长非常关键,作为应对土壤紧实胁迫的有效策略具有重要的现实意义。未来的研究方向与重点包括:揭示紧实胁迫下根系分泌物与微生物的“对话机制”,探明紧实胁迫下根系–土壤–微生物的互作关系和作用机制,为发挥根系生物学潜力,强化关键根系/根际性状,塑造健康土壤结构,提高土壤紧实胁迫下的农业生产力提供科学依据。

关键词：土壤紧实胁迫根系根分泌物生物学潜力相互作用