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单加氧酶的发掘、改造及在级联反应中应用的研究

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单加氧酶的发掘、改造及在级联反应中应用的研究

作者：张志昊江南大学

学位级别：硕士

羟化反应是一种重要的C-H键活化反应,可以实现从惰性C-H合成具有更高附加值的羟基化合物。开发高活性和区域选择性的羟化反应生物催化剂具有重要的研究意义和应用价值。本研究通过对单加氧酶的筛选,发现来源于巨大芽孢杆菌(Bacillus meg... 详细信息

羟化反应是一种重要的C-H键活化反应,可以实现从惰性C-H合成具有更高附加值的羟基化合物。开发高活性和区域选择性的羟化反应生物催化剂具有重要的研究意义和应用价值。本研究通过对单加氧酶的筛选,发现来源于巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)的细胞色素P450BM3具有羟化环己烷(Cyclohexane,CHX)和对二甲苯(p-xylene,PX)的活性,通过对其进行分子改造,实现了对2,5-二甲基吡嗪(2,5-Dimethylpyrazine,DMP)羟化活性的从无到有,并得到针对底物类似物具有高区域选择性羟化能力的突变酶。进一步设计了不同的多酶级联反应系统,以合成具有更高附加值的产物。主要研究内容如下:(1)单加氧酶的筛选。以催化活力和可溶性为考量,对单加氧酶进行筛选,得到六种不同来源的单加氧酶。其中P450BM3具备一定的羟化能力,其野生型(WT)催化CHX和PX的总周转数(TTN)分别13.8和7.3,同时其为一类具有较好可溶性表达的自给自足型单加氧酶。因此,以P450BM3作为出发酶,借助蛋白质改造工程,获得催化性能更加优异的P450BM3突变酶。(2)P450BM3蛋白质分子改造。通过分子对接选择底物附近10(?)内的9个关键位点L75、V78、F81、A82、F87、L181、I263、A264、A328进行定点突变,获得了羟化活力显著提升的突变酶。其中A82F和A328F对CHX的活力较WT分别提升了12.5倍和13.4倍,对PX的活力分别提升了27.7倍和33.4倍。双突变体P450BM3对CHX和PX的活力相较WT分别提升了30.4倍和65.6倍。在此基础上,分析底物结构差异,针对DMP进行新一轮羟化活力改造。对以上9个关键的位点进行天冬氨酸扫描和谷氨酸扫描,获得三个单突变体L75E、F82E和F328E,其TTN分别为3.3、11.9、13.7,双突变体L75E/F82E的TTN为14.6,三突变体L75E/F82E/F328S、L75E/F82E/F328T的TTN分别为15.5和26.1,实现了对DMP羟化活力从无到有的突破。(3)级联反应体系的构建与优化。将P450BM3和P450BM3分别与来源于Pseudomonas putida的苯甲醇脱氢酶和苯甲醛脱氢酶构建串联级联反应,分别用于催化底物PX(10 m M)和DMP(5 m M),在反应6 h内对甲基苯甲酸和5-甲基吡嗪-2甲酸的产率分别为73.5%和37.2%。将P450BM3与醇脱氢酶Kp ADH和来源于Acinetobacter johnsonii的单加氧酶AjBVMO构建串联级联反应催化底物CHX(10 m M),在反应6 h内ε-己内酯的产率可达68.4%。为促进ε-己内酯的高效合成,设计并优化了两条酶级联反应。以Kp ADH和AjBVMO构建从环己醇到ε-己内酯的底物供给型级联反应,可催化100 m M环己醇获得68.6 m Mε-己内酯,TOF最高达17.8 min,TTN为1273;以来源于Candida glabrata的醇脱氢酶Cg KR1与AjBVMO构建产物汇聚型级联反应,可催化100 m M环己酮获得115.1 m Mε-己内酯,TOF最高达9.2 min,TTN为1231。两种酶级联系统也可用于合成γ-丁内酯和δ-戊内酯。从产物浓度和绿色化学角度来看,产物汇聚系统比底物供给系统更具应用前景。

关键词： C-H键活化 P450单加氧酶半理性改造多酶级联反应反应优化

靶向BCMA治疗多发性骨髓瘤的纳米抗体免疫毒素的理性构建

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靶向BCMA治疗多发性骨髓瘤的纳米抗体免疫毒素的理性构建

作者：张志昊北京化工大学

学位级别：硕士

多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是来源于骨髓浆细胞的恶性血液肿瘤,发病率占所有肿瘤的1%,占血液肿瘤的10%,排在血液肿瘤的第2位,死亡构成比为所有肿瘤的2.1%。据美国SEER(肿瘤监测、流行、终末结果)数据库显示,多发性骨髓瘤发病率... 详细信息

多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是来源于骨髓浆细胞的恶性血液肿瘤,发病率占所有肿瘤的1%,占血液肿瘤的10%,排在血液肿瘤的第2位,死亡构成比为所有肿瘤的2.1%。据美国SEER(肿瘤监测、流行、终末结果)数据库显示,多发性骨髓瘤发病率逐年升高,2019年发病率为1.8%。多发性骨髓瘤患者接受传统的化疗后,中位生存时间约为3年。近年来,多发性骨髓瘤的免疫疗法取得了较大进展,但是多发性骨髓瘤仍然是一种无法彻底治愈的疾病,并且常常还伴随严重的副作用,预后差且复发率高,复发后往往转变为难治性多发性骨髓瘤,因此探索新的治疗手段和靶点尤为重要。B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)是在多发性骨髓瘤以及成熟浆细胞上特异性表达的蛋白,目前BCMA已经作为治疗MM的新兴靶点而受到关注。本研究通过向羊驼体内注射BCMA蛋白以进行免疫,提取外周血液淋巴细胞总RNA,构建了库容量为2.8×10 cfu的纳米抗体免疫文库,以此为基础得到了滴度为2.25×10 cfu/m L的噬菌体展示文库,并筛选出7个纳米抗体候选分子Nb BCMA。通过基因工程构建表达质粒,将这7个纳米抗体候选分子通过连接肽(GGGGS)与PE38毒素进行连接,构建出Nb BCMA-PE38免疫毒素,使用大肠杆菌BL21表达系统进行表达,通过包涵体的变复性,利用His标签与镍柱结合经过AKTA系统进行纯化,得到纯度在85%以上的蛋白样品,经过流式细胞结合实验及亲和力检测实验,最终筛选出两个免疫毒素:Nb BCMA-PE38-1和Nb BCMA-PE38-3,其亲和力解离常数K值分别为4.09 n M和4.17 n M。使用U266细胞系检测两个免疫毒素的细胞杀伤效果,其IC分别为1252 ng/m L和7251ng/mL。

关键词：多发性骨髓瘤免疫毒素纳米抗体噬菌体文库 B细胞成熟抗原

好氧反硝化细菌Burkholderia sp. ZH8的脱氮机理及生物强化应用研究

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好氧反硝化细菌Burkholderia sp. ZH8的脱氮机理及生物强化应用研...

作者：张志昊西安建筑科技大学

学位级别：硕士

在我国快速发展的过程中,环境污染问题也日益突出,随着政府和公众对环境质量的愈发重视,人们对湖泊、河流等水体水质要求也逐渐提高。生物脱氮目前被广泛应用于污水处理中,传统的生物脱氮技术利用硝化细菌、反硝化细菌等微生物的生长代... 详细信息

在我国快速发展的过程中,环境污染问题也日益突出,随着政府和公众对环境质量的愈发重视,人们对湖泊、河流等水体水质要求也逐渐提高。生物脱氮目前被广泛应用于污水处理中,传统的生物脱氮技术利用硝化细菌、反硝化细菌等微生物的生长代谢过程达到对氮素的去除。但是,由于这些细菌生长条件各不相同,需要不同的环境才能达到对氮素去除的目的。而好氧反硝化细菌的发现打破了这一瓶颈,由于其世代周期短、对环境有良好的适应性,并且具有可以进行同步硝化反硝化的特点,因此成为了目前大多数学者的研究热点。目前关于好氧反硝化菌的研究多集中于可处理工业废水、生活污水等高浓度含氮水体菌株的分离和筛选方面,而对可处理天然湖泊、河水以及污水处理厂尾水等低浓度含氮水体菌株的研究相对较少,且关于它的脱氮特性和机理的研究较为缺乏。论文从长时间稳定运行的生物慢滤池筛选出一株能够实现同步脱氮除磷能力的好氧反硝化细菌,为目前缺乏有效、经济的废水处理技术提供技术支撑。主要研究结果如下:(1)在实验室内运行稳定的生物滤池中筛选出一株好氧反硝化菌,并将其命名为ZH8,其脱氮除磷能力都可达到95%以上,在进行16SrRNA以及全基因组鉴定后,确定其为伯克氏菌(Burkholderia sp.)。在探究环境因子对其影响的结果表明,当以丁二酸钠为碳源,C/N为10,温度为30℃,转速区间为160～200 r/min(溶解氧浓度为3.1～5.2 mg/L)时菌株ZH8的脱氮效果最好,并且可以适应pH值为7.0～10.0的弱碱性环境。(2)(2)菌株ZH8可以以NH-N作为氮源,在NH-N的初始浓度为15 mg/L,12 h的OD为0.316,NH-N去除率可达100%,最大去除速率为3.95 mg/L/h,整个反应过程中无其他形式氮积累,总氮中有98.26%的氮被同化为内源氮。此外,ZH8对PO-P的去除率为89%,最大去除速率为0.66 mg/L/h。(3)菌株ZH8可以分别以NO-N和NO-N进行生长代谢,初始氮浓度为15 mg/L时,12 h的OD分别为0.233及0.239,NO-N和NO-N的去除率及最大去除速率为61.71%、98.99%以及0.78 mg/L/h、1.27 mg/L/h。此外,以NO-N及NO-N作为唯一氮源时对PO-P的去除率分别为79.51%及97.99%,都表现出高效的除磷能力。但是以NO-N为单一氮源时有明显NO-N积累,高达5.92 mg/L,导致TN的去除率仅为61.7%。(4)经全基因组检测,菌株ZH8的总序列条数为487750条,总碱基数为3612148436 bp。GO功能分类表明参与细胞代谢过程的基因数目最多,GOC分析显示参与转录的基因占比高于其他功能基因。KEGG代谢通路共得到48条代谢通路,其中包括一条完整的氮代谢通路,主要由4个相关还原酶基因构成:硝酸盐还原酶、亚硝酸盐还原酶、一氧化氮还原酶和一氧化二氮还原酶,主要代谢途径为:NO-N→NO-N→NO→NO→N。(5)在采用纯菌ZH8为种源培养的生物膜反应器中,反应器运行至10 d时均完成挂膜,达到稳定状态。对模拟废水中的NO-N、NO-N、NH-N及TN的去除率均可达到98%以上。在处理模拟低浓度含氮废水时6个生物膜反应器TN的去除率也可达90%以上。通过改变水力停留时间至12 h,TN去除率可达94%以上,说明菌株ZH8有助于维持系统长期高效脱氮的运行。

关键词：好氧反硝化伯克氏菌代谢机理脱氮全基因组

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河南省空手道队后备人才现状与对策研究

河南省空手道队后备人才现状与对策研究

作者：张志昊河南大学

学位级别：硕士

在2015年11月13日,国家体育总局贯彻落实《奥运项目竞技体育后备人才培养中长期规划（2014-2024）》中,明确提出为了国家体育事业的繁荣发展,各单位要重视体育后备人才建设。空手道项目是河南省竞技体育的优势项目之一,各地市空手道专... 详细信息

在2015年11月13日,国家体育总局贯彻落实《奥运项目竞技体育后备人才培养中长期规划（2014-2024）》中,明确提出为了国家体育事业的繁荣发展,各单位要重视体育后备人才建设。空手道项目是河南省竞技体育的优势项目之一,各地市空手道专业队为省、国家运动队培养并输送出一大批优秀的后备体育人才,对空手道体育后备人才事业做出巨大的贡献。然而对河南省空手道后备人才的研究相对较少,为了了解河南省空手道队后备人才的发展现状,本文通过使用文献法、调查法、数理统计法、逻辑分析法等研究方法,以河南省空手道队后备人才现状与对策为研究对象,剖析和总结当前河南省空手道队后备人才的现状,并在此基础上为河南省空手道队后备人才的可持续发展提出相应的对策与建议。研究得出如下结论:河南省空手道队后备人才队伍中男性运动员数量多于女性运动员,且多数人的参训目标是以成为省级或国家级运动员为主;运动员毕业后对于升学的需求较大,但缺乏良好的学习氛围,普遍文化课成绩薄弱,存在一定的学训问题;近年来在影响人才招生选拔因素中,“家长意愿”和“就业问题”成为主要因素,对于人才的建设产生了负面影响;在教练员的日常教学过程中,硬件设施不健全、经费投入不足、收入较低成为影响教练员教学质量的重要因素;由于政府、社会以及各单位领导,对于人才建设方面的重视度较低导致人才引进出现困难、人才数量缩减、质量下降。提出以下建议:拓宽运动员的选材路径,完善选拔机制,确保运动员选拔机会平等,为后备人才建设提供有力保障;注重运动员文化素质的培养,营造良好的学习氛围,确保学训平衡;加大对空手道项目的宣传力度,提高社会关注度,以此建立良好的社会群众基础,保障人才选拔的生源质量;加强政府对空手道队后备人才建设的重视,同时加大对经费资源的投入、硬件设施的完善以及空手道教练员队伍的建设,提高教练员的薪资待遇水平,确保教练员的正常教学活动的开展。

关键词：河南省空手道后备人才对策

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规模化滴灌系统灌溉施肥性能评价及模拟

规模化滴灌系统灌溉施肥性能评价及模拟

作者：张志昊中国水利水电科学研究院

学位级别：硕士

随着集约化农业发展,滴灌系统于近年来呈现规模化趋势。随着系统控制面积增加,由系统水力偏差、地形偏差等引起的灌水施肥不均匀性问题凸显,可能会对我国滴灌技术的快速推广产生负面影响。评价规模化滴灌系统灌水施肥性能,辨析其关键影... 详细信息

随着集约化农业发展,滴灌系统于近年来呈现规模化趋势。随着系统控制面积增加,由系统水力偏差、地形偏差等引起的灌水施肥不均匀性问题凸显,可能会对我国滴灌技术的快速推广产生负面影响。评价规模化滴灌系统灌水施肥性能,辨析其关键影响因素,并提出适当的优化措施对于规模化滴灌系统的应用至关重要。本文采用田间试验评价、控制试验和模型模拟3种方法研究规模化滴灌系统灌水施肥均匀性特征,探究了毛管双向供水方式对滴灌系统水力性能的提升作用。规模化滴灌系统评价工作分别在系统、单元和毛管三个尺度下,评价了毛管布置形式、毛管首部压力、灌水器堵塞等因素对水肥均匀性及一致性的影响,并分析了在不同灌溉时期下灌水器制造偏差、毛管水力偏差和堵塞对水分分布均匀性的影响权重。在系统调查研究的基础上,开展了毛管单/双向供水方式的控制试验,评价了毛管供水方式、毛管长度、首部压力、施肥罐压差和灌水器类型对毛管压力分布、灌水和施肥均匀性及一致性的影响。在控制试验的基础上,本研究基于EPANET 2.0软件构建了滴灌系统水肥分布模拟模型,利用试验数据对模型参数进行了率定和验证,分析了单/双向供水方式下,地形坡度、首部压力和系统控制规模对管网水肥分布的影响。主要结论如下:(1)灌溉季节早期,试验选取的规模化滴灌系统中,各轮灌组水量分布均匀度普遍低于80%,随着轮灌组控制面积和距首部枢纽距离的增加均匀度逐渐降低。灌溉季节早期,毛管压力偏差是影响水量分布的主要因素,影响权重达到0.41-0.71,随着滴灌系统灌水和施肥次数的增加,在灌溉季节末期,灌水器堵塞是影响滴灌系统水量分布的主要因素,影响权重为0.44～0.62。(2)通过控制试验评价了供水方式、毛管长度和毛管首部压力等因素压力分布、灌水量分布、灌水和施肥均匀性及一致性的影响。结果表明毛管双向供水方式能够显著降低毛管压力偏差率和流量偏差率,并提升毛管极限铺设长度。灌水器允许流量偏差率为20%情况下,双向供水方式毛管极限铺设长度较单向供水提升约60%。相同试验处理下采用双向供水方式的毛管灌水和施肥均匀性分别较单向供水方式提高了 1%～9%和1%～8%。通过对试验结果进行方差分析可知,毛管供水方式对灌水和施肥均匀度的影响均达到了极显著水平(P=0.05)。(3)基于EPANET2.0软件构建了控制试验管网模型,模型能够较好地模拟滴灌系统水肥分布规律和压差式施肥罐工作特性。利用该软件构建了不同坡度条件和系统控制面积下滴灌模型,对比发现,在逆坡和顺坡条件下,双向供水方式下毛管极限铺设长度较单向供水分别增加约80%和65%。滴灌系统灌水均匀度为80%时,双向供水方式下灌水单元控制面积较单向供水方式增加了69～82%。

关键词：滴灌毛管供水方式水肥分布均匀性压力分布水肥一致性 EPANET

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面向深度学习安全的对抗样本研究及其利用

面向深度学习安全的对抗样本研究及其利用

作者：张志昊南京邮电大学

学位级别：硕士

伴随数据量和硬件水平的提升,深度学习凭借端到端的高效推理方式,在图像分类、目标检测和人机对话等任务上取得了突破,同时也在无人驾驶、人脸识别和入侵检测等高安全性需求任务中广泛应用。因此,深度学习的深入研究和相关的丰富应用极... 详细信息

伴随数据量和硬件水平的提升,深度学习凭借端到端的高效推理方式,在图像分类、目标检测和人机对话等任务上取得了突破,同时也在无人驾驶、人脸识别和入侵检测等高安全性需求任务中广泛应用。因此,深度学习的深入研究和相关的丰富应用极大地推动了计算机视觉、自然语言处理等领域的发展。然而尽管深度学习被应用于众多高安全性需求场景中（Deep Learning for Security）,但是深度学习依然是一把双刃剑,其技术本身带来的安全性问题（Security of Deep Learning）也需要重视。因此,AI安全就成为了与深度学习伴生的热门研究领域。研究对抗样本就是研究如何增强模型甚至整个系统的鲁棒性,实现更高的安全性。现阶段对抗样本的研究基本上集中在计算机视觉领域,且可以将相关研究分为对抗样本攻击、防御和应用三个方面。对抗样本的攻击通过生成对抗样本完成对目标模型的攻击,使其作出错误推理;对抗样本的防御通过各种安全技术消除对抗样本对目标模型造成的负面影响。以上研究从攻防两个对立的角度提升深度学习的安全性,同时也对深度学习这种黑盒技术的可解释性做出贡献。此外,如何合理利用对抗样本特性实现图像加密和盲水印等实际应用也是一个新兴的研究方向。因此,论文从对抗样本上述三个研究方向各提出了一种算法。首先,论文研究并分析了现有的对抗样本攻击算法,发现大多数算法仅在理想条件下生成微小的、不含合理语义信息的对抗扰动,在现实应用中这些扰动极易被破坏。论文针对这一问题,提出了一种在隐层特征空间中生成合理语义扰动的隐层编码定向迁移算法LETT,通过黑盒攻击的方式实现了一种新的特征级扰动攻击算法。其次,检测算法作为对抗样本防御的一种算法,通过合理提取特征,计算各种人为设定的规则完成检测,因此如何设计相关指标和规则是对抗样本检测算法的思路之一。针对这一思路,论文提出了一种改进k近邻并引入自适应权重投票的隐层编码异常检测算法LEAD,通过距离度量的方式实现高质量检测,同时利用数据降维提升了检测速度。最后,针对对抗样本扰动特性,研究如何实现端到端的盲水印技术。针对这一问题,论文提出了一种将定长编码嵌入图像的隐层编码无痕嵌入算法LETE,通过设计含特征复用的生成对抗网络和相关损失函数,在加速网络模型训练的同时,提高了模型的图像重构、编码重构以及抗噪能力。

关键词：对抗样本深度学习数据流形黑盒攻击异常检测编码嵌入

农家书屋提升农民精神文化生活获得感的路径研究

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农业科技与信息 2022年第8期 10-12页

作者：张志昊河南中医药大学河南郑州450046

农家书屋对满足农民文化精神生活需要和促进农村精神文明建设发挥了巨大作用,为进一步提升农民精神文化生活获得感,农家书屋应当在“建”“管”“用”上下功夫,找准农民的需求,建好一批优质农家书屋,并维护好其日常运行。本文就农家书... 详细信息

农家书屋对满足农民文化精神生活需要和促进农村精神文明建设发挥了巨大作用,为进一步提升农民精神文化生活获得感,农家书屋应当在“建”“管”“用”上下功夫,找准农民的需求,建好一批优质农家书屋,并维护好其日常运行。本文就农家书屋提升农民精神文化生活获得感的路径进行了研究。

关键词：农家书屋农民精神文化生活获得感

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注浆在桩土共用受力基础中的现场试验研究

福建建筑 2024年第4期 114-117页

作者：张志昊漳州城投建工集团有限公司福建漳州363000

为了研究后注浆对强风化岩层中钻孔灌注桩承载性状的影响规律,对厦门市某超高层建筑的3根直径为1200 mm的钻孔灌注桩进行自平衡静载试验。通过对比,分析了未注浆桩与后注浆桩的承载与变形特性,发现散体状和碎裂状强风化岩层经后注浆技... 详细信息

为了研究后注浆对强风化岩层中钻孔灌注桩承载性状的影响规律,对厦门市某超高层建筑的3根直径为1200 mm的钻孔灌注桩进行自平衡静载试验。通过对比,分析了未注浆桩与后注浆桩的承载与变形特性,发现散体状和碎裂状强风化岩层经后注浆技术处理后,岩层抗压承载能力得到提升,基桩承载力亦得到大幅度提升。并将试桩静载测试数据与现行规范及地勘报告中的推荐值进行对比,发现本工程强风化花岗岩层中后注浆桩侧摩阻力增强系数β_(si)达到2.24~2.77,较规范推荐值1.4~1.8,提升了约52.6%。

关键词：钻孔灌注桩后注浆竖向承载力静载试验增强系数

竖井二氧化碳“二阶二段”筒形掏槽爆破技术及应用

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煤炭科学技术 2023年第10期51卷 65-71页

作者：倪昊北京科技大学土木与资源工程学院北京100083 煤炭科学技术研究院有限公司北京100013

针对竖井爆破施工的限制因素和炸药受控的问题,结合现有掏槽技术的特点,提出二氧化碳“二阶二段”筒形掏槽爆破技术。首先,介绍了二氧化碳爆破技术的原理和二氧化碳爆破器的结构;阐述了“二阶二段”筒形掏槽的核心思想,“二阶二段”是... 详细信息

针对竖井爆破施工的限制因素和炸药受控的问题,结合现有掏槽技术的特点,提出二氧化碳“二阶二段”筒形掏槽爆破技术。首先,介绍了二氧化碳爆破技术的原理和二氧化碳爆破器的结构;阐述了“二阶二段”筒形掏槽的核心思想,“二阶二段”是指从“时空”两个维度对掏槽形式的一种描述,将掏槽区岩石分成深浅不同的2个台阶,掏槽孔的爆破顺序分成2个段别;同时掏槽孔布置成内外2圈直径不同的双圆筒形状,在掏槽圈的中心布置1个空孔,一阶掏槽孔在内圈,二阶掏槽孔在外圈,一阶掏槽孔和二阶掏槽孔统一向中心孔倾斜一定的角度,所形成圆筒的顶面积大,底面积小,一阶掏槽孔先爆破,二阶掏槽孔后爆破。“二阶二段”筒形掏槽充分结合了“二阶二段”和筒形掏槽的各自优点,中心孔为爆破孔提供弱自由面和补偿空间,一阶掏槽孔和二阶掏槽孔围成双筒形,深浅结合、分段爆破,降低了二阶爆破时岩石的夹制力,有利于掏槽成腔,提升爆破效果。其次,分析了“二阶二段”筒形掏槽的成腔机制,推导了掏槽爆破的剪切阻力公式和爆破成腔的动力公式,确定了槽腔岩石在二氧化碳爆生气体的静作用下抛离槽腔所需要满足的基本条件。最后,通过对比炸药直眼掏槽爆破和二氧化碳“二阶二段”筒形掏槽爆破的现场应用效果,发现2种方式在循环进尺、炮孔利用率和掏槽腔体积的3项爆后指标上差值较小,进一步验证了二氧化碳“二阶二段”筒形掏槽爆破适用于竖井掘进,为竖井掏槽爆破提供了新的技术方式。

关键词：竖井掘进二氧化碳爆破二阶二段筒形掏槽竖井爆破