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SDC1在静脉畸形组织中表达及其对静脉内皮细胞作用的研究

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SDC1在静脉畸形组织中表达及其对静脉内皮细胞作用的研究

作者：张德馨郑州大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:静脉畸形是最常见的先天性血管畸形,是静脉血管发育过程中形态发生错误的结果,具有侵袭性可累及多个组织层次,严重影响了患者的生活质量,甚至可导致患者死亡。静脉畸形的发病机制复杂,其分子机制尚未完全阐明,并且目前... 详细信息

研究背景和目的:静脉畸形是最常见的先天性血管畸形,是静脉血管发育过程中形态发生错误的结果,具有侵袭性可累及多个组织层次,严重影响了患者的生活质量,甚至可导致患者死亡。静脉畸形的发病机制复杂,其分子机制尚未完全阐明,并且目前静脉畸形的治疗国际上尚无统一标准,根治方法有限、残留率高。为深入了解静脉畸形涉及的分子机制,同时为在分子水平上治疗静脉畸形提供靶点,本研究分析了静脉畸形中的基因表达模式,鉴定出与静脉畸形发生发展相关的差异表达基因,研究了静脉畸形中SDC1表达的改变,及其对静脉畸形内皮细胞迁移、侵袭和血管生成的作用,验证了SDC1表达异常引发异常血管生成和静脉畸形发展的假设。方法:1,收集2020年12月至2021年6月在郑州大学第三附属医院血管瘤外科行手术切除且经病理组织学确认为静脉畸形的组织作为实验组,距离病变切缘3cm以内的正常静脉血管作为对照组,同时收集其病理资料。2,本研究应用基因芯片在转录组水平上识别差异表达基因,其筛选标准为adj P<0.05,|FC|≥2。3,用GO数据库及KEGG数据库对差异基因进行统计学分析,以找到与静脉畸形显著相关的基因功能和增强的生物信号通路。4,用TIMER数据库中分析SDC1在不同癌症类型中的m RNA表达情况。5,在差异基因中,重点研究SDC1,q RT-PCR、Western Blot和免疫组化的方法验证SDC1在静脉畸形组织的表达情况。6,利用q RT-PCR和Western Blot的方法检测SDC1在人脐静脉内皮细胞中的表达情况,si-SDC1转染人脐静脉内皮细胞,后通过划痕实验、Transwell迁移侵袭实验、血管生成实验检测沉默SDC1对人脐静脉内皮细胞迁移、侵袭、成管能力的影响。结果:1,通过基因芯片,共发现1368个符合筛选标准的基因,其中上调m RNA 1192个,下调m RNA 176个。2,通过GO富集分析主要涉及细胞外基质、细胞外区域和细胞外基质结构成分;KEGG通路分析显示蛋白质消化和吸收、基底细胞癌和补体和凝血通路显著富集。3,通过q RT-PCR、Western Blot和免疫组化分析表明SDC1在静脉畸形组织中表达明显低于临近正常对照组织。4,在人脐静脉内皮细胞中,沉默SDC1后,其迁移、侵袭和血管生成能力均得到增强。结论:1,基因芯片表明,有众多基因参与了静脉畸形的发生,共筛选差异表达基因1368个。2,静脉畸形组织中SDC1 m RNA及其蛋白表达水平显著降低。3,SDC1与人脐静脉内皮细胞迁移、侵袭和血管生成能力相关。4,SDC1在静脉畸形发生发展过程中存在相关的作用,为静脉畸形发展的分子机制研究的深入提供了理论基础。

关键词：静脉畸形基因芯片 SDC1 人脐静脉上皮细胞迁移侵袭血管生成

γ-氨基丁酸A型受体在干眼模型中的治疗作用及机制

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γ-氨基丁酸A型受体在干眼模型中的治疗作用及机制

作者：张德馨青岛大学

学位级别：硕士

目的:研究γ-氨基丁酸A型受体(γ-aminobutyric acid type A receptor,GABAAR)在小鼠结膜组织中的表达及其对干眼症小鼠模型的治疗作用和机制。方法:1.构建恒温(24±2℃)、恒湿(30±5%)、恒定风速(2.5±0.5km/s)的干燥应激环境(Desiccat... 详细信息

目的:研究γ-氨基丁酸A型受体(γ-aminobutyric acid type A receptor,GABAAR)在小鼠结膜组织中的表达及其对干眼症小鼠模型的治疗作用和机制。方法:1.构建恒温(24±2℃)、恒湿(30±5%)、恒定风速(2.5±0.5km/s)的干燥应激环境(Desiccating stress,DS),给予6-8周雌性C57BL/6小鼠氢溴酸东莨菪碱溶液皮下注射,14天后采用酚红棉线、荧光素钠染色法评估建模情况。采用RT-PCR、Western blot法检测正常和干眼症小鼠结膜组织中GABAAR m RNA和蛋白的表达变化,免疫组化法检测GABAAR的蛋白表达水平及定位。2.组织块培养法获取体外培养的小鼠结膜杯状细胞(conjunctival Goblet cells,CGCs),分为对照组、蝇蕈醇组、印防己毒素预处理组(300u M GABAAR拮抗剂印防己毒素预处理1h后,给予100u M蝇蕈醇)以及印防己毒素组。蝇蕈醇处理12h后采用RT-PCR法检测各组GABAAR、Muc5AC m RNA表达;蝇蕈醇处理24h后采用Western blot、ELISA法分别检测各组GABAAR、Muc5AC蛋白表达。3.给予干眼症小鼠3mg/m L蝇蕈醇溶液结膜下注射,酚红棉线法检测处理1天、3天、5天、7天后小鼠泪液分泌量,荧光素钠染色法评估眼表损伤情况、并进行临床评分,苏木素-伊红及过碘酸-雪夫染色(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)观察角结膜上皮组织形态学变化及计数CGCs数量。4.取1天、3天、5天、7天干眼症小鼠结膜组织,采用RT-PCR法检测GABAAR、Muc5AC、TNF-α及IL-1βm RNA水平的变化,ELISA法检测小鼠结膜中的Muc5AC、TNF-α及IL-1β蛋白水平,Western Blot、免疫组化法检测各组小鼠GABAAR的活化差异。结果:1.GABAAR在小鼠结膜组织中表达,主要分布在结膜复层鳞状上皮中;干眼症小鼠结膜组织中的GABAAR m RNA和蛋白表达水平明显低于正常。2.蝇蕈醇处理CGCs后,GABAAR、Muc5AC m RNA和蛋白表达水平较对照组均显著升高,差别具有统计学意义;印防己毒素预处理组GABAAR、Muc5AC表达水平较蝇蕈醇组降低;印防己毒素处理组GABAAR表达水平较对照组显著降低,同时Muc5AC表达水平下降,但差别无统计学意义。3.蝇蕈醇处理后,干眼症小鼠泪液分泌量显著增加,角膜损伤减轻、临床评分明显改善,CGCs数量及角结膜组织形态恢复。4.GABAAR的表达随蝇蕈醇处理天数逐渐升高;Muc5AC在蝇蕈醇处理后开始升高,m RNA于第3天达到高峰,蛋白水平于第5天达峰;TNF-α和IL-1β表达水平随处理时间逐渐下降。结论:干眼症小鼠结膜中GABAAR与Muc5AC的平行下降,提示GABAAR可能参与调控干眼发病与进展。上调GABAAR在小鼠结膜组织中的表达可以通过促进CGCs分泌黏蛋白Muc5AC、抑制炎症因子TNF-α、IL-1β表达,修复DS引起的眼表损伤,具有治疗干眼的潜力。GABAAR有望成为临床上诊断和治疗干眼症的新靶点。

关键词： γ-氨基丁酸A型受体干眼症蝇蕈醇结膜杯状细胞 Muc5AC

中医护理干预对脑动脉供血不足性眩晕患者的效果分析

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第11期 117-119页

作者：张德馨安徽医科大学附属六安医院安徽六安237000 六安市人民医院安徽六安237000

探讨对于脑动脉供血不足性眩晕的患者,临床护理干预中应用中医护理干预的实施效果。方法研究中主要是纳入了医院病房在2020年6月至2022年4月收治的脑动脉供血不足性眩晕者60例,对所有的研究对象进行了分组,主要是按照随机数字表法的原... 详细信息

探讨对于脑动脉供血不足性眩晕的患者,临床护理干预中应用中医护理干预的实施效果。方法研究中主要是纳入了医院病房在2020年6月至2022年4月收治的脑动脉供血不足性眩晕者60例,对所有的研究对象进行了分组,主要是按照随机数字表法的原则,分组为观察组、对照组,每组患者均是30例。各组均是应用相同的治疗方式,而其中对照组采取常规的护理干预,观察组患者采取常规护理及中医护理干预。对比两组患者的眩晕发作情况、心理状况(SAS/SDS评分)及护理满意度情况。结果在干预14d的时刻,观察组的患者眩晕发作频率以及发作持续时间指标均是低于对照组(P<0.05);干预14d观察组患者SAS、SDS评分低于对照组(P<0.05);干预14d满意度调查结果为观察组满意度93.33%高于对照组满意度66.67%(P<0.05)。结论应用中医护理干预脑动脉供血不足性眩晕效果满意,控制眩晕发作情况,缓解焦虑抑郁情绪及提高护理满意度。

关键词：中医护理干预脑动脉供血不足性眩晕眩晕发作心理状态护理满意度

基于指纹图谱法对不同炮制方式下甘松质量的影响研究

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中国药学杂志 2022年

作者：张德馨林林孙仟李颖石丽张雪王明耿林永强山东省食品药品检验研究院山东省中药标准创新与质量评价工程实验室山东步长神州制药有限公司中国海洋大学山东中医药大学

目的建立甘松挥发油指纹图谱，对不同炮制方式的甘松进行质量评价，为甘松的炮制方式提供参考。方法收集10批次甘松，不同炮制方法处理后，水蒸气蒸馏法提取挥发油。GC法建立指纹图谱，并采用高分辨质谱对共有峰成分进行鉴定，再以聚... 详细信息

目的建立甘松挥发油指纹图谱，对不同炮制方式的甘松进行质量评价，为甘松的炮制方式提供参考。方法收集10批次甘松，不同炮制方法处理后，水蒸气蒸馏法提取挥发油。GC法建立指纹图谱，并采用高分辨质谱对共有峰成分进行鉴定，再以聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法进行分析，找出三种炮制方式下的主要差异成分，结果建立了甘松挥发油去土处理、水洗晾干、水洗烘干的GC指纹图谱，共标定18个共有峰，采用化学计量学分析方法，可以对不同炮制方式的甘松进行有效区分，高分辨气质联用技术对共有峰成分进行指认，发现不同的炮制方式会对甘松中白菖烯，氧化喇叭茶烯-(II)，百秋李醇，(-)-马兜铃烯等成分影响显著。结论本实验所建立的甘松挥发油指纹图谱方法精密度、重复性、稳定性良好，且各峰分离度较高，结合化学计量学模式发现不同的炮制方式会对甘松质量产生较大影响，可以为甘松的炮制方式与质量控制提供参考和依据。

关键词：甘松挥发油指纹图谱化学计量学分析高分辨质谱

眼眶丛状神经纤维瘤合并腹膜后神经纤维瘤1例报告并文献复习

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临床医学进展 2023年第7期13卷 12077-12082页

作者：张德馨周子微王谦青岛大学医学部山东青岛青岛大学附属医院山东青岛

目的:探讨眼眶丛状神经纤维瘤的临床特征,以加深对该肿瘤的认识。方法:回顾性分析1例眼眶丛状神经纤维瘤患者的临床资料,并结合国内外文献进行复习探讨。结果:患者以发现左眼眼球突出2年为主要临床表现,眼科联合神经外科经颅开眶行眶内... 详细信息

目的:探讨眼眶丛状神经纤维瘤的临床特征,以加深对该肿瘤的认识。方法:回顾性分析1例眼眶丛状神经纤维瘤患者的临床资料,并结合国内外文献进行复习探讨。结果:患者以发现左眼眼球突出2年为主要临床表现,眼科联合神经外科经颅开眶行眶内及颅内肿瘤切除术,术后病理学检查示肿瘤细胞排列松散,呈纺锤样,组织可见丰富小血管及绳索样的粗大神经,神经纤维束呈波浪状排列。免疫组化染色示S-100阳性、SOX10弱阳性,不表达SMA、EMA、CD34。随访1个月未见肿瘤复发、转移。结论:眼眶丛状神经纤维瘤临床较罕见,具有独特的病理学特征,手术治疗疗效确切。

关键词：丛状神经纤维瘤眼眶肿瘤免疫组织化学诊断病例报告

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关于社科情报工作的思考

图书馆论坛 1992年第2期12卷 46-48页

作者：张德馨广东省社科联

广东省社会科学联合会是全省社会科学方面的学会、协会、研究会的群众性学术团体的组织机构。探讨隶属于这个组织的图书情报工作,以适应社会科学理论研究发展的要求,更好地为物质文明和精神文明建设服务,既是本文的前提,又是通过实践工... 详细信息

广东省社会科学联合会是全省社会科学方面的学会、协会、研究会的群众性学术团体的组织机构。探讨隶属于这个组织的图书情报工作,以适应社会科学理论研究发展的要求,更好地为物质文明和精神文明建设服务,既是本文的前提,又是通过实践工作获取认识的结果。

关键词：社科情报情报工作

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基于指纹图谱法对不同炮制方式下甘松的化学成分差异分析

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中国药学杂志 2022年第24期57卷 2084-2091页

作者：张德馨林林孙仟李颖石丽张雪王明耿林永强山东中医药大学济南250355 山东省食品药品检验研究院山东省中药标准创新与质量评价工程实验室济南250101 中国海洋大学山东青岛266100 山东步长神州制药有限公司山东菏泽274000

目的建立甘松挥发油指纹图谱,对不同炮制方式的甘松进行质量评价,为甘松的炮制方式提供参考。方法收集10批次甘松,不同炮制方法处理后,水蒸气蒸馏法提取挥发油。气相色谱法(GC)建立指纹图谱,并采用高分辨质谱对共有峰成分进行鉴定,再以... 详细信息

目的建立甘松挥发油指纹图谱,对不同炮制方式的甘松进行质量评价,为甘松的炮制方式提供参考。方法收集10批次甘松,不同炮制方法处理后,水蒸气蒸馏法提取挥发油。气相色谱法(GC)建立指纹图谱,并采用高分辨质谱对共有峰成分进行鉴定,再以聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法进行分析,找出3种炮制方式下的主要差异成分。结果建立了甘松挥发油去土处理、水洗晾干、水洗烘干的GC指纹图谱,共标定18个共有峰,采用化学计量学分析方法可以对不同炮制方式的甘松进行有效区分,高分辨气质联用技术对共有峰成分进行指认,发现不同的炮制方式会对甘松中白菖烯,喇叭烯氯化物-(Ⅱ),百秋李醇,(-)-马兜铃烯等成分影响显著。结论本实验所建立的甘松挥发油指纹图谱方法精密度、重复性、稳定性良好,且各峰分离度较高,结合化学计量学模式发现不同的炮制方式会对甘松质量产生较大影响,可以为甘松的炮制方式与质量控制提供参考和依据。

关键词：甘松挥发油指纹图谱化学计量学分析高分辨质谱

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GABA受体激动剂在干眼模型中对炎症反应的调节作用及对眼表修复的影响

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临床医学进展 2023年第3期13卷 3875-3882页

作者：张德馨周子微郑恒瑞王谦青岛大学医学部山东青岛青岛大学附属医院山东青岛

目的:观察GABA A型受体激动剂Muscimol对干眼模型鼠眼中TNF-α、IL-1β表达的调节作用及对眼表修复的影响。方法:选用SPF级雌性C57BL/6小鼠(7~8周龄),用3 mg/mL东莨菪碱溶液皮下注射,同时模拟干燥环境建立干眼症模型,14天后给予3 mg/mL ... 详细信息

目的:观察GABA A型受体激动剂Muscimol对干眼模型鼠眼中TNF-α、IL-1β表达的调节作用及对眼表修复的影响。方法:选用SPF级雌性C57BL/6小鼠(7~8周龄),用3 mg/mL东莨菪碱溶液皮下注射,同时模拟干燥环境建立干眼症模型,14天后给予3 mg/mL Muscimol溶液结膜下注射。于1、3、5天行泪液分泌量测定及荧光素钠染色,同时制备眼表组织切片,采用苏木素–伊红染色法评估角膜组织形态学变化。分别采用PCR、ELISA方法检测小鼠结膜组织中TNF-α和IL-1β的mRNA及蛋白的表达。结果:在使用Muscimol处理后的第1、3天各项临床指标均有恢复趋势,第5天后的泪液分泌量显著增加(P < 0.01),角膜荧光素钠染色分级减轻(P < 0.01)。角膜组织切片的HE染色结果显示,Muscimol处理组角膜上皮规整,相应损伤有所减轻。Muscimol处理组TNF-α和IL-1β的mRNA及蛋白的表达均呈下降趋势,第5天差别具有统计学意义(均P < 0.01)。结论:Muscimol结膜下注射可抑制干眼模型小鼠结膜中炎症因子的表达,促进眼表损伤的修复。

关键词：蝇蕈醇干眼症抗炎

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芳香烃受体在干眼中的调控作用

临床医学进展 2023年第3期13卷 4166-4175页

作者：周子微张德馨郑恒睿王谦青岛大学医学部山东青岛青岛大学附属医院眼科山东青岛

目的:探讨芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor, AhR)在干眼中对结膜杯状细胞增殖分化及黏蛋白5AC (MUC5AC)分泌的调控作用。方法:建立小鼠干眼动物模型,采用酚红棉线法测量小鼠泪液分泌量,使用裂隙灯观察小鼠角膜荧光素钠染色损伤情... 详细信息

目的:探讨芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor, AhR)在干眼中对结膜杯状细胞增殖分化及黏蛋白5AC (MUC5AC)分泌的调控作用。方法:建立小鼠干眼动物模型,采用酚红棉线法测量小鼠泪液分泌量,使用裂隙灯观察小鼠角膜荧光素钠染色损伤情况,并记录临床评分。给予AhR激动剂(FICZ)或AhR抑制剂(CH223191)处理七天,采用RT-PCR检测小鼠结膜组织中AhR、MUC5AC和炎症因子(TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8) mRNA的表达。提取C57BL/6小鼠结膜杯状细胞,给予FICZ或CH223191处理,采用RT-PCR检测小鼠结膜杯状细胞中AhR、MUC5AC和炎症因子(TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8) mRNA的表达。结果:与对照组相比,AhR在干眼小鼠结膜组织中表达降低。FICZ处理后AhR、MUC5AC表达升高,炎症因子表达下降。CH223191处理后AhR、MUC5AC表达降低,炎症因子表达升高。结论:AhR活化后促进结膜杯状细胞增殖分化,增加MUC5AC分泌,在治疗干眼中发挥重要作用。

关键词：芳香烃受体(AhR) 干眼结膜杯状细胞