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益心泰有效组分调节心衰兔心肌成纤维细胞增殖和凋亡作用机理研究

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益心泰有效组分调节心衰兔心肌成纤维细胞增殖和凋亡作用机理研究

作者：张彤瑜湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:以心肌成纤维细胞作为体外研究对象,观察不同剂量益心泰有效组分对心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响,探讨益心泰有效组分调节心肌成纤维细胞增殖和凋亡作用的可能机制研究。方法:原代和传代培养普通级健康新西兰兔的CFs,利用波形蛋... 详细信息

目的:以心肌成纤维细胞作为体外研究对象,观察不同剂量益心泰有效组分对心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响,探讨益心泰有效组分调节心肌成纤维细胞增殖和凋亡作用的可能机制研究。方法:原代和传代培养普通级健康新西兰兔的CFs,利用波形蛋白结合免疫荧光染色法对CFs进行鉴定;用CCK-8法分别检测各组各时间点CFs的增殖活力,以吸光度(OD值)表示。实验分为(1)对照组:心肌成纤维细胞;(2)模型组(Ang II组):心肌成纤维细胞+无血清培养48h+Ang II 10mol/L处理12h、(3)low dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分低48h、(4)medium dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分中48h、(5)high dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分高48h、(6)Losartan Potassium组:心肌成纤维细胞+氯沙坦钾组48h、(7)Ang II+low dosage:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分低48h+Ang II 10mol/L处理12h、(8)Ang II+medium dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分中48h+Ang II 10mol/L处理12h、(9)Ang II+high dosag e组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分高48h+Ang II 10mol/L处理12h、(10)Ang II+Losartan Potassium组:心肌成纤维细胞+氯沙坦钾组48h+Ang II 10mol/L处理12h。利用倒置相差显微镜,细胞计数观察细胞形态和生长状况,然后用流式细胞仪测定细胞凋亡率、细胞周期;用Western blot检测各组Bax和Bcl-2蛋白的表达;用RT-PCR检测各组collagen1a、collagen3a m RNA表达。结果:1.显微镜下细胞呈梭形,无自主搏动。波形蛋白染色阳性,CFs纯度较高。CCK-8法检测各组CFs的增殖活力:与对照组相比,模型组OD值显著升高(P<0.05);与模型组相比,Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Ang II+Losartan Potassium组OD值降低(P<0.05),其中Ang II+high dosage组OD值降低明显(P<0.05)。2.流式细胞仪检测细胞凋亡率与细胞周期的结果:当益心泰有效组分作用于CFs细胞时,随着益心泰有效组分浓度的增加,凋亡细胞所占的比例明显升高。与对照组相比,模型组G0/G1期细胞百分比下降,S期、G2/M期细胞百分比升高。与模型组相比较,Ang II+low dosage组、Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Losartan Potassium组的G0/G1期细胞百分比升高,而S期、G2/M期细胞百分比降低,其中Ang II+high dosage组的G0/G1期细胞百分比升高显著,S期、G2/M期细胞百分比降低明显。*** blot法检测各组Bax和Bcl-2蛋白表达结果:与对照组相比,模型组Bax表达下降(P<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05)。与模型组相比,Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Losartan Potassium组Bax表达升高(P<0.05),Bcl-2表达下降(P<0.05),其中Ang II+high dosage组Ba x表达升高显著(P<0.05),Bcl-2表达下降明显(P<0.05)。***-PCR检测各组collagen1a、collagen3a m RNA表达:与对照组比较,模型组的collagen1a、collagen3a m RNA表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Losartan Potassium组collagen1a、collagen3a m RNA表达下降(P<0.05),其中Ang II+high dosage组collagen1a、collagen3a m RN A表达下降明显(P<0.05)。结论:1.益心泰有效组分可以阻滞Ang II诱导的CFs细胞增殖周期。2.益心泰有效组分可以诱导CFs凋亡。3.益心泰有效组分可以在转录和翻译水平上抑制collagen1a、collagen3a m RNA表达,从而发挥其抗MF的作用。4.益心泰有效组分可以提高Bax的表达,降低Bcl-2的表达,诱导CFs的凋亡,从而发挥其抗MF的作用。

关键词：益心泰有效组分心肌成纤维细胞增殖凋亡

益心泰醇提取物对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响

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中药药理与临床 2021年第6期37卷 124-128页

作者：雷洋张彤瑜郭志华李雅龙云唐云湖南省中医药研究院文献信息研究所长沙410006 湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院心血管病科长沙410007

目的:探讨益心泰醇提取物对血管紧张素(angiotension,Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖与胶原合成的影响。方法:差速贴壁法提取兔CFs,建立AngⅡ诱导的CFs纤维化模型,分为模型对照组、益心泰醇提取物50、100、20... 详细信息

目的:探讨益心泰醇提取物对血管紧张素(angiotension,Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖与胶原合成的影响。方法:差速贴壁法提取兔CFs,建立AngⅡ诱导的CFs纤维化模型,分为模型对照组、益心泰醇提取物50、100、200 mg/L组、氯沙坦钾600 mg/L组,另设空白对照组,各组分别给予相应药物或培养基处理48 h。采用CCK-8法检测CFs的增殖活力,流式细胞分析仪检测细胞周期,Western blot法及RT-PCR测定增殖细胞核抗原(PCNA)、胶原蛋白-Ⅰ(collagenⅠ)、胶原蛋白-Ⅲ(collagenⅢ)蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,模型对照组CFs的细胞活力显著升高(P<0.01),G0/G1期比值显著下降,而S期百分率显著上升(P<0.01),PCNA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白及mRNA表达显著上调(P<0.01)。与模型对照组比较,各药物组CFs细胞活力明显降低(P<0.05或P<0.01),G0/G1期比值明显上升(P<0.05或P<0.01),S期百分率明显降低(P<0.05或P<0.01),益心泰醇提取物100 mg/L组CollagenⅠ蛋白表达,PCNA、CollagenⅠ蛋白及其mRNA表达均明显下调(P<0.05),益心泰醇提取物200 mg/L组PCNA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白及其mRNA表达均明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:益心泰醇提物可抑制AngⅡ诱导的心肌纤维化,其机制可能与阻滞细胞周期,降低细胞活力和下调PCNA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白及mRNA表达有关。

关键词：益心泰醇提取物心肌成纤维细胞血管紧张素-Ⅱ 增殖胶原合成

益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

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中药新药与临床药理 2021年第9期32卷 1245-1253页

作者：杨金伟郭志华李雅张彤瑜邓奕辉湖南中医药大学湖南长沙410208

目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制。方法将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以AngⅡ(10-7 mol·L^(... 详细信息

目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制。方法将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以AngⅡ(10-7 mol·L^(-1))诱导构建细胞增殖及纤维化模型。空白血浆组及模型组以15%空白血浆培养,益心泰含药血浆组以15%益心泰含药血浆培养,干预24 h。采用CCK-8法检测CFs细胞增殖情况;ELISA法测定细胞中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)及转化生长因子(TGF-β1)含量;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western Blot法检测细胞中TGF-β1、B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测CFs的增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平。结果15%益心泰含药血浆对CFs无明显的促细胞增殖或抑制作用。与空白血浆组比较,模型组细胞G0/G1期的细胞百分率明显降低(P0.05);Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平均显著升高(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显上调(P<0.01),Bax蛋白表达明显下调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,益心泰含药血浆组细胞的G0/G1期细胞百分率明显升高(P<0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平明显降低(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.01),Bax蛋白表达明显上调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。结论益心泰含药血浆能够抑制CFs细胞增殖分化及纤维化,可能与其调控Bax/Bcl-2平衡及下调纤维化相关因子表达有关。

关键词：益心泰含药血浆心肌成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 细胞增殖细胞凋亡 TGF-β1 Bax/Bcl-2

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中国城市怎样走向现代化

新建筑 1997年第3期 27+46-27+46页

作者：Ｚ·布罗姆伯里克,郭华瑜,张彤南京建筑工程学院建筑系

中国当今的城市环境发展显然与现代生活的需要不相符合。指出了中国城市化进程中一些不尽如人意的现象，并呼吁尽早开展研究，找寻这个特殊的国家在特殊的文化背景下特殊的解决问题的办法。

关键词：中国,城市环境,人口密度,生活质量

益心泰醇提物对血管紧张素Ⅱ诱导的兔心肌成纤维细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

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中国中医药信息杂志 2021年第8期28卷 83-86页

作者：唐云郭志华张彤瑜龙云李雅湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

目的观察益心泰醇提物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的兔心肌成纤维细胞(CFs)Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法提取新生兔CFs,细胞分为对照组、模型组、氯沙坦钾组和益心泰醇提物低、中、高剂量组。除对照组外... 详细信息

目的观察益心泰醇提物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的兔心肌成纤维细胞(CFs)Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法提取新生兔CFs,细胞分为对照组、模型组、氯沙坦钾组和益心泰醇提物低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组细胞予AngⅡ处理12 h建立心肌纤维化模型,再加入相应浓度药物培养一定时间,对照组加入不含AngⅡ和药物的培养基培养,CCK-8法检测CFs细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组CFs细胞活力明显升高,Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.01);与模型组比较,益心泰醇提物低、中、高剂量组CFs细胞活力明显降低,Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),益心泰醇提物中、高剂量组细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论益心泰醇提物可抑制AngⅡ诱导的心肌纤维化,其机制可能与抑制CFs增殖、降低细胞活力和Bcl-2蛋白表达、升高Bax蛋白表达、促进CFs凋亡有关。

关键词：益心泰醇提取物心肌成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 细胞凋亡兔

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现代科技赋能中药全产业链的传承与创新

中成药 2024年第10期 3540-3544页

作者：李玲张彤上海中医药大学中药学院经方与现代中药融合创新全国重点实验室

目的探讨现代科技赋能中药全产业链的方法与路径。方法分析我国中药产业的发展历程和发展现状，探讨现代科技赋能中药产业各环节的成功案例和发展思路，并提出中药产业的传承创新发展的思考与建议。结果中医药博大精深且开放包容，... 详细信息

目的探讨现代科技赋能中药全产业链的方法与路径。方法分析我国中药产业的发展历程和发展现状，探讨现代科技赋能中药产业各环节的成功案例和发展思路，并提出中药产业的传承创新发展的思考与建议。结果中医药博大精深且开放包容，目前科技赋能中医药已有许多成功案例，也可用现代科学解释部分中药的炮制和复方作用原理。中药产业链传承创新应在中药溯源与品质评价的基础上，重视临床定位与科学共识，将现代科学技术与中医药擅长的领域相结合，与现代医学协同发展，并基于人用经验加快创新药物研发。结论现代科技赋能中药的整个产业链，既有传承精华的经典名方和人用经验，又有创新发展的现代科技质量控制、作用机制研究和创新药物研发，全方面多领域助力中医药更好的服务于人民健康事业。

关键词：中药全产业链科技赋能传承创新

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金属硫化物超细颗粒的环境行为和生物效应

中国环境科学 2024年第2期44卷 1071-1084页

作者：关文宇张展华张彤南开大学环境科学与工程学院天津市城市生态环境修复与污染防治重点实验室天津300350

微纳尺度的金属硫化物超细颗粒在自然环境中分布广泛且可长期稳定存在,具有不同于大尺寸矿物的理化性质和反应活性.正确认识金属硫化物超细颗粒的来源、环境行为和生物效应,准确评估其对人体和环境的潜在健康风险,已成为环境科学领域热... 详细信息

微纳尺度的金属硫化物超细颗粒在自然环境中分布广泛且可长期稳定存在,具有不同于大尺寸矿物的理化性质和反应活性.正确认识金属硫化物超细颗粒的来源、环境行为和生物效应,准确评估其对人体和环境的潜在健康风险,已成为环境科学领域热点之一.基于此,本文综述了金属硫化物超细颗粒的自然来源和人为来源,重点分析了金属硫化物超细颗粒的团聚、转化和吸附等环境行为及其对微生物、植物、动物等生物体的影响效应.最后,针对目前研究中存在的难点问题,着重从金属硫化物超细颗粒精准识别和定量、超细颗粒与污染物及生物细胞的界面反应过程、超细颗粒与生物体作用的分子学机制和原位表征技术开发等方面进行了展望.

关键词：金属硫化物超细颗粒来源环境行为生物效应

奥尔夫教学法在高中音乐鉴赏课中的实践性研究 ——以海口市Y中学为例

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奥尔夫教学法在高中音乐鉴赏课中的实践性研究 ——以海口市Y中学...

作者：张彤海南师范大学

学位级别：硕士

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北京文学（精彩阅读） 2024年第6期 192-193页

作者：张彤不详