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作者：张彤瑜湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:以心肌成纤维细胞作为体外研究对象,观察不同剂量益心泰有效组分对心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响,探讨益心泰有效组分调节心肌成纤维细胞增殖和凋亡作用的可能机制研究。方法:原代和传代培养普通级健康新西兰兔的CFs,利用波形蛋... 详细信息

目的:以心肌成纤维细胞作为体外研究对象,观察不同剂量益心泰有效组分对心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响,探讨益心泰有效组分调节心肌成纤维细胞增殖和凋亡作用的可能机制研究。方法:原代和传代培养普通级健康新西兰兔的CFs,利用波形蛋白结合免疫荧光染色法对CFs进行鉴定;用CCK-8法分别检测各组各时间点CFs的增殖活力,以吸光度(OD值)表示。实验分为(1)对照组:心肌成纤维细胞;(2)模型组(Ang II组):心肌成纤维细胞+无血清培养48h+Ang II 10mol/L处理12h、(3)low dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分低48h、(4)medium dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分中48h、(5)high dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分高48h、(6)Losartan Potassium组:心肌成纤维细胞+氯沙坦钾组48h、(7)Ang II+low dosage:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分低48h+Ang II 10mol/L处理12h、(8)Ang II+medium dosage组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分中48h+Ang II 10mol/L处理12h、(9)Ang II+high dosag e组:心肌成纤维细胞+益心泰有效组分高48h+Ang II 10mol/L处理12h、(10)Ang II+Losartan Potassium组:心肌成纤维细胞+氯沙坦钾组48h+Ang II 10mol/L处理12h。利用倒置相差显微镜,细胞计数观察细胞形态和生长状况,然后用流式细胞仪测定细胞凋亡率、细胞周期;用Western blot检测各组Bax和Bcl-2蛋白的表达;用RT-PCR检测各组collagen1a、collagen3a m RNA表达。结果:1.显微镜下细胞呈梭形,无自主搏动。波形蛋白染色阳性,CFs纯度较高。CCK-8法检测各组CFs的增殖活力:与对照组相比,模型组OD值显著升高(P<0.05);与模型组相比,Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Ang II+Losartan Potassium组OD值降低(P<0.05),其中Ang II+high dosage组OD值降低明显(P<0.05)。2.流式细胞仪检测细胞凋亡率与细胞周期的结果:当益心泰有效组分作用于CFs细胞时,随着益心泰有效组分浓度的增加,凋亡细胞所占的比例明显升高。与对照组相比,模型组G0/G1期细胞百分比下降,S期、G2/M期细胞百分比升高。与模型组相比较,Ang II+low dosage组、Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Losartan Potassium组的G0/G1期细胞百分比升高,而S期、G2/M期细胞百分比降低,其中Ang II+high dosage组的G0/G1期细胞百分比升高显著,S期、G2/M期细胞百分比降低明显。*** blot法检测各组Bax和Bcl-2蛋白表达结果:与对照组相比,模型组Bax表达下降(P<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05)。与模型组相比,Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Losartan Potassium组Bax表达升高(P<0.05),Bcl-2表达下降(P<0.05),其中Ang II+high dosage组Ba x表达升高显著(P<0.05),Bcl-2表达下降明显(P<0.05)。***-PCR检测各组collagen1a、collagen3a m RNA表达:与对照组比较,模型组的collagen1a、collagen3a m RNA表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,Ang II+medium dosage组、Ang II+high dosage组、Losartan Potassium组collagen1a、collagen3a m RNA表达下降(P<0.05),其中Ang II+high dosage组collagen1a、collagen3a m RN A表达下降明显(P<0.05)。结论:1.益心泰有效组分可以阻滞Ang II诱导的CFs细胞增殖周期。2.益心泰有效组分可以诱导CFs凋亡。3.益心泰有效组分可以在转录和翻译水平上抑制collagen1a、collagen3a m RNA表达,从而发挥其抗MF的作用。4.益心泰有效组分可以提高Bax的表达,降低Bcl-2的表达,诱导CFs的凋亡,从而发挥其抗MF的作用。

关键词：益心泰有效组分心肌成纤维细胞增殖凋亡

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益心泰醇提取物对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响

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中药药理与临床 2021年第6期37卷 124-128页

作者：雷洋张彤瑜郭志华李雅龙云唐云湖南省中医药研究院文献信息研究所长沙410006 湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院心血管病科长沙410007

目的:探讨益心泰醇提取物对血管紧张素(angiotension,Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖与胶原合成的影响。方法:差速贴壁法提取兔CFs,建立AngⅡ诱导的CFs纤维化模型,分为模型对照组、益心泰醇提取物50、100、20... 详细信息

目的:探讨益心泰醇提取物对血管紧张素(angiotension,Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖与胶原合成的影响。方法:差速贴壁法提取兔CFs,建立AngⅡ诱导的CFs纤维化模型,分为模型对照组、益心泰醇提取物50、100、200 mg/L组、氯沙坦钾600 mg/L组,另设空白对照组,各组分别给予相应药物或培养基处理48 h。采用CCK-8法检测CFs的增殖活力,流式细胞分析仪检测细胞周期,Western blot法及RT-PCR测定增殖细胞核抗原(PCNA)、胶原蛋白-Ⅰ(collagenⅠ)、胶原蛋白-Ⅲ(collagenⅢ)蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,模型对照组CFs的细胞活力显著升高(P<0.01),G0/G1期比值显著下降,而S期百分率显著上升(P<0.01),PCNA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白及mRNA表达显著上调(P<0.01)。与模型对照组比较,各药物组CFs细胞活力明显降低(P<0.05或P<0.01),G0/G1期比值明显上升(P<0.05或P<0.01),S期百分率明显降低(P<0.05或P<0.01),益心泰醇提取物100 mg/L组CollagenⅠ蛋白表达,PCNA、CollagenⅠ蛋白及其mRNA表达均明显下调(P<0.05),益心泰醇提取物200 mg/L组PCNA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白及其mRNA表达均明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:益心泰醇提物可抑制AngⅡ诱导的心肌纤维化,其机制可能与阻滞细胞周期,降低细胞活力和下调PCNA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白及mRNA表达有关。

关键词：益心泰醇提取物心肌成纤维细胞血管紧张素-Ⅱ 增殖胶原合成

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益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

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中药新药与临床药理 2021年第9期32卷 1245-1253页

作者：杨金伟郭志华李雅张彤瑜邓奕辉湖南中医药大学湖南长沙410208

目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制。方法将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以AngⅡ(10-7 mol·L^(... 详细信息

目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制。方法将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以AngⅡ(10-7 mol·L^(-1))诱导构建细胞增殖及纤维化模型。空白血浆组及模型组以15%空白血浆培养,益心泰含药血浆组以15%益心泰含药血浆培养,干预24 h。采用CCK-8法检测CFs细胞增殖情况;ELISA法测定细胞中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)及转化生长因子(TGF-β1)含量;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western Blot法检测细胞中TGF-β1、B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测CFs的增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平。结果15%益心泰含药血浆对CFs无明显的促细胞增殖或抑制作用。与空白血浆组比较,模型组细胞G0/G1期的细胞百分率明显降低(P0.05);Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平均显著升高(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显上调(P<0.01),Bax蛋白表达明显下调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,益心泰含药血浆组细胞的G0/G1期细胞百分率明显升高(P<0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平明显降低(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.01),Bax蛋白表达明显上调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。结论益心泰含药血浆能够抑制CFs细胞增殖分化及纤维化,可能与其调控Bax/Bcl-2平衡及下调纤维化相关因子表达有关。

关键词：益心泰含药血浆心肌成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 细胞增殖细胞凋亡 TGF-β1 Bax/Bcl-2

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温肾健脾汤治疗重症肺炎抗生素相关性腹泻的疗效观察及对肠道菌群的影响

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中国中医药科技 2024年第4期31卷 762-764页

作者：谢苗苗张彤瑜李夏温州市中医院重症监护室浙江温州325000

重症肺炎是一种常见的呼吸道危重病症,常伴随呼吸衰竭、多器官功能障碍,对患者的生命安全构成严重威胁[1],细菌感染是重症肺炎主要的病因之一[2]。目前,抗生素对于该病的治疗效果取得重大进展[3],在临床治疗该病中抗生素常常联合使用[4]... 详细信息

重症肺炎是一种常见的呼吸道危重病症,常伴随呼吸衰竭、多器官功能障碍,对患者的生命安全构成严重威胁[1],细菌感染是重症肺炎主要的病因之一[2]。目前,抗生素对于该病的治疗效果取得重大进展[3],在临床治疗该病中抗生素常常联合使用[4],通过强效的抗菌作用消除细菌侵入体内所引起的相关感染,缓解患者的临床症状[5];但因该病治疗过程相对较长,患者常伴有其他疾病,侵入性操作多,抗酸剂应用多及饮食改变,易导致肠黏膜屏障受损;长期抗生素的使用会产生耐药[6],耐药菌一旦产生便容易侵蚀胃肠道黏膜,破坏正常肠道微生物群,导致药源性腹泻、恶心呕吐等一系列不良反应,尤以抗生素相关性腹泻(antibiotic-as-sociated diarrhea,AAD)发病率最高,也相对较为严重,严重者会导致治疗的中断,影响预后及康复[7]。

关键词：抗生素相关性腹泻重症肺炎危重病症抗酸剂 diarrhea 细菌感染呼吸衰竭肠黏膜屏障

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中国城市怎样走向现代化

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新建筑 1997年第3期 27+46-27+46页

作者：Ｚ·布罗姆伯里克,郭华瑜,张彤南京建筑工程学院建筑系

中国当今的城市环境发展显然与现代生活的需要不相符合。指出了中国城市化进程中一些不尽如人意的现象，并呼吁尽早开展研究，找寻这个特殊的国家在特殊的文化背景下特殊的解决问题的办法。

关键词：中国,城市环境,人口密度,生活质量

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益心泰醇提物对血管紧张素Ⅱ诱导的兔心肌成纤维细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

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中国中医药信息杂志 2021年第8期28卷 83-86页

作者：唐云郭志华张彤瑜龙云李雅湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

目的观察益心泰醇提物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的兔心肌成纤维细胞(CFs)Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法提取新生兔CFs,细胞分为对照组、模型组、氯沙坦钾组和益心泰醇提物低、中、高剂量组。除对照组外... 详细信息

目的观察益心泰醇提物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的兔心肌成纤维细胞(CFs)Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法提取新生兔CFs,细胞分为对照组、模型组、氯沙坦钾组和益心泰醇提物低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组细胞予AngⅡ处理12 h建立心肌纤维化模型,再加入相应浓度药物培养一定时间,对照组加入不含AngⅡ和药物的培养基培养,CCK-8法检测CFs细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组CFs细胞活力明显升高,Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.01);与模型组比较,益心泰醇提物低、中、高剂量组CFs细胞活力明显降低,Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),益心泰醇提物中、高剂量组细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论益心泰醇提物可抑制AngⅡ诱导的心肌纤维化,其机制可能与抑制CFs增殖、降低细胞活力和Bcl-2蛋白表达、升高Bax蛋白表达、促进CFs凋亡有关。

关键词：益心泰醇提取物心肌成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 细胞凋亡兔

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ICU患者并发肺部感染的胸部超声和CT的诊断价值分析

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中国现代医生 2022年第36期60卷 40-43,48页

作者：潘一鹏张开亚黄定靠张彤瑜董天成浙江中医药大学附属温州中医院重症医学科浙江温州325000

目的分析胸部超声和CT在重症监护室(intensive care unit,ICU)患者并发肺部感染的诊断价值。方法将2018年5月至2021年5月在浙江中医药大学附属温州中医院ICU住院治疗的103例疑似肺部感染患者纳入本研究中,均先后接受胸部CT、超声检查,... 详细信息

目的分析胸部超声和CT在重症监护室(intensive care unit,ICU)患者并发肺部感染的诊断价值。方法将2018年5月至2021年5月在浙江中医药大学附属温州中医院ICU住院治疗的103例疑似肺部感染患者纳入本研究中,均先后接受胸部CT、超声检查,保留完整图像,分析其征象表现,并以肺部感染金标准,比较分析两者的诊断效能。结果103例患者确诊肺部感染76例,无感染27例。超声征象主要是胸膜线异常,A、B线异常、肺实变及胸腔积液;CT征象主要是磨玻璃影、实变影及网格影或狭长细线样影等征象混合存在。CT诊断特异性为77.78%,敏感度为90.78%,准确度为87.38%,超声分别为74.04%、88.16%、84.47%,两种检查分别比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论胸部超声和CT在肺部感染诊断中均有良好效能,均有较高且一致的诊断准确性,对ICU患者可应用床旁胸部超声进行肺部感染诊断。

关键词：重症监护室肺部感染胸部超声 CT

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基于数据挖掘技术探讨郭志华治疗失眠的用药规律

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中医药临床杂志 2020年第6期32卷 1078-1081页

作者：张彤瑜刘承鑫魏佳明王健章郭志华湖南中医药大学湖南长沙410208

目的:运用现代科研思路与方法对郭志华教授临证治疗失眠的用药进行全面深入地整理和收集,总结郭志华治疗冠心病的用药规律与经验。方法:收集郭志华教授临床治疗失眠的用药方剂,采用数据挖掘技术,运用Microsoft Excel软件统计分析,使用... 详细信息

目的:运用现代科研思路与方法对郭志华教授临证治疗失眠的用药进行全面深入地整理和收集,总结郭志华治疗冠心病的用药规律与经验。方法:收集郭志华教授临床治疗失眠的用药方剂,采用数据挖掘技术,运用Microsoft Excel软件统计分析,使用频次统计的方法对所有药物进行统计分析,寻找高频药物及药类,以探讨郭志华教授治疗失眠的用药规律。结果:频次排列前十味药即甘草、川芎、麦冬、茯神、酸枣仁、半夏、柏子仁、生地、瓜蒌、当归,药类频次多集中在补虚药、安神药。结论:郭志华教授治疗失眠常用补虚、安神等功效的药物,临床时结合实际辨证论治,疗效颇佳。

关键词：数据挖掘郭志华失眠用药规律

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郭志华教授从“无虚不作眩”理论治疗眩晕临床经验

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亚太传统医药 2019年第9期15卷 82-84页

作者：刘承鑫郭志华张彤瑜魏佳明王健章湖南中医药大学

从眩晕入手,整理了郭志华教授“无虚不作眩”病因病机理论,总结了从虚论治眩晕的临床治疗经验,并选取了其临床病案进一步分析其“无虚不作眩”理论下遣方用药特色.郭志华教授在病机上强调眩晕多为虚证,在治疗上强调以补虚为主,兼顾其他... 详细信息

从眩晕入手,整理了郭志华教授“无虚不作眩”病因病机理论,总结了从虚论治眩晕的临床治疗经验,并选取了其临床病案进一步分析其“无虚不作眩”理论下遣方用药特色.郭志华教授在病机上强调眩晕多为虚证,在治疗上强调以补虚为主,兼顾其他病症.

关键词：眩晕郭志华无虚不作眩临床经验

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郭志华运用药对治疗慢性心力衰竭临床经验

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中医药临床杂志 2020年第2期32卷 242-245页

作者：刘承鑫张彤瑜魏佳明王健章郭志华湖南中医药大学湖南长沙410208

心衰(心力衰竭,Heart failure)是各种心脏疾病的终末阶段,也是心血管领域最为棘手和最具挑战性的疾病。药对是中药配伍运用过程中最常见最基本的运用形式,且具有紧扣病机、功效专一、药简效强的特点,在运用到心衰治疗过程中疗效显著。... 详细信息

心衰(心力衰竭,Heart failure)是各种心脏疾病的终末阶段,也是心血管领域最为棘手和最具挑战性的疾病。药对是中药配伍运用过程中最常见最基本的运用形式,且具有紧扣病机、功效专一、药简效强的特点,在运用到心衰治疗过程中疗效显著。该文整理了郭志华教授运用药对治疗心衰经验,并选取了其临床病案进一步佐证其遣方用药特色。郭教授治疗心衰经验独到,值得推广学习。

关键词：心衰郭志华药对临床经验

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