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玉米螟谷胱甘肽转硫酶的纯化及性质研究

北京大学学报（自然科学版） 1999年第4期35卷 474-479页

作者：马素永周先碗张庭芳北京大学生命科学学院

以亚洲玉米螟（Ｏｓｔｒｉｎｉａｆｕｒｎａｃａｌｉｓ）为材料，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ、还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）为配基的亲和层析，分离纯化得到玉米螟谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ... 详细信息

以亚洲玉米螟（Ｏｓｔｒｉｎｉａｆｕｒｎａｃａｌｉｓ）为材料，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ、还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）为配基的亲和层析，分离纯化得到玉米螟谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）。以２，４二硝基氯苯（ＣＤＮＢ）为底物测得其比活为１０７０Ｕ／ｍｇ蛋白，收率为２２９％，提纯１１３８倍。经ＳＤＳＰＡＧＥ和ＰＡＧＥ鉴定，得到的ＧＳＴ为一条带，亚基的分子量为２５ｋＤ，经凝胶过滤测得其全酶分子量为５０ｋＤ，说明该酶是由两个相同亚基组成的。ＩＥＦ测得主带等电点为８２。该酶最适温度为４１℃，最适ｐＨ范围为６３～６９。经动力学测定该酶双底物反应机制为序列机制，对ＣＤＮＢ的Ｋｍ值为０１５ｍｍｏｌ／Ｌ，对ＧＳＨ的Ｋｍ值为０３５ｍｍｏｌ／Ｌ，两种底物的ｋｃａｔ均为７８３ｓ－１。Ｃｌ－对底物ＣＤＮＢ有竞争性抑制作用，对ＧＳＨ是非竞争性抑制作用；３，５二硝基苯甲酸（ＤＮＢ）对ＣＤＮＢ有竞争性抑制作用，对ＧＳＨ是反竞争性抑制作用。

关键词：谷胱甘肽转硫酶玉米螟提纯抗药性

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大熊猫脑钙调素的纯化及性质研究

生物化学与生物物理进展 1999年第1期26卷 87-89页

作者：张燕红张庭芳北京大学生命科学学院

以大熊猫脑为材料，经提取、热处理、ＰｈｅｎｙｌＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ４Ｂ疏水柱和快速液相分子筛层析，分离纯化得到ＣａＭ．经ＳＤＳＰＡＧＥ、ＰＡＧＥ和ＩＥＦ鉴定，得到的ＣａＭ为一条带．经测定，大熊猫脑ＣａＭ的分子... 详细信息

以大熊猫脑为材料，经提取、热处理、ＰｈｅｎｙｌＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ４Ｂ疏水柱和快速液相分子筛层析，分离纯化得到ＣａＭ．经ＳＤＳＰＡＧＥ、ＰＡＧＥ和ＩＥＦ鉴定，得到的ＣａＭ为一条带．经测定，大熊猫脑ＣａＭ的分子质量为１９ｋｕ，等电点为３８．酶活性实验表明大熊猫脑ＣａＭ对牛心磷酸二酯酶有激活作用．氨基酸组成分析结果与其他来源ＣａＭ相近．

关键词：钙调素大熊猫疏水层析 CaM

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蛋白激酶C的研究进展

生理科学进展 1993年第2期24卷 123-126页

作者：张庭芳秦岭北京大学生物学系北京100871 中国医学科学院药物研究所北京100050

蛋白激酶C(PKC)是由多种同工酶组成的蛋白质家族,它们结构相似,但各具有不同生化特性及生理功能。PKC对基因表达及细胞表面受体的调控均起很重要的作用并具有双重性。

关键词：蛋白激酶研究蛋白激酶C

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丙酮酸氧化酶在压力下的解离

生物物理学报 1992年第1期8卷 135-142页

作者：阮康成张庭芳中国科学院上海生物化学研究所 200031 北京大学生物系生化教研室

本文通过测定丙酮酸氧化酶内源荧光谱和荧光偏振的变化研究了该酶在1—2200bar压力下的解离。研究结果表明,在压力作用下酶的辅基FAD不可逆地从酶分子上解离下来,并因此引起酶的失活;酶亚基在压力下的解离是可逆的,在5℃,pH7.6条件下,... 详细信息

本文通过测定丙酮酸氧化酶内源荧光谱和荧光偏振的变化研究了该酶在1—2200bar压力下的解离。研究结果表明,在压力作用下酶的辅基FAD不可逆地从酶分子上解离下来,并因此引起酶的失活;酶亚基在压力下的解离是可逆的,在5℃,pH7.6条件下,该酶的解离自由能⊿G°为29.89k cal/mol,解离标准体积变化⊿V°为-220ml/mol。脱辅基丙酮酸氧化酶的解离自由能为24.93k cal/mol,证明FAD对酶有稳定作用;⊿V°则为-153ml/mol,减少了近30％,表明FAD对亚基间的空间大小有很大贡献。经胰凝乳蛋白酶部分酶解所活化的酶的解离⊿G°和⊿V°均有所增加,底物丙酮酸亦有相同的影响。研究还表明,碱性pH条件能促进丙酮酸氧化酶的解离。在此研究中,我们也观察到了Weber和Ruan在乳酸脱氢酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶等研究中报道的"conformational drift"现象。

关键词：丙酮酸氧化酶解离

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蚯蚓钙结合蛋白的分离纯化及性质的研究

北京大学学报（自然科学版） 1996年第6期32卷 741-748页

作者：王采芹张庭芳北京大学生命科学学院

以赤子爱胜蚓（ＥｉｓｅｎｉａＦｏｅｔｉｄａ）为材料分离纯化了钙调素（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ），并得到一种新的钙结合蛋白（Ｎｅｏ－ＣａｌｃｉｕｍＢｉｎｄｉｎｇＰｒｏｔｅｉｎ，ＮＣＢＰ）经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＰＡＧＥ... 详细信息

以赤子爱胜蚓（ＥｉｓｅｎｉａＦｏｅｔｉｄａ）为材料分离纯化了钙调素（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ），并得到一种新的钙结合蛋白（Ｎｅｏ－ＣａｌｃｉｕｍＢｉｎｄｉｎｇＰｒｏｔｅｉｎ，ＮＣＢＰ）经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳鉴定，这两种蛋白均表现均一。ＣａＭ分子量为１８．９ｋＤ，ＮＣＢＰ为１６ｋＤ，等电点分别为３．６和４．３，两种蛋白具有不同的肽谱。研究证明蚯蚓ＣａＭ具有与其他来源ＣａＭ所特有的性质，对环核苷酸磷酸二酯酶有明显的激活作用，电泳行为受Ｃａ２＋的影响出现ＣａＭ特征性电泳行为，ＮＣＢＰ亦有类似性质。ＣａＭ和ＮＣＢＰＮ－端均为Ｇｌｙ，ＣａＭＣ－末端为Ｍｅｔ。经氨基酸组成分析表明蚯蚓ＣａＭ及ＮＣＢＰ和其他动物ＣａＭ一样，不含Ｃｙｓ和Ｔｒｐ。其中Ｐｈｅ／Ｔｙｒ比分别为８∶１和７∶２。

关键词：钙调素钙结合蛋白蚯蚓分离提纯

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镁合金的双辊板带连续铸轧技术

铸造技术 2005年第1期26卷 79-81页

作者：张莹耿茂鹏王艳春张庭芳谢水生南昌大学机电学院江西南昌330029 北京有色金属研究总院北京100088

综述了绿色环保材料镁合金的特点、适用范围及其加工方式,分析了镁合金双辊板带连续铸轧技术是镁合金加工的未来发展方向,并指出了存在的问题和挑战。

关键词：镁合金镁板带双辊铸轧近终成形

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油菜花粉钙结合蛋白的研究

北京大学学报（自然科学版） 1999年第4期35卷 480-486页

作者：董爱武赵涛李晓东张庭芳北京大学生命科学学院

以油菜花粉（Ｂｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）为材料纯化了钙调素（ＣａＭ），并得到一种新钙结合蛋白（ＮＣＢＰ）。经ＳＤＳＰＡＧＥ、ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳（ＩＥＦ）鉴定，这两种蛋白质均表现均一。ＣａＭ分子量为１８... 详细信息

以油菜花粉（Ｂｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）为材料纯化了钙调素（ＣａＭ），并得到一种新钙结合蛋白（ＮＣＢＰ）。经ＳＤＳＰＡＧＥ、ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳（ＩＥＦ）鉴定，这两种蛋白质均表现均一。ＣａＭ分子量为１８８ｋＤ，ＮＣＢＰ为１６３ｋＤ，等电点分别为３６和４２。研究证明花粉ＣａＭ具有与其他来源ＣａＭ所特有的性质，对环核苷酸磷酸二酯酶（简称ＰＤＥ）有明显的激活作用，而花粉ＮＣＢＰ不明显。花粉ＣａＭ在ＰＡＧＥ和ＳＤＳＰＡＧＥ中电泳行为有Ｃａ２＋效应，而ＮＣＢＰ仅表现在ＰＡＧＥ中。经氨基酸组成分析表明两种蛋白质氨基酸组成不同，但均含有较多的酸性氨基酸，不含Ｔｒｐ，含１个Ｃｙｓ。ＣａＭ和ＮＣＢＰＮ端均为封闭，ＣａＭＣ端为ＭｅｔＡｌａＬｙｓＣＯＯＨ。两种蛋白质具有不同的肽谱和ＣＤ谱。用ＤＴＮＢ修饰花粉ＣａＭＣｙｓ残基，则激活ＰＤＥ的能力明显下降。

关键词：钙调素钙结合蛋白油菜花粉 NCBP

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大熊猫子宫钙调素的分离纯化和性质的研究

生物化学杂志 1993年第6期9卷 748-754页

作者：申雪菲张庭芳北京大学生物学系北京100871

以大熊猫子宫为材料分离纯化了钙调素(Calmodulin,CaM),经SDS-PAGE,PAGE和等电聚焦电泳鉴定,表现均一。分子量为18800道尔顿,等电点为3.6。该蛋白质分子的N-末端为封闭的。大熊猫子宫钙调素具有其它来源钙调素所特有的一些性质。对环核... 详细信息

以大熊猫子宫为材料分离纯化了钙调素(Calmodulin,CaM),经SDS-PAGE,PAGE和等电聚焦电泳鉴定,表现均一。分子量为18800道尔顿,等电点为3.6。该蛋白质分子的N-末端为封闭的。大熊猫子宫钙调素具有其它来源钙调素所特有的一些性质。对环核苷酸磷酸二酯酶有明显的激活作用,还发现对超氧化物歧化酶也有一定的激活作用。电泳行为受Ca^(2+)影响而出现特征性电泳改变,在含有Ca^(2+)的SDS凝胶电泳中,电泳速度比EGTA存在对略快,在PAGE中,有Ca^(2+)比无Ca^(2+)对电泳速度略慢。大熊猫子宫钙调素的氨基酸组成中,Phe/Tyr为8:2,可观察到钙调素特征性紫外吸收光谱。

关键词：大熊猫子宫调钙蛋白分离提纯

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镁合金高温流变应力实验及其数学模型研究

塑性工程学报 2008年第5期15卷 17-21页

作者：张庭芳黄菊花范洪春南昌大学机电工程学院南昌330029

通过采用单向拉伸实验,在高温蠕变试验机上测定了含稀土耐高温ME20M镁合金板料在不同拉伸速度、不同温度下的力学性能,并分析了其特点与原因;利用实验得出的应力应变数据,校验了目前提出的适用于工程实际应用的含常软化因子的镁合金高... 详细信息

通过采用单向拉伸实验,在高温蠕变试验机上测定了含稀土耐高温ME20M镁合金板料在不同拉伸速度、不同温度下的力学性能,并分析了其特点与原因;利用实验得出的应力应变数据,校验了目前提出的适用于工程实际应用的含常软化因子的镁合金高温流变应力数学模型,在含常软化因子的镁合金高温流变应力数学模型的基础上,提出了适用于更大应变速率范围、温度范围的含非常软化因子的镁合金高温流变应力数学模型。通过与BP神经网络预测结果等比较,上述两个数学模型能较好地预测不同温度、应变速率范围的镁合金流变应力,但精度不如神经网络模型。

关键词：镁合金流变应力数学模型 BP神经网络