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RNAi沉默促肝细胞再生磷酸酶-3基因抑制肝癌细胞侵袭

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中华肝脏病杂志 2008年第3期16卷 227-229页

作者：范钰张尤历张炜吴莺江苏大学附属医院消化科镇江212001

促肝细胞再生磷酸酶（PRL）-3基因是PRLs家族重要成员之一，与某些肿瘤侵袭转移有关。最近研究发现，PRL3基因在肝癌细胞中高表达，但目前尚不清楚PRL-3基因在肝癌细胞侵袭转移中的可能作用和机制。本研究借助于RNA干扰（RNAi）技术，... 详细信息

促肝细胞再生磷酸酶（PRL）-3基因是PRLs家族重要成员之一，与某些肿瘤侵袭转移有关。最近研究发现，PRL3基因在肝癌细胞中高表达，但目前尚不清楚PRL-3基因在肝癌细胞侵袭转移中的可能作用和机制。本研究借助于RNA干扰（RNAi）技术，以合成PRL-3基因小干扰RNA（siRNA）转染处理肝癌细胞Hep3B，从体内外观察了对癌细胞侵袭的影响，并从基质金属蛋白酶（MMP）角度探讨了可能的机制。

关键词：癌,肝细胞侵袭基质金属蛋白酶促肝细胞再生磷酸酶,鼠

空腹血清甘胆酸测定对肝硬变患者Child分级的意义

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中华消化杂志 1990年第4期10卷 239-240页

作者：孙人杰张尤历镇江医学院附属医院

RNAi抑制存活素基因表达对前列腺癌细胞侵袭的影响

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中华老年医学杂志 2008年第11期27卷 847-850页

作者：范钰张尤历李华江苏大学附属人民医院肿瘤研究所镇江市212002 Hanover Department of Pharmacology and Toxicology Dartmouth Medical School Darmouth College NHUSA03755

目的探讨存活素（survivin）基因对前列腺癌细胞侵袭的影响和可能机制。方法采用survivin基因小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）转染处理人前列腺癌细胞系PC-3后，分别采用实时定量RFPCR和Western blot检测survivin基因和基质... 详细信息

目的探讨存活素（survivin）基因对前列腺癌细胞侵袭的影响和可能机制。方法采用survivin基因小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）转染处理人前列腺癌细胞系PC-3后，分别采用实时定量RFPCR和Western blot检测survivin基因和基质金属蛋白酶家族-2、-9（matrix metalloproteinases-2、-9）mRNA和蛋白水平，分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力；其次，将转染48h的细胞接种裸鼠，观察对癌细胞体内侵袭的影响。结果软琼脂集落形成试验显示，3．125、6．250nmol／L和12．500nmol／L siRNA组集落形成数分别为17．8±1．6、13．6±1．5、8．8±1．4，而对照组为22．6±1.8（P〈0．05）；Boyden小室模型试验显示，3．125、6．250nmol／L和12．500nmol／L siRNA组穿过滤膜的细胞数分别为33．6±2．1、19．5±1．9、8．1±1．8，而对照组为49．4±2．3（P〈0．05）。体内试验显示，对照组裸鼠组织癌细胞侵袭横纹肌和血管，而转染组未见这些现象。同时发现，转染组细胞MMP-2、-9基因mRNA和蛋白水平明显下调，呈浓度和时间依赖性（P〈0．01）。结论采用survivin siRNA转染可抑制前列腺癌细胞侵袭转移，其机制可能与下调MMP-2和MMP9表达有关。

关键词：前列腺肿瘤肿瘤侵润基质金属蛋白酶类

肝硬化患者低动脉血氧分压和低动脉血二氧化碳分压的临床意义

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胃肠病学 2006年第11期11卷 671-673页

作者：张宇川张尤历范钰江苏大学附属医院消化科 212001

背景：肝硬化患者可合并多种脏器功能异常,其中肺功能异常临床并不少见,应引起重视。目的：探讨肝硬化患者低动脉血氧分压(PaO_2)和低动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)与肝功能Child-Pugh分级的关系及其临床意义。方法：77例诊断明确的肝硬... 详细信息

背景：肝硬化患者可合并多种脏器功能异常,其中肺功能异常临床并不少见,应引起重视。目的：探讨肝硬化患者低动脉血氧分压(PaO_2)和低动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)与肝功能Child-Pugh分级的关系及其临床意义。方法：77例诊断明确的肝硬化患者纳入研究,其中Child-Pugh A级24例,B级29例,C级24例。行动脉血气分析以比较各级患者的PaO_2和PaCO_2。对低PaO_2血症者,予吸氧4h后复查动脉血气。结果：Child-Pugh A、B、C级肝硬化患者的低PaO_2血症和低PaCO_2血症发生率依次增高．PaO_2和PaCO_2检测值依次降低。三组低PaO_2血症的发生率分别为20．8％、48．3％和79．2％(P＜0．05)。PaO_2均值分别为10．72kPa±1．27kPa、9．85kPa±1．38kPa和9．13kPa±1．09kPa (P＜0．05)：低PaCO_2血症的发生率分别为29．2％、65．5％和91．7％(P＜0．05),PaCO_2均值分别为4．74kPa±0．64kPa、4．27kPa±0．54kPa和3．78 kPa±0．83kPa(P＜0．05)。低PaO_2血症者吸氧后低PaO_2血症显著改善(9．42kPa±0．84kPa对11．74kPa±0．86kPa,P＜0．01)．而低PaCO_2血症则未见改善(4．27kPa±0．34kPa对4．35kPa±0．46kPa,P＞0．05)。结论：低PaO_2和低PaCO_2是肝硬化患者存在肺功能异常的一项参考指标,并可能与肝损害程度有关。低PaCO_2并不是低PaO_2的继发结果,而可能是反映肝硬化患者肺功能异常的独立因素。

关键词：肝硬化 Child-Pugh分级动脉血氧分压动脉血二氧化碳分压

中西药联合保留灌肠治疗慢性溃疡性结肠炎疗效观察

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中国中西医结合杂志 2007年第12期27卷 1123-1125页

作者：王晓燕吴莺蒋晓猛魏金文范钰张尤历江苏大学附属医院消化科江苏镇江212001

目的观察中西药结合保留灌肠治疗慢性溃疡性结肠炎的疗效。方法采用对照试验观察中西药结合组(治疗组)和单纯西药保留灌肠组(对照组)的临床疗效。10天为1个疗程,共2个疗程。结果治疗组总有效率为96.7%,对照组总有效率73.3%,两组比较,差... 详细信息

目的观察中西药结合保留灌肠治疗慢性溃疡性结肠炎的疗效。方法采用对照试验观察中西药结合组(治疗组)和单纯西药保留灌肠组(对照组)的临床疗效。10天为1个疗程,共2个疗程。结果治疗组总有效率为96.7%,对照组总有效率73.3%,两组比较,差异有统计学意义(x^2=4.71,P<0.05)。两组治疗后症状改善情况与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);腹痛、腹泻症状改善情况治疗组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前后结肠镜检查积分情况(除息肉外)比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组与对照组比较(除息肉外)差异亦有统计学意义(P<0.05)。粪常规检查结果两组治疗后与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照组比较(除脓球外),差异有统计学意义(P<0.05)。两组复发情况比较,治疗组总复发率为33.3%,对照组为60.0%,两组比较,差异有统计学意义(x^2=4.286,P<0.05)。结论中西药结合保留灌肠疗法治疗溃疡性结肠炎具有良好的疗效。

关键词：慢性溃疡性结肠炎中西药结合保留灌肠

肝硬化患者过度通气及呼吸性碱中毒的临床意义

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中国临床医学 2006年第6期13卷 938-939页

作者：张宇川张尤历陈世耀范钰江苏大学附属医院消化科江苏镇江212001 复旦大学附属中山医院消化科上海200032

目的：探讨肝硬化患者过度通气及其引起的呼吸性碱中毒的临床意义。方法：97例诊断明确的肝硬化患者。其中代偿期肝硬化34例；失代偿期肝硬化无肝性脑病35例；失代偿期肝硬化合并肝性脑病的28例。所有病例均进行动脉血气分析,比较3组患... 详细信息

目的：探讨肝硬化患者过度通气及其引起的呼吸性碱中毒的临床意义。方法：97例诊断明确的肝硬化患者。其中代偿期肝硬化34例；失代偿期肝硬化无肝性脑病35例；失代偿期肝硬化合并肝性脑病的28例。所有病例均进行动脉血气分析,比较3组患者低二氧化碳血症和呼吸性碱中毒的发生率及严重程度。结果：①代偿期肝硬化组、失代偿期肝硬化无肝性脑病组、失代偿期肝硬化合并肝性脑病组低二氧化碳血症发生率依次增高(P＜0．01)；3组PaCO_2依次降低(P＜0．01)；②代偿期肝硬化组、失代偿期肝硬化无肝性脑病组、失代偿期肝硬化合并肝性脑病组呼吸性碱中毒的发生率依次增高(P＜0．05),呼吸性碱中毒也依次加重(P＜0．01)。结论：肝硬化患者随着肝功能的减退,容易发生过度通气,而过度通气造成呼吸性碱中毒,进一步加重肝硬化患者的病情。在治疗肝硬化时应注意监测和纠正酸硷紊乱。

关键词：肝硬化肝性脑病低二氧化破血症呼吸性碱中毒

幽门螺杆菌对胃癌细胞BGC-823形态及凋亡相关基因表达的影响

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世界华人消化杂志 2011年第17期19卷 1767-1772页

作者：吴莺李翔周红范钰张尤历沈琰何亚龙江苏大学附属医院消化科江苏省镇江市212001 江苏大学基础医学与医学技术学院江苏省镇江市212013 江苏大学附属人民医院肿瘤科江苏省镇江市212001

目的:探讨H.pylori刺激人胃癌细胞BGC-823后,对细胞形态以及凋亡抑制基因Survivin和凋亡基因caspase-3mRNA表达的影响.方法:分别用东亚型H.pylori菌株和西方型H.pylori菌株超声提取物,刺激胃癌细胞BGC-823,显微镜下直接观察细胞形态的变... 详细信息

目的:探讨H.pylori刺激人胃癌细胞BGC-823后,对细胞形态以及凋亡抑制基因Survivin和凋亡基因caspase-3mRNA表达的影响.方法:分别用东亚型H.pylori菌株和西方型H.pylori菌株超声提取物,刺激胃癌细胞BGC-823,显微镜下直接观察细胞形态的变化.同时利用荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测胃癌细胞BGC-823凋亡抑制基因Survivin和凋亡基因caspase-3 mRNA的表达水平.结果:H.pylori刺激胃癌细胞BGC-823后12h,出现蜂鸟表型,呈时间依赖性,24h最明显,东亚型组与西方型组相比,引起的细胞蜂鸟表型百分率明显增加(29.3%±2.1%vs8.0%±2.0%,F=164.73,P<0.05).H.pylori超声提取液刺激胃癌细胞BGC-823后,在东亚型组和西方型组均出现凋亡抑制基因Survivin mRNA的表达量明显上调,与对照组相比caspase-3 mRNA的表达量明显下降(P<0.05);并且东亚型组Survivin mRNA的表达的上调以及cas-pase-3 mRNA的表达较西方型组均明显下降(P<0.05).结论:H.pylori超声提取液可诱导胃癌细胞BGC-823发生形态学改变,并且引起凋亡抑制基因Survivin mRNA表达上调、凋亡基因caspase-3 mRNA表达下降.东西方型H.pylori菌株之间存在生物活性的差异.

关键词：幽门螺杆菌蜂鸟表型凋亡相关基因 CagA蛋白分型

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胃癌细胞中与端粒酶活性负相关的基因克隆

中国老年学杂志 2006年第2期26卷 230-232页

作者：严丽荣张尤历宋志秀江苏大学附属医院江苏镇江212001 江苏大学生命科学院

目的探讨人胃癌细胞活性经过端粒酶RNA干涉后基因片段的差异表达以及对其进行克隆和测序。方法通过荧光差异显示获得DNA,经过PCR扩增、DNA克隆,对制备的质粒DNA酶切产物进行鉴定及序列分析。结果以端粒酶RNA干涉的真核细胞表达载体转染... 详细信息

目的探讨人胃癌细胞活性经过端粒酶RNA干涉后基因片段的差异表达以及对其进行克隆和测序。方法通过荧光差异显示获得DNA,经过PCR扩增、DNA克隆,对制备的质粒DNA酶切产物进行鉴定及序列分析。结果以端粒酶RNA干涉的真核细胞表达载体转染两种胃癌细胞系,均检测到一些基因的表达发生改变;对其中4个片段进行了测序,有2个是癌发生相关基因。结论RNA干涉后人胃癌细胞基因发生变化,活性下降,RNA干涉可用于肿瘤基因治疗。

关键词：端粒酶 RNA干涉荧光差异显示

DNMT3a和HDAC2在胃癌组织中的表达及临床相关性分析

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南京医科大学学报（自然科学版） 2012年第9期32卷 1232-1236页

作者：王正江杨鸿梅姚志新徐岷张尤历盐城市第一人民医院消化科江苏盐城224001 江苏大学附属医院消化科江苏镇江212001

目的:检测DNA甲基转移酶3a(DNA methltransferase 3a,DNMT3a)和组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在人胃癌组织中的表达,分析其与临床特征的相关性。方法:应用Western blot方法检测30例配对人胃腺癌和癌旁组织中DNMT3a和H... 详细信息

目的:检测DNA甲基转移酶3a(DNA methltransferase 3a,DNMT3a)和组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在人胃癌组织中的表达,分析其与临床特征的相关性。方法:应用Western blot方法检测30例配对人胃腺癌和癌旁组织中DNMT3a和HDAC2表达的差异;免疫组织化学方法检测90例胃腺癌患者手术切除癌组织中DNMT3a和HDAC2的表达水平,并分析其表达与临床病理学指标的关系。结果:Western blot检测结果显示癌组织中DNMT3a和HDAC2蛋白表达量明显高于癌旁组织(P<0.01);90例胃癌标本中,免疫组化结果显示DNMT3a阳性表达率为79%(71/90),HDAC2蛋白表达阳性率为86%(77/90),癌组织中DNMT3a表达强度与肿瘤分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05),HDAC2表达强度与肿瘤浸润深度、病理学大体分型、TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05)。DNMT3a与HDAC2在胃癌组织中的表达呈正相关(P<0.05)。结论:DNMT3a与HDAC2是胃腺癌发生发展中的危险因素之一,一定程度上能反映胃腺癌的恶性程度,对预后的判断有一定价值,是一项有潜在价值的肿瘤相关标志物。

关键词：胃癌 DNA甲基转移酶组蛋白去乙酰化酶病理