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链霉菌发酵生产磷脂酶A2及酶解菜籽油脚条件的优化

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链霉菌发酵生产磷脂酶A2及酶解菜籽油脚条件的优化

作者：张安世华中农业大学

学位级别：硕士

磷脂是一类含磷酸基团的脂类物质的总称，广泛应用于食品、医药、化妆品、皮革、涂料等领域。由于普通磷脂亲水性不够理想，使磷脂的应用受到了很大的限制。为了提高磷脂的亲水性，必须对磷脂进行改性。改性方法包括物理改性、化学改性... 详细信息

磷脂是一类含磷酸基团的脂类物质的总称，广泛应用于食品、医药、化妆品、皮革、涂料等领域。由于普通磷脂亲水性不够理想，使磷脂的应用受到了很大的限制。为了提高磷脂的亲水性，必须对磷脂进行改性。改性方法包括物理改性、化学改性和酶法改性。由于前两种方法存在着一些安全性问题，已逐渐被淘汰。本实验采用了酶法改性的方法，利用磷脂酶裂解磷脂分子中的脂肪酸基团使之转化成为溶血磷脂，与普通磷脂相比，溶血磷脂在乳化性能方面有明显改善。本研究的主要工作是利用李维琳老师构建的磷脂酶A(PLA)的高产菌株发酵制备磷脂酶，并用磷脂酶对油脚磷脂进行水解，优化出链霉菌发酵产酶和酶水解油脚磷脂的最佳条件，为溶血磷脂的工业化生产奠定了重要的实验室基础。具体内容和结论如下： 1．利用PLA高产菌株发酵制备磷脂酶A，对培养基的组成和发酵条件进行了优化，发酵培养基组成(g／L)：黄豆饼粉5.0，麸皮5.0，NaNO 5.0，CaCO 1.0。最佳摇瓶发酵条件为：培养基起始pH7.5，培养温度30℃，摇床转速180r／min，接种量7％，装瓶量80mL／250mL三角瓶，接种后48h酶活力由优化前的0.43IU／mL提高到0.54IU／mL，提高了26％。同时还在10L发酵罐中进行了初步放大试验。当接种量7％，初始pH7.5，通气量0.5m／h，在0-16h之间，转速为300r／min，在16-48h之间，转速为50r／min，30℃发酵，24h PLA的活力达到高峰0.55IU／mL。 2．利用发酵得到的磷脂酶A水解油脚，进行了酶改性研究。油脚磷脂的最佳水解工艺条件为：底物浓度20％，反应温度50℃，起始pH值8.0，Ca浓度0.3％。 3．在油脚磷脂的最佳水解条件下制备溶血磷脂，测定溶血磷脂乳化能力为251mL油／g磷脂，是普通磷脂(53mL油／g磷脂)的5倍左右。在不同pH值、不同温度条件下，溶血磷脂的乳化稳定性均优于普通磷脂。

关键词：链霉菌发酵磷脂酶A2 磷脂乳化性

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西葫芦cDNA全长转录组序列分析

分子植物育种 2023年第24期21卷 8028-8035页

作者：张中海王美丽唐忠丽薛诗怡张安世雷逢进许小勇焦作师范高等专科学校焦作454002 山西农业大学园艺学院山西省设施蔬菜协同创新中心太谷030801 山西农业大学棉花研究所运城044000 海南省崖州湾种子实验室三亚572025

为解析西葫芦中类胡萝卜素积累的分子机制,本研究利用PacBio单分子长读长测序技术(single-molecule long-read sequencing technology,SMRT)对富含类胡萝卜素的黄皮西葫芦(21pu05)叶、雌花、雄花、未授粉果实和授粉10 d果实等组织的混... 详细信息

为解析西葫芦中类胡萝卜素积累的分子机制,本研究利用PacBio单分子长读长测序技术(single-molecule long-read sequencing technology,SMRT)对富含类胡萝卜素的黄皮西葫芦(21pu05)叶、雌花、雄花、未授粉果实和授粉10 d果实等组织的混合样品进行全长转录组测序分析。试验结果共获得循环一致序列(circular consensus read,CCS) 158 968条,其中全长非嵌合(full length reads non-chimeric,FLNC)序列113 284条。聚类分析获得高质量的一致序列28 383条,其中融合转录本有213个。进一步分析发现16 895个可变剪接基因位点,其中新基因位点1 734个,新转录本18 510个。序列结构预测鉴定出8 773个SSR位点、8 527个完整ORF序列,以及317个长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)。对16 508个新转录本进行了功能注释。以上研究结果为开展西葫芦类胡萝卜素合成相关基因的克隆及分子机制的解析提供参考。

关键词：黄皮西葫芦全长转录组可变性剪接融合转录本

猕猴桃SCoT遗传多样性分析及指纹图谱的构建

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植物研究 2017年第2期37卷 259-265页

作者：张安世张中海齐秀娟刘莹骆扬焦作师范高等专科学校理工学院焦作454000 中国农业科学院郑州果树研究所郑州450009

利用SCoT标记对32个猕猴桃品种进行了遗传多样性分析。从47个SCoT引物中筛选了11个引物进行PCR扩增,共扩增出185个条带,其中多态性条带180个,多态性比率为97.30%。各引物Nei’s基因多样性指数(H)平均为0.238 4,Shannon’s信息指数(I)平... 详细信息

利用SCoT标记对32个猕猴桃品种进行了遗传多样性分析。从47个SCoT引物中筛选了11个引物进行PCR扩增,共扩增出185个条带,其中多态性条带180个,多态性比率为97.30%。各引物Nei’s基因多样性指数(H)平均为0.238 4,Shannon’s信息指数(I)平均为0.377 8。利用UPGMA构建32份猕猴桃种质资源的聚类树状图。在遗传相似系数为0.78处可将32个猕猴桃品种分为5组,聚类结果与形态学分类基本一致。利用4条引物扩增的16个多态性位点构建了32个猕猴桃品种的DNA指纹图谱,可以将32个猕猴桃品种区分并准确鉴定。

关键词：猕猴桃 SCoT DNA指纹图谱遗传多样性

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溶血磷脂的乳化性能研究

安徽农业科学 2007年第13期35卷 3800-3801页

作者：张安世李维琳华中农业大学生命科学技术学院

研究了溶血脂的乳化性能,研究表明:溶血磷脂乳化油脂的能力是普通磷脂的5倍左右;随磷脂浓度的升高,溶血磷脂的乳化稳定性大幅度提高;普通磷脂和溶血磷脂在酸性条件下的乳化稳定性均较差,在碱性条件下溶血磷脂的乳化稳定性更好;溶血磷脂... 详细信息

研究了溶血脂的乳化性能,研究表明:溶血磷脂乳化油脂的能力是普通磷脂的5倍左右;随磷脂浓度的升高,溶血磷脂的乳化稳定性大幅度提高;普通磷脂和溶血磷脂在酸性条件下的乳化稳定性均较差,在碱性条件下溶血磷脂的乳化稳定性更好;溶血磷脂在高温和低温下的乳化稳定性都大于普通磷脂。

关键词：磷脂酶A2 油脚溶血磷脂乳化稳定性

珍稀濒危植物太行菊遗传多样性的ISSR分析

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广西植物 2014年第4期34卷 535-540页

作者：张安世赵利新刘莹焦作师范高等专科学校生物系河南焦作454001 河南省国有焦作林场河南焦作454191

利用ISSR分子标记技术对太行山特有濒危物种太行菊11个自然居群的遗传多样性进行研究。用10个引物对11个居群的122个样品进行扩增,共得到150个扩增位点,其中多态性位点149个,多态位点百分率(PPL)为99.33%。POPGENE分析显示,太行菊具有... 详细信息

利用ISSR分子标记技术对太行山特有濒危物种太行菊11个自然居群的遗传多样性进行研究。用10个引物对11个居群的122个样品进行扩增,共得到150个扩增位点,其中多态性位点149个,多态位点百分率(PPL)为99.33%。POPGENE分析显示,太行菊具有较高的遗传多样性(H=0.2149,I=0.3455)。沁阳市大西天居群的遗传多样性水平最高(H=0.1910,I=0.2969),山西陵川县大双村居群的遗传多样性水平最低(H=0.1356,I=0.2155)。Nei’s遗传多样性分析表明,11个自然居群间出现了较高的遗传分化(基因分化系数Gst=0.2566,基因流Nm=1.4488)。生境的的片段化和基因流障碍可能是导致太行菊居群间遗传分化显著的主要原因。通过对太行菊居群遗传多样性和遗传结构的分析,该文提出了一些保护策略。

关键词：太行菊 ISSR 遗传多样性遗传分化保护策略

基于ISSR标记的猕猴桃品种遗传多样性分析及指纹图谱构建

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植物资源与环境学报 2017年第3期26卷 19-26页

作者：张安世韩臣鹏齐秀娟张中海焦作师范高等专科学校理工学院河南焦作454000 郑州绿博园管理中心河南郑州451470 中国农业科学院郑州果树研究所河南郑州450009

采用ISSR标记对中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)、美味猕猴桃[*** ***(***.)***.]、软枣猕猴桃[***(*** Zucc.)*** Miq.]和毛花猕猴桃(*** Benth.)的32个样本进行了遗传多样性分析,并以ISSR标记为基础构建了DNA指纹图谱。结果表明:筛选的10个多态性高且条带清晰的引物共扩增出200个条带(位点),其中,多态性位点195个,多态性位点百分率(PPL)达97.50%;各引物的多态性信息含量(PIC)以及供试样本的观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Nei’s基因多样性指数(H)和Shannon’s多样性指数(I)的总均值分别为0.908 0、1.980 0、1.356 9、0.225 5和0.361 3,4个猕猴桃种间的遗传分化系数(G_(st))为0.414 6,基因流(N_m)为0.705 9,且32个样本间的Na、Ne、H和I值差异极显著(P<0.001)。供试32个样本间的遗传相似系数(GS)为0.565 0~0.965 0,平均值为0.716 4;基于GS值进行UPGMA聚类分析,在GS值为0.76处将32个样本分为4组,基本对应供试的4个猕猴桃种类,其中,第Ⅰ组的大多数样本属于美味猕猴桃品种,第Ⅱ组的样本均属于中华猕猴桃品种,第Ⅲ组的样本属于毛花猕猴桃品种,第Ⅳ组的样本均属于软枣猕猴桃品种。分子方差分析结果表明:4个猕猴桃的种间变异占总变异的40.84%,种内变异占总变异的59.16%。研究结果表明:供试的猕猴桃品种间遗传分化程度较高,基因交流频率较低,且总遗传变异的近60%存在于种内,说明供试的猕猴桃品种具有较丰富的遗传多样性。另外,根据10个ISSR引物的扩增结果,筛选出引物UBC818、UBC824、UBC854和UBC895扩增的15个多态性位点构建的DNA指纹图谱可用于供试32个猕猴桃样本的鉴定。

关键词：猕猴桃 ISSR标记遗传多样性聚类分析 DNA指纹图谱