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动物源性产品中泰乐菌素与替米考星残留免疫分析方法研究

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动物源性产品中泰乐菌素与替米考星残留免疫分析方法研究

作者：姚婵媛华南农业大学

学位级别：硕士

泰乐菌素(Tylosin,TYL),是从弗氏链霉菌的培养液中获得的一种大环内酯类抗生素。替米考星(Tilmicosin,TMC)是由TYL为前体物半合成而得。因为其良好的抑菌性,TYL和TMC被广泛应用于畜牧养殖业。但是这些药物的残留会引起人体的过敏反应,... 详细信息

泰乐菌素(Tylosin,TYL),是从弗氏链霉菌的培养液中获得的一种大环内酯类抗生素。替米考星(Tilmicosin,TMC)是由TYL为前体物半合成而得。因为其良好的抑菌性,TYL和TMC被广泛应用于畜牧养殖业。但是这些药物的残留会引起人体的过敏反应,对抗生素产生抗药性等危害。因此,加强对食品中此类抗生素的监控至关重要。目前TYL和TMC的分析方法主要是液相色谱法、液质联用法等,这些方法准确可靠,常作为确证方法,但设备昂贵、前处理繁琐耗时、样品通量低,无法进行现场监控。免疫检测技术是利用抗原抗体反应与酶促反应相结合的一种技术,具有灵敏、快速、速高通量等特点,可与仪器确证技术搭配应对量大面宽的农产品、食品安全快速筛查需求,近年来已成为研究热点。本文以TYL和TMC为对象,设计合成了4个半抗原并制备了TYL单克隆抗体,分别建立了间接竞争酶联免疫分析法和胶体金免疫层析分析法。研究内容如下:(1)分别以TYL和TMC为原料设计合成出了4种半抗原,通过活泼酯法偶联载体蛋白进行动物免疫实验,获得了能够特异性识别TYL的抗血清,在1μg/mL TYL药物条件下,其抑制率为89%。进一步通过细胞实验筛选出能特异性识别TYL的单克隆抗体。(2)基于单克隆抗体建立了检测TYL的间接竞争酶联免疫分析(ciELISA)方法。通过优化后,该方法的检测限为0.58 ng/mL,IC为4.72 ng/mL,线性检测范围为1.267.65 ng/mL;与TMC的交叉率为48.96%,TMC的检测限为1.31ng/mL,IC为9.64 ng/mL,线性检测范围为1.967.40 ng/mL。与其余大环内酯类抗生素及结构功能类似物交叉反应率均<0.1%,方法特异性好,批内批间的变异系数均<15%,方法精密度高。牛奶、水样品经前处理优化和倍比稀释法消除基质效应,平均添加回收率在76.3509.50%之间,检测结果与HPLC-MS/MS方法对比相关性良好。(3)基于单克隆抗体制备了检测TYL的胶体金免疫层析试纸条(GICA)。通过优化后,该方法的IC为18.95ng/mL,检测范围(B/B0=0时所对应的x值)为1.566.92 ng/mL,在缓冲溶液中的可视化检测限为50 ng/mL。与TMC的交叉率为100.69%,IC为18.82 ng/mL,检测范围为1.7403 ng/mL,与其余大环内酯类抗生素及结构功能类似物交叉反应率均<0.1%,样品平均添加回收率在65.9626.12%之间,检测结果与HPLC-MS/MS方法对比相关性良好。

关键词：泰乐菌素替米考星单克隆抗体间接竞争酶联免疫分析方法胶体金免疫层析试纸条

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研究型大学研究生学术文化建设研究

研究型大学研究生学术文化建设研究

作者：田婵媛华南理工大学

学位级别：硕士

学术文化是高校校园文化的重要组成部分,良好的学术文化对大学高层次人才的培养与科研创新起着极其重要的滋养作用。本研究主要从高校管理及制度建设视角出发,探讨研究生的群体学术文化建设,形成以大学精神为引领、以学位培养制度为规... 详细信息

学术文化是高校校园文化的重要组成部分,良好的学术文化对大学高层次人才的培养与科研创新起着极其重要的滋养作用。本研究主要从高校管理及制度建设视角出发,探讨研究生的群体学术文化建设,形成以大学精神为引领、以学位培养制度为规范、以广泛的活动参与和互动为主要形式的研究生学习与生活,进而影响至个体。研究型大学应该构建良好的学术文化生态环境,以便让研究生们生在其中,在潜移默化中受到正面、积极的影响和激励,自动自发地完成培养计划所规定的任务、达到培养目标的要求。研究生学术文化及其对研究生培育的影响,以及如何借此影响,有意识地调节培养过程的相关环节,改进培养措施,这是本文研究所关注的焦点。研究型大学拥有丰富的师资资源、高水平的研究平台和既有学术成就,是研究生培养的“大户”,这是本文研究所依托的重要对象。首先从绪论部分入手介绍了选题背景、研究意义和大致的研究思路及研究方法,接着对研究型大学研究生学术文化建设的相关概念进行界定,并通过教育学、管理学等理论知识阐述了本研究所依赖的理论基础。其次笔者立足前人已有对大学学术文化的研究,解析大学学术文化的内涵,并分析各要素之间的关系。在此基础上结合研究生学术文化的构成要素、学术文化特征等,构建出研究生学术文化的理论框架。在理论分析的同时,本研究也运用调查问卷的研究方法,对当前研究生学术文化建设现状进行了调研,发现目前研究生学术文化建设仍存在一定的问题,如部分研究生道德素养亟待提升、学术制度有待优化等。运用理论研究成果对研究生学术文化建设中存在的现象和问题进行分析,以期得到合理和科学的解释。最后,在前面理论研究和现实调查基础上,本文给出了加强研究生学术文化建设的对策和建议,如强化学术观念与大学精神、完善学术制度增强研究生学术规范意识、建立更加有效的学术管理模式等。

关键词：研究型大学研究生学术文化建设

倪译《史记》中文化术语英译透明性及译者调节

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倪译《史记》中文化术语英译透明性及译者调节

作者：张婵大连理工大学

学位级别：硕士

《史记》作为一部历史典籍巨著,包含了大量富有中国古代文化内涵的术语,术语翻译的成败直接决定了翻译的效果,术语的英译策略取决于译者对于翻译原则的倾向性。瓦尔特`本雅明的透明观认为透明翻译应是对原文字对字的遵从,让原文发挥光芒... 详细信息

《史记》作为一部历史典籍巨著,包含了大量富有中国古代文化内涵的术语,术语翻译的成败直接决定了翻译的效果,术语的英译策略取决于译者对于翻译原则的倾向性。瓦尔特`本雅明的透明观认为透明翻译应是对原文字对字的遵从,让原文发挥光芒;劳伦斯`韦努蒂认为只有总重他者文化,才能实现透明的翻译。本文以前者的透明观及后者的透明性翻译原则为框架,以尊重他者文化及读者接受性为参照,分析倪豪士的《史记》译本中文化术语的翻译策略。本文将文化术语进行分类,参照Peter Newmark及Eugene A. Nida的词汇分类原则,结合《史记》自身特点,将文化术语主要分为：自然现象、特殊历史人物术语、物质文化、宗教、礼乐诗书及褒奖术语。针对不同类型的术语,译者采取的翻译策略也要有适当的选择并需要在源语文化和异语文化之间进行调节,最终通过增强透明性来提高术语译文的可读性。

关键词：《史记》英译文化术语透明性译者调节

p66Shc特异性慢病毒载体的构建及其对高氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的影响

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p66Shc特异性慢病毒载体的构建及其对高氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的...

作者：张婵泸州医学院

学位级别：硕士

目的：构建p66Shc特异性慢病毒载体,稳定转染至人肺泡Ⅱ型上皮A549细胞中，抑制p66Shc的表达，并探讨其对高氧诱导肺泡上细胞凋亡的影响。方法：设计3条p66ShcRNA干扰靶点，合成双链DNA，与双酶切后的慢病毒空载体进行连接，转化入感... 详细信息

目的：构建p66Shc特异性慢病毒载体,稳定转染至人肺泡Ⅱ型上皮A549细胞中，抑制p66Shc的表达，并探讨其对高氧诱导肺泡上细胞凋亡的影响。方法：设计3条p66ShcRNA干扰靶点，合成双链DNA，与双酶切后的慢病毒空载体进行连接，转化入感受态的细胞，鉴定阳性克隆正确后，抽提、扩增质粒，与另外3个辅助包装质粒进行慢病毒包装，测定滴度后感染A549细胞，选取沉默效应最为明显的p66Shc-Shc1组进入后续实验，稳定培养一个月。同时体外传代培养慢病毒空载体感染的A549细胞及未做任何处理的A549细胞。将实验细胞分为四组：对照组，高氧组，慢病毒+高氧组，空载体+高氧组。对照组：在含10%胎牛血清和1%青链霉素的1640培养基中常规培养;高氧组、慢病毒+高氧组、空载体+高氧组：加入等量的上述培养液，换液后，以3L/min的速度通入含95%氧气的高纯混合气10min，后在培养箱中密闭培养。培养结束后收集细胞检测指标:倒置相差显微镜下观察A549细胞的形态学改变;流式细胞术检测高氧及慢病毒载体对细胞凋亡的影响;SP细胞免疫化学方法检测分组24小时后XIAP，Caspase-9蛋白的表达;激光共聚焦显微镜检测线粒体活性氧产生情况及膜电位变化情况。结果：（1）p66Shc-pLenR-GPH载体的鉴定：将重组质粒及pLenR-GPH空载体以限制性内切酶双酶切后行琼脂糖凝胶电泳，电泳结果与预期相符，LV-shRNA载体构建成功。（2）慢病毒的包装：将所构建的p66Shc-pLenR-GPH重组质粒及pLenR-GPH空载体与辅助包装质粒pRsv-REV， pMDlg-pRRE，pMD2G共转染293T细胞，转染终止24小时后在荧光倒置显微镜下观察，每孔细胞均表达GFP绿色荧光，转染成功。（3）稳定沉默p66Shc基因的A549细胞系的建立：将浓缩后的病毒感染A549细胞，对感染后的A549细胞做荧光定量PCR及Western blot，3组细胞p66ShcRNA表达量降低，p66Shc蛋白的表达下降，p66Shc-Shc1组下降更为明显，表明我们已经成功建立了稳定沉默p66Shc的A549细胞系，并选取p66Shc-Shc1组进入后续实验。（4）倒置相差显微镜下观察细胞的形态学改变:对照组细胞贴壁良好，呈铺路石样，为典型扁圆多角形，数量多，排列紧密，悬浮细胞少。高氧组及空载体+高氧组细胞随时间延长，悬浮细胞数量增多，贴壁细胞生长缓慢，细胞形态由典型的扁圆多角形变成圆形或椭圆形，数量减少，连接松散，细胞间隙可见较多细胞碎片。慢病毒+高氧组细胞生长状态欠佳，部分细胞形态由典型的扁圆多角形变成圆形或椭圆形，活细胞数量较高氧组增多，悬浮细胞数量较高氧组少，但未达到对照组水平;（5）流式细胞术检测凋亡:与对照组相比，高氧组及空载体+高氧组细胞凋亡率明显增加，差异有统计学意义(p<0.05)。而慢病毒+高氧组的凋亡率有所降低，与高氧组比较差异有统计学意义(p<0.05);（6）免疫组织化学方法检测凋亡相关蛋白的表达：与对照组相比，高氧组及空载体+高氧组细胞内XIAP表达减少，Caspase-9蛋白的表达明显增加，差异有统计学意义(p<0.05)。而与高氧组相比，慢病毒+高氧组细胞内XIAP表达增加，Caspase-9蛋白的表达有明显降低，差异有统计学意义(p<0.05);（7）激光共聚焦显微镜结果：与对照组相比，高氧组细胞线粒体活性氧含量显著增加，膜电位明显下降，差异有统计学意义(p<0.05)。而与高氧组相比，慢病毒+高氧组细胞线粒体活性氧含量显著减少，膜电位明显升高，差异有统计学意义(p<0.05)，但未达到对照组水平(p<0.05)。结论：高氧诱导细胞内p66Shc出现高表达，发生磷酸化，转位于线粒体，线粒体活性氧产生增多，膜电位下降。靶向表达p66Shc的shRNA慢病毒载体，转染入人肺泡Ⅱ型上皮A549细胞内，可通过RNA干扰导致p66Shc基因沉默，减少线粒体活性氧产生，减轻膜电位下降，减少A549细胞凋亡，减轻肺泡上皮细胞的损伤。而慢病毒空载体组则没有这种变化。

关键词：高氧肺泡上皮细胞慢病毒载体 RNA干扰 p66Shc凋亡

区域劳务品牌产业链延伸研究——以“鄂州金刚石刀具工”为例

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区域劳务品牌产业链延伸研究——以“鄂州金刚石刀具工”为例

作者：张婵中南民族大学

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我国有着大量富余的农村劳动力，这部分劳动力迫切需要转移到非农产业中去。因此，如何提高我国农村富余劳动力有效转移就业能力，一直是政府部门和学术界研究摸索的重要理论和实践问题。劳务群体在一定行业规模中利用特定区域聚集的品... 详细信息

我国有着大量富余的农村劳动力，这部分劳动力迫切需要转移到非农产业中去。因此，如何提高我国农村富余劳动力有效转移就业能力，一直是政府部门和学术界研究摸索的重要理论和实践问题。劳务群体在一定行业规模中利用特定区域聚集的品牌化优势进行规范和管理，从而形成了区域劳务品牌，这种新型的品牌的产生预示着我国劳务经济开始走进品牌经营化时代。但是，区域劳务品牌是一种特殊的品牌，主要与提供劳务相关，形成产业链的是少之又少，在扩大就业和发展劳务品牌的进程中，必须创新发展思路，更新发展观念，改变发展方式。本文主要从区域劳务品牌理论研究、产业链理论研究和区域劳务品牌产业链的发展研究，这三个方面对国内外文献进行了梳理，研究发现对于区域劳务品牌的研究中，目前基本没有涉及到产业链研究。因此，本文基于区域劳务品牌理论与产业链理论对区域劳务品牌的产业链展开深入研究。首先，要实现区域劳务品牌的进一步发展，就必须将区域劳务品牌的开发向技术品牌、产品品牌和产业品牌上升，实现升级换代，从而带动产业链的发展，形成产业规模效益。其次，要运用具体的方式，包括技术提升、文化培养、形象塑造等来提升区域劳务品牌的附加值，这样不但能提高区域劳务品牌的发展内涵，而且还能增加区域劳务品牌的生命力。在实证研究中，论文选取“鄂州金刚石刀具工”劳务品牌为研究对象，通过访谈研究和问卷分析得出“鄂州金刚石刀具工”产业链延伸影响的主要因素。然后基于已有研究理论，通过对访谈研究的结果分析设计出区域劳务品牌产业链延伸的路径，在具体分析的时候，分别根据产业的特点从上游和下游产业链延伸做了较为详细的案例分析，通过案例说明应该如何具体把产业链延伸运用到区域劳务品牌的发展中来。最后对论文进行了归纳总结，提出了具体的发展方向以及未来进一步研究的方向。

关键词：品牌区域劳务品牌产业链延伸

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OCDMA编解码器的研究

OCDMA编解码器的研究

作者：张婵太原理工大学

学位级别：硕士

光纤通信因光纤的海量带宽,而具有电通信无可比拟的信号传输能力。光纤具有较高的信号质量、较远的传输距离、较大的信息容量,在计算机通信和电信领域有着广泛的应用,使得通信水平、交流方式、以及人们生活方式都发生了巨大的变化。光... 详细信息

光纤通信因光纤的海量带宽,而具有电通信无可比拟的信号传输能力。光纤具有较高的信号质量、较远的传输距离、较大的信息容量,在计算机通信和电信领域有着广泛的应用,使得通信水平、交流方式、以及人们生活方式都发生了巨大的变化。光纤通信和计算机技术一起形成了现代高新技术的两个重大支柱,很大程度上推动了社会的繁荣发展和人类的文明进步。码分多址(CDMA)技术由于其出色的技术优点,已经在移动通信和卫星通信领域有了较为广泛的应用,与其它多址技术相比,CDMA系统具有更大的系统容量,保密性更好,抗干扰能力更强。但是CDMA技术中的优势仍然没有充分的发挥出来,这是因为在移动通信和卫星通信中有着带宽限制。论文研究了光码分多址(OCDMA)系统各个关键部分的功能和结构,重点探讨了其中的编解码技术。重点工作如下：(1)研究了长周期光纤光栅的色散补偿问题,对色散补偿光纤在搭建的系统中进行仿真,得出仿真曲线,验证了色散补偿对恢复所传输信号的有效性。(2)对基于长周期光纤光栅的编解码器进行验证分析。首先介绍长周期光纤的基础知识,包括写入方法,分析方法等。其中分析方法采用的是时下流行的耦合模理论方法。通过对存在于长周期光栅中的模式进行分析,得出长周期光栅的交叉透射谱,从而设计编解码器的参数。(3)通过Optisystem仿真软件,对基于长周期光纤光栅的OCDMA编解码器进行系统仿真,得出并分析了仿真结果。

关键词：光码分多址编解码器光地址码长周期光纤光栅