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Haoqin Qingdan Decoction(蒿芩清胆汤)and Ribavirin Therapy Downregulate CD14 and Toll-Like Receptor 4 in Febrile Disease with Dampness-Heat Syndrome in A Mouse Model

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Chinese Journal of Integrative Medicine 2016年第10期22卷 768-773页

作者：骆欢欢张奉学吴薇王新华 Journal-Publishing Center Guangzhou University of Chinese MedicineGuangzhou(510006)China Department of Tropical Medicine.Guangzhou University of Chinese Medicine Guangzhou(510006)China Dean's Office Guangdong Provincial Hospital of Chinese MedicineGuangzhou(510405)China Headmaster's Office Guangzhou Medical UniversityGuangzhou(510182)China

Objective： To evaluate the effect of Chinese medicine Haoqin Qingdan Decoction （蒿芩清胆汤, HQD） for febrile disease dampness-heat syndrome （FDDHS）. Methods： Forty mice were divided into four groups, including normal control, FDDHS （induced by Radix et Rhizoma Rhei recipe and influenza virus A1 FM1 model）, HQD, and the ribavirin groups （10 in each）. The normal control and FDDHS groups were administered normal saline. HQD and the ribavirin groups were administered HQD and ribavirin intragastrically once daily at a dose of 64 g/（kg.d） and 0.07 g/（kg.d）, respectively for 7 days. Lethargy, rough hair, diarrhea, tongue color and sole color were evaluated for pathological changes in morphology. The tongue and lung tissues were collected for histology. The CD14 and toll-like receptor 4 （TLR4） expression levels were measured using real-time quantitative polymerase chain reaction. Results： More than 80% of the FDDHS mice showed hypokinesia and lethargy, and pathological changes associated with rough hair, diarrhea, tongue color and sole color. With advanced treatment for 7 days, the thick greasy tongue fur of the HQD and ribavirin groups were thinner than that of the FDDHS group （P〈0.05）, and it was the thinnest in the ribavirin group as compared with that in other groups （P〈0.05）. The CD14 and TLR4 expression levels in the lung tissues of HQD and ribavirin groups significantly delined compared with the model group （P〈0.05 or P〈0.01）. CD14 was down-regulated more remarkably in the HQD group compared with the ribavirin group （P〈0.05）, whereas the converse was true with TLR4 （P〈0.05）. Conclusions： We established a FDDHS mouse model showing systemic clinical symptoms. Both HQD and ribavirin can inhibit the expression of CD14 and TLR4 in FDDHS mice, while the effect of ribavirin might be much more violent. The expression changes of CD14 and TLR4 consistently refers to lipopolysaccharide, the commonly and hotly inducing factor in FDDHS.

关键词： CD14 toll-like receptor 4 febrile disease dampness-heat syndrome Haoqin Qingdan Decoction,ribavirin Chinese medicine

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蚓激酶同工酶降解乙型肝炎抗原并保护肝功能

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生物化学与生物物理进展 2022年第1期49卷 202-218页

作者：周园牟丽娴范士超王秀梅曹潇王学清张奉学赵静魏艳赫荣乔西南医科大学基础医学院泸州646000 中国科学院生物物理研究所北京100101 北京大学药学院分子药剂学与新释药系统北京市重点实验室北京100191 广州中医药大学基础医学院广州510099

目的蚓激酶同工酶(LKIs)作为肠溶胶囊的有效成分,用于治疗血栓性疾病已有30多年历史。近年来,LKIs在其他危重疾病中的研究时有报道。本文关注LKIs在乙型肝炎方面的作用。方法乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)... 详细信息

目的蚓激酶同工酶(LKIs)作为肠溶胶囊的有效成分,用于治疗血栓性疾病已有30多年历史。近年来,LKIs在其他危重疾病中的研究时有报道。本文关注LKIs在乙型肝炎方面的作用。方法乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)分别与不同浓度LKIs孵育,观察这些蛋白质的降解和估计肽链的切割位点。Hep G2.2.15细胞与LKIs孵育,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白质印迹(Western blotting)检测细胞分泌的HBsAg和HbeAg。LKIs灌胃Balb/c小鼠30天,采用ELISA和Western blotting检测其血清HBsAg和HBeAg,免疫组化染色检测肝组织中的HBcAg。采用苏木精-伊红染色分析乙肝病毒转基因小鼠肝组织的损害,并通过ELISA定量分析血清谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)。腹腔注射后,取大鼠血清和肝组织,测定其中的LKIs含量,从而观察LKIs的吸收。采用LKIs给龙岩麻鸭灌胃30天,通过PCR检测其血清HBV DNA。结果蚓激酶肠溶胶囊的有效成分是含有6种LKIs的复方蛋白酶药物,可以降解HBV编码的蛋白质。LKIs降解HBsAg的位点为K141/P142及R160/F161;HBc Ag为R142/E143;HBeAg为R122/E123。LKIs可显著抑制Hep G2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg。LKIs灌胃,HBV转基因小鼠血清HBsAg和HBeAg水平及肝组织的HBcAg水平均降低,提示病毒的组装和释放可能受到了抑制。在LKIs处理的转基因小鼠中,血清GPT和GOT水平降低,肝组织溶解数量减少,表明LKIs对小鼠肝细胞具有保护作用。LKIs灌胃龙岩麻鸭,血清中DHBV DNA水平明显下降,停药后出现反弹。结论LKIs通过降解HBs、HBc和HBe蛋白,可能干扰HBV的装配和释放,减少病毒在肝细胞之间的传递,从而对肝细胞起到保护作用。

关键词： HBeAg HBcAg HBsAg 蚓激酶同工酶乙肝病毒同工酶

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流感病毒介导肺损伤的免疫病理机制的研究进展

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中药新药与临床药理 2014年第2期25卷 236-240页

作者：邵敏明张奉学广州中医药大学热带医学研究所广东广州510405

流行性感冒是由流感病毒引起的一种急性上呼吸道传染病,可造成急性肺损伤及严重并发症。研究表明,过度免疫应答是引起病理损伤的主要原因之一。本文对甲型流感病毒感染过程中引发的病理性肺损伤的免疫学机制进行综述,为深入了解流感病... 详细信息

流行性感冒是由流感病毒引起的一种急性上呼吸道传染病,可造成急性肺损伤及严重并发症。研究表明,过度免疫应答是引起病理损伤的主要原因之一。本文对甲型流感病毒感染过程中引发的病理性肺损伤的免疫学机制进行综述,为深入了解流感病毒感染防御机制,寻求新的治疗靶点提供参考。

关键词：流行性感冒肺损伤细胞因子免疫应答

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乙型肝炎患者外周血单个核细胞IL-6 mRNA表达的定量分析

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中华肝脏病杂志 2000年第6期8卷 346-347页

作者：宋卫东张奉学李振纲中国科学技术大学生命科学院合肥230028 广州中医药大学热带医学研究所

目的：探讨IL-6参与乙型肝炎的免疫病理损伤和病毒清除的机理。方法：采用ELISA法检定了慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者血清IL-6含量，竞争性RT-PCR-ELISA法分析了CHB外周血单个核细胞的IL-6 mRNA表达水平。结果：CHB... 详细信息

目的：探讨IL-6参与乙型肝炎的免疫病理损伤和病毒清除的机理。方法：采用ELISA法检定了慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者血清IL-6含量，竞争性RT-PCR-ELISA法分析了CHB外周血单个核细胞的IL-6 mRNA表达水平。结果：CHB血清IL-6含量明显升高，竞争性RT-PCR结果表明对照组和患者组IL-6 mRNA靶片段表达频率分别为41.7%（5/12）和82.1%（23/28），定量ELISA表明5例对照组IL-6 mRNA 拷贝数在1000～10000之间，平均拷贝数的对数为3.65；而患者组均大于10000，平均拷贝数的对数为4.40。结论： IL-6在乙型肝炎发病中具有重要作用，而IL-6水平升高主要与患者外周血单个核细胞（peripheral blood monocyte cell，PBMC）IL-6 mRNA表达增强有关。

关键词：白细胞介素-6 mRNA 慢性乙型肝炎

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减毒麻疹病毒在体内外对HBV的影响

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中华实验和临床病毒学杂志 2001年第2期15卷 154-156页

作者：杨湛吴婉芬卢群馨蔡小莉雷春亮张奉学广州市传染病病院肝病研究所广州510060 广州中医药大学热带病研究所抗病毒研究室

目的　观察减毒麻疹病毒在体内外对乙型肝炎病毒 (HBV)的影响。方法　选择慢性乙型肝炎有病毒活跃复制的患者 ,予接种减毒麻疹病毒 ,每周 2次共 12周 ,随访至第 48周。定期观察T细胞CD4+ 、CD8+ 亚群、γ 干扰素、白细胞介素 2、HBeAg及... 详细信息

目的　观察减毒麻疹病毒在体内外对乙型肝炎病毒 (HBV)的影响。方法　选择慢性乙型肝炎有病毒活跃复制的患者 ,予接种减毒麻疹病毒 ,每周 2次共 12周 ,随访至第 48周。定期观察T细胞CD4+ 、CD8+ 亚群、γ 干扰素、白细胞介素 2、HBeAg及HBVDNA变化 ;在培养 2 2 15细胞的上清液中加入麻疹病毒 ,观察HBV标记物的变化。结果　治疗前CD4+ CD8+ 比值为 1 0 5± 0 19,48周时升至 1 47± 0 18,与治前相比 ,差异有显著性 (t=5 36 ,P <0 .0 1) ;在接种麻疹病毒 2周后 ,虽然白细胞介素 2和γ 干扰素总体平均水平较治疗前差异无显著性 ,但前者有 5例 (2 6 3 % )第 2周时升至治疗前 5倍 ,与对照组相比 ,差异有显著性 (χ2 =12 .0 7,P <0 0 0 5 ) ;治疗前HBeAg定量检测为 317 35±15 1 75 ,48周时 139 17± 16 6 6 6 ,与治疗前比较 ,差异有显著性 (t=2 16 ,P <0 0 0 5 )。治疗前HBVDNA阳性率为 10 0 % ,第 48周时为 6 3 16 % ,与治疗前比较 ,差异具有显著性 (χ2 =10 0 8,P <0 0 0 5 )。对照组上述指标前后比较 ,差异均无显著性。在培养 2 2 15细胞的上清液中加入麻疹病毒 ,HBsAg和HBeAg的分泌均受到抑制。结论　麻疹病毒与HBV重叠感染时 ,前者引致的机体细胞免疫状态改变可能干扰或抑制后者复制 ;

关键词：减毒麻诊病毒乙型肝炎病毒病毒干扰

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羌银解热汤对MDCK细胞感染流感病毒的预防作用

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时珍国医国药 2012年第8期23卷 1967-1968页

作者：李亮张奉学王新华广州中医药大学附属中山市中医医院广东中山528401 广州中医药大学热带医学研究所广东广州510405

目的观察羌银解热汤在体外对流感病毒的作用。方法先将MDCK细胞与羌银解热汤一起孵育,后加入病毒攻击,观察羌银解热汤对流感病毒的预防作用。先将羌银解热汤和流感病毒混合,再加入MDCK细胞,观察羌银解热汤对流感病毒的直接灭活作用。结... 详细信息

目的观察羌银解热汤在体外对流感病毒的作用。方法先将MDCK细胞与羌银解热汤一起孵育,后加入病毒攻击,观察羌银解热汤对流感病毒的预防作用。先将羌银解热汤和流感病毒混合,再加入MDCK细胞,观察羌银解热汤对流感病毒的直接灭活作用。结果在预防作用中,羌银解热汤在最大无毒浓度125g/L时,能够抑制流感病毒,血凝结果为阴性。在对流感病毒直接灭活实验中,羌银解热汤能够降低病毒滴度一个梯度。结论羌银解热汤在体外对流感病毒具有预防和直接灭活作用。

关键词：羌银解热汤流感病毒 MDCK细胞

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叶下珠复方联合干扰素治疗乙型肝炎40例

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陕西中医 1999年第4期20卷 146-147页

作者：黄玲张奉学李常青广州中医药大学热带医学研究所 510407

采用叶下珠复方(苦味叶下珠、三七等)联合干扰素治疗慢性乙型肝炎40例,并与干扰素治疗30例对比观察,结果显示叶下珠复方联合干扰素组治疗3个月后,临床症状改善明显,治疗总有效率为92.5％。疗效优于对照组(P0.05)。研究表明,叶下珠复方... 详细信息

采用叶下珠复方(苦味叶下珠、三七等)联合干扰素治疗慢性乙型肝炎40例,并与干扰素治疗30例对比观察,结果显示叶下珠复方联合干扰素组治疗3个月后,临床症状改善明显,治疗总有效率为92.5％。疗效优于对照组(P0.05)。研究表明,叶下珠复方与干扰素联合治疗慢性乙型肝炎,在改善临床症状及改善肝功能方面具有一定的协同作用。

关键词：乙型肝炎中西医结合治疗叶下珠复方胶囊

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清热透表方对流感病毒小鼠TLR7、MyD88、NF-κB、AP-1 mRNA及蛋白的表达

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时珍国医国药 2016年第2期27卷 322-324页

作者：齐玲邵敏明刘妮赵昉张奉学广州中医药大学热带医学研究所广东广州510405

目的观察解表清肺方对甲型流感病毒FM1感染小鼠肺组织细胞Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)、激活转录因子核因子-Kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、转录激活因子-1(transcription activator-1,AP-1)mRNA及蛋白表达影响。方法将C57小鼠分为6组,每组8只,将其随机分为正常组,模型组,阳性对照组(即利巴韦林组,剂量为0.5g·kg-1·d-1),解表清肺方高、中、低剂量组(即中药高、中、低剂量组,其剂量分别为8,4,2g·kg-1·d-1),将各组小鼠乙醚轻度麻醉,滴鼻感染15LD50流感病毒液,每鼠4滴,约0.05 ml,正常组以生理盐水滴鼻,于攻毒前一天开始灌胃给药,共给药5 d,每天1次,每次0.3 ml,正常组和模型组分别给予等溶剂的蒸馏水,于攻毒第4天处死小鼠。采用RT-PCR反应测定小鼠肺组织的TLR7、My D88、NF-κB、AP-1 mRNA的表达,采用western blot法测定测定肺组织TLR7、My D88、NF-κB、AP-1蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组TLR7、My D88、NF-κB、AP-1 mRNA及蛋白表达升高(P0.05)。结论清热透表方各剂量组可以通过以My D88依赖的TLR7为主的信号通路,发挥抗流感病毒的作用。

关键词：清肺透表方流感病毒 Toll7信号通路

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银黄清肺胶囊对鼻病毒作用的体外实验研究

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生物医学 2023年第3期13卷 309-317页

作者：屈金艳张奉学李艳波张婵娟赵立军文复权湖南安邦制药股份有限公司湖南长沙广州中医药大学热带医学研究所广东广州

目的:观察银黄清肺胶囊对鼻病毒导致细胞病变的抑制作用。方法:以利巴韦林为对照药,接种鼻病毒R14型于HEL细胞,采用细胞病变抑制法(CPE),观察银黄清肺胶囊体外对呼吸道鼻病毒作用。结果:银黄清肺胶囊在5.0 mg/mL和2.5 mg/mL浓度下均能... 详细信息

目的:观察银黄清肺胶囊对鼻病毒导致细胞病变的抑制作用。方法:以利巴韦林为对照药,接种鼻病毒R14型于HEL细胞,采用细胞病变抑制法(CPE),观察银黄清肺胶囊体外对呼吸道鼻病毒作用。结果:银黄清肺胶囊在5.0 mg/mL和2.5 mg/mL浓度下均能完全抑制鼻病毒R14型对HEL细胞的病变,对鼻病毒R14型无预防作用,其疗效为抑制作用 > 治疗作用 > 预防作用。病毒直接杀伤作用试验中发现,5.0 mg/mL与1.0 mg/mL的银黄清肺胶囊对病毒的滴度无明显抑制作用。结论:银黄清肺胶囊对鼻病毒有较好的抑制作用,以及一定的治疗作用,其对病毒的抑制作用不是通过对病毒直接杀伤作用实现的,可能与改变受体细胞膜通道或与病毒竞争性结合膜受体,从而影响病毒的入侵过程以发挥抑制病毒复制的作用有关。

关键词：银黄清肺胶囊鼻病毒体外

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白藜芦醇对多种呼吸道病毒作用体外实验研究

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中药材 2008年第9期31卷 1388-1390页

作者：关文达杨子峰刘妮秦笙张奉学朱宇同暨南大学抗体工程研究中心广东广州510632 广州医学院第一附属医院呼吸疾病国家重点实验室广东广州510120 澳门科技大学中医药学院澳门特别行政区广州中医药大学热带医学研究所广东广州510405

目的:观察白藜芦醇对多种呼吸道病毒导致细胞病变的抑制作用,为进一步探讨白藜芦醇的抗病毒机理积累基础。方法:分别接种甲1型流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒long株、腺病毒7型、鼻病毒R14型于MD-CK、A549、HEp-2、MRC-5细胞,采用细胞... 详细信息

目的:观察白藜芦醇对多种呼吸道病毒导致细胞病变的抑制作用,为进一步探讨白藜芦醇的抗病毒机理积累基础。方法:分别接种甲1型流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒long株、腺病毒7型、鼻病毒R14型于MD-CK、A549、HEp-2、MRC-5细胞,采用细胞病变抑制法(CPE),观察白藜芦醇体外对多种呼吸道病毒作用。结果:白藜芦醇在无毒浓度120μg/m l下,对腺病毒7型所致的细胞病变有抑制作用,而对甲1型流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒long株、鼻病毒R14型均未见抑制作用。结论:白藜芦醇具有体外抑制腺病毒7型作用,其对DNA病毒作用机理值得进一步探讨。

关键词：白藜芦醇呼吸道病毒体外

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