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siRNA靶向干扰IL-12基因对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响

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中国老年学杂志 2014年第11期34卷 3098-3100页

作者：翟旭张启财辽宁医学院附属第一医院神经外科辽宁锦州121001

目的观察siRNA干扰白细胞介素(IL)-12基因表达对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法将含有IL-12 siRNA的表达质粒稳定转染人脑胶质瘤细胞,应用western印迹杂交检测IL-12的表达变化,噻唑蓝(MTT)法及吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察脑胶... 详细信息

目的观察siRNA干扰白细胞介素(IL)-12基因表达对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法将含有IL-12 siRNA的表达质粒稳定转染人脑胶质瘤细胞,应用western印迹杂交检测IL-12的表达变化,噻唑蓝(MTT)法及吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察脑胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况。结果转染后,western印迹检测显示IL-12 siRNA组的IL-12表达较阴性对照组及空载体组显著降低(P<0.01),MTT法显示IL-12siRNA组中的细胞生长受抑明显,AO/EB染色显示IL-12 siRNA组的凋亡率较阴性对照组及空载体组高。结论 IL-12 siRNA靶向干扰了IL-12蛋白的表达,并对脑胶质瘤细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用。

关键词：脑胶质瘤细胞凋亡细胞增殖 IL-12基因 RNA干扰

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高中排球训练中软硬结合的训练思考

体育风尚 2020年第4期 46-47页

作者：张启财中山市桂山中学

排球是我们国家的骄傲,也是在国内高中教育阶段的体育教学和体育竞赛中已经普及的一个运动项目。随着体育运动越来越被重视,高中阶段排球项目的不断普及,为提高学生的排球技术水平,老师在训练的方法上也在不断的改进。本文通过对高中排... 详细信息

排球是我们国家的骄傲,也是在国内高中教育阶段的体育教学和体育竞赛中已经普及的一个运动项目。随着体育运动越来越被重视,高中阶段排球项目的不断普及,为提高学生的排球技术水平,老师在训练的方法上也在不断的改进。本文通过对高中排球训练中软硬结合训练方法的优势简单陈述后,采取了对照实验法进行了软硬结合训练方式的实验研究,并对该实验进行了简单的思考讨论。

关键词：排球训练软硬结合垫球

立德树人背景下高中生体育精神的培育路径研究

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当代体育科技 2020年第4期10卷 127-128页

作者：张启财广东省中山市桂山中学广东中山528463

本文运用文献资料、专家访谈等方法对立德树人与体育精神的逻辑关联进行研究分析,提出高中体育精神培育的路径。研究认为,立德树人的是回答高中生体育精神培育什么,为什么培育的顶层设计,通过深化课堂改革、发挥出教师指导者和引路人作... 详细信息

本文运用文献资料、专家访谈等方法对立德树人与体育精神的逻辑关联进行研究分析,提出高中体育精神培育的路径。研究认为,立德树人的是回答高中生体育精神培育什么,为什么培育的顶层设计,通过深化课堂改革、发挥出教师指导者和引路人作用、塑造出良好的校园文化及完善资助与帮扶制度等路径来培育高中生体育精神品格,为新时代社会主义中国培养出优秀的接班人。

关键词：立德树人高中生体育精神培育路径

Exendin-4对颅脑创伤大鼠认知功能及Nrf2信号通路的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2019年第1期28卷 33-37页

作者：张启财张赛王永阁赵然天津医科大学研究生院 300070 天津市神经创伤修复重点实验室武警特色医学中心300162 滦州市人民医院神经外科 063700

目的探索Exendin-4对大鼠颅脑创伤(traumatic brain injury,TBI)后痴呆的影响及相关机制。方法按随机数表法将30只SD大鼠分为3组:sham组(10只)、TBI组(10只)、Exendin-4组(10只),TBI组和Exendin-4组均采用皮质撞击致伤法构建TBI模型;TBI完成后1个月采用Morris水迷宫实验检测大鼠记忆功能;Western blot法检测海马组织β淀粉样蛋白(Aβ1-42)、tau蛋白、核细胞系因子2相关因子(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)表达。结果大鼠TBI术后1个月,TBI组与sham组相比逃避潜伏期(escape latency,EL) [(35.31±13.23)s,(8.79±9.71)s]延长,目标象限停留时间[(17.78±4.68)s,(26.35±5.83)s]缩短,穿越平台次数[(1.40±1.75)次,(3.50±1.45)次]减少;海马组织中Aβ1-42相对含量[(1.0140±0.0328),(0.4355±0.0152)]明显升高,tau蛋白相对含量[(0.8039±0.0251),(0.5170±0.0185)]明显升高,Nrf2表达水平[(0.3851±0.0188),(0.4901±0.0140)]明显下降,差异具有统计学意义(t=5.110,3.625,4.068,16.010,9.208,4.474,均P<0.01);Exendin-4组与TBI组相比EL[(23.74±10.95),(35.31±13.23)]缩短,目标象限停留时间[(24.28±5.37),(17.78±4.68)]缩短,穿越平台次数[(3.30±1.88),(1.40±1.75)]减少,海马组织中Aβ1-42相对含量[(0.8370±0.0188)(1.0140±0.0328)]明显降低,tau蛋白相对含量[(0.6693±0.0166 vs 0.8039±0.0251)]明显降低,Nrf2表达水平[(0.4738±0.0166),(0.3851±0.0188)]明显升高,差异具有统计学意义(t=2.052,2.866,5.196,4.693,3.480,3.538,均P<0.01)。结论Exendin-4可明显改善TBI大鼠的学习记忆功能,减少海马组织中Aβ1-42和tau的含量,提高Nrf2表达水平,改善TBI大鼠神经功能预后。

关键词：颅脑创伤 Exendin-4 认知功能障碍核细胞系因子2相关因子淀粉样蛋白β1-42

IL-12siRNA对脑胶质瘤细胞增殖与分化的影响

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齐齐哈尔医学院学报 2014年第1期35卷 73-74页

作者：翟旭张启财辽宁医学院附属第一医院神经外科锦州121001

目的观察IL-12 siRNA对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法将含有IL-12siRNA的表达质粒稳定转染人脑胶质瘤细胞,应用MTT法及AO/EB染色观察脑胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况。结果转染后,MTT法显示IL-12 siRNA组中的细胞生长受抑明显,AO/E... 详细信息

目的观察IL-12 siRNA对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法将含有IL-12siRNA的表达质粒稳定转染人脑胶质瘤细胞,应用MTT法及AO/EB染色观察脑胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况。结果转染后,MTT法显示IL-12 siRNA组中的细胞生长受抑明显,AO/EB染色显示IL-12siRNA组的凋亡率较阴性对照组及空载体组高。结论 IL-12siRNA靶向干扰了IL-12蛋白的表达,并对脑胶质瘤细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用。

关键词：脑胶质瘤细胞分化细胞增殖 IL-12 siRNA

丙烯醛在颅脑爆炸创伤诱导的帕金森病中的作用机制研究

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遵义医科大学学报 2020年第5期43卷 565-572页

作者：王利张启财李强涂悦武警特色医学中心门诊部天津300162 武警特色医学中心神经外科天津300162

目的探索丙烯醛(Acrolein,ACR)在爆炸颅脑创伤(Bomb traumatic brain injury,bTBI)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)中的作用机制。方法选取健康雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组(sham组8只)和bTBI组(2 d组8只和7 d组8只)。收集sham组和损伤后(1、2、3、5、7 d)大鼠尿液评估ACR代谢产物N-乙酰基-S-(3-羟基丙基)半胱氨酸(3-HPMA)变化。大鼠安乐死后取一侧大脑通过Western blot评估全脑、纹状体(Striatum,STR)前后区和黑质区(Substantia nigra,SN)的ACR、α突触核蛋白(a-synuclein,a-syn)、磷酸化与未磷酸化酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)水平变化,并通过免疫荧光法在另一侧脑半球检测α-syn与ACR的荧光共定位。结果与sham组相比,3-HPMA在损伤后开始明显增加(P<0.05);与sham相比,2 d和7 d组全脑、STR前区、STR后区和SN区中的ACR均显著增加(P<0.05);与sham相比2 d和7 d组全脑、STR前区、STR后区和SN区25 kDa的α-syn均显著增加(P<0.05),但除SN区19 kDa的α-syn增加外,其余各部位均显著降低(P<0.05),而且除SN区7 d组之外各部位25 kDa/19 kDaα-syn的比值在2、7 d均显著增加(P<0.05);与sham组相比,SN区unp-TH水平升高,pTH-Ser31水平降低(P<0.05),全脑和SN区的丝氨酸40位磷酸化酪氨酸羟化酶(pTH-Ser40)均降低,而在STR前、后区均升高(P<0.05);与sham组相比,2、7 d组STR和SN中α-syn蛋白和ACR的共定位增加。结论ACR可以作为TBI介导PD的病理过程中的关键分子,填补了TBI后PD发病机制的空白,为治疗TBI后PD开辟了新的途径。

关键词：颅脑损伤丙烯醛 α突触核蛋白帕金森氏病

HIF-1α对大鼠创伤后认知功能障碍的影响研究

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中风与神经疾病杂志 2019年第5期36卷 395-400页

作者：张启财张赛孙中磊天津医科大学天津300070 武警特色医学中心天津300162 枣庄矿业集团中心医院山东枣庄277800

目的提高低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的水平对大鼠颅脑创伤(Traumatic Brain Injury,TBI)后认知功能障碍的影响及其机制初步探索。方法将大鼠随机分为3组:sham组、TBI组、脯氨酸羟化酶(Prolyl Hydroxylase,PHD)抑制剂组,TBI组和PHD抑制剂组均采用皮质撞击致伤法构建模型;TBI完成3d后每组大鼠随机取10只,取海马组织,采用Westernblot法检测HIF-1α及其下游蛋白表达水平,荧光原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测神经细胞凋亡;1m后采用Morris水迷宫试验检测大鼠记忆功能,取海马组织,检测认知功能障碍相关蛋白。结果大鼠TBI术后3dTBI组与sham组相比HIF-1α、促血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)表达水平升高(P<0.01),差异具有统计学意义,PHD抑制剂组与TBI组相比HIF-1α、VEGF、EPO表达水平升高(P<0.01),差异具有统计学意义;大鼠TBI术后1mTBI组与sham组相比平均逃避潜伏期延长(P<0.01),目标象限停留时间与穿越平台次数减少(P<0.01),海马组织中淀粉样蛋白β1-42(β-amyloid peptide1-42,Aβ1-42)、tau含量明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;PHD抑制剂组与TBI组相比平均逃避潜伏期缩短(P<0.01),目标象限停留时间与穿越平台次数增加(P<0.01),海马组织中Aβ1-42、tau含量明显减少(P<0.01),差异具有统计学意义。结论提高HIF-1α的表达水平可明显改善大鼠神经功能预后,提高大鼠记忆水平,减少TBI大鼠的海马组织中Aβ1-42和tau的含量,减少大鼠TBI后认知功能障碍的发生,为TBI后认知功能障碍的治疗及预防提供一个新的靶点。

关键词：颅脑创伤低氧诱导因子-1α 认知功能障碍淀粉样蛋白β1-42 tau 促血管内皮生长因子促红细胞生成素

IL-33过表达通过促进髓鞘再生改善TBI小鼠认知功能

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遵义医科大学学报 2020年第6期43卷 692-696页

作者：张启财孙中磊张赛滦州市人民医院河北滦州063700 天津市神经创伤修复重点实验室暨武警特色医学中心天津300162 枣矿集团中心医院山东枣庄277100

目的探索白细胞介素-33(IL-33)过表达对小鼠颅脑创伤(TBI)后认知功能障碍作用及其可能机制。方法随机选取32只C57小鼠按随机数字表法分为4组(n=8):sham组、TBI组、编码空白基因载体组(NC组)和编码IL-33基因载体组(IL-33组),除sham组外,... 详细信息

目的探索白细胞介素-33(IL-33)过表达对小鼠颅脑创伤(TBI)后认知功能障碍作用及其可能机制。方法随机选取32只C57小鼠按随机数字表法分为4组(n=8):sham组、TBI组、编码空白基因载体组(NC组)和编码IL-33基因载体组(IL-33组),除sham组外,各组小鼠通过皮质撞击法构建TBI模型。TBI术后,sham组与TBI组立即注射等量人工脑脊液,NC组和IL-33组小鼠分别在海马区注射对应基因编码的表达载体,第4周时采用Morris水迷宫实验评估小鼠记忆功能,随后将所有小鼠安乐死,取脑组织进行实时定量PCR和Western blot法评估抗IL-33表达,Western blot和劳克坚牢蓝(LFB)染色评估髓鞘蛋白表达水平。结果与sham组相比,TBI组与NC组髓磷脂碱性蛋白(MBP)和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)水平降低,平均逃避潜伏期延长,LFB染色面积减少(P<0.05);与TBI组和NC组相比,IL-33组IL-33 mRNA和蛋白水平升高,平均逃避潜伏期缩短,MBP、MOG水平升高,LFB染色面积增加(P<0.05)。结论IL-33过表达可以促进TBI小鼠脑组织髓鞘再生,改善TBI小鼠认知功能。

关键词：颅脑创伤 IL-33 神经功能髓鞘再生

抗tau蛋白抗体基因疗法对慢性颅脑创伤的治疗作用研究

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中华神经创伤外科电子杂志 2020年第5期6卷 292-298页

作者：柴慈婧涂悦张启财侯伊玲武警特色医学中心体检中心天津300162 武警特色医学中心颅脑创伤与神经研究所天津300162

目的探究抗tau蛋白(pTau)基因腺病毒相关病毒(AAV)载体中枢神经系统(CNS)直接干预对慢性颅脑创伤(CTE)的治疗效果。方法随机选取24只C57小鼠按随机数字表法分为3组,正常对照组(sham组)、CTE 4周组和CTE 12周组,每组8只,采用皮质撞击法建... 详细信息

目的探究抗tau蛋白(pTau)基因腺病毒相关病毒(AAV)载体中枢神经系统(CNS)直接干预对慢性颅脑创伤(CTE)的治疗效果。方法随机选取24只C57小鼠按随机数字表法分为3组,正常对照组(sham组)、CTE 4周组和CTE 12周组,每组8只,采用皮质撞击法建立CTE小鼠动物模型,并在实验开始的第4、12周时取脑组织Western blot检测pTau蛋白相对水平评估该模型;将余56只小鼠按随机数字表法分为7组:sham组、noAAV组、AAVrh.10Null组和编码2B6、CisTau、IPN007、PHF1基因载体组,每组8只,除sham组外,各组小鼠通过皮质撞击法构建CTE模型。第3周时sham组与noAAV组注射等量人工脑脊液,其余各组小鼠分别在海马区注射对应基因编码的表达载体,第4周时所有小鼠安乐死,取脑组织进行免疫荧光和Western blot法评估抗pTau抗体表达,并评估对CTE小鼠的治疗效果。结果CTE小鼠模型4和12周组脑组织pTau明显高于sham组,差异均具有统计学意义(P<0.05);AAVrh.10 PHF1与AAVrh.10 IPN治疗组显著降低了小鼠脑组织中pTau的水平,且AAVrh.10 PHF1组优于AAVrh.10 IPN组(P=0.032)。结论抗pTau抗体基因的AAVrh.10病毒载体CNS直接治疗CTE有效,为治疗提供了新的方向。

关键词：慢性颅脑创伤中枢神经系统腺病毒相关病毒 tau蛋白