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马鹿Ghrelin cDNA全长序列的克隆及其在各器官内表达的研究

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马鹿Ghrelin cDNA全长序列的克隆及其在各器官内表达的研究

作者：张召议内蒙古农业大学

学位级别：硕士

Ghrelin是一种首先在胃部发现的、与生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue receptor,GHS-R)结合后发挥其功能性作用的激素。大量研究表明Ghrelin具有调控生长激素(Growth hormone,GH)、刺激食欲和调节能量平衡、影响胰岛... 详细信息

Ghrelin是一种首先在胃部发现的、与生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue receptor,GHS-R)结合后发挥其功能性作用的激素。大量研究表明Ghrelin具有调控生长激素(Growth hormone,GH)、刺激食欲和调节能量平衡、影响胰岛素分泌和调节糖代谢、抗炎免疫、增强心脏功能和保护消化道黏膜等多种生物学效应。马鹿是一种珍贵的反刍动物,目前极少有关于马鹿Ghrelin的研究报道。本研究为探知马鹿Ghrelin cDNA全长序列及Ghrelin在马鹿体内可能表达的器官,利用克隆、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和生物信息学分析等技术对其进行研究。结果显示:首次获得马鹿Ghrelin cDNA全长序列,共539 bp,包含46 bp的5′非翻译区(5′Untranslated Region,5′UTR)、351 bp开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)及128 bp的3′非翻译区(3′UTR)。该ORF编码116个氨基酸残基,包括23个氨基酸残基组成的信号肽,27个氨基酸残基组成的成熟肽及66个氨基酸残基组成的C-末端肽。生物信息学分析显示:马鹿Ghrelin基因编码产物存在跨膜区域和信号肽。RT-PCR和RT-qPCR结果显示:Ghrelin mRNA在马鹿的舌、食管、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、大脑、下丘脑、气管黏膜、肺、心肌、心内膜、肝、胰、脾、肾、输尿管、膀胱、输卵管、子宫、阴道、垂体、松果体、颌下腺、腮腺、甲状腺、淋巴结、肾上腺、卵巢和骨骼肌等器官中均有表达,且皱胃内的表达量明显高于其它器官。以上研究结果为进一步探究Ghrelin基因的相关生物信息学情况奠定理论基础,同时为研究Ghrelin在马鹿体内的生理功能提供有效依据。

关键词： Ghrelin 马鹿 cDNA 克隆反转录聚合酶链式反应实时荧光定量PCR 生物信息学分析

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鸡禽流感的病原学与综合防控

养殖与饲料 2021年第12期20卷 110-111页

作者：张召议内蒙古通辽市高林屯种畜繁育中心内蒙古通辽028000

鸡禽流感是由禽流感病毒引起的烈性人畜共患传染病,患病鸡常表现为精神萎靡、蛋鸡产蛋停止、呼吸系统、消化系统以及精神系统紊乱。该病的预防主要采取加强饲养管理,定期对鸡舍进行清扫和消毒,尽量减少从场外引入种鸡、种蛋等措施。接... 详细信息

鸡禽流感是由禽流感病毒引起的烈性人畜共患传染病,患病鸡常表现为精神萎靡、蛋鸡产蛋停止、呼吸系统、消化系统以及精神系统紊乱。该病的预防主要采取加强饲养管理,定期对鸡舍进行清扫和消毒,尽量减少从场外引入种鸡、种蛋等措施。接种疫苗可达到良好的免疫效果。

关键词：鸡禽流感病原学综合防控

肉牛改良现状及提高母牛冷配受胎率的技术措施

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中国畜禽种业 2021年第11期17卷 115-116页

作者：张召议内蒙古通辽市高林屯种畜繁育中心 028000

冷配技术是我国黄牛改良的重要技术手段,但目前仍有部分地区的冷配受胎率相对较低,基于此,本文介绍我国肉牛改良的现状,探讨提高母牛冷配受胎率的技术措施,希望能为肉牛改良工作奠定理论基础。

关键词：母牛冷配受胎率技术措施

全市乡村振兴建功人才暨嘎查村党组织书记培训班举行 001

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全市乡村振兴建功人才暨嘎查村党组织书记培训班举行

通辽日报

作者：张召议

本报讯今年，市委组织部以嘎查村“两委”换届为契机，紧盯新一届嘎查村“两委”班子特别是党组织书记带头人队伍建设，自3月29日起，与市农牧局联合举办“全市乡村振兴建功人才暨嘎查村党组织书记培训班”，利用一个半月的时间，对全... 详细信息

本报讯今年，市委组织部以嘎查村“两委”换届为契机，紧盯新一届嘎查村“两委”班子特别是党组织书记带头人队伍建设，自3月29日起，与市农牧局联合举办“全市乡村振兴建功人才暨嘎查村党组织书记培训班”，利用一个半月的时间，对全市优秀嘎查村党组织书记、主任和村务监督?

关键词：村党组织

来源： cnki报纸评论

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cnki报纸

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Ghrelin在马鹿器官组织中的表达

中国兽医杂志 2018年第4期54卷 29-31,34页

作者：张召议王彩云杨银凤内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为研究Ghrelin在马鹿体内可能表达的器官,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)方法检测马鹿的舌、食管、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、肝、胰... 详细信息

为研究Ghrelin在马鹿体内可能表达的器官,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)方法检测马鹿的舌、食管、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、肝、胰、颌下腺、腮腺、气管、肺、肾、输尿管、膀胱、卵巢、输卵管、子宫、阴道、大脑、下丘脑、垂体、松果体、甲状腺、肾上腺、心肌、心内膜、脾、淋巴结和骨骼肌中Ghrelin表达情况。结果显示,Ghrelin在皱胃内的表达量明显高于其他器官(P<0.05);胰、子宫、卵巢、十二指肠和食管次之,与其余30种器官的表达量相比差异也显著(P<0.05);其余器官内的表达量相对较少。结论:Ghrelin在所检测的36种器官内均有表达。

关键词： Ghrelin 马鹿反转录-聚合酶链式反应实时荧光定量PCR

酿酒酵母细胞壁诱导体外培养绵羊瘤胃上皮细胞表达SBD-1的研究

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畜牧兽医学报 2018年第5期49卷 927-934页

作者：田巧珍金鑫张曼张召议王云鹤杨银凤内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

旨在探究酿酒酵母细胞壁对原代培养绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(Sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响。本试验首先提取酿酒酵母细胞壁,并进行鉴定;再用酿酒酵母细胞壁(0、25、50、100、200、400μg·mL^(-1))刺激健康绵羊的原代瘤... 详细信息

旨在探究酿酒酵母细胞壁对原代培养绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(Sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响。本试验首先提取酿酒酵母细胞壁,并进行鉴定;再用酿酒酵母细胞壁(0、25、50、100、200、400μg·mL^(-1))刺激健康绵羊的原代瘤胃上皮细胞(0、2、4、8、12、24h)后,进行RT-qPCR和ELISA试验,确定诱导SBD-1表达的最佳浓度和时间。结果表明:1)本试验提取的酿酒酵母细胞壁成分较纯,可用于后续试验;2)体外培养绵羊瘤胃上皮细胞呈鹅卵石铺路状,符合试验要求;3)使用200μg·mL^(-1)的酿酒酵母细胞壁去刺激瘤胃上皮细胞12h,SBD-1mRNA和蛋白表达量最大,与其他组相比均差异极显著(P<0.001)。综上表明,酿酒酵母细胞壁能够促进绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,且酵母细胞壁最佳浓度和刺激时间分别为200μg·mL^(-1)和12h。

关键词：酿酒酵母细胞壁绵羊瘤胃上皮细胞 β-防御素-1

马鹿生长素Ghrelin全长cDNA的克隆及序列分析

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中国农业大学学报 2018年第10期23卷 88-95页

作者：张曼金鑫王云鹤魏方温婧怡张召议杨银凤内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018

为获得马鹿(Cervus elaphus)Ghrelin全长cDNA序列并进行序列比较和分析,本试验以马鹿皱胃黏膜组织内提取的总RNA为模板,通过RT-PCR、RACE和基因克隆等技术进行克隆。结果表明:获得长度为539bp的马鹿cDNA全序列(GenBank accession ***857... 详细信息

为获得马鹿(Cervus elaphus)Ghrelin全长cDNA序列并进行序列比较和分析,本试验以马鹿皱胃黏膜组织内提取的总RNA为模板,通过RT-PCR、RACE和基因克隆等技术进行克隆。结果表明:获得长度为539bp的马鹿cDNA全序列(GenBank accession ***857494),其中包括46bp的5′非编码区(5′UTR),351bp的开放阅读框(ORF),编码116个氨基酸残基的前原Ghrelin(preproghrelin),128bp的3′非编码区(3′UTR)和poly(A)14;Ghrelin的氨基酸同源性分析表明,马鹿Ghrelin cDNA全序列与驯鹿、梅花鹿、山羊、绵羊、牛等物种间的同源性较高,进化树分析与其亲缘关系远近一致。

关键词：马鹿 Ghrelin cDNA 克隆序列分析

牛结核病的病原、临床症状、诊断方法及综合防治措施

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中国动物保健 2021年第10期23卷 32-33页

作者：张召议包雨鑫王慧玲通辽市高林屯种畜繁育中心内蒙古通辽028000 通辽市农牧科学研究所内蒙古通辽028000 通辽市科尔沁区第七中学内蒙古通辽028000

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种人畜共患传染病,该病在世界各地均有发生,随着我国养牛业的持续发展,牛结核病的发病率也在逐步提高,不仅对养牛产业有着严重的影响,同时也危害人类健康安全。本文介绍了牛结核病的病原、临床症状、诊... 详细信息

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种人畜共患传染病,该病在世界各地均有发生,随着我国养牛业的持续发展,牛结核病的发病率也在逐步提高,不仅对养牛产业有着严重的影响,同时也危害人类健康安全。本文介绍了牛结核病的病原、临床症状、诊断方法以及综合防治措施,以供参考。

关键词：牛结核病病原临床症状综合防治措施

酿酒酵母细胞壁可通过TLR2受体调控绵羊瘤胃上皮细胞表达SBD-1

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中国兽医学报 2019年第2期39卷 296-302页

作者：田巧珍金鑫张曼张召议王云鹤杨银凤内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

旨在研究酿酒酵母细胞壁对体外培养绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响及其调控途径,为揭示酿酒酵母细胞壁对机体免疫的调控机制提供理论依据。本研究将不同质量浓度的酿酒酵母细胞壁提取物(0,25,50,1... 详细信息

旨在研究酿酒酵母细胞壁对体外培养绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响及其调控途径,为揭示酿酒酵母细胞壁对机体免疫的调控机制提供理论依据。本研究将不同质量浓度的酿酒酵母细胞壁提取物(0,25,50,100,200,400mg/L)作用于绵羊瘤胃上皮细胞不同时间(0,2,4,8,12,24h)后,检测上皮细胞SBD-1和Toll样受体-2(TLR2)mRNA表达水平,并进一步通过TLR2阻断试验来证实TLR2是否介导酵母细胞壁促进SBD-1表达。结果表明,不同浓度的酵母细胞壁刺激瘤胃上皮细胞时,随着细胞壁浓度的增加SBD-1mRNA表达量呈先升高后降低的趋势,且酿酒酵母细胞壁质量浓度为200mg/L刺激12h时,SBD-1 mRNA表达量达到峰值,与对照组和其他时间组相比差异显著(P<0.05);用质量浓度为200mg/L的酿酒酵母细胞壁刺激绵羊瘤胃上皮细胞不同时间,同样在12h时,TLR2的mRNA表达量达到最大;阻断试验表明TLR2可介导SBD-1的表达。本研究结果表明酿酒酵母细胞壁可促进绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,且质量浓度200mg/L时,刺激瘤胃上皮细胞12h时SBD-1的表达量达到最高,而TLR2参与该调控过程。

关键词：酿酒酵母细胞壁 β-防御素-1 实时荧光定量PCR Toll样受体-2