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褶纹冠蚌GSK-3β/β-Trcp通过调控Nrf2参与抗氧化应激的机制研究

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褶纹冠蚌GSK-3β/β-Trcp通过调控Nrf2参与抗氧化应激的机制研究

作者：胡怡乐南昌大学

学位级别：硕士

褶纹冠蚌（Cristaria plicata）是我国淡水养殖贝类之一,因养殖过程中受病原微生物的感染给养殖带来巨大损失。因此,探究褶纹冠蚌的免疫功能有着重要意义。核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）,属... 详细信息

褶纹冠蚌（Cristaria plicata）是我国淡水养殖贝类之一,因养殖过程中受病原微生物的感染给养殖带来巨大损失。因此,探究褶纹冠蚌的免疫功能有着重要意义。核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）,属于碱性亮氨酸拉链（basic leucine zipper,bZIP）转录因子中的Cap'n'Collar（CNC）亚族,是调节氧化应激和亲电刺激的关键转录因子,不仅有抗氧化作用,还能降低炎症反应,刺激细胞自噬以及提高线粒体功能。GSK-3β是糖原合成激酶3的一个异构体,属于高度保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,可抑制炎症、调节免疫功能。β转导重复蛋白（β-transducing-repeat-containing,β-Trcp）属于F-box蛋白家族,参与细胞周期进程、免疫和炎症等调控机制。Nrf2的信号通路是一个既保守又复杂的反应,其经典的氧化还原依赖方式是在正常的生理条件下Keap1与Nrf2结合,将Nrf2稳定于细胞质,中但当发生氧化应激后两者发生解离,Nrf2被激活转入核中激活抗氧化基因的表达,激活细胞保护作用。而非经典的氧化还原不依赖的方式是当有机体受到应激源的刺激或Keap1的活性被抑制时,GSK-3β/β-Trcp会成为调控Nrf2的核心机制。然而GSK-3β/β-Trcp是否通过调控Nrf2参与褶纹冠蚌的免疫应激还未见报道。因此本文以褶纹冠蚌为对象,对GSK-3β和β-Trcp进行了研究。利用RACE技术和RT-PCR技术克隆获得褶纹冠蚌CpGSK-3β、Cpβ-Trcp的c DNA全长序列,分别为2152 bp和2998 bp。CpGSK-3β的ORF为1236 bp,具有一个保守性较高的S＿TKc域。Cpβ-Trcp的ORF为2391 bp,含有一个Fbox域及7个WD40域。用在线软件分析CpGSK-3β分子量为46.5 KDa,理论等电点为8.88;Cpβ-Trcp分子量为89.6 KDa,理论等电点为8.41。序列比对结果显示,CpGSK-3β与三角帆蚌的一致性最高为99%,Cpβ-Trcp与太平洋牡蛎的一致性最高为67%。CpGSK-3β和Cpβ-Trcp在褶纹冠蚌的肝胰腺、鳃、肾、闭壳肌、外套膜、足、性腺、血细胞中都有分布,在肝胰腺和肾中表达量相对较高。LPS、PGN、Poly I:C以及过氧化氢刺激后CpGSK-3β和Cpβ-Trcp在肝胰腺、鳃和肾脏中的表达上调。合成ds CpGSK-3β和ds Cpβ-Trcp进行干扰实验结果显示CpNrf2和CpNQO1的表达量均有所上调。这些结果表明CpGSK-3β、Cpβ-Trcp有参与褶纹冠蚌免疫应激过程。原核表达得到CpGSK-3β、Cpβ-Trcp和CpNrf2-Neh6融合蛋白以及构建酵母双杂质粒,诱导表达后得到的His-CpGSK-3β和His-Cpβ-Trcp均在包涵体中,GST-CpNrf2-Neh6在上清和沉淀中均有表达,纯化后得到0.531 g/L的CpGSK-3β和0.495 g/L的Cpβ-Trcp及2.5 g/L CpNrf2-Neh6的重组蛋白。通过酵母双杂及GST-Pulldown实验表明CpNrf2-Neh6分别与CpGSK-3β和Cpβ-Trcp均能体外结合。染色结果显示CpGSK-3β对CpNrf2-Neh6有体外磷酸化作用。亚细胞定位显示CpGSK-3β主要位于细胞质中,Cpβ-Trcp在核质中均有表达。通过纸片扩散结果表明CpGSK-3β和Cpβ-Trcp对H2O2具有拮抗作用。上述结果表明GSK-3β和β-Trcp可能是通过Nrf2参与褶纹冠蚌的氧化应激过程。

关键词： GSK-3β β-Trcp Nrf2 过氧化氢氧化应激

基于磁流变阻尼器的半主动座椅悬架减振策略研究

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基于磁流变阻尼器的半主动座椅悬架减振策略研究

作者：乐晶晶盐城工学院

学位级别：硕士

随着工业技术和经济的快速发展,汽车越来越普及,人们的交通出行结构已经发生了根本性变化,汽车出行已然成为交通常态,车辆的乘坐舒适性已成为人们选购汽车的重要考虑因素之一。磁流变阻尼器作为一种先进的半主动减振器,它可以在磁场的... 详细信息

随着工业技术和经济的快速发展,汽车越来越普及,人们的交通出行结构已经发生了根本性变化,汽车出行已然成为交通常态,车辆的乘坐舒适性已成为人们选购汽车的重要考虑因素之一。磁流变阻尼器作为一种先进的半主动减振器,它可以在磁场的作用下改变磁流变液的粘度,从而实现对汽车等结构振动的控制和减振。为了降低车辆振动,提高驾乘人员的乘坐舒适性,本文提出了模糊控制、变论域模糊控制、粒子群优化PID三种减振策略,对磁流变阻尼半主动座椅悬架进行减振效果仿真测试。本文研究工作总结如下:⑴磁流变阻尼器特性试验及力学模型的建立。参考相关文献,搭建磁流变阻尼器实验台架,开展力学特性试验。基于试验得到的关于力、位移等相关数据,使用非线性最小二乘法对修正Dahl模型进行参数辨识,根据辨识结果搭建精确的磁流变阻尼器模型,比较试验结果与仿真结果,验证模型的可行性。接着采用自适应模糊神经推理系统建立了阻尼器的逆动力学模型,为后续开展半主动座椅悬架进行减振策略仿真建立了基础。⑵路面模型及汽车座椅悬架的模型建立。结合实际行驶路况,在Matlab/Simulink软件中建立了C级随机路面及阶跃路面,阐述了驾乘人员乘坐舒适性指标、单自由度、二自由度及多自由度“人-座椅”模型。结合本文研究目标,最终选取单自由度“人-座椅”模型作为研究对象,并搭建了三自由度被动座机悬架及半主动座椅悬架仿真模型,且分别进行了动力学分析。绘制了被动座椅悬架在随机路面及阶跃路面激励下座椅加速度及座椅动行程的仿真响应曲线图。⑶半主动座椅悬架系统减振策略研究及仿真分析。本文介绍了模糊逻辑控制、变论域模糊控制、PID控制及PSO(particle swarm optimization)智能算法相关理论知识。设计了模糊控制,由于传统模糊控制的论域不可调,因此在传统的模糊控制基础上设计了变论域模糊控制策略,并在传统PID控制方法基础上结合粒子群智能寻优算法(PSO)提出了PSO-PID控制方法。模糊控制及变论域模糊控制策略中均选取座椅实际垂直位移作为控制参数。接着在C级随机路面及阶跃路面输入下,联合三自由度半主动座椅悬架及磁流变阻尼器修正Dahl正逆模型对三种控制方法进行仿真验证,选择座椅悬架加速度及动行程作为评价指标与被动座椅悬架四种控制方法进行对比分析。结果表明三种减振控制策略都可以提高座椅悬架的平顺性,提升驾乘人员的乘坐舒适性。在随机路面下,PSO-PID减振策略下,座椅悬架动行程的均方根值改善率达到71%,但座椅加速度均方根值改善率较低为11%,变论域模糊控制的综合减振效果更好;阶跃路面输入下,PSO-PID控制策略的减振效果最好,座椅悬架动行程的峰值改善率达到78%。变论域模糊控制及PSO-PID控制策略减振效果均优于模糊控制。

关键词：磁流变阻尼器座椅悬架模糊控制变论域模糊控制 PSO-PID控制

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小学高学段语文习作单元教学现状及优化策略

小学高学段语文习作单元教学现状及优化策略

作者：任天乐曲阜师范大学

学位级别：硕士

习作教学一直受“不想写”“不会写”“不敢写”三大难题困扰。统编版小学语文教材为了弥补传统习作教学的不足,专门编排了以习作能力培养为主线的习作单元,形成了“要素统领,以读促写”的小学习作单元体系。加之,新颁布的《义务教育语... 详细信息

习作教学一直受“不想写”“不会写”“不敢写”三大难题困扰。统编版小学语文教材为了弥补传统习作教学的不足,专门编排了以习作能力培养为主线的习作单元,形成了“要素统领,以读促写”的小学习作单元体系。加之,新颁布的《义务教育语文课程标准(2022年版)》对小学生的习作能力提出更高要求,研究习作单元教学具有一定价值。小学高学段正处于中学段和初中阶段的过渡时期,具有重要的奠基和衔接作用。但由于统编教材投入时间尚短,一线教师、学者对习作单元教学的相关理论探讨和实践探索还有所欠缺。鉴于此,本研究尝试探寻小学高学段语文习作单元教学存在问题,并剖析深层次原因,从而提出更具针对性的优化策略。本研究在对统编教材、课程标准以及相关文献进行系统梳理和文本分析的基础上,明确小学高学段语文习作单元教学依据,包括习作单元编排、课标规定以及学生习作心理能力,并以此作为现状调查的设计依据,围绕教师对习作单元认知、教学目标定位、教学内容组织、教学实施以及教学评改五个维度,采用问卷调查法、访谈法和课堂观察法三种方法开展调查研究。通过资料整理和数据分析发现,大多数教师肯定了习作单元的教学价值,能够认识到课程标准对习作单元教学的导向作用,但在教学实践过程中仍然存在以下问题:第一,单元要素目标不突出,目标定位偏离课标;第二,内容组织灵活性不足,教学资源缺乏整合;第三,课堂活动交互性欠缺,读写训练存在障碍;第四,评价工具针对性不强,评改标准缺乏规范。针对上述问题,本研究主要从学校管理、教师教学、学生学习三个层面进行原因分析:从学校层面来看,学校管理和制度建设有待完善;从教师层面来看,教师习作单元教学理念和能力制约;从学生层面来看,高学段学生习作学习面临挑战。基于此,本研究结合具体教学案例对应三方责任主体提出优化策略,力图改善小学高学段语文习作单元教学现状。首先,健全学校管理机制,营造开放教研环境。其中,以教师需求为导向,教师培训提质增效;规范习作评改体系,体现多元评价方式;拓宽家校合作渠道,鼓励家长积极参与。其次,教师把握单元要素,整体规划教学路径。具体来说,更新教师教学理念,拓展专业认知地图;深入领悟教材编排,精准定位教学目标;立足习作单元整体,灵活处理板块内容;搭建支架巧设情境,推进读写实践活动。最后,培养良好行为习惯,实现习作能力进阶。一是考虑学生个体差异,分层设计习作作业;二是端正学生学习态度,激发习作内在动机。

关键词：习作单元小学高学段存在问题优化策略

双层配体金纳米团簇用于声动力治疗口腔颌面部伤口感染

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双层配体金纳米团簇用于声动力治疗口腔颌面部伤口感染

作者：洪乐吉林大学

学位级别：硕士

研究背景:口腔颌面部伤口感染是口腔外科的常见病及多发病,暴露的创口易被细菌入侵并定植[1]。同时颌面部血管密集,血运丰富,重要的神经肌肉集中分布,细菌释放的毒力因子会随血运较快传播,容易引起重要器官的间接损伤,甚至威胁生命。最... 详细信息

研究背景:口腔颌面部伤口感染是口腔外科的常见病及多发病,暴露的创口易被细菌入侵并定植[1]。同时颌面部血管密集,血运丰富,重要的神经肌肉集中分布,细菌释放的毒力因子会随血运较快传播,容易引起重要器官的间接损伤,甚至威胁生命。最重要的是,口腔颌面部的损伤不仅会影响人体正常生理功能,还可能会因为在创口处留下疤痕而影响患者的美观,对患者的正常生活和心理健康造成长期影响[2]。目前,针对颌面部感染主要的治疗手段是清创后配合抗生素治疗[3]。然而,面对抗生素耐药性的问题,有效的新型抗生素种类急剧下降[4]。因此,新的抗菌手段亟待被开发[4]。近年来,声动力治疗（sonodynamic therapy,SDT）作为一种非侵入性,具有深层组织穿透性的无创治疗方法被广泛关注[5]。此外,它不会导致抗生素耐药性的出现。然而,既能够高效产生活性氧且具有高药物利用率的声敏剂还未被开发,这阻碍了SDT的临床应用。实验目的:通过配体工程策略将精氨酸（arginine,Arg）作为第二层配体接枝到由6-氮杂-2-硫代胸腺嘧啶（6-Aza-2-thiothymine,ATT）保护的金纳米团簇（Arg-ATT-Au NCs）表面,使其能够在超声（ultrasound,US）的激发下产生抗菌效应。通过体内抗菌活性实验和体外创口感染动物模型实验,研究Arg-ATT-Au NCs在口腔颌面部创口感染中的抗菌及促进组织修复的效果,并对金纳米团簇（Au NCs）抗菌的机制进行深入探索。实验方法:1.采用改良的一锅法合成ATT-Au NCs,再加入精氨酸溶液,通过水浴加热法合成Arg-ATT-Au NCs。2.通过紫外-可见光吸收光谱（Ultraviolet-visible absorption spectroscopy,UV-vis）,光致发光光谱（Photoluminescence spectroscopy,PL）,X射线光电子能谱（X-ray photoelectron spectroscopy,XPS）,核磁共振氢谱（Nuclear magnetic resonance hydrogen spectroscopy,1H-NMR）,傅里叶变换红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）,时间分辨发光光谱（Time-resolved luminescence spectroscopy,TRPL）,透射电子显微镜（Transmission electron microscopy,TEM）等手段对Au NCs进行表征,并测试了Au NCs的SDT效果。3.通过体外实验（CCK-8实验）和体内实验(小鼠的心肝脾等重要脏器组织的苏木精-伊红染色（Hematoxylin-eosin staining,H&E）、小鼠的肝功和肾功的相关的生化指标检测),评价两种Au NCs的生物安全性。4.通过细菌的标准平板计数法（colony forming units,CFU）实验和扫描电子显微镜（Scanning electron microscopy,SEM）等实验探究了Arg-ATT-Au NCs对致病性大肠杆菌（Escherichia coli,***）和致病性金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,***）的杀菌能力。5.通过全转录组RNA测序来评估特定的m RNA水平的反应,探究Arg-ATT-Au NCs在m RNA水平杀伤细菌的生物学机制。6.建立小鼠背部伤口感染模型,采用组织切片H&E染色、天狼星红染、免疫组织化学染色评估了Arg-ATT-Au NCs在体内抗菌能力及治疗创口感染的效果。结果:1.在40℃水浴中合成的双层配体的Arg-ATT-Au NCs与单层配体的ATT-Au NCs有相同的核心结构,最外层的Arg与ATT之间通过胍基形成氢键,保持了整体的结构稳定性。这种配体工程实现了对ATT-Au NCs的非辐射弛豫的抑制,使得Arg-ATT-Au NCs在US的激发下,激发态电子损耗小,Arg-ATT-Au NCs产生ROS的能力较修饰前的ATT-Au NCs的ROS产率提高一倍。2.在US的激发下,Arg-ATT-Au NCs具有良好的声动力活性。3.通过体内和体外毒性试验,证明了Arg-ATT-Au NCs和ATT-Au NCs具有低细胞毒性,且能在体内正常代谢不影响各个重要脏器的健康,有良好的生物安全。4.根据体外的抗菌活性实验,Arg-ATT-Au NCs在US的激发下可以使细菌生物平板计数下降约四个数量级,并且对代表性的致病菌***与***的杀菌效果良好。5.全转录组RNA测序结果显示

关键词：配体工程金纳米团簇声动力治疗抗菌转录组分析口腔颌面部伤口感染

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基于点云特征学习的3D目标检测方法研究

基于点云特征学习的3D目标检测方法研究

作者：刘世乐烟台大学

学位级别：硕士

3D目标检测是计算机视觉领域中一项具有挑战性的问题,可以通过多种方法来解决,包括基于单模态和基于多模态的3D目标检测方法。单模态方法可以分为基于单目相机、基于双目相机、基于激光雷达的方法。尽管单目相机方法和双目相机方法可以... 详细信息

3D目标检测是计算机视觉领域中一项具有挑战性的问题,可以通过多种方法来解决,包括基于单模态和基于多模态的3D目标检测方法。单模态方法可以分为基于单目相机、基于双目相机、基于激光雷达的方法。尽管单目相机方法和双目相机方法可以提供深度信息,但它们的准确性有限,而激光雷达方法可以提供可靠的深度信息,因此激光雷达方法吸引了大量研究人员和企业的关注。通过将点云划分为不同的数据类型,激光雷达方法可以分为基于原始点云的、基于网格点云的方法。基于原始点云的3D目标检测能够直接从点云数据中提取物体的几何特征,从而更好地保留物体的形状和结构信息。然而,由于点云数据本身的复杂性,对原始点云进行特征提取需要处理大量的数据,并进行复杂的计算和内存操作,这增加了计算成本和时间。为了降低运算成本,一些方法将稀疏和不规则的点云离散成3D体素或2D支柱的规则网格点云,网格点云数据在内存中以有序的方式存储,有利于减少随机内存访问和提高数据运算效率。然而,网格化过程将不可避免地带来信息丢失,信息丢失程度与网格化的分辨率紧密相关。受激光雷达点云的稀疏性、无序性和非均匀分布的限制,在物体几何结构相似、距离较近、被遮挡或截断的情况下,仅使用激光雷达传感器识别物体仍然是一项具有挑战性的任务。为了解决这些局限性,研究人员越来越多地关注基于多模态的3D目标检测,例如将相机图像和激光雷达点云相结合,以提高3D目标检测的精度。本论文将重点研究基于激光雷达点云的单模态方法与基于激光雷达点云和单目相机图像的多模态的3D目标检测。针对这两种方法中的一些问题,本论文基于深度学习技术,提升3D目标检测的精度。在第三章中,本论文提出了一种基于多重注意力和尺度感知的实时支柱3D目标检测器,检测速度可以达到每秒30帧。在第四章中,本论文探讨了当前基于激光雷达点云的单模态方法的不足,针对这些缺点,向激光雷达点云中引入了单目相机图像,提出了一种自适应学习点云和图像多样性特征融合网络,以实现更好的3D目标检测性能。具体工作如下:(1)提出了一种基于多重注意力和尺度感知的实时支柱3D目标检测器。提出的方法由一个强大的编码器网络组成,用于有效的支柱特征学习。具体来说,在第三章中,提出了多重注意力模块,用于支柱特征的编码,该模块利用外部注意力和一种类似基于挤压和激励的注意力策略来增强支柱的编码能力。此外,第三章还提出了一种注意力双向特征金字塔网络,多重注意力模块考虑了点云的稀疏和不规则模式,提取尺度感知特征。提出的方法是每秒30帧的实时3D目标检测器。(2)提出了一种新的两阶段多传感器深度神经网络,称为自适应学习点云和图像多样性特征融合网络。该方法通过结合低级图像特征和高级点云特征,利用细粒度图像信息对点云信息进行补充。具体来说,在第四章中,设计了一个细粒度图像特征提取模块,从图像中学习细粒度信息,而不是依赖于具有粗粒度信息的深层特征。此外,第四章还设计了一个多样性特征融合模块,将低级图像特征转换为逐点图像特征,并通过注意机制探索它们的互补特征,确保细粒度图像特征与点云特征的有效结合。

关键词： 3D目标检测深度学习激光雷达支柱点云注意力机制多模态融合

基于隐含狄利克雷分配和机器学习的英语作文自动评分研究

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基于隐含狄利克雷分配和机器学习的英语作文自动评分研究

作者：林美乐上海师范大学

学位级别：硕士

从CPTPP数据跨境流动规则析我国相关制度的完善

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从CPTPP数据跨境流动规则析我国相关制度的完善

作者：许佳乐江西财经大学

学位级别：硕士

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基于RPA的上海商米财务共享中心优化研究

基于RPA的上海商米财务共享中心优化研究

作者：安佳乐上海师范大学

学位级别：硕士

大肠杆菌葡萄糖木糖共利用产D-乳酸菌株的构建

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大肠杆菌葡萄糖木糖共利用产D-乳酸菌株的构建

作者：乔佳乐长春工业大学

学位级别：硕士

D-乳酸,分子式为CH3CH(OH)COOH,是一种α-羟基酸,含手性碳,广泛用于医药农业和化工领域。以其为原料的D-聚乳酸添加到L-聚乳酸中,能够提升生物可降解材料的热稳定性,市场对D-乳酸的需求日益增加。以生物质资源木质纤维素为碳源生产D-乳... 详细信息

D-乳酸,分子式为CH3CH(OH)COOH,是一种α-羟基酸,含手性碳,广泛用于医药农业和化工领域。以其为原料的D-聚乳酸添加到L-聚乳酸中,能够提升生物可降解材料的热稳定性,市场对D-乳酸的需求日益增加。以生物质资源木质纤维素为碳源生产D-乳酸可以有效解决D-乳酸生物合成成本高的问题。但微生物在利用木质纤维素水解液(主要成分为葡萄糖和木糖)发酵时,存在葡萄糖代谢物阻遏效应,木糖利用受到葡萄糖的抑制。本实验室前期,通过优化葡萄糖代谢途径和挖掘新的木糖转运蛋白,获得了能同步利用葡萄糖和木糖的大肠杆菌工程菌株Rec1.0。本研究以Rec1.0为出发菌,设计并创建了能同步利用葡萄糖和木糖的产D-乳酸工程菌,并对产D-乳酸工程菌株高效利用葡萄糖和木糖的能力进行了分子机制解析。主要研究结果如下:(1)设计并创建D-乳酸合成途径:利用还原力平衡和能量供给原则,设计了厌氧条件下以葡萄糖和木糖为底物合成D-乳酸的可能性,能够实现1 mol葡萄糖+1.2 m ol木糖=4 mol乳酸+4 ATP,碳摩尔转化率为1 mol/mol;利用CRISPR/Cas9基因编辑技术系统,敲除了mgs A、pfl B、frd及adh E基因,阻断了L-乳酸、甲酸、丁二酸和乙醇副产物的合成途径,获得工程菌株QJL005;厌氧发酵显示,QJL005的产物主要为D-乳酸,96h产量达到32.7 g/L,且无其他副产物。(2)适应性进化显示葡萄糖激酶Gl K的高活性提高了葡萄糖消耗速率:尽管Q JL005的发酵主要产物为D-乳酸,但其生长速度及葡萄糖消耗速率明显降低,相比R ec1.0分别降低了8.54倍,8.96倍;为提高葡萄糖消耗速率,对QJL005以葡萄糖为唯一碳源进行适应性进化,经过20次转接,获得中间菌株QJL008,其葡萄糖消耗速率达到0.75 g/g DCW·h,是QJL005的8.33倍;重测序分析显示:(a)葡萄糖激酶基因glk的启动子附近的SD序列从AGGAAA突变AGGAGG,这种改变可能促进了glk基因的翻译;(b)glk基因的编码区发生两个突变,分别为A142V和R188H,利用PSS M、蛋白质结构模拟和分子对接分析,显示这两个突变位点具有分子进化优势,促进了疏水区域对葡萄糖分析的结合;转录组分析显示:glk基因表达水平提高了51.23倍;酶活分析显示:Gl K活性增加7.3倍。这些结果说明Gl K活性的提高是QJL008葡萄糖消耗速率提高的分子机制。(3)CRP G141D突变提高了木糖代谢途径关键基因的表达:适应性进菌株QJL008虽然葡萄糖消耗速率到0.75 g/g DCW·h,但木糖消耗速率只有0.41 g/g DCW·h。为此,对QJL008进行了葡萄糖和木糖双碳源适应性驯化,经过20次转接,获得工程菌株QJL010,其葡萄糖和木糖的消耗速率分别达到0.75和0.82 g/g DCW·h;重测序分析显示,crp基因(编码cyclic AMP receptor protein)发生单突变G141D,文献报道,CRP G141D突变,能够激活木糖代谢途径相关基因的转录;转录组分析显示了木糖代谢途径相关基因xyl R、xyl E和gal ABC*的表达水平分别提高了16.6倍、402.1倍和4.46倍;反向代谢工程及q PCR进一步证明了CRP G141D突变激活了xyl R、xyl E和gal ABC*基因的表达,证明了CRP G141D突变提高了木糖代谢途径关键基因的表达,有效提高了QJL010工程菌株的木糖消耗速率。综上所述,通过本论文的研究,成功构建了一株可以高效共利用葡萄糖和木糖产D-乳酸的工程菌株QJL010,D-乳酸产量96 h达到87.5 g/L,碳摩尔转化率为0.99 m ol/mol。本研究的结果为利用大肠杆菌平台菌株从木质纤维素生物质中生产高值化学品提供了有价值的借鉴。

关键词：大肠杆菌葡萄糖木糖 D-乳酸适应性进化