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中国兽医科技 1989年第8期19卷 43-44页

作者：张兹钧吴明杰张子春朱万光农业部动物检疫所

Joseph,***等(1987)首先建立并应用快速碱转移RNA技术对蓝舌病毒(BTV)核酸进行了研究,证明该技术转移效率高,操作简单,不需要昂贵仪器,并且发现不同类型的膜对于实验的重复性影响极大。我们根据Joseph,

关键词：蓝舌病毒核酸碱印渍转移 RNA技术

用牛鼻甲细胞生产牛病毒性腹泻病毒可溶性抗原的研究

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中国动物检疫 1985年 7-11页

作者：张兹钧张燕霞农牧渔业部动物检疫所

本文介绍了牛鼻甲细胞的制备方法,并比较了用该细胞来生产牛病毒性腹泻病毒可溶性抗原的各种条件。建议推广的流程是:用橡皮刮子将病变细胞刮下,经离心将病变细胞与维持液分开,再用无花果蛋白酶消化法制备细胞内可溶性抗原,用超过滤法... 详细信息

本文介绍了牛鼻甲细胞的制备方法,并比较了用该细胞来生产牛病毒性腹泻病毒可溶性抗原的各种条件。建议推广的流程是:用橡皮刮子将病变细胞刮下,经离心将病变细胞与维持液分开,再用无花果蛋白酶消化法制备细胞内可溶性抗原,用超过滤法从维持液中制备细胞外可溶性抗原。然后用棋盘扩散法测定抗原的最适浓度。也可用硫酸铵或聚乙二醇来沉淀可溶性抗原,它们的最适浓度分别为40%和7%。

关键词：细胞制备方法可溶性抗原鼻甲牛病毒性腹泻

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应用DIG标记探针杂交检测IBDV

中国病毒学 1994年第4期9卷 351-355页

作者：陈士友陈溥言蔡宝祥金由辛王德宝张兹钧南京农业大学动物医学系中国科学院上海生化所分子生物学国家重点实验室拱北动植物检疫局中国科学院上海细胞生物学研究所

本试验用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）标记的探针建立了核酸杂交检测传染性法氏囊病病毒（ＩＢ－ＤＶ）的方法，并在敏感性方面同琼脂扩散试验进行了比较。探针来源于ＩＢＤＶＳＴＣ－ｌｌ９和ＳＴＣ－２４３ｃＤＮＡ。杂... 详细信息

本试验用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）标记的探针建立了核酸杂交检测传染性法氏囊病病毒（ＩＢ－ＤＶ）的方法，并在敏感性方面同琼脂扩散试验进行了比较。探针来源于ＩＢＤＶＳＴＣ－ｌｌ９和ＳＴＣ－２４３ｃＤＮＡ。杂交方法的敏感性试验表明，核酸杂交可以检测到０．１ｐｇ的ＩＢＤＶＲＮＡ；与多个毒株核酸的杂交则显示出标记的探针可以作为通用试剂用于ＩＢＤＶ早期感染的诊断；而同琼脂扩散试验的比较则说明，杂交方法比常规的免疫沉淀反应敏感１０４倍以上。除此之外，由于杂交方法特异以及非放射性探针操作方便，因而具有很大的应用前景。

关键词：传染性法氏囊病病毒地高辛标记探针

产蛋下降综合症病毒(EDS’76)核酸序列分析及基因扩增研究

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中国进出境动植检 1995年第4期 26-28页

作者：胡木枝张兹钧金由辛拱北动植物检疫局广东珠海519020 中科院上海生化所上海200031

从被EDS＇76病毒感染的鸭胚尿囊液中提取病毒核酸,经Pstl酶切后重组到PT_7/T_3a—19的PstI位点,再转化到Ecoli DH 5a中。在LB平板上筛选了一个EDS特异的PTEZ·P28重组质粒。用双脱氧末端终止法测定了该重组质粒中插入片段的一段核酸序列... 详细信息

从被EDS＇76病毒感染的鸭胚尿囊液中提取病毒核酸,经Pstl酶切后重组到PT_7/T_3a—19的PstI位点,再转化到Ecoli DH 5a中。在LB平板上筛选了一个EDS特异的PTEZ·P28重组质粒。用双脱氧末端终止法测定了该重组质粒中插入片段的一段核酸序列,在此基础上设计了一对引物,用这对引物成功地从EDS＇76—DNA上扩增出了一个209 bP的核酸片段。

关键词：产蛋下降综合症基因扩增鸡病病毒

测定牛血清中抗牛鼻气管炎病毒抗体的酶联免疫吸附试验——Ⅱ、抗原的制备

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中国动物检疫 1987年第1期 3-7页

作者：张兹钧孙书华张燕霞农牧渔业部动物检疫所

用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定牛血清中传染性牛鼻气管炎(IBR)病毒抗体的方法与细胞中和试验相比有很多优点,但在ELISA试验中,抗原的质量对结果的可靠性、重复性和灵敏度都有直接的影响,低质量的抗原常常造成结果不佳,甚至失

关键词：病毒抗原 IBR 鼻甲管细胞粗制抗原牛肾细胞病毒抗体牛血清

测定牛血清中抗传染性牛鼻气管炎病毒抗体的酶联免疫吸附试验——Ⅲ.与细胞中和试验的比较

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中国动物检疫 1987年第3期 3-5页

作者：张兹钧孙书华张燕霞农牧渔业部动物检疫所

在诊断传染性牛鼻气管炎的血清学方法中,国内外学者们普遍认为微量细胞中和试验比其它方法准确,但它远不如新近发展起来的酶联免疫吸附试验(ELISA)简便、快速和经济。在灵敏度和特异性方面,学者们也曾进行过比较。本文将进一步比较这两... 详细信息

在诊断传染性牛鼻气管炎的血清学方法中,国内外学者们普遍认为微量细胞中和试验比其它方法准确,但它远不如新近发展起来的酶联免疫吸附试验(ELISA)简便、快速和经济。在灵敏度和特异性方面,学者们也曾进行过比较。本文将进一步比较这两种方法的特异性,灵敏度以及它们之间的相关性。材料和方法病毒:制备ELISA抗原和微量细胞小和试验所用的病毒为Bartha Nu/64 IBR弱毒株。将含10%犊牛血清的病毒培养物冻融三次后,用3,000rpm离心15分钟,上清液小量分装后贮存在-70℃备用。

关键词：中和试验 ELISA 传染性牛鼻气管炎病毒抗体滴度酶联免疫吸附试验细胞

西藏牦牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离和鉴定

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中国兽医科技 1991年第1期21卷 32-33页

作者：洛桑列措索巴张兹钧张子春吴明杰朱万光西藏自治区畜牧兽医队农业部青岛动物检疫所

1976年以来,在我国西藏昌都地区一带的牦牛群中流行一种类似于病毒性腹泻/粘膜病的传染病,其主要临床症状为急性腹泻,体温升高,口鼻腔溃烂、流涎,眼结膜充血、流泪,孕母牛流产等,并常引起母牛和小牛死亡。1988年8月在西藏类乌齐县和巴... 详细信息

1976年以来,在我国西藏昌都地区一带的牦牛群中流行一种类似于病毒性腹泻/粘膜病的传染病,其主要临床症状为急性腹泻,体温升高,口鼻腔溃烂、流涎,眼结膜充血、流泪,孕母牛流产等,并常引起母牛和小牛死亡。1988年8月在西藏类乌齐县和巴青县一带又爆发本病,我们赴现场采集病料,并进行动物的回归试验以及病毒的分离与鉴定工作。

关键词：牛牦牛病毒性腹泻粘膜病分离

用免疫扩散试验测定牛和羊血清中牛病毒性腹泻—粘膜病抗体的研究

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中国预防兽医学报 1982年第3期 35-38+56页

作者：张兹钧张燕霞崔芳英李正英农业部动物检疫所

用 Oregon C24 V 弱毒株感染的原代犊牛肾细胞培养物制备抗原,以自然感染 BVD—MD 病毒的康复羊血清为阳性参考血清,在0.8%的琼脂糖凝胶(用离子强度为0.02,DH8.1的 Tris—Giycin(?)—Hcl 缓冲液配制)中进行免疫扩散试验,48小时内就能出... 详细信息

用 Oregon C24 V 弱毒株感染的原代犊牛肾细胞培养物制备抗原,以自然感染 BVD—MD 病毒的康复羊血清为阳性参考血清,在0.8%的琼脂糖凝胶(用离子强度为0.02,DH8.1的 Tris—Giycin(?)—Hcl 缓冲液配制)中进行免疫扩散试验,48小时内就能出现清楚的沉淀线。在对新西兰和英国进口羊的检疫中,免疫扩散试验和病毒中和试验的结果基本一致.

关键词：羊血清阳性血清诊断血清抗原 BVD 抗体粘膜病粘膜疾病

用免疫扩散试验和病毒中和试验测定粘膜病抗体的比较

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中国动物检疫 1985年 49-50+53页

作者：张兹钧张燕霞刘佩兰孙书华农牧渔业部动物检疫所

在粘膜病的诊断方法中,国内外学者们(1),(2),(8),(4),(6)普遍认为病毒中和试验(VNT)的敏感性和特异性均高于兔疫扩散试验(IDT\但中和试验需要严格的无菌操作和熟练的组织培养技术,而且需要较长的时间才能得出结果,所以这一方法很难被椎... 详细信息

在粘膜病的诊断方法中,国内外学者们(1),(2),(8),(4),(6)普遍认为病毒中和试验(VNT)的敏感性和特异性均高于兔疫扩散试验(IDT\但中和试验需要严格的无菌操作和熟练的组织培养技术,而且需要较长的时间才能得出结果,所以这一方法很难被椎广。我们对该病的免疫扩散试验进行了改进,在本报告中将进一步与病毒中和试验进行比较。

关键词：中和试验粘膜病粘膜疾病免疫扩散试验抗体

测定牛血清中抗牛鼻气管炎病毒抗体的酶联免疫吸附试验——Ⅰ.最适条件的建立

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中国动物检疫 1986年第1期 12-17页

作者：张兹钧孙书华普淑英刘佩兰张燕霞农牧渔业部动物检疫所

测定牛血清中抗牛鼻气管炎病毒抗体的方法有很多种,其中最常用的方法是细胞中和试验。但由于该试验自始至终都需要严格的无菌操作和熟练的组织培养技术,所需的时间较长,费用也较昂贵,所以不太容易被推广。自从1974年Voller等人在聚苯乙... 详细信息

测定牛血清中抗牛鼻气管炎病毒抗体的方法有很多种,其中最常用的方法是细胞中和试验。但由于该试验自始至终都需要严格的无菌操作和熟练的组织培养技术,所需的时间较长,费用也较昂贵,所以不太容易被推广。自从1974年Voller等人在聚苯乙烯微量板上建立起酶联免疫吸附试验(ELISA)以来,由于该方法具有很高的灵敏度,快速,经济和便于自动化操作等优点,目前已广泛地应用于病毒病的快速诊断。测定牛血清中抗牛鼻气管炎病毒抗体的ELISAlK已有过几篇报导,而且这些国家也正准备用该方法来代替细胞中和试验作为口岸检测牛鼻气管炎抗体的正规方法,但

关键词：鼻气管炎 OD 包被抗原阳性血清诊断血清阴性血清阴性对照血清中和试验病毒抗体最适条件马血清封闭时间牛血清