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PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强中的作用

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中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 161-165页

作者：胡晓玲肖鸿美胡新武李艾张亮品张兰秋华中科技大学同济医学院基础医学部生理教研室湖北武汉430030

目的 :观察PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强 (longtermpotentiation ,LTP)中的作用。方法 :应用细胞外电生理记录方法 ,通过向海马CA3区分别微量注射血小板活化因子 (PlateletactivatingfactorPAF)受体拮抗剂银杏内酯B(GinkgolideB... 详细信息

目的 :观察PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强 (longtermpotentiation ,LTP)中的作用。方法 :应用细胞外电生理记录方法 ,通过向海马CA3区分别微量注射血小板活化因子 (PlateletactivatingfactorPAF)受体拮抗剂银杏内酯B(GinkgolideB)和激动剂mc PAF ,以群体锋电位 (populationspikesPS)幅度为指标 ,观察PP CA3通路的LTP变化。结果 :① 0 .2 μmol/L的银杏内酯B对CA3区的诱发电位无影响 ,但可抑制CA3区的LTP。② 0 .2 5mol/L的三氯化铝不影响CA3区LTP ,但可加强银杏内酯B的抑制作用。③ 4 0 μmol/Lmc PAF对强直刺激引起的LTP无影响 ,却可减轻 0 .5mol/L三氯化铝的对LTP的抑制作用。结论 :PAF受体在刺激PP诱发的CA3区LTP中起作用 ,而金属铝对CA3区LTP的抑制作用至少部分与PAF受体有关。

关键词： PAF受体铝血小板活化因子长时程增强 LTP 诱发电位银杏内酯B

模拟血管迷走性晕厥动物模型神经体液介质变化的研究

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中华儿科杂志 2009年第1期47卷 74-75页

作者：黄萍王宏伟董燕程佩萱张亮品杜军保广州市儿童医院心血管科 510120 华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科华中科技大学同济医学院生理学系北京大学第一医院儿科

血管迷走性晕厥（vasovagalsyncope，VVS）是由多种因素触发而引起的周围血管扩张，血压下降和（或）心率减慢，心排血量减少、脑血流低灌注，导致一过性意识和姿势紧张丧失。临床上较为常见，发病率为每年1．3‰～2．7‰，是儿童晕厥... 详细信息

血管迷走性晕厥（vasovagalsyncope，VVS）是由多种因素触发而引起的周围血管扩张，血压下降和（或）心率减慢，心排血量减少、脑血流低灌注，导致一过性意识和姿势紧张丧失。临床上较为常见，发病率为每年1．3‰～2．7‰，是儿童晕厥中最常见的病因，约占所有晕厥患儿的80％。近年来，许多学者对VVS进行了大量研究，但VVS的病理生理学机制亦尚未完全明了。

关键词：血管迷走性晕厥神经体液动物模型病理生理学机制质变模拟周围血管扩张脑血流低灌注

Characterization of Monoclonal Antibody to L-Homocysteic Acid and Its Immunohistochemistry in Rat Hippocampus

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2005年第1期25卷 1-4页

作者：刘长金李爱胡新武唐明杜以梅张亮品陈蕾 Department of Physiology School of Basic Medical Sciences Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Wuhan 430030 China

L-homocysteic acid (HCA) and other amino acids were conjugated to rat brain material (extracted rat brain protein) with glutaraldehyde to form HCA- and amino acids-brain material conjugates. The specificity of monoclonal antibody (McAb) was tested on serial dilution test and absorption test on enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using these conjugates as antigens instead of amino acids-BSA (bovine serum albumin) conjugates used previously. The characterized McAb was applied for immunohistochemical staining using PAP (peroxidase antiperoxidase) technique in combination with silver enhancement of diamino-benzene (DAB) products. The results indicated that McAb to L-HCA reacted with L-HCA-brain material conjugates, but not with other amino acids-brain material conjugates so far tested. McAb absorbed with L-HCA-brain material abolished or decreased immunoreactivity of L-HCA-brain material with McAb. The antibody selectively stained subpopulation of cells and processes in the hippocampus fixed with glutaradehyde. Absorption of McAb with L-HCA-brain material abolished immunohistochemical staining. These results suggested that McAb was specific for L-HCA-brain materials and could be used for imunohistocytochemistry. This would provide a new tool for immunohistochemical visualization and localization of L-HCA in the nervous system.

关键词： L-homocysteic acid monoclonal antibody enzyme-linked immunosorbent assay immunohistochemistry amino acids-brain materials

钠钙交换在早期小鼠胚胎心肌细胞自律性和动作电位中的作用

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生理学报 2020年第6期72卷 757-764页

作者：骆红艳胡新武张亮品曾莹关秀文华中科技大学同济医学院基础医学院生理学系武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院武汉430030 武汉市黄陂区人民医院武汉430300

本文旨在研究钠钙交换体(sodium calcium exchanger,NCX)在胚胎早期发育阶段心肌细胞动作电位(action potential,AP)产生过程中的作用。酶解法获得C57小鼠胚胎发育早期的单个心肌细胞后,用全细胞膜片钳技术记录NCX特异性阻断剂KB-R7943(... 详细信息

本文旨在研究钠钙交换体(sodium calcium exchanger,NCX)在胚胎早期发育阶段心肌细胞动作电位(action potential,AP)产生过程中的作用。酶解法获得C57小鼠胚胎发育早期的单个心肌细胞后,用全细胞膜片钳技术记录NCX特异性阻断剂KB-R7943(5μmol/L)和SEA0400(1μmol/L)给药前后心肌细胞AP变化。结果显示,KB-R7943和SEA0400对起搏细胞样心肌细胞的AP均具有显著的负性变时作用,但只对部分心室细胞样心肌细胞产生这种作用。KB-R7943对心室细胞样心肌细胞的负性变时作用伴有动作电位时程(action potential duration,APD)缩短;而SEA0400的这种负性变时作用则与舒张期自动去极化速度(velocity of diastolic depolarization,Vdd)降低相关。从胚胎龄9.5天(embryonic day 9.5,E9.5)到E10.5,KB-R7943和SEA0400对心室细胞样胚胎心肌细胞AP负性变时作用逐渐消失。以上结果提示,在胚胎早期的短期发育过程中,NCX在胚胎心肌细胞自律性和AP形成中可能发生发育依赖性变化,表明NCX在不同条件/状态的心肌细胞中具有不同的功能。

关键词： SEA0400 KB-R7943 钠钙交换体胚胎心肌细胞动作电位

β-淀粉肽-(1-40)对电压依赖性钙电流的作用及铝和银杏内酯B对该作用的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2004年第6期33卷 659-662页

作者：陈蕾刘长金唐明胡新武李爱张亮品骆红艳胡晓玲华中科技大学同济医学院基础医学院生理学系武汉430030

目的　探讨不同时期配制的 β 淀粉肽 (1 4 0 ) (Aβ1 40 )对大鼠海马CA1区锥体神经元高电压依赖性钙通道电流 (IHVA)的作用并观察铝和银杏内酯B (GB)对该作用的影响。方法　应用全细胞膜片钳技术记录海马神经元IHVA电流 ,并观察药物... 详细信息

目的　探讨不同时期配制的 β 淀粉肽 (1 4 0 ) (Aβ1 40 )对大鼠海马CA1区锥体神经元高电压依赖性钙通道电流 (IHVA)的作用并观察铝和银杏内酯B (GB)对该作用的影响。方法　应用全细胞膜片钳技术记录海马神经元IHVA电流 ,并观察药物对其的作用。结果　 (1)细胞外给予老化处理的Aβ1 40 可以增强IHVA幅度 ,Aβ1 40 的作用具有不可逆性和浓度依赖性 ;新鲜配制的Aβ1 40 对IHVA几乎没有影响。 (2 )Aβ1 40 增强IHVA的作用可以被L 型钙通道阻断剂nifedipine抵消。 (3)PKA的抑制剂H 89可以抵消Aβ1 40 对IHVA的增强作用。 (4)Aβ1 40 增加IHVA的作用可被 1 0mmol/L的AlCl3 进一步增加。 (5 )细胞外给予GB对正常的IHVA没有影响 ,但可抵消Aβ1 40 对IHVA的增强作用。结论 β 淀粉肽(Aβ)通过增强IHVA可引起胞内钙超载 ,这可能是其产生神经毒性作用的机制之一 ,铝可以加强Aβ的毒性作用 ;GB可通过抑制钙离子内流对神经元起一定保护作用。

关键词： Aβ1-40 银杏内酯B 细胞外增强作用影响依赖性观察增强淀粉配制

Thymosinβ4 Impeded Murine Stem Cell Proliferation with an Intact Cardiovascular Differentiation

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2016年第3期36卷 328-334页

作者：聂丽高仕君赵亚楠 Jacob Masika 骆红艳胡新武张亮品曾莹 Jürgen Hescheler 梁华敏 Department of Physiology Chinese-German Stem Cell Centerthe Key Laboratory of Drug Target Research and Pharmacodynamic EvaluationHubei Province School of Basic Medicine Huazhong University of Science and Technology Institute of Brain Research Huazhong University of Science and Technology College of Pharmacy Wuhan Institute of Bioengineering Department of Medical Physiology Faculty of Health SciencesEgerton University Union Hospital Huazhong University of Science and Technology Institute of Neurophysiology University of Cologne

Thymosin β4（Tβ4） is a key factor in cardiac development, growth, disease, epicardial integrity, blood vessel formation and has cardio-protective properties. However, its role in murine embryonic stem cells（m ESCs） proliferation and cardiovascular differentiation remains unclear. Thus we aimed to elucidate the influence of Tβ4 on m ESCs. Target genes during m ESCs proliferation and differentiation were detected by real-time PCR or Western blotting, and patch clamp was applied to characterize the m ESCs-derived cardiomyocytes. It was found that Tβ4 decreased m ESCs proliferation in a partial dose-dependent manner and the expression of cell cycle regulatory genes c-myc, c-fos and c-jun. However, m ESCs self-renewal markers Oct4 and Nanog were elevated, indicating the maintenance of self-renewal ability in these m ESCs. Phosphorylation of STAT3 and Akt was inhibited by Tβ4 while the expression of RAS and phosphorylation of ERK were enhanced. No significant difference was found in BMP2/BMP4 or their downstream protein smad. Wnt3 and Wnt11 were remarkably decreased by Tβ4 with upregulation of Tcf3 and constant ？-catenin. Under m ESCs differentiation, Tβ4 treatment did not change the expression of cardiovascular cell markers α-MHC, PECAM, and α-SMA. Neither the electrophysiological properties of m ESCs-derived cardiomyocytes nor the hormonal regulation by Iso/Cch was affected by Tβ4. In conclusion, Tβ4 suppressed m ESCs proliferation by affecting the activity of STAT3, Akt, ERK and Wnt pathways. However, Tβ4 did not influence the in vitro cardiovascular differentiation.

关键词： thymosin β4 murine embryonic stem cells proliferation cardiogenesis patch clamp

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甲基汞诱导海马神经细胞凋亡及其机制研究

环境与健康杂志 2008年第1期25卷 18-21,95页

作者：李爱陈雷胡新武张亮品曹雪红刘烈炬刘长金华中科技大学同济医学院生理系湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院药理系湖北武汉430030

目的研究甲基汞对海马神经元的损伤及致凋亡作用,并初步探讨甲基汞神经毒性的机制。方法以5d内新生SD大鼠海马神经元为实验对象,用四甲基偶氮唑盐(MMT)法检测甲基汞对培养的海马神经细胞活性的影响,原位末端标记(TUNEL)法和流式AnnexinV... 详细信息

目的研究甲基汞对海马神经元的损伤及致凋亡作用,并初步探讨甲基汞神经毒性的机制。方法以5d内新生SD大鼠海马神经元为实验对象,用四甲基偶氮唑盐(MMT)法检测甲基汞对培养的海马神经细胞活性的影响,原位末端标记(TUNEL)法和流式AnnexinV-FITC-PI法检测甲基汞诱导海马细胞凋亡细胞数和凋亡百分率,并用激光共聚焦技术,从单个细胞水平检测甲基汞对胞内游离Ca2+瞬间动态变化的影响。结果MMT法显示,0.1μmol/L甲基汞作用24h对培养的海马神经细胞杀伤率为(22.90±2.77)%(n=7)。TUNEL法显示,0.1μmol/L甲基汞作用24h组海马神经元凋亡指数[(34.45±1.30)%,n=10]高于溶剂对照组[(6.01±0.64)%,n=10],差异有统计学意义(P<0.01)。流式AnnexinV-FITC-PI法显示,0.1μmol/L甲基汞作用24h诱导海马神经细胞凋亡率为(51.20±4.98)%(n=5)。即时染毒0.01、0.1、1μmol/L甲基汞,使海马神经元细胞内游离钙离子浓度分别增加(5.58±2.37)%(n=5),(82.71±20.42)%(n=4)和(246.38±64.77)%(n=4)。预孵育硝苯的平可延缓甲基汞升钙作用的起效时间并降低胞内钙离子浓度增加的幅值。结论甲基汞对培养的海马神经细胞的急剧升钙作用可能参与了甲基汞的致细胞损伤和诱导凋亡作用,并且可能与细胞膜上的电压门控钙通道有关。

关键词：汞甲基汞化合物神经元凋亡细胞内游离钙

心-肺联合灌流法分离兔肺静脉肌细胞的方法（英文）

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生理学报 2016年第1期68卷 50-56页

作者：高琳琳张苗苗张亮品杨殊琳姚可珺宋元龙华中科技大学同济医学院生理学系武汉430030

肺静脉中存在的心肌样细胞在阵发性房颤的发生中发挥了极重要作用。因而研究这些心肌样细胞的生理特性有很重要的现实意义。由于缺乏有效地分离这些肌细胞的方法,使相应的科学研究工作受到很大限制。本文介绍了一种创新性的分离肺静脉... 详细信息

肺静脉中存在的心肌样细胞在阵发性房颤的发生中发挥了极重要作用。因而研究这些心肌样细胞的生理特性有很重要的现实意义。由于缺乏有效地分离这些肌细胞的方法,使相应的科学研究工作受到很大限制。本文介绍了一种创新性的分离肺静脉肌细胞的方法,该方法的关键点是联合经主动脉逆行心脏灌注与经肺动脉的顺行肺静脉灌流,最大程度地确保了肺静脉肌细胞微环境的有效灌注。通过本方法获取的肺静脉肌细胞的数量与活性均明显高于传统的经心脏灌流消化的方法。

关键词：肺静脉房颤肌细胞分离

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血管迷走性晕厥动物模型的建立

实用儿科临床杂志 2008年第13期23卷 1022-1023页

作者：黄萍王宏伟董燕程佩萱张亮品夏治广州市儿童医院心血管科广州510120 华中科技大学同济医学院华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 华中科技大学同济医学院生理学系武汉430030

目的拟建立血管迷走性晕厥(VVS)动物模型,为VVS发病机制、病理生理和药物干预的研究提供基础。方法12只健康新西兰大白兔称体质量后,耳缘静脉注射戊巴比妥钠(40mg/kg),麻醉后仰卧位固定于专用兔固定架上。耳缘静脉注射肝素钠注射液1000U... 详细信息

目的拟建立血管迷走性晕厥(VVS)动物模型,为VVS发病机制、病理生理和药物干预的研究提供基础。方法12只健康新西兰大白兔称体质量后,耳缘静脉注射戊巴比妥钠(40mg/kg),麻醉后仰卧位固定于专用兔固定架上。耳缘静脉注射肝素钠注射液1000U(肝素化),无菌条件下右侧股动脉置入导管,连接于有创血压监测管及压力转换器,左侧股动脉置入导管,供抽血用。观察5min后,以5mL/min的速度抽血,连续监测其心率、血压,记录其放血量,直至其血压显著降低或出现抽搐。结果1.心率变化:12只新西兰大白兔基础心率为(305.3±29.1)次/min,经实验(7.6±1.7)min后,心率达到最高值(322.3±27.2)次/min,心率增加(18.2±3.0)次/min,放血量(40.6±3.2)mL。此后随着放血量增加,心率减慢(13.6±1.4)次/min。2.血压变化:12只新西兰大白兔基础血压为(9.99±1.24)kPa,实验初心率增快,但血压无明显变化。随着放血量增加,心率增快,平均血压下降(0.25±0.07)kPa/min,直至心率达到最高值。此后随放血量增加,心率减慢,平均血压下降较前显著,下降(0.85±0.2)kPa/min,直至大白兔角膜反射完全消失,肌肉松弛或出现抽搐、抽泣样呼吸、死亡。总放血量为(55.3±13.5)mL。结论对动物实施失血诱发Bezold-Jarisch反射与人类VVS表现类似,是研究VVS较为合理的模型。

关键词：晕厥,血管迷走性动物模型兔