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食品与机械 2016年第2期32卷 173-177,182页

作者：张亚佳李忠海中南林业科技大学食品科学与工程学院湖南长沙410004

目前有机磷类农药在农业生产中仍然应用广泛,有机磷类农药及其代谢产物对人体有较严重的毒害作用。文章综述近年来国内外在果蔬中有机磷农药残留分析检测技术的应用及研究进展,并对有机磷类农药残留检测技术的发展前景进行展望。

关键词：果蔬有机磷农药残留检测方法

湘江流域长沙段有机磷农药在蔬菜中残留及消解动态的研究

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湘江流域长沙段有机磷农药在蔬菜中残留及消解动态的研究

作者：张亚佳中南林业科技大学

学位级别：硕士

蔬菜是我国食用最广泛的食品之一。近年来,随着有机磷农药的大范围使用,蔬菜食用的安全隐患越来越大,尽管从2007年1月1日起,全国禁止使用甲胺磷等5种剧毒有机磷农药,但全国各地有机磷农药中毒事件仍时有发生。由于有机磷农药的毒性巨大... 详细信息

蔬菜是我国食用最广泛的食品之一。近年来,随着有机磷农药的大范围使用,蔬菜食用的安全隐患越来越大,尽管从2007年1月1日起,全国禁止使用甲胺磷等5种剧毒有机磷农药,但全国各地有机磷农药中毒事件仍时有发生。由于有机磷农药的毒性巨大,所以迫切需要建立起一种蔬菜中有机磷农药的快速高效检测方法以及对喷洒过有机磷农药的蔬菜进行安全性评价和动态消解研究。本研究选取了湘江流域长沙段5个具有代表性的蔬菜种植基地进行样品采集。主要研究结果如下：(1)建立了QuEChERS-气相色谱(QuEChERS-FID)测定蔬菜中甲胺磷、对硫磷、氧化乐果残留量的方法,该方法选用乙腈作为萃取溶剂,在1、5、10μg/L3个添加水平下,样品的回收率为88.43%～96.59%,相对标准偏差为3.58%～6.33%,甲胺磷、对硫磷、氧化乐果的定量限(LOQ)分别为0.03、0.05、0.02 μg/L(2)对长沙市5个具有代表性的蔬菜种植区的3种蔬菜采样检测：小白菜的有机磷农残检测平均合格率为98.60%;黄瓜和西红柿的平均合格率分别为97.37%和97.73%。试验分别从农药残留量和农残检测率、试验检测结果的分析和现有国家规定最大残留量标准这三个方面作出评价：甲胺磷占据所有被检测出的有机磷农药的52.5%;5个采样点中有机磷农药残留超标率最高的是谷山乡,最低的是大托镇;洋湖湿地蔬菜种植区蔬菜风险较大,其它种植区蔬菜较为安全。长沙市蔬菜中农药污染的原因是农药产品结构不合理,菜农不能合理的喷洒农药,国家职能部门监管力度不够;对策是调整农药产品结构、加强宣传培训和蔬菜种植结构调整、加强无农药残留蔬菜的宣传和推广。(3)试验研究了三种有机磷农药在蔬菜上的动态消解规律,建立了甲胺磷、对硫磷和氧化乐果的标准曲线;研究了三种有机磷农药在不同蔬菜上的残留消解动态,甲胺磷、对硫磷和氧化乐果的施药浓度分别是75 mg/L、50 mg/L 和 100mg/L,得出了三种有机磷农药在三种蔬菜中的半衰期、消解曲线、回归曲线和消解方程,三种农药在蔬菜中的半衰期范围在1.70～3.24 d;研究了施药浓度和施药次数与蔬菜中有机磷农药残留量的关系,结果显示施药浓度越大,蔬菜中农药残留量越大;施药次数越多,蔬菜中农药残留量越大。

关键词：蔬菜有机磷农药气相色谱法安全性评价消解动态

肝素结合的成纤维细胞生长因子促进鼠皮肤烧伤愈合的研究

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中国医科大学学报 2002年第1期31卷 3-4,8页

作者：董玉兰李永军王跃中张亚佳中国医科大学基础医学院实验病理学研究室辽宁沈阳110001

目的 :探讨肝素结合的成纤维细胞生长因子 (FGF)对烧伤愈合的促进作用。方法 :于小鼠背部皮肤用2 0W电烙 ,电灼 2 0s,烙成直径 0 .5cm圆形II度烧伤伤口 ,实验组用FGF(含FGF 30 0 μg/ml,肝素 10 0 μg/ml) ,对照组用生理盐水 ,每天换药 ... 详细信息

目的 :探讨肝素结合的成纤维细胞生长因子 (FGF)对烧伤愈合的促进作用。方法 :于小鼠背部皮肤用2 0W电烙 ,电灼 2 0s,烙成直径 0 .5cm圆形II度烧伤伤口 ,实验组用FGF(含FGF 30 0 μg/ml,肝素 10 0 μg/ml) ,对照组用生理盐水 ,每天换药 1次。术后 1,3,5 ,7,10d处死动物 ,观察伤口愈合情况。结果 :FGF明显促进烧伤伤口处毛细血管、成纤维细胞增生 (P <0 .0 1) ,胶原蛋白的生成 ,肉芽组织的增生及皮肤的修复。实验组较对照组愈合快 4～ 5d。结论 :肝素结合的FGF促进烧伤伤口的肉芽组织增生 ,胶原蛋白及基质的生成。

关键词：成纤维细胞生长因子肉芽组织烧伤愈合

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人主动脉内皮细胞长期培养及形态学研究

中华心血管病杂志 1991年第2期19卷 97-99+125+127页

作者：董玉兰陈铁镇王铁吉王跃忠张亚佳中国医科大学实验病理学研究室

国内首次成功培养人主动脉内皮细胞达10～15代。应用相差显微镜,扫描、透射电镜,Ⅷ因子相关抗原的免疫荧光抗体及血管紧张素转换酶的单克隆抗体,对内皮细胞进行形态学研究。在培养液中加入20%人血清,内皮细胞生长因子 200μg/ml,肝素100... 详细信息

国内首次成功培养人主动脉内皮细胞达10～15代。应用相差显微镜,扫描、透射电镜,Ⅷ因子相关抗原的免疫荧光抗体及血管紧张素转换酶的单克隆抗体,对内皮细胞进行形态学研究。在培养液中加入20%人血清,内皮细胞生长因子 200μg/ml,肝素100μg/ml,及培养皿底的明胶覆膜是人内皮细胞长期培养的重要条件。

关键词：内皮,血管细胞,培养的形态发生

维生素E对内皮细胞诱发血管平滑肌细胞凋亡的抑制作用

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中国医科大学学报 2001年第4期30卷 245-247,260页

作者：孙东辉杨向红董玉兰王跃中张亚佳中国医科大学基础医学院实验病理学教研室沈阳110001

目的 :研究维生素E对脂质过氧化损伤的内皮细胞 (EC)诱发的血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡是否具有抑制作用。方法 :以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应 ,将制备的内皮细胞条件培养液 (EC CM)作为实验因素作用于培养的... 详细信息

目的 :研究维生素E对脂质过氧化损伤的内皮细胞 (EC)诱发的血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡是否具有抑制作用。方法 :以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应 ,将制备的内皮细胞条件培养液 (EC CM)作为实验因素作用于培养的VSMC。采用透射电子显微镜 ,免疫组织化学等方法观察维生素E对内皮细胞条件培养液诱发的血管平滑肌细胞凋亡的影响。结果 :电镜可见VSMC凋亡小体。免疫组织化学结果显示 ,VSMC的 p5 3蛋白表达增加 ,bcl 2蛋白表达下调。加维生素E组电镜改变轻微 ,p5 3、bcl 2异常表达减轻。结论 :维生素E对脂质过氧化损伤的内皮细胞诱发的血管平滑肌细胞凋亡具有抑制作用。

关键词：维生素E 内皮细胞血管平滑肌细胞细胞凋亡动脉粥样硬化

血管内皮细胞的活化或损伤诱导平滑肌细胞的增生和凋亡

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中华病理学杂志 2002年第5期31卷 445-446页

作者：杨向红孙东辉董玉兰王跃中张亚佳中国医科大学实验病理学研究室沈阳110001

细胞培养：采用改进的Jaffe氏培养法，培养人脐带静脉内皮细胞。采用贴块法培养人脐动脉平滑肌细胞并传代。培养液均为含20%胎牛血清的DMEM培养液。内皮细胞的脂质过氧化引发实验：将培养达融合状态的内皮细胞分组，分别加入含不同浓度... 详细信息

细胞培养：采用改进的Jaffe氏培养法，培养人脐带静脉内皮细胞。采用贴块法培养人脐动脉平滑肌细胞并传代。培养液均为含20%胎牛血清的DMEM培养液。内皮细胞的脂质过氧化引发实验：将培养达融合状态的内皮细胞分组，分别加入含不同浓度氢过氧化枯烯的培养液孵育后，测定脂质过氧化物的代谢终产物丙二醛（MDA）的含量。培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性的测定：LDH是细胞内的可溶性酶，当细胞膜被破坏时可漏出细胞外，可作为细胞损伤的早期检测指标。采取内皮细胞培养液，以Sigma公司的LDH测定试剂盒检测。

关键词：细胞活化细胞增生细胞凋亡血管内皮细胞平滑肌细胞

脂质过氧化对器官培养动脉内皮细胞的损伤及抗氧化药物的保护作用

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中国病理生理杂志 1992年第5期8卷 467-470页

作者：唐中华陈铁镇王佐周王跃忠张亚佳中国医科大学实验病理学研究室

本实验建立了稳定的动脉器官培养方法并以联胺作用于培养的动脉引发脂质过氧化反应,系统地观察硒、维生素E及人参皂甙对内皮细胞脂质过氧化损伤的保护作用。结果表明:联胺激发和促进了脂质过氧化反应引起脂质过氧化物含量增加,内皮细胞... 详细信息

本实验建立了稳定的动脉器官培养方法并以联胺作用于培养的动脉引发脂质过氧化反应,系统地观察硒、维生素E及人参皂甙对内皮细胞脂质过氧化损伤的保护作用。结果表明:联胺激发和促进了脂质过氧化反应引起脂质过氧化物含量增加,内皮细胞生物膜系统损伤及PGI_2合成功能降低。而预先用200 ppb硒、50μg/ml维生索E、10μg/ml人参皂甙作用于动脉,可抑制联胺引起的组织脂贡过氧化物含量升高,使内皮细胞生物膜系统损伤程度减轻并增加PGI_2合成能力。表明硒、维生素E、人参皂甙在一定程度上对内皮细胞过氧化损伤有保护作用,可能对动脉粥样硬化有防治作用。这为抗氧化剂特别是人参皂甙作为抗氧化药物在临床上合理应用提供一定的理论依据。

关键词：动脉内皮抗氧剂动脉粥样硬化

脂质过氧化损伤的内皮细胞对血管平滑肌细胞凋亡的影响

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中国医科大学学报 2001年第Z1期30卷 6-8页

作者：孙东辉杨向红董玉兰王跃中张亚佳吴惠中国医科大学基础医学院实验病理学教研室

目的:研究脂质过氧化损伤的内皮细胞(endothelial cell,EC)对血管平滑肌细胞(vessel smooth musclecells,VSMC)凋亡的影响.方法:以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应,将制备的内皮细胞条件培养液(endothelial cell ... 详细信息

目的:研究脂质过氧化损伤的内皮细胞(endothelial cell,EC)对血管平滑肌细胞(vessel smooth musclecells,VSMC)凋亡的影响.方法:以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应,将制备的内皮细胞条件培养液(endothelial cell conditional medium, EC-CM)作为实验因素作用于培养的VSMC.采用相差显微镜,透射电子显微镜,琼脂糖凝胶电泳的方法观察内皮细胞条件培养液对VSMC凋亡的影响.结果:经脂质过氧化损伤的内皮细胞条件培养液作用后,相差显微镜下见VSMC明显收缩,大多数细胞胞浆皱缩,细胞间连接疏松.电镜下可见凋亡的VSMC,细胞收缩变小,胞膜完整,细胞核内的染色质固缩成块状,核仁消失,细胞膜膨出形成凋亡小体.琼脂糖凝胶电泳见VSMC的DNA呈"阶梯状"图谱.结论:脂质过氧化损伤的内皮细胞能诱发培养的VSMC发生凋亡.

关键词：内皮细胞血管平滑肌细胞细胞凋亡动脉硬化

糖基化终末产物上调大鼠心脏微血管内皮细胞NF-κB和COX-2表达

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中国糖尿病杂志 2009年第2期17卷 133-135页

作者：柳爱华杨向红王跃中张亚佳刘政操中国医科大学盛京医院病理科 110004 沈阳市妇幼保健所

目的研究糖基化终末产物(AGEs)对大鼠心脏微血管内皮细胞因子κB(NF-κB)和环氧合酶2(COX-2)表达的影响,探讨AGEs与糖尿病血管病变间的关系。方法体外培养大鼠心脏微血管内皮细胞至亚融和状态时,以不同浓度糖基化白蛋白BSAAGEs与之作用... 详细信息

目的研究糖基化终末产物(AGEs)对大鼠心脏微血管内皮细胞因子κB(NF-κB)和环氧合酶2(COX-2)表达的影响,探讨AGEs与糖尿病血管病变间的关系。方法体外培养大鼠心脏微血管内皮细胞至亚融和状态时,以不同浓度糖基化白蛋白BSAAGEs与之作用不同时间后,检测内皮细胞NF-κB及COX-2蛋白的表达。结果 25、50、100、200mg/L BSA-AGEs作用后,NF-κB和COX-2蛋白表达呈剂量依赖性增多,100mg/LAGEs作用6、12、24、48h,NF-κB和COX-2蛋白表达呈时间依赖性增多。结论 BSA-AGEs可促进体外培养微血管内皮细胞NF-κB和COX-2的表达,其作用可能与NF-κB的活化有关。

关键词：糖基化终末产物微血管内皮细胞核因子kB 环氧合酶2

成纤维细胞生长因子促进小鼠皮肤伤口愈合的研究

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中国修复重建外科杂志 1996年第3期10卷 136-138页

作者：董玉兰王跃中张亚佳王佐州王铁吉中国医科大学实验病理研究室

为了探索成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）对创伤愈合的作用设计了本实验。于小鼠背部皮肤制成无菌手术切割伤口。实验组用ＦＧＦ溶液（含ＦＧＦ３００μｇ／ｍｌ，肝素１００μｇ／ｍｌ）... 详细信息

为了探索成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）对创伤愈合的作用设计了本实验。于小鼠背部皮肤制成无菌手术切割伤口。实验组用ＦＧＦ溶液（含ＦＧＦ３００μｇ／ｍｌ，肝素１００μｇ／ｍｌ）０．５ｍｌ，对照组用生理盐水０．５ｍｌ，分别滴入伤口处，然后用无菌纱布包扎，每天换药一次。术后１，３，５，７和１０天观察伤口愈合情况。结果显示：实验组毛细血管和成纤维细胞增生较对照组明显，并提前２～３天达最高峰。表明ＦＧＦ能强有力地促进肉芽组织增生和伤口愈合。

关键词：成纤维细胞生长因子伤口愈合