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基于肥大细胞脱颗粒探讨艾灸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠低度炎性反应的影响

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中国针灸 2024年第3期44卷 283-294页

作者：方明储浩然宋小鸽阮静茹邹玲李奎武廖路敏马文黎韩啸宇朱敬伟王子叶方誉澄安徽中医药大学第二临床医学院合肥230061 安徽中医药大学第二附属医院/安徽省针灸医院名医堂合肥230061 安徽省中医药科学院针灸临床研究所合肥230061 安徽省针灸临床医学研究中心合肥230061 安徽中医药大学针灸经络研究所

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠结肠肥大细胞脱颗粒及炎性因子表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的可能机制。方法:从5只健康SPF级SD孕鼠产下的45只幼鼠中随机选取8只作为正常组,其余37只采用母子分离+醋酸灌肠+慢性束... 详细信息

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠结肠肥大细胞脱颗粒及炎性因子表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的可能机制。方法:从5只健康SPF级SD孕鼠产下的45只幼鼠中随机选取8只作为正常组,其余37只采用母子分离+醋酸灌肠+慢性束缚应激的方法制备IBS-D模型,将造模成功的32只大鼠随机分为模型组、酮替芬组、艾灸组、灸药组,每组8只。酮替芬组给予酮替芬溶液(10 mL/kg)灌胃,艾灸组给予悬灸双侧“天枢”“上巨虚”,灸药组给予悬灸双侧“天枢”“上巨虚”结合酮替芬溶液灌胃,均每天1次,连续干预7 d。分别于造模前后及干预后计算各组稀便率、检测腹壁回缩反射(AWR)最小容量阈值。干预后,采用HE染色观察各组大鼠结肠组织形态,扫描电镜观察结肠黏膜超微结构,透射电镜观察结肠黏膜肥大细胞超微结构,甲苯胺蓝染色观察结肠黏膜肥大细胞脱颗粒情况,ELISA法检测大鼠血清和结肠组胺、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、蛋白酶激活受体2(PAR-2)含量,Western blot法和实时荧光定量PCR法检测大鼠结肠IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2蛋白和mRNA表达,免疫荧光法检测大鼠结肠组胺、IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2阳性表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织被大量炎性细胞浸润,结肠黏膜严重破坏,绒毛排列散乱,肥大细胞内颗粒电子密度降低、颗粒数量明显减少;稀便率、肥大细胞脱颗粒率升高(P<0.01),AWR最小容量阈值降低(P<0.01);血清和结肠组胺、IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2含量升高(P<0.01);结肠组胺阳性表达升高(P<0.01),IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2蛋白、m RNA及阳性表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,酮替芬组、艾灸组、灸药组大鼠结肠组织炎性细胞浸润明显减少,结肠黏膜较完整,绒毛排列较整齐,肥大细胞内颗粒电子密度升高、颗粒数量增多;稀便率、肥大细胞脱颗粒率下降(P<0.01),AWR最小容量阈值升高(P<0.01);血清和结肠组胺、IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2含量降低(P<0.01);结肠组胺阳性表达降低(P<0.01),结肠IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2蛋白、mRNA及阳性表达均降低(P<0.01)。与酮替芬组比较,艾灸组血清组胺、IL-6、类胰蛋白酶含量降低(P<0.01,P<0.05),结肠IL-1β、IL-6含量降低(P<0.01,P<0.05);结肠IL-1β、IL-1α、PAR-2蛋白表达降低(P<0.05),结肠IL-1β、类胰蛋白酶阳性表达降低(P<0.01,P<0.05)。与酮替芬组和艾灸组比较,灸药组稀便率、肥大细胞脱颗粒率下降(P<0.01),AWR最小容量阈值上升(P<0.01);血清和结肠组胺、IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2含量降低(P<0.01);结肠IL-1β、类胰蛋白酶、PAR-2蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05);结肠IL-1β、IL-6、IL-1α、类胰蛋白酶、PAR-2 mRNA及阳性表达均降低(P<0.01,P<0.05);结肠组胺阳性表达降低(P<0.01)。结论:艾灸“天枢”“上巨虚”可抑制IBS-D模型大鼠的结肠低度炎性反应,其作用机制可能与抑制肥大细胞分泌组胺、类胰蛋白酶,从而降低相关炎性因子表达有关。

关键词：腹泻型肠易激综合征艾灸肥大细胞脱颗粒低度炎性反应组胺类胰蛋白酶

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biRGD-siVEGFR2联合阿帕替尼靶向治疗NSCLC的实验研究

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biRGD-siVEGFR2联合阿帕替尼靶向治疗NSCLC的实验研究

作者：廖路敏南方医科大学

学位级别：硕士

人非小细胞肺癌(NSCLC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率呈逐年上升趋势,临床上以化疗为主。Apatinib是我国自主研发的抗血管生成靶向药物,在肺癌等多种恶性肿瘤的治疗中呈现出良好的应用前景,但化疗药物往往副作用大,易出... 详细信息

人非小细胞肺癌(NSCLC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率呈逐年上升趋势,临床上以化疗为主。Apatinib是我国自主研发的抗血管生成靶向药物,在肺癌等多种恶性肿瘤的治疗中呈现出良好的应用前景,但化疗药物往往副作用大,易出现多药耐药性,且不同患者对药物敏感性不同,使用单一的化疗药物往往不能取得良好的治疗效果。因此,肺癌的治疗迫切需要寻找一种高效低毒的治疗方法。小干扰RNA分子(siRNA)可有效沉默靶基因的表达,具有治疗疾病且避免耐药性的潜力。研究表明,RGD(Arg-Gly-Asp)多肽与siRNA分子共价偶联可特异性靶向进入αvβ3受体阳性细胞并沉默靶基因的表达。本课题建立了人非小细胞肺癌裸鼠肿瘤模型,以小鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)为靶点,构建了 biRGD-siVEGFR2给药系统,采取biRGD-siVEGFR2和阿帕替尼联合给药的方式,观察了其对肿瘤生长的抑制作用,以期达到增效减毒的抗肿瘤效果,为NSCLC的治疗提供新思路。方法1、biRGD-siVEGFR2的合成与验证biRGD通过linker与siRNA正义链5'端共价偶联连得到biRGD-siRNA,分别采用LC-MS和RP-HPLC进行质谱确定与纯度分析。采用qRT-PCR和Western Blot验证biRGD-siVEGFR2的基因沉默功能,琼脂糖凝胶电泳检测血清稳定性。ELISA检测该分子的免疫原性。2、体内考察biRGD-siVEGFR2联合阿帕替尼的抗肿瘤生物学活性裸鼠皮下接种6×106个A549-luc+细胞,建立人非小细胞肺癌肿瘤模型。肿瘤体积约50～60 mm3时,随机分为6组。A生理盐水组;B biRGD-siNC(2 nmol/20 g);C biRGD-siVEGFR2(1 nmol/20 g);D biRGD-siVEGFR2(2 nmol/20 g);E Apatinib(2.6 mg/20 g);F biRGD-siVEGFR2(1 nmol/20 g)+Apatinib(1.3 mg/20 g)。biRGD-siRNA每隔48 h尾静脉给药一次,一共7次,Apatinib每隔48 h灌胃给药一次。每次给药前测量裸鼠肿瘤体积,给药后每隔5天检测瘤内荧光强度。分别采用qRT-PCR和Western Blot技术检测肿瘤组织中VEGFR2 mRNA和蛋白表达水平。免疫组织化学法分别检测肿瘤组织中CD31和Ki67蛋白的阳性表达,以观察微血管密度和细胞增殖情况并采用TUNEL实验检测肿瘤细胞凋亡情况。采集血清,检测ALT、AST、BUN、Cr四项生化指标。HE染色观测肾脏的病理变化。结果1、biRGD-siVEGFR2的合成与验证成功合成了 biRGD-siVEGFR2分子,其纯度可达80%左右。该分子能显著下调VEGFR2 mRNA和蛋白的表达水平且血清稳定性良好,无明显免疫原性。2、体内考察biRGD-siVEGFR2联合阿帕替尼的抗肿瘤生物学活性(1)经1 5天治疗,biRGD-siVEGFR2单独给药组能显著抑制肿瘤生长,但增加剂量其抑瘤作用未见明显增强。高剂量Apatinib组和联合给药组抑瘤作用较其他各组更为显著,但这两组间的抑瘤效果没有显著差异。(2)各组肿瘤组织中VEGFR2 mRNA和蛋白表达水平以及微血管密度和肿瘤增殖细胞数均不同程度降低,而凋亡细胞数增多,其总体趋势与抑制肿瘤生长趋势一致。(3)各治疗组的肝指标浓度之间无显著性差异,而高剂量Apatinib组的肾指标略高于其他组。HE染色结果进一步证实了高剂量Apatinib具有一定的肾毒性,而其他治疗组未发现明显的毒性。结论合成的biRGD-siVEGFR2分子具有抗肿瘤生物学活性,小剂量范围内无明显剂量依赖性。高剂量Apatinib具有良好的抗肿瘤效果,但有潜在的肾毒性。biRGD-siVEGFR2和Apatinib的低剂量联合疗法,能有效抑制肿瘤生长并能够降低单一使用高剂量Apatinib所产生的肾毒性。

关键词： biRGD-siVEGFR2 Apatinib VEGFR2 联合用药 NSCLC

艾灸对腹泻型肠易激综合征大鼠中脑组织miRNA-133b、Pitx3/TH及神经递质的影响

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Journal of Acupuncture and Tuina Science 2022年第6期20卷 433-445页

作者：陈进雨王娇娇邹玲祝姗姗李奎武廖路敏阮静茹储浩然杨燕萍 Graduate School of Anhui University of Chinese Medicine Hefei 230038China The Second Affiliated Hospital of Anhui University of Chinese Medicine Hefei 230061China Clinical Institute of Acupuncture and Moxibustion Anhui Academy of Chinese MedicineHefei 230038China 不详

目的:通过观察艾灸天枢及上巨虚对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠中脑组织微小RNA-133b(miRNA-133b)、垂体同源盒家族因子3(Pitx3)/酪氨酸羟化酶(TH)及神经递质的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的作用机制.方法:将健康Sprague-Dawley大鼠随机... 详细信息

目的:通过观察艾灸天枢及上巨虚对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠中脑组织微小RNA-133b(miRNA-133b)、垂体同源盒家族因子3(Pitx3)/酪氨酸羟化酶(TH)及神经递质的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的作用机制.方法:将健康Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和西药组,每组12只.除正常组外,其余各组采取母子分离及醋酸灌肠联合束缚应激刺激方法建立IBS-D大鼠模型.正常组和模型组不干预;艾灸组取双侧天枢及上巨虚施以温和灸;西药组予利福昔明灌胃.观察各组大鼠不同时期体征状况.干预后,苏木素-伊红染色观察大鼠结肠组织病理形态,酶联免疫吸附法检测各组大鼠血浆、结肠及中脑组织中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)及5-羟色胺(5-HT)含量,实时荧光定量聚合酶链反应法检测中脑组织中miRNA-133b、Pitx3及TH mRNA的相对表达量,免疫印迹法及免疫荧光法检测中脑组织中Pitx3及TH蛋白的相对表达量.结果:不同组间、不同时间点各组大鼠体重均有统计学差异(P0.05).线性相关性分析表明,miRNA-133b与Pitx3呈负相关(r0,P<0.01).结论:艾灸天枢及上巨虚可改善IBS-D大鼠腹泻症状和内脏高敏感性,其机制可能与上调中脑miRNA-133b抑制Pitx3/TH的表达,降低神经递质的表达水平有关.

关键词：灸法温和灸肠易激综合征腹泻微小RNA-133b 垂体同源盒家族因子3 酪氨酸羟化酶神经递质

艾灸通过调节腹泻型肠易激综合征大鼠结肠组织miR-345-3p/miR-216a-5p表达抑制炎性反应

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针刺研究 2023年第3期48卷 226-232页

作者：邹玲阮静茹陈进雨王娇娇祝姗姗廖路敏李奎武王婧吉储浩然安徽中医药大学研究生院合肥230038 安徽中医药大学第二附属医院合肥230061 安徽省中医药科学院针灸临床研究所合肥230061 安徽省针灸临床医学研究中心合肥230061

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的抗炎机制。方法:SD幼鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC)组,每... 详细信息

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的抗炎机制。方法:SD幼鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC)组,每组12只。采用新生仔鼠母子分离联合醋酸灌肠刺激联合慢性束缚法复制IBS-D大鼠模型。艾灸组艾灸“天枢”“上巨虚”,每次20 min,每天1次,治疗7 d。PDTC组腹腔注射PDTC(50 mg·kg^(-1)·d^(-1)),共治疗7 d。观察各组幼鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值;HE染色法观察各组幼鼠结肠黏膜层病理形态;ELISA法检测各组幼鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;荧光定量PCR法检测各组幼鼠结肠组织中miR-345-3p、miR-216a-5p、NF-κB p65 mRNA表达水平;免疫荧光法检测各组幼鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果:与正常组比较,模型组稀便率升高(P<0.01),体质量、AWR最小容量阈值降低(P<0.01),结肠组织黏膜存在轻度炎性反应,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高(P<0.01),IL-4含量降低(P<0.01),结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量降低(P<0.01),NF-κB p65 mRNA相对表达量升高(P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值升高(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和PDTC组稀便率降低(P<0.01),体质量、AWR最小容量阈值升高(P<0.01),结肠组织黏膜炎性反应减轻,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P<0.01),IL-4含量升高(P<0.01),结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量升高(P<0.05),NF-κB p65 mRNA相对表达量降低(P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值降低(P<0.01)。与艾灸组比较,PDTC组血清IL-6含量降低(P<0.01)。结论:艾灸可以减轻IBS-D大鼠肠道炎性反应水平,降低内脏高敏感性,其机制可能与提高结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p表达水平,抑制NF-κB p65表达水平,从而降低炎性因子水平有关。

关键词：腹泻型肠易激综合征艾灸炎性反应 miR-345-3p miR-216a-5p 核因子-κB p65

基于多个miRNAs调节NF-κB信号通路探讨艾灸干预腹泻型肠易激综合征模型大鼠的抗炎机制研究

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中国针灸 2022年第6期42卷 654-662页

作者：祝姗姗王娇娇邹玲陈进雨李奎武廖路敏阮静茹李难储浩然安徽中医药大学研究生院合肥230038 安徽中医药大学第二附属医院合肥230061 安徽省针灸临床医学研究中心合肥230061 安徽省中医药科学院针灸临床研究所合肥230038

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠多个微小RNAs(miRNAs)调节核因子-κB(NF-κB)、炎性因子的影响,探讨艾灸干预IBS-D的抗炎机制。方法:从52只初生幼鼠中随机抽取12只作为正常组,剩余大鼠制备IBS-D模型,将36只造模成功... 详细信息

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠多个微小RNAs(miRNAs)调节核因子-κB(NF-κB)、炎性因子的影响,探讨艾灸干预IBS-D的抗炎机制。方法:从52只初生幼鼠中随机抽取12只作为正常组,剩余大鼠制备IBS-D模型,将36只造模成功的大鼠随机分为模型组、药物组和艾灸组,每组12只。药物组予腹腔注射吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC);艾灸组予“天枢”“上巨虚”艾灸治疗,每次20 min,均每天1次,共干预7 d。于造模前后及干预后测量各组大鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值;干预后采用ELISA法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β、IL-8含量,HE染色观察各组大鼠结肠组织形态,实时荧光定量PCR法检测大鼠结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65 mRNA的表达量,免疫荧光法检测大鼠结肠组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-8的蛋白表达。结果:造模后模型组大鼠体质量、AWR最小容量阈值均低于正常组(P<0.01),稀便率均高于正常组(P<0.01);干预后,模型组大鼠结肠组织炎性细胞浸润明显,血清TNF-α、IL-1β、IL-8含量均高于正常组(P<0.05),结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65mRNA表达量均高于正常组(P<0.05),结肠组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-8蛋白表达亦高于正常组(P<0.01)。干预后,药物组和艾灸组大鼠体质量、AWR最小容量阈值均高于模型组(P<0.05),稀便率均低于模型组(P<0.05),结肠组织炎性细胞浸润较模型组减少,血清TNF-α、IL-1β、IL-8含量及结肠组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-8蛋白表达均低于模型组(P<0.05,P<0.01);药物组大鼠结肠组织miR-125b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65 mRNA表达量均低于模型组(P<0.05),艾灸组大鼠结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65 mRNA表达量均低于模型组(P<0.05)。大鼠结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a与NF-κB p65mRNA呈正相关(0

关键词：腹泻型肠易激综合征艾灸微小RNAs(miRNAs) 核因子-κB(NF-κB)

基于SCF/c-kit信号通路探讨艾灸干预对腹泻型肠易激综合征大鼠免疫功能稳态的影响

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中国针灸 2023年第2期43卷 177-185页

作者：李奎武储浩然阮静茹王娇娇陈进雨祝姗姗邹玲廖路敏童婷婷安徽中医药大学第二临床医学院合肥230061 安徽中医药大学第二附属医院安徽省针灸医院名医堂合肥230061 安徽省中医药科学院针灸临床研究所合肥230061 安徽省针灸临床医学研究中心合肥230061

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠干细胞因子(SCF)/酪氨酸激酶受体(c-kit)信号通路及免疫功能的影响,探讨艾灸干预IBS-D的机制。方法:从6只健康SPF级孕鼠产下的52只幼鼠中随机选取12只作为正常组,剩余40只采用母子分... 详细信息

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠干细胞因子(SCF)/酪氨酸激酶受体(c-kit)信号通路及免疫功能的影响,探讨艾灸干预IBS-D的机制。方法:从6只健康SPF级孕鼠产下的52只幼鼠中随机选取12只作为正常组,剩余40只采用母子分离、醋酸灌肠、慢性束缚应激三因素联合复制IBS-D大鼠模型,将造模成功的36只大鼠随机分为模型组、艾灸组、西药组,每组12只。艾灸组予悬灸“天枢”“上巨虚”,西药组予利福昔明悬浊液(150 mg/kg)灌胃,均每天1次,连续干预7 d。分别于醋酸灌肠前(35日龄)、造模后(45日龄)、干预后(53日龄)检测各组大鼠体质量、稀便率(LSR)、腹壁回缩反射(AWR)评分达3分时最小容量阈值;干预后(53日龄),HE染色观察大鼠结肠组织形态,测定脾脏及胸腺脏器系数,ELISA法检测血清炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-10、IL-8]、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、CD45+)、CD4+/CD8+值及免疫球蛋白(Ig A、Ig G、Ig M)含量,实时荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠结肠组织SCF、c-kit m RNA及蛋白表达,免疫荧光法检测大鼠结肠组织SCF、c-kit阳性表达。结果:干预后,与正常组比较,模型组体质量、AWR评分达3分时最小容量阈值降低(P0.05)。SCF、c-kit m RNA表达与AWR评分达3分时最小容量阈值、IL-10呈正相关(P<0.01),与其余指标均呈负相关(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸干预可降低IBS-D模型大鼠内脏高敏感性,改善其腹痛、腹泻等症状,其作用机制可能与上调SCF/c-kit信号通路的表达、改善IBS-D免疫功能状态有关。

关键词：腹泻型肠易激综合征艾灸干细胞因子/酪氨酸激酶受体(SCF/c-kit)信号通路免疫功能

siRNA介导的PD-L1沉默可增强人CD8~＋T淋巴细胞的体外杀伤作用

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南方医科大学学报 2018年第7期38卷 800-806页

作者：王震黄文岑柏宏魏媛怡廖路敏黎国仙季爱民南方医科大学珠江医院药剂科广东广州510282 南京制药厂有限公司新药研发中心江苏南京210007 邵阳市中心医院药剂科湖南邵阳422000 广州医科大学附属肿瘤医院肿瘤放射中心广东广州510095

目的设计并筛选多条可高效特异性降低肿瘤细胞表面沉默程序性死亡受体-配体1(PD-L1)表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并研究其增强人CD8^+T淋巴细胞对人胶质瘤细胞(U87 MG)免疫杀伤作用。方法根据siRNA设计法则,并通过siDirect软件在线设计... 详细信息

目的设计并筛选多条可高效特异性降低肿瘤细胞表面沉默程序性死亡受体-配体1(PD-L1)表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并研究其增强人CD8^+T淋巴细胞对人胶质瘤细胞(U87 MG)免疫杀伤作用。方法根据siRNA设计法则,并通过siDirect软件在线设计针对PD-L1基因的几种不同的siRNA序列,并运用BLAST进行同源性分析,最终确定候选序列;通过RT-qPCR、Western blot及流式细胞术实验,选出高效抑制PD-L1 mRNA及蛋白表达的siRNA序列;通过流式细胞术及CCK8检测PD-L1siRNA沉默U87 MG细胞的PD-L1后,人CD8^+T细胞对U87 MG的细胞凋亡及增殖的影响。结果设计了10条针对人PD-L1基因具有不同核苷酸序列的siRNA。采用RT-qPCR、Western blot及流式细胞术在mRNA及蛋白水平上检测siRNA的沉默效率,与对照组相比,siPD-L1-1、siPD-L1-2、siPD-L1-3、siPD-L1-4、siPD-L1-5及siPD-L1-8均显著降低U87 MG中PD-L1基因的表达(P<0.05),其中siPD-L1-3的沉默效率最高。与对照组相比,流式细胞术及CCK8结果显示,siPD-L1-3及siPD-L1-8均可显著增强人CD8^+T细胞对U87 MG细胞的杀伤作用,且该杀伤作用可显著抑制U87 MG细胞增殖(P<0.05)。结论本文设计并筛选了能有效沉默PD-L1基因表达的siPD-L1-1、siPD-L1-2、siPD-L1-3、siPD-L1-4、siPD-L1-5及siPD-L1-8的6条序列,其中siPD-L1-3和siPD-L1-8可高效增强T淋巴细胞对U87 MG细胞免疫杀伤作用,且siPD-L1-3的作用最为显著。本文设计的PD-L1siRNA分子可以用于设计和制备预防、治疗多种癌症的核酸药物。

关键词：程序性死亡受体-配体1 小干扰RNA 神经胶质瘤细胞 CD8+T细胞核酸药物

空气过滤用静电纺纳米纤维膜的制备及性能研究

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过程工程学报 2024年第5期24卷 599-608页

作者：程思敏钱付平朱晨陈路敏董伟仲怀玉安徽工业大学建筑工程学院安徽马鞍山243032 安徽工业大学能源与环境学院安徽马鞍山243032

为了开发高效低阻的空气过滤用纤维膜,采用静电纺丝的方法制备了聚丙烯腈(PAN)静电纺纳米纤维膜。通过改变PAN浓度及静电纺丝时长,得到了不同形貌及过滤性能的静电纺纳米纤维膜。结合场发射扫描电子显微镜等表征方式和过滤性能测试台对... 详细信息

为了开发高效低阻的空气过滤用纤维膜,采用静电纺丝的方法制备了聚丙烯腈(PAN)静电纺纳米纤维膜。通过改变PAN浓度及静电纺丝时长,得到了不同形貌及过滤性能的静电纺纳米纤维膜。结合场发射扫描电子显微镜等表征方式和过滤性能测试台对静电纺纳米纤维膜形貌及过滤性能进行测试与分析,获得性能最优的PAN静电纺纳米纤维膜的制备参数如下:PAN浓度为9wt%,静电纺丝时长为5.0 h。此条件下制备的静电纺纳米纤维膜厚度为0.0240 mm,平均纤维直径为396 nm,PM2.5过滤效率为99.99%,过滤压降为67 Pa,品质因子最高,为0.137 Pa^(-1)。

关键词：静电纺丝纳米纤维膜空气过滤 PM2.5

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任务型教学法在初中英语阅读教学中的运用研究

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英语教师 2024年第7期24卷 40-43页

作者：路敏安徽亳州新能源学校安徽亳州255400

阐述任务型教学法在初中英语阅读教学中的运用价值。结合教学案例,提出教师可以通过巧设课内阅读任务、创设语篇相关情境、合理点拨指导、共享任务探究成果、补充读后拓展任务、反思任务探究流程等策略将任务型教学法运用于初中英语阅... 详细信息

阐述任务型教学法在初中英语阅读教学中的运用价值。结合教学案例,提出教师可以通过巧设课内阅读任务、创设语篇相关情境、合理点拨指导、共享任务探究成果、补充读后拓展任务、反思任务探究流程等策略将任务型教学法运用于初中英语阅读教学中,从而提升阅读课堂教学质量。认为将任务型教学法用于初中英语阅读教学可以激活学生的探究热情,提升他们的课文解读效果,并锻炼他们的学习能力,为其终身发展提供助力。

关键词：任务型教学法初中英语阅读教学