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作者：廖美芳湖南中医药大学

学位级别：硕士

呕吐毒素,又名DON(deoxynivalenol,脱氧雪腐镰刀菌烯醇),属于单端孢霉烯族类化合物,是一类强有力的免疫抑制剂。DON易感染谷物、玉米、红薯等常用农作物,除此之外,还会污染动物的次生代谢产物,如猪肉、牛奶、羊血等。因此,对人类及动物... 详细信息

呕吐毒素,又名DON(deoxynivalenol,脱氧雪腐镰刀菌烯醇),属于单端孢霉烯族类化合物,是一类强有力的免疫抑制剂。DON易感染谷物、玉米、红薯等常用农作物,除此之外,还会污染动物的次生代谢产物,如猪肉、牛奶、羊血等。因此,对人类及动物的健康构成了威胁,特别是对免疫功能具有明显的影响。猪是对其最敏感的家畜之一,而肠道作为营养物质吸收的主要场所,也是DON攻击的第一靶标。DON有很高的免疫抑制和细胞毒素作用,根据DON的剂量和作用时间不同可引起免疫刺激或免疫抑制。当人食用了被DON污染的食物后,会导致厌食、呕吐、发烧、腹泻、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状,严重时影响造血系统甚至死亡。中国传统饮食习惯中粮谷比例远远高于西方,使得呕吐毒素的危害更为突出。目的:通过空肠上皮细胞系IPEC-J2为模型,筛选合适的DON作用浓度和时间。从CCK-8实验检测细胞增殖率;细胞周期和凋亡检测;Werstem-Blot检验Caspase3(17)和Caspase3(32)的表达;实时荧光定量分别检测相对定量中细胞因子、线粒体氧化应激、游离氨基酸转运载体的相关目的基因表达量。通过这些指标来观测DON对IPEC-J2凋亡和功能的影响。方法:1)不同浓度DON作用不同时间对IPEC-J2细胞CCK-8增殖实验:用96孔板培养细胞,进行24小时、48小时、72小时培养,设置低浓度200ng/mlDON,高浓度2000ng/mlDON,通过测量培养基OD值计算细胞相对生存率。2)不同DON浓度处理后IPCE-J2细胞周期检测:用培养皿培养细胞,用高浓度2000ng/mlDON、低浓度200ng/m1DON处理细胞6小时、12小时、24小时,按照试剂盒进行实验操作,分析PI荧光直方图上细胞各周期的百分率。3)不同DON浓度处理后IPCE-J2细胞凋亡检测:细胞培养同上,按照试剂盒操作,在流式细胞仪观察检测,收集闪点图,进行凋亡率统计。4)DON处理后IPEC-J2细胞在Caspase3基因上的蛋白表达实验:细胞培养同上,加入50ulRIPA裂解液,裂解。检测蛋白浓度、电泳、转膜、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色曝光、灰度分析、数据处理。5)DON处理后IPEC-J2细胞在(细胞因子、线粒体氧化应激、氨基酸转运载体)基因上的qRTPCR实验:细胞培养和DON处理,提取RNA、RNA浓度测定、DNA去除反应、反转录、实时荧光定量、数据处理。结果:1)DON对IPEC-J2细胞生长有显著影响,抑制细胞增殖。选取24小时为终止时间段,分别进行6、12、24小时的研究。2)200ng/mlDON组细胞有丝分裂更多停留在S期,2000ng/mlDON更多停留在G2/M期。3)DON作用短时间6小时,细胞早期凋亡率和总凋亡率随着DON浓度上升而增高。4)DON激活细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶Caspase3(17)片段,作用时间在6小时效果显著。5)细胞因子相关基因表达:高浓度2000ng/mlDON两个基因表达上均显著升高,显著激活IL-8、IL-1β炎症基因的表达。线粒体氧化应激相关基因表达:DON作用12小时后高浓度2000ng/ml使TFAM、mtSSB、ND4、CCOXIV表达量显著上升,Cytc在24小时表达量增高。游离氨基酸转运载体基因表达:DON在作用12小时会抑制营养物质游离氨基酸转运载体Bo+AT的表达,24小时后抑制SGLT1、ASCT2、GIUT2表达。结论:DON对IPEC-J2细胞生长具有显著影响,通过抑制其增殖,诱导凋亡和刺激炎症反应等来实现。其中低浓度200ng/mlDON使细胞有丝分裂停留在S期;高浓度DON使细胞周期停留在有丝分裂后期G2/M期。在细胞凋亡上DON主要作用在6小时或之前时间段,此结果与在6小时左右启动了 Caspase3基因有关。高浓度 2000ng/mlDON 作用 12 小时 TFAM、mt SSB、ND4、CCOXV、CCOXIV表达量上升。mtSSB表达失调,mtDNA发生基因突变,如高氧化应激、水解脱氨基反应、烷基化作用,DNA损伤将大量积累,最终导致多种相关疾病的发生。ND4基因促使遗传性视神经病,线粒体肌病,张力障碍等相关疾病发生。CCOXIV基因促使细胞色素加深,细胞膜趋向老化。氨基酸转运载体的表达中DON处理低浓度和高浓度作用12小时在Bo+AT、SGLT1表达上均有下降,说明此浓度DON抑制糖类被动吸收,阻碍果糖和半乳糖转运,小肠转运葡萄糖的效率降低,从而引起代谢障碍,其中低浓度200ng/ml作用更明显。

关键词： IPEC-J2 呕吐毒素(DON) 细胞周期细胞凋亡蛋白表达免疫荧光定量

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有效教学视角下高中地理课堂管理研究 ——以惠州市H中学为例

有效教学视角下高中地理课堂管理研究 ——以惠州市H中学为例

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作者：廖美芳广西师范大学

学位级别：硕士

地理是高中课程的重要科目,在高中地理课堂教学中,课堂管理问题一直是影响课堂教学有效性的重要方面。本文采用文献研究法,结合对惠州市H中学地理教师、学生的问卷调查、访谈以及随堂听课,就高中地理课堂管理问题进行了研究。本文之研... 详细信息

地理是高中课程的重要科目,在高中地理课堂教学中,课堂管理问题一直是影响课堂教学有效性的重要方面。本文采用文献研究法,结合对惠州市H中学地理教师、学生的问卷调查、访谈以及随堂听课,就高中地理课堂管理问题进行了研究。本文之研究共分为绪论、第一至四部分和研究结论与研究展望。绪论部分,在提出问题的基础上,阐述了研究的目的及意义、思路和方法,并对国内外有关课堂管理的研究进行了综述。对研究涉及的相关理论如目标管理理论、有效管理理论以及课堂教学理论等进行了阐述。在研究理论基础上,第已部分对课堂管理、有效课堂管理以及有效地理课堂管理等概念进行了解析,就高中地理课堂管理对有效教学的意义进行阐述。论文第二部分为高中地理课堂管理的现状调查,以惠州市H中学为例,明确了调查对象,设计了调查问卷、访谈提纲以及随堂听课记录,并对调查的实施以及调查结果进行了论述。论文第三部分为高中地理课堂管理存在的问题及原因,根据调查访谈结果,对高中地理课堂管理中存在的问题进行了分析研究,并对问题的成因进行了剖析。论文第四部分为高中地理课堂管理的策略研究,在分析高中地理课堂管理影响因素的基础上,提出了高中地理课堂管理的相关策略。研究结论与研究展望,对本文的研究成果进行了梳理总结并对今后的进一步研究工作进行了展望。本文的研究结论主要为:一是在高中地理课堂目标管理中,很多教师只关注知识目标的达成,对于学生能力培养及情感目标的实现不够重视;在课堂时间管理中,师生、生生互动交流环节所占的时间较少,学生自主学习所占的时间较少;在课堂纪律管理中,没有结合地理学科特点制定出完善的课堂规章制度,有些教师虽然制定了课堂规章制度,但对制度的落实情况不够重视;在课堂环境管理中,很多地理教师不重视课堂环境管理,尤其是对课堂心理环境的管理几近于无。二是高中地理课堂管理存在问题的成因,主要是一些地理教师缺乏课堂管理意识及对课堂管理的认知存在偏差;教师课堂教学技能管理水平不高;没有结合地理学科特点制定出课堂规章制度,对制度的落实情况不够重视;忽视课堂环境管理与学生心理;课堂管理主体不明,师生之间互动交流缺乏等。三是影响高中地理课堂管理有效性的因素,从课堂教学主客体的角度而言主要为教师与学生。教师因素中主要包括了教师课堂管理能力、教学水平的高低、职业素养与综合素质等因子;学生因素中主要包括了学生自律能力、学习成绩、性格特点以及心理素质等因子。四是提出高中地理课堂管理的策略,包括课堂目标管理策略、课堂时间管理策略、课堂纪律管理策略、课堂环境管理的策略以及课堂情感管理的策略。

关键词：有效教学高中地理课堂管理

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喷雾式瓶装气道湿化方式在喉癌术后气道管理中的应用

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中国急救医学 2017年第A1期37卷 146-147页

作者：莫木琼王东芳廖美芳梁银爱中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院广东广州510080

目的分析喷雾式瓶装气道湿化方式在喉癌术后气道管理中的应用.方法选择60例喉癌术治疗患者并随机分组.常规组采用常规注射器内气管滴药,喷雾组应用喷雾式瓶装气道湿化方式.比较两组气道管理舒适度;气道黏膜出血、肺部感染和刺激性咳... 详细信息

目的分析喷雾式瓶装气道湿化方式在喉癌术后气道管理中的应用.方法选择60例喉癌术治疗患者并随机分组.常规组采用常规注射器内气管滴药,喷雾组应用喷雾式瓶装气道湿化方式.比较两组气道管理舒适度;气道黏膜出血、肺部感染和刺激性咳嗽发生率;干预前后患者生活质量评分.结果喷雾组气道管理舒适度高于常规组(P0.05);出院时喷雾组生活质量评分优于常规组(P<0.05).结论喷雾式瓶装气道湿化方式在喉癌术后气道管理中的应用效果确切,可有效改善患者临床症状,促进痰液咳出,湿化气道,减少刺激性咳嗽和气道黏膜出血,促进舒适度的增加.

关键词：喷雾式瓶装气道湿化方式喉癌术后气道管理应用效果

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支架式教学方法在生物学探究性实验教学中的有效运用

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生物学教学 2009年第8期34卷 11-13页

作者：廖美芳崔鸿寇永奎华中师范大学生命科学学院武汉430079 江西省九江第一中学 332000

支架式教学的生物学探究性实验教学，主要包括创设探究情境、搭建探究支架、学生独立或小组合作探究、探究性实验的效果评价以及开展表达和交流活动五个环节。

关键词：生物学教学支架式教学方法探究性实验

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基于网络的项目式学习在高中生物学大概念教学中的应用

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基础教育研究 2022年第11期 66-68页

作者：廖美芳广东中山市第一中学中山528403

在高中生物学大概念教学中引入基于网络的项目式学习,让学生利用各种网络资源和社会资源,在真实情境中体验问题解决的过程,加深理解抽象的生物学基本概念,培养生物学学科核心素养和信息素养。在符合学生认知水平和能力的前提下,教师确... 详细信息

在高中生物学大概念教学中引入基于网络的项目式学习,让学生利用各种网络资源和社会资源,在真实情境中体验问题解决的过程,加深理解抽象的生物学基本概念,培养生物学学科核心素养和信息素养。在符合学生认知水平和能力的前提下,教师确立项目式学习主题,通过创设情境、设计任务、利用资源、生成成果、评价反馈等基本环节,让基于网络的项目式学习成为培养高中生生物学学科核心素养的重要方式。

关键词：网络项目式学习大概念教学

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思维导图在高中地理复习中的应用

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教学考试 2019年第45期 67-70页

作者：廖美芳广东省惠州市惠阳高级中学实验学校

思维导图是一种非常普遍的教学方式。本文在阐述使用思维导图的背景下,通过典型地理知识复习的思维导图案例,以期能有效整合所学知识,提高复习效果,为教师的教学和学生学习提供新的思路和方法。一、使用思维导图的背景(一)地理学科学习... 详细信息

思维导图是一种非常普遍的教学方式。本文在阐述使用思维导图的背景下,通过典型地理知识复习的思维导图案例,以期能有效整合所学知识,提高复习效果,为教师的教学和学生学习提供新的思路和方法。一、使用思维导图的背景(一)地理学科学习难度大地理学科的内容包含了人文地理和自然地理,在学科属性上文理兼备,是一门综合性极强的学科。

关键词：思维导图地理复习社会经济条件

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社会思潮多元化影响下高校思政工作开展的若干思考

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课程教育研究 2019年第24期 70-71页

作者：廖美芳桂林电子科技大学信息与通信学院

高校大学生正是人生观、世界观、价值观形成的重要时期。此时的大学生刚走出高中校园,受年龄、阅历、自身理论素质的限制,较易受到一些思潮的影响也对一些新的思潮较容易接受。当前社会,正处于社会主义发展的新时代,国际经济形势复杂多... 详细信息

高校大学生正是人生观、世界观、价值观形成的重要时期。此时的大学生刚走出高中校园,受年龄、阅历、自身理论素质的限制,较易受到一些思潮的影响也对一些新的思潮较容易接受。当前社会,正处于社会主义发展的新时代,国际经济形势复杂多变,人们获得信息的渠道日益广泛而迅速,各种社会思潮纷繁复杂涌入高校,一些理论观点和意识形态对我国一些主流文化教育和思想形成一定冲击。如何正确地引领多元化社会思潮成为高校思想政治工作新挑战。

关键词：高校多元化社会思潮思想政治教育社会主义核心价值观

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大学生心理危机干预研究

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课程教育研究 2017年第18期 190-191页

作者：廖美芳桂林电子科技大学

加强各高校的心理健康教育工作,完善心理危机干预机制,这样能够更好的帮助高校中有严重心理问题的学生度过自己的心理难关,降低高校学生的心理危机事件发生的概率,减少高校学生因心理上的危机所带来的生命损失和精神折磨,从而使得高校... 详细信息

加强各高校的心理健康教育工作,完善心理危机干预机制,这样能够更好的帮助高校中有严重心理问题的学生度过自己的心理难关,降低高校学生的心理危机事件发生的概率,减少高校学生因心理上的危机所带来的生命损失和精神折磨,从而使得高校学生能够更加健康地成长。

关键词：大学生心理危机预警干预

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鼻内镜手术治疗三叉神经痛14例围手术期的护理

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中国误诊学杂志 2009年第23期9卷 5697-5698页

作者：廖美芳中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科广东广州510080

目的:探讨鼻内镜下微创手术治疗三叉神经痛围手术期的有效护理方法。方法:对14例三叉神经痛的患者行鼻内镜下微创手术治疗的资料进行回顾性分析。结果:治愈12例,显效1例,有效1例。结论:术前加强护患沟通做好心理护理、术前准备;术后注... 详细信息

目的:探讨鼻内镜下微创手术治疗三叉神经痛围手术期的有效护理方法。方法:对14例三叉神经痛的患者行鼻内镜下微创手术治疗的资料进行回顾性分析。结果:治愈12例,显效1例,有效1例。结论:术前加强护患沟通做好心理护理、术前准备;术后注意疼痛护理、饮食指导,严密观察病情变化、预防并发症的发生;对鼻内镜下微创手术治疗三叉神经痛的患者手术成功起到重要的作用。

关键词：内窥镜检查三叉神经痛/外科学围手术期护理

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呕吐毒素对IPEC-J2细胞凋亡的影响

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动物营养学报 2018年第3期30卷 1027-1034页

作者：廖美芳孟英才詹济华印遇龙廖鹏李玲湖南中医药大学药学院长沙410208 中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室长沙410125

本研究以IPEC-J2细胞为材料,研究不同浓度和时间处理下呕吐毒素(DON)对猪空肠上皮细胞凋亡的影响。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖毒性,筛选出合适的DON作用时间(6、12、24 h)。通过低浓度(200 ng/mL)和高浓度(2 000 ng/mL)DON分别作用IPE... 详细信息

本研究以IPEC-J2细胞为材料,研究不同浓度和时间处理下呕吐毒素(DON)对猪空肠上皮细胞凋亡的影响。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖毒性,筛选出合适的DON作用时间(6、12、24 h)。通过低浓度(200 ng/mL)和高浓度(2 000 ng/mL)DON分别作用IPEC-J2细胞6、12、24 h,检测DON对细胞有丝分裂周期和细胞早期凋亡的影响。结果表明:1)DON对IPEC-J2细胞生长有明显抑制作用,200和2 000 ng/mL DON浓度下,48和72 h的细胞存活率显著低于24 h(P<0.05);2 000 ng/mL DON浓度下,72 h的细胞存活率显著低于48 h(P<0.05)。2)不同DON浓度对细胞周期影响不同,低浓度DON主要作用于细胞有丝分裂S期,干扰DNA的复制;而高浓度DON主要作用于细胞有丝分裂G2/M期,干扰有关酶与纺锤丝蛋白质的合成。3)DON作用6 h,低浓度DON组和高浓度DON组早期凋亡率和总凋亡率显著高于对照组(P<0.05);DON作用12 h,高浓度DON组早期凋亡率和总凋亡率显著高于对照组和低浓度DON组(P<0.05)。由此可见,DON抑制了IPEC-J2细胞增殖,低浓度DON使细胞有丝分裂停留在S期,高浓度DON使细胞有丝分裂停留在G2/M期。DON促使细胞早期凋亡,使总凋亡率上升,且促凋亡作用随DON浓度升高而增强。

关键词：呕吐毒素 IPEC-J2细胞周期凋亡增殖

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