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模板法合成氮掺杂类石墨烯及其类酶活性研究

模板法合成氮掺杂类石墨烯及其类酶活性研究

作者：楼章萍南京大学

学位级别：硕士

经过修饰和掺杂或具有特殊形貌结构的碳材料,具有比单纯碳材料更丰富的表面化学特征,在能源、生物分析以及生物医药领域有着更广泛的应用。在众多掺杂元素中,氮元素以其相似的原子尺寸,更高的电子密度,在碳材料的掺杂改性中的应用最为... 详细信息

经过修饰和掺杂或具有特殊形貌结构的碳材料,具有比单纯碳材料更丰富的表面化学特征,在能源、生物分析以及生物医药领域有着更广泛的应用。在众多掺杂元素中,氮元素以其相似的原子尺寸,更高的电子密度,在碳材料的掺杂改性中的应用最为普遍。模板法合成碳材料,能在产物中保留模板的结构特征,可以合成出具有特殊表面形貌或内部微结构的材料,是理性设计和制备特殊形貌结构碳材料的实用方法。纳米酶是指既具备纳米材料特征又具有酶学特性的功能材料,它克服了天然酶易失活变性和制备提取困难等弱点。关于纳米酶的研究在短短十几年间形成指数式的增长,使纳米酶成为一个年轻而富有活力的研究领域。碳基纳米酶是纳米酶领域的一个重要组成部分,已经开发出的碳基纳米酶囊括了多种立体结构和类酶活性,如最早研究的具有类超氧化物歧化酶(SOD)活性的零维富勒烯,具有类过氧化物酶(HRP)活性的一维碳纳米管和二维石墨烯等。本论文用模板法直接合成出氮元素掺杂的类石墨烯碳材料,并对其类HRP酶活性做了详细研究,成功将其应用于双氧水、葡萄糖和抗坏血酸的检测。(1)本论文以天然黏土矿物蒙脱土(MMT)为硬模板,高氮碳比的聚乙烯亚胺(PEI)同时为碳源和氮源,利用两者相反的带电性质,组装合成出具有类石墨烯形貌特征的氮掺杂碳材料。通过X射线衍射(XRD)、透射电镜(TEM)、X射线光电子能谱(XPS)、拉曼光谱、傅里叶转换红外光谱(FTIR)等对材料进行表征,证明了所得材料为具有二维片状结构的类石墨烯碳材料,该材料含碳、氧、氮三种元素,并且具有较高的氮含量(4.65-7.53%)。通过调控PEI的分子量和合成过程的锻烧温度,发现以600分子量的PEI为碳源,在600 ℃锻烧下获得的产物(即:CP600-6)具有最高的类HRP酶活性;进一步对其模拟其它酶如氧化酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的类酶活性进行研究,发现其具有专一的类HRP酶活性。在催化机理的研究中,发现其类酶活性是通过催化双氧水产生羟基自由基,进一步氧化底物而实现的。(2)以类HRP酶活性最佳的CP600-6为例,进一步对其酶活性做深入研究。首先,验证了CP600-6具有内在的类HRP酶活性,能催化经典的底物如3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)和1,2-苯二胺(OPD)等,其催化活性依赖于底物浓度和催化剂浓度,并且随pH和温度改变而变化。接着,对CP600-6做酶促动力学研究,发现其具有很高的Vmax值,这说明其具有较好的类HRP酶活性;与天然的HRP相比,CP600-6对TMB表现出更高的亲和力。最后,将CP600-6用于双氧水、葡萄糖和抗坏血酸的检测,双氧水的线性检测范围为20-200 μM,检测限为15 μM;葡萄糖的线性检测范围为10-100μM,检测限为10μM;抗坏血酸的线性检测范围为8-80 μM,检测限为8 μM。

关键词：蒙脱土聚乙烯亚胺模板法石墨烯碳基纳米酶

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内置扰流柱列太阳能集热管的换热分析

太阳能学报 2020年第9期41卷 227-232页

作者：皮骏蒲芋树刘光才李章萍中国民航大学通用航空工程学院天津300300

抛物型槽式太阳能集热管在运行过程中外壁受到非均匀太阳热流的加热,由此诱发的热应变和弯曲变形易导致集热管的失效。该文运用计算机模拟的方法研究内置扰流柱列太阳能集热管的换热性能,模拟结果表明,雷诺数、柱单元截面形状、柱单元... 详细信息

抛物型槽式太阳能集热管在运行过程中外壁受到非均匀太阳热流的加热,由此诱发的热应变和弯曲变形易导致集热管的失效。该文运用计算机模拟的方法研究内置扰流柱列太阳能集热管的换热性能,模拟结果表明,雷诺数、柱单元截面形状、柱单元高径比对内置扰流柱列集热管的周向截面温差、内壁面努赛尔数有明显影响。扰流柱列可为改善太阳能集热管的换热性能提供可能性。

关键词：太阳能集热器热流计算机模拟扰流柱列换热性能

金融科技对制造业企业全要素生产率的影响研究

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金融科技对制造业企业全要素生产率的影响研究

作者：许章萍云南财经大学

学位级别：硕士

小学课堂的“边缘学生”问题研究 ——以湖大附小等校为例

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小学课堂的“边缘学生”问题研究 ——以湖大附小等校为例

作者：郑章萍湖北大学

学位级别：硕士

近年来随着素质教育的发展和人们对教育公平的重视,"边缘学生"的问题有了较为明显的改善。但是,小学阶段的"边缘学生"还或多或少的存在着,他们被老师和同学所忽视或排斥,在基础教育阶段,边缘化的境况将对他们的身心全面发展带来负面影响... 详细信息

近年来随着素质教育的发展和人们对教育公平的重视,"边缘学生"的问题有了较为明显的改善。但是,小学阶段的"边缘学生"还或多或少的存在着,他们被老师和同学所忽视或排斥,在基础教育阶段,边缘化的境况将对他们的身心全面发展带来负面影响,并使之无法平等享有教育机会的分配和老师的关爱,因此,我们要尽可能的防止在小学阶段产生"边缘学生"。笔者通过对湖北大学附属小学和复兴路小学高年级学生进行调查研究发现,"边缘学生"是由多方面原因形成的。针对这一现象,如果不能进行及时的教育引导,就会对学生的健康发展产生不利的影响。本文运用问卷法、访谈法、观察法等多种方法对小学课堂中的"边缘学生"进行研究,对"边缘学生"的现状、特点、后果、形成原因进行考察,并以教育公平、标签理论、需要层次理论为理论基础,从学校、家庭、社会、自身等方进行分析,为小学课堂"边缘学生"的教育引导提出相应的策略。本文分为五个部分。第一部分是绪论,主要阐明选题原由、梳理国内外相关文献资料并做出文献综述、阐明研究意义、研究目的与内容以及研究方法与理论基础。第二部分是对"边缘学生"的概述,对"边缘学生"与"后进生"、"困难学生"等进行概念的辨析,以明确小学课堂"边缘学生"概念的内涵与外延。第三部分分析了小学课堂中"边缘学生"的特征和类型,对其千差万别的成因进行了详细阐述。第四部分主要通过问卷、访谈、观察等方法了解"边缘学生"在课堂中的生存情况,结合"边缘学生"的课堂表现,从家庭、学校和社会、自身四个方面对"边缘学生"的形成原因进行了全面解读,为下文的教育引导提供依据。第五部分是对如何引导小学课堂中的"边缘学生"提出探讨,主要是从家庭、学校、社会、自身这几个方面提出应对策略,帮助"边缘学生"融入集体。

关键词：边缘学生边缘化标签教育公平

人类肠道病毒71型衣壳蛋白全基因成和原核表达分析

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人类肠道病毒71型衣壳蛋白全基因成和原核表达分析

作者：章萍萍安徽医科大学

学位级别：硕士

人类肠道病毒71型（Human enterovirus71，简称EV71）属于小RNA病毒科肠道病毒属，人类肠道病毒A，核酸为单股正链RNA。目前已知EV71的感染可以导致手足口病、无菌性脑膜炎、脑炎、疱疹性咽峡炎和脊髓灰质炎样的麻痹性疾病等多种与神经... 详细信息

人类肠道病毒71型（Human enterovirus71，简称EV71）属于小RNA病毒科肠道病毒属，人类肠道病毒A，核酸为单股正链RNA。目前已知EV71的感染可以导致手足口病、无菌性脑膜炎、脑炎、疱疹性咽峡炎和脊髓灰质炎样的麻痹性疾病等多种与神经系统相关的疾病。手足口病在美国和欧洲处于小范围流行的阶段，但是在1975保加利亚和1978年匈牙利有过两次大疫情爆发和高死亡率。近年来，EV71病毒的流行在亚太地区呈上升趋势，包括马来西亚、新加坡、台湾、日本、韩国、越南和中国大陆。肠道病毒EV71型有A、B（B1、B2、B3、B4、B5）、C（C1、C2、C3、C4、C5）三个基因型，共11个亚型，病毒的颗粒为二十面体立体对称的球形结构，无包膜，直径约24～30nm，核酸为含有大约7400个核苷酸的单股正链RNA。RNA中仅有一个开放阅读框（ORF），编码含2194个氨基酸的多聚蛋白，在其两侧为5′和3′非编码区（UTRs），与其他肠道RNA病毒一样，在3′末端有多聚腺苷酸（polyA）尾，而其5′末端共价结合有一个小分子量的蛋白（VPg）VP1，P2和VP3三个蛋白暴露在病毒外壳的表面，而VP4包埋在病毒外壳的内侧与病毒核心紧密连接，因而抗原决定簇基本上位于VP1-VP3上。近年来，已经开发出不同类型的EV71疫苗，但目前普遍处于临床前开发阶段，包括灭活疫苗、DNA疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、表位多肽疫苗和病毒样颗粒疫苗。这些疫苗在动物模型中的研究表明中和抗体的产生起关键作用。本研究就目前研究中缺乏批准上市的抗原、抗体（酶标或化学发光）试剂，造成疫苗活性评价中中和抗体效价测定的不准确性和可比性，我们构建了VP1，VP0，VP3三种原核表达质粒，成功的表达了VP1，VP0蛋白，并对其免疫原性做了初步评价而且验证了VP1是抗原决定中心，为EV71诊断试剂盒和亚单位疫苗的研究奠定基础。（一） EV71相关基因片段的体外合成根据GenBank中录入的EV71/***/19.08/6株全基因序列，翻译成经大肠杆菌密码子优化后的VP1，VP0,VP3的基因核苷酸序列，利用OE-PCR原理设计全基因体外合成的特异性引物并进行体外合成。合成的全长片段TA克隆至pMD18T载体上，经过序列测定和最后的修正合成，成功合成三个外壳蛋白的基因片段。（二）VP1，VP0，VP3的原核表达和VP1的免疫原性分析。分别以三个测序正确的含有基因片段的质粒为模板，用含酶切位点的引物PCR扩增出DNA产物后克隆到原核表达载体pET-32a，分别构建的三种原核表达质粒pET-32a-VP1，pET-32a-VP0，pET-32a-VP3将三种原核表达质粒转入***21（DE3），经过IPTG诱导表达和纯化，进行动物免疫EV71-VP1蛋白的动物免疫，对其免疫原性进行分析。成功构建了三个原核表达质粒对进行原核表达并用Ni-NTA亲和层析法纯化目的融合蛋白。其中VP1，VP0表达量较高，VP3表达量不高。VP1免疫新西兰大白兔和BABL/C小鼠并制备抗血清。ELISA检测pET-32a-VP1和手足口病患儿的血清呈特异性结合反应，其IgG抗体滴度达1：64000，pET-32a-VP0和手足口病抗体滴度:1：32000，pET32a蛋白与仅有患儿的血清较弱结合。说明我们利用原核密码子体外基因合成表达表达纯化的蛋白很好的保留了很好的抗原性，同时也反映了VP1是抗原决定中心。为今后EV71诊断试剂盒和亚单位疫苗的研究提供参考。（三）基孔肯雅病毒衣壳蛋白C和包膜蛋白E2的全基因合成和原核表达分析利用重叠延伸PCR方法体外合成基孔肯雅病毒外壳蛋白C和包膜蛋白E2的全基因序列，并且构建外壳蛋白C和包膜蛋白E2的原核表达质粒。同时根据Expasy软件对E2跨膜疏水的预测，构建缺失疏水区的E2（1-350）突变体原核表达质粒。将测序正确的原核质粒转化至BL21（DE3），经IPTG诱导表达，SDS-PAGE检测重组质粒的表达情况。经IPTG诱导表达后，SDS-PAGE结果显示缺失突变体pET21b-E2（1-350）融合蛋白表达量较pET21b-E2（1-404）有明显提高。提示E2蛋白跨膜疏水区（351-378aa）对该蛋白的原核表达具有重要影响。

关键词：肠道病毒71型手足口病全基因合成原核表达蛋白纯化

水分条件对藜蒿(Artemisia selengensis)富集湿地土壤重金属的影响

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湖泊科学 2019年第6期31卷 1592-1600页

作者：章萍曾宪哲王亲媛王伟吴代赦南昌大学资源环境与化工学院鄱阳湖环境与资源利用教育部重点实验室

基于鄱阳湖南矶山湿地土壤及藜蒿Cd、As污染风险评价,利用盆栽实验研究水分条件对区域土壤理化性质、砷镉形态及其上生长的藜蒿(Artemisia selengensis)重金属富集能力的影响.结果表明:土壤Cd含量超标,存在生态风险,藜蒿茎中As含量达食... 详细信息

基于鄱阳湖南矶山湿地土壤及藜蒿Cd、As污染风险评价,利用盆栽实验研究水分条件对区域土壤理化性质、砷镉形态及其上生长的藜蒿(Artemisia selengensis)重金属富集能力的影响.结果表明:土壤Cd含量超标,存在生态风险,藜蒿茎中As含量达食品污染限量标准,存在食用风险;藜蒿对Cd、As的富集能力受土壤水分环境影响,水分增加会造成土壤pH与有机质含量上升,抑制藜蒿富集Cd的同时促进富集As.线性回归计算显示土壤有效态As含量与藜蒿As富集量呈显著正相关,可以用来评价藜蒿As富集情况,而土壤有效态Cd含量与藜蒿Cd富集量间无显著相关性.结合区域土壤Cd、As污染情况,适宜控制水分为缺水或旱湿交替条件,可以降低藜蒿等湿地植物中Cd的富集量;适宜控制水分为淹水条件,可以减少土壤Cd、As有效态含量.

关键词：鄱阳湖南矶山湿地重金属水分条件藜蒿富集

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小组工作介入安置帮教对象职业融入研究

小组工作介入安置帮教对象职业融入研究

作者：李章萍西北民族大学

学位级别：硕士

安置帮教对象是指在刑满释放五年以内和解除社区矫正三年以内的人员。安置帮教对象的主要任务是接受并配合司法部门对其的监督管理和帮扶。帮助安置帮教对象尽快职业融入是促进安置帮教尽早实现再社会化的重要举措。本文在调查了安置帮... 详细信息

安置帮教对象是指在刑满释放五年以内和解除社区矫正三年以内的人员。安置帮教对象的主要任务是接受并配合司法部门对其的监督管理和帮扶。帮助安置帮教对象尽快职业融入是促进安置帮教尽早实现再社会化的重要举措。本文在调查了安置帮教对象就业现状的基础上,发现当前安置帮教对象就业存在的问题,采用小组工作的方法,结合社会支持理论,设计了从职业能力融入、工作环境融入、工作角色融入、心理融入四个方面为主题的小组活动。通过帮助安置帮教对象链接技能培训学校、鼓励考取职业证书等方式促进安置帮教对象职业能力融入。通过人际关系讨论、情景再现的方式帮助安置帮教对象学习处理工作环境中遇到的问题。通过角色扮演,角色辨析等方式帮助安置帮教对象了解工作角色促进角色融入。通过问题倾诉、心理疏导、沟通鼓励等方式促进安置帮教对象更快的从心理上适应工作。通过实践研究笔者发现,小组社会工作在帮助安置帮对象实现职业融入中发挥了很大作用。安置帮教对象建立了自己的社会支持网络,获得了来自同伴的鼓励和帮助,有助于安置帮教对象更快的实现职业融入。

关键词：小组工作安置帮教对象职业融入

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游戏“换皮”的著作权法规制

游戏“换皮”的著作权法规制

作者：孙章萍贵州大学

学位级别：硕士

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基于中学信息科技学科的对话教学行动研究

基于中学信息科技学科的对话教学行动研究

作者：章萍君上海师范大学

学位级别：硕士

随着新课程改革的持续推进，对话教学作为一种教学方式以及教学原则，在教学目的、教学伦理、教学方式和教学思维引起了空前革命，受到越来越多的重视。相对于传统的教学方式，对话教学有以下四个显著特征，即对话教学是民主的、平等的... 详细信息

随着新课程改革的持续推进，对话教学作为一种教学方式以及教学原则，在教学目的、教学伦理、教学方式和教学思维引起了空前革命，受到越来越多的重视。相对于传统的教学方式，对话教学有以下四个显著特征，即对话教学是民主的、平等的教学;对话教学是沟通与合作的教学;对话教学是互动的、交往的教学;对话教学是创造的、生成的教学。作为一名一线信息科技教师，笔者认为对话教学是融教学价值观与方法论于一体的教学哲学，符合新课程改革的教学理念，在学科教学中开展对话教学有利于提高课堂教学的有效性。因此，笔者在研究对话教学理论的基础上，紧扣新课程的核心理念，积极开展对话教学行动研究。通过行动研究，努力优化自己的教学方式，调动学生学习的积极性与主动性，加强学法指导，帮助学生了解对话，学会对话，分享对话，在自主探究、合作学习的过程中，改变传统的学习方式。本论文是开展信息科技学科对话教学行动研究的成果。通过研究构建了符合我校实际的中学信息科技学科对话教学模式，提出信息科技学科的常见的对话类型，建构不同对话类型的操作流程，总结出信息科技学科实践对话教学的相关策略;论文最后对二年多的对话教学实践进行了总结：证明了对话教学促进了教师的专业化发展，提升了学生的信息素养;作者认为对话教学非常适合在中学信息科技学科进行推广。

关键词：对话教学信息科技教学学习方式信息素养