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肉桂几丁质酶基因CcCHI的克隆及其原核表达

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分子植物育种 2022年第7期20卷 2244-2251页

作者：闵远洋李韵雪吕佳麦晋贤廖沛然杨全广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广州510006

几丁质酶(Chitinase,CHi)是一类广泛分布在高等植物中的水解酶,作用于真菌的细胞壁,是植物抵御真菌病害的重要功能蛋白。本研究从肉桂转录组中挖掘出一个几丁质酶基因CcCHI,并对该基因进行了克隆与原核表达研究。结果表明,CcCHI基因长12... 详细信息

几丁质酶(Chitinase,CHi)是一类广泛分布在高等植物中的水解酶,作用于真菌的细胞壁,是植物抵御真菌病害的重要功能蛋白。本研究从肉桂转录组中挖掘出一个几丁质酶基因CcCHI,并对该基因进行了克隆与原核表达研究。结果表明,CcCHI基因长1206 bp,经生物信息学分析,该基因序列编码402个氨基酸,蛋白理论相对分子量为43.22 kD,等电点为9.13。经序列比对与系统进化树分析,CcCHI与沉水樟中的Ⅴ类几丁质酶亲缘关系最近。通过构建pET-32a(+)-CcCHI原核表达质粒并转化大肠杆菌中进行诱导表达后,经真菌抑菌试验发现该蛋白具有一定的抗真菌活性。本研究首次发掘了肉桂中的几丁质酶基因,并初步研究了其蛋白的抗真菌活性,为进一步研究肉桂抗真菌病害的分子机制与抗病品种选育提供理论基础。

关键词：肉桂(Cinnamomum cassia) 原核表达基因克隆几丁质酶

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岗梅花部特征、开花物候及繁育方式分析

分子植物育种 2023年

作者：张浩锋乜晓凤麦晋贤韩正洲马庆黄煜权廖沛然杨全广东药科大学国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心云浮市南领药业有限公司华润三九医药股份有限公司广东药科大学中药学院

岗梅为冬青属(Ilex)秤星树(Ilex asprella)干燥根、茎，是清热解毒类中成药的原料。本研究通过野外观察和人工控制实验相结合的方法，从开花动态、花部基本特征、繁育系统等方面对岗梅植株的开花繁殖进行了探究。研究发现，岗梅于3月中... 详细信息

岗梅为冬青属(Ilex)秤星树(Ilex asprella)干燥根、茎，是清热解毒类中成药的原料。本研究通过野外观察和人工控制实验相结合的方法，从开花动态、花部基本特征、繁育系统等方面对岗梅植株的开花繁殖进行了探究。研究发现，岗梅于3月中旬开花，花期持续23～25 d，单花花期为10～13 d，雌花与雄花的开花同步指数为0.867 2±0.066 9，表现出大量而集中的开花式样。岗梅花冠白色，4～8瓣，雌花直径为7.41±0.59 mm，单生于叶腋，花柱明显，高3.14±0.22 mm，雄蕊败育，花柄长12.18±2.99 mm；雄花直径为5.91±0.51 mm，3～5花呈束状簇生于叶腋，雄蕊4～8枚，高2.43±0.44 mm，雌蕊败育，花柄较短，长为4.81±1.46 mm。MTT染色15 min用于岗梅花粉活力检测效果最佳。岗梅花粉在开花前两天已具有较强活力，开花当天活力最强，开花后第三天开始减弱。岗梅柱头在开花前两天已具有一定可授性，开花当天柱头可授性最强，开花后第三天明显减弱，整体趋势与花粉活力相近。岗梅花粉胚珠比为3629.91±955.12，杂交指数为4，套袋实验显示其不存在自交现象，自然授粉与人工授粉均具有较高的成功率，表明其繁育系统为专性异交。岗梅的访花昆虫较少，主要观察到膜翅目(Hymenoptera)、双翅目(Diptera)的3种昆虫，蜜蜂科(Apidae)昆虫是其主要的传粉昆虫。本研究对岗梅的开花物候与繁育系统进行探究，为进一步揭示其繁殖机制提供理论基础，也为岗梅的生产育种工作提供理论参考。

关键词：岗梅开花物候花部特征花粉活力繁育系统

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三七对不同水分条件的生理响应及其机理研究

三七对不同水分条件的生理响应及其机理研究

作者：廖沛然昆明理工大学

学位级别：硕士

三七(Panax notoginseng (Bruk) F.H.Chen)为五加科人参属多年生草本植物,具有活血化瘀、消肿止痛及预防、缓解心脑血管等疾病的作用,是诸多中成药的主要原料。云南省是三七的道地产区,出产的三七占全国市场的95%以上。云南干旱气候的... 详细信息

三七(Panax notoginseng (Bruk) F.H.Chen)为五加科人参属多年生草本植物,具有活血化瘀、消肿止痛及预防、缓解心脑血管等疾病的作用,是诸多中成药的主要原料。云南省是三七的道地产区,出产的三七占全国市场的95%以上。云南干旱气候的频频发生,并对三七种植产生了严重影响,自2014年以来,种植三七受旱面积占总种植面积的80%以上,灌溉支出占总种植成本的10%以上,并随干旱程度的加剧呈逐年上升趋势。但三七种植的灌溉中存在问题,既灌溉的时间、方式和水量等均根据经验进行,不但用水成本增加,而且对珍贵的水资源造成了极大的浪费。科学合理灌溉是节约成本的主要手段,而三七的科学灌溉技术需建立在三七需水规律的理论基础上。因此,本研究以三七为研究对象,以期探究三七不同生长阶段生理代谢响应与皂苷含量的变化规律,探明三七需水规律。本次研究的主要结果如下：1.以三七种子为试验材料,探究了不同水分沙埋处理对三七种子后熟过程生理影响以及聚乙二醇(PEG 6000)模拟干旱胁迫对后熟结束后三七种子抗氧化酶、渗透物质和根系活力等生理指标的影响。结果表明,干旱造成种子脱水越严重,种子活力也越低,MDA含量越高,SOD、POD和CAT酶活性则表现为先增大后减小的趋势,粗脂肪、可溶性总糖和水溶性蛋白含量也基本不变;随着PEG 6000浓度的上升,成熟的三七种子萌发特性指标呈下降趋势,SOD、POD、CAT和APX酶活性呈先增后减趋势,而可溶性总糖和水溶性蛋白以及MDA含量呈上升趋势。综上所述,三七种子后熟对脱水敏感,需注意补水;三七幼苗能够通过调节抗氧化酶系统、渗透胁迫物质及抗逆胁迫信号物质应对干旱胁迫,当PEG 6000浓度超过15%后即对三七萌发产生伤害。2.以三七幼苗为试验材料,研究了聚乙二醇(PEG6000)模拟干旱胁迫对三七30 d苗龄的幼苗各部位SOD、ODCAT等酶活性、渗透物质含量和根系活力指标的影响。结果表明,根和叶中POD、APX活力随PEG 6000处理浓度(0%、2.5%、5.0%和7.5%)和时间(1—3 d)的增加而呈上升趋势,SOD酶在同一处理时间下随PEG 6000浓度的增加呈先升后降趋势,同一处理浓度下则随时间的增加而上升,CAT酶活力表现为在同一处理时间下随PEG 6000浓度的增加而升高,同一处理浓度下则随时间的增加而呈先升后降之趋势;茎中SOD和APX酶活性变化不明显,CAT酶活力随处理时间和浓度的增加而上升;根和叶中MDA、可溶性蛋白和脯氨酸含量以及根系活力随处理浓度和时间的增加而显著上升;处理1d后,根尖H2O2和NO的荧光信号随处理浓度升高而增强。综上,三七幼苗能够通过调节抗氧化酶活性、渗透胁迫物质及抗逆胁迫信号物质以应对干旱胁迫,当PEG 6000浓度超过5%后对三七幼苗产生伤害。3.以2年生三七为试验对象,研究分析25%、40%、55%土壤绝对含水量条件下三七农艺性状、叶片相对含水量、叶绿素含量、光合特性变化以及单体皂苷积累等。结果表明,25%和55%土壤水分含量均会抑制三七叶面积、花茎、花幅的增长,推迟花期,干旱胁迫下须根数上升,水渍条件下须根数下降。随着干旱和水渍时间延长,叶片相对含水量分别上升和下降,叶绿素含量下降,净光合速率、蒸腾速率、气孔导度均下降,胞间C02上升;除花外,主根、剪口和叶的可溶性总糖和蛋白积累量均上升;各部位单体皂苷含量也有变化。综上所述,花期三七的最适水分条件为40%土壤绝对含水量,此时农艺形状最优,光合速率最高,也有利于单体皂苷积累。4.以3年生三七为试验对象,研究分析了PEG 6000模拟干旱胁迫对三七叶片抗氧化酶系统、单体皂苷含量与叶片皂苷合成关键基因表达量的影响。结果表明,除对照以外,相同时间下随着PEG浓度的上升和相同PEG浓度下随着时间的增加三七叶片的SOD、POD、CAT和APX酶活性均成先增后减趋势。2.5%浓度下抗氧化酶均有最大酶活性,故本次试验用浓度为2.5% PEG 6000处理三七,进行转录组分析、测定叶片皂苷合成基因的相对表达量与叶片单体皂苷含量变化。结果表明随着2.5%的PEG6000(W/V)处理时间的增加萜类和酮类化合物的代谢通路差异表达基因数量先增后减,在12h时差异表达的萜类和酮类化合物的代谢通路基因数最多。2.5% PEG 6000处理12h后三七叶片Rb1、Rb2和Rb3含量最高,处理36 h后Rc含量最高。处理24 h后含量Rbl最低,处理3h后Rb2、Rbc和Rb3含量最低,12h时Rb1+Rc+Rb2+Rb3总和最大,3h时最小。ACAT、HMCAS、PMK和DS的相对表达量均随着处理时间的增加而呈先增后减趋势,GGPS、SE和IPI的相对表达量随处理时间的延长呈先降后升再降的趋势,MDD、HMCAR和MVK相对表达量变化不明显。综上,短时间的PEG 6000模拟干旱对三七叶片皂苷合成与含量有影响,2.5%处理12

关键词：三七抗氧化酶渗透物质农艺性状光合作用皂苷皂苷合成酶

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“官渡粑粑”的视觉形象塑造与文化传播

“官渡粑粑”的视觉形象塑造与文化传播

作者：廖沛然云南艺术学院

学位级别：硕士

研究“官渡粑粑”是对非物质文化遗产的保护、继承、弘扬;“官渡粑粑”是官渡古镇历史文化的沉淀之一,同时也糅合了民俗文化与旅游文化,对“官渡粑粑”的研究也是对官渡古镇历史文化的研究;也是对新时期官渡古镇文化的发展与完善;对“... 详细信息

研究“官渡粑粑”是对非物质文化遗产的保护、继承、弘扬;“官渡粑粑”是官渡古镇历史文化的沉淀之一,同时也糅合了民俗文化与旅游文化,对“官渡粑粑”的研究也是对官渡古镇历史文化的研究;也是对新时期官渡古镇文化的发展与完善;对“官渡粑粑”的研究有助于促进官渡古镇旅游区经济的发展以及昆明市的特色旅游的发展。“官渡粑粑”作为官渡古镇精品旅游项目之一,需要严谨的品牌视觉形象塑造以及系统科学的文化传播方式;对大众消费者而言则需要进行旅游项目的文化宣传、科普、教育,通过视觉的塑造与文化的科普,站在市场和普通消费者的角度、从艺术设计学视觉传达设计专业的学科特点出发加强大众消费者对于“官渡粑粑”的印象。“官渡粑粑”本身具有很高的文化价值和商业价值,本论文中关于“官渡粑粑”的相关资料都是经过严格的资料收集以及现场采访、拍摄、录音等,具有客观性以及历史价值。“官渡粑粑”作为非物质文化遗产项目它具有浓厚的地域民族特色,深受昆明本地居民以及外来旅游者的喜爱,通过一代又一代人的传承、经营至今,它所取得的历史、经济、文化价值是无法估量的。“官渡粑粑”也是官渡古镇历史发展的见证,也是官渡古镇居民的物质以及精神生活的重要组成部分,因此我们要不断地把“官渡粑粑”开发好,利用好,保护好,让它在新世纪里更好地发挥社会效益和经济效益。

关键词：官渡粑粑视觉形象设计文化传播

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高校“体尖生”现象的研究与对策

成都体育学院学报 1999年第2期25卷 87-89页

作者：廖沛然艾泽秀四川联合大学成都体育学院

１９８６－１９８７年间，国家体委相继发出一系列文件，在全国５０余所高等学校内试办高水平运动队，力争在普通高校内出“世界冠军”，拿“奥运金牌”，于是各个高校在以后的招生、入学、训练中，根据自己的实际情况，制定自己的政策... 详细信息

１９８６－１９８７年间，国家体委相继发出一系列文件，在全国５０余所高等学校内试办高水平运动队，力争在普通高校内出“世界冠军”，拿“奥运金牌”，于是各个高校在以后的招生、入学、训练中，根据自己的实际情况，制定自己的政策，把拿“世界冠军”、“奥运金牌”纳...

关键词：高校体育尖子学生管理训练

岗梅药材重金属生物可给性及其人体健康风险评价

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生态毒理学报 2022年第2期17卷 402-412页

作者：李韵雪闵远洋麦晋贤韩正洲马庆黄煜权廖沛然杨全广东药科大学中药学院广州510006 国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广州510006 华润三九医药股份有限公司深圳518110

研究10个不同批次及产地的岗梅药材中重金属铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)和铜(Cu)的含量、生物可给性及转移率,并应用靶标系数危害法(THQ)评估5种重金属的健康风险。样品经湿法消解后,用原子荧光光度法和原子吸收分光光度法进行检测... 详细信息

研究10个不同批次及产地的岗梅药材中重金属铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)和铜(Cu)的含量、生物可给性及转移率,并应用靶标系数危害法(THQ)评估5种重金属的健康风险。样品经湿法消解后,用原子荧光光度法和原子吸收分光光度法进行检测。岗梅药材中存在镉和铅超标现象,超标率镉为80%、铅为100%;汞、砷和铜均未超标;岗梅药材水煎液5种重金属含量均未超过标准,5种重金属很少溶于水煎液;10批次岗梅药材重金属生物可给性均<100%,均未完全溶出,安全风险较低;10批次岗梅药材及水煎液重金属(铜、砷、铅、汞和镉)THQ(成人、儿童)值均<1。岗梅重金属对人体健康造成的影响不明显。通过岗梅重金属生物可给性与风险评估模型,评估了岗梅药材及其煎煮液重金属安全风险,发现实验所用岗梅样品重金属均处于安全范围内。如此可见,中药材重金属超标问题不能一刀切,应考虑每个中药材的特点来制定相应合理的重金属限量标准。

关键词：重金属岗梅生物可给性 THQ 体外试验

起伏地表QR径向基函数有限差分及其在弹性波逆时偏移中的应用

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地球物理学报 2024年第3期67卷 1181-1207页

作者：段沛然谷丙洛李振春李青阳中国石油大学(华东)地球科学与技术学院青岛266580 深层油气重点实验室青岛266580 中国石油长庆油田分公司勘探开发研究院西安710018

弹性波逆时偏移不受倾角和偏移孔径的限制,能够实现任意复杂构造的高精度多波成像,是目前最精确的多分量资料偏移成像方法之一.逆时偏移算法的核心是波场延拓,传统波场延拓以水平基准面为边界条件,基于固定采样步长进行规则网格剖分,采... 详细信息

弹性波逆时偏移不受倾角和偏移孔径的限制,能够实现任意复杂构造的高精度多波成像,是目前最精确的多分量资料偏移成像方法之一.逆时偏移算法的核心是波场延拓,传统波场延拓以水平基准面为边界条件,基于固定采样步长进行规则网格剖分,采用阶梯近似法处理起伏地表和复杂构造界面时会产生台阶散射,严重影响起伏地表复杂构造的成像精度.基于无网格节点模型,定量分析了弹性波模拟中径向基函数有限差分法的频散关系和稳定性条件.基于此,提出一种基于QR径向基函数的高精度有限差分方法,并提出一种优化的起伏地表自适应节点剖分方法,推导了精确的无网格自由边界条件和弹性波无网格混合吸收边界条件,形成了新的基于无网格的起伏地表弹性波数值模拟方法.此外,本文将此无网格径向基函数有限差分方法应用于精确的纵横波场矢量分解公式,实现了起伏地表弹性波逆时偏移成像.通过对高斯山丘模型,起伏凹陷模型和起伏地表Marmousi-2模型进行数值试算,验证了本文方法的有效性和可行性.

关键词：起伏地表无网格径向基函数有限差分自由边界弹性波逆时偏移

三七幼苗对聚乙二醇(PEG 6000)模拟干旱胁迫的生理响应研究

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中国中药杂志 2015年第15期40卷 2909-2914页

作者：廖沛然崔秀明杨野李子唯葛进王承潇杨晓艳刘大会昆明理工大学生命科学与技术学院昆明市道地药材可持续发展利用重点实验室云南昆明650500 云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650231

以三七幼苗(30 d苗龄)为试验材料,研究了聚乙二醇(PEG 6000)模拟干旱胁迫对其各部位抗氧化酶、渗透物质和根系活力等生理指标的影响。结果表明,根和叶中POD,APX活力随处理浓度(PEG 6000 0,2.5%,5.0%,7.5%)和时间(1,2,3 d)的增加而不断上... 详细信息

以三七幼苗(30 d苗龄)为试验材料,研究了聚乙二醇(PEG 6000)模拟干旱胁迫对其各部位抗氧化酶、渗透物质和根系活力等生理指标的影响。结果表明,根和叶中POD,APX活力随处理浓度(PEG 6000 0,2.5%,5.0%,7.5%)和时间(1,2,3 d)的增加而不断上升,SOD则表现为在同一处理时间下随处理浓度的增加而先升后降,同一处理浓度下则随处理时间的延长而上升,CAT活性表现为在同一处理时间下随处理浓度的增加而增加,同一处理浓度下则随处理时间的延长而呈先升高后降低的趋势;茎中SOD,APX活性变化不明显,CAT活性随处理时间和浓度的增加而升高;根和叶中MDA、可溶性蛋白和脯氨酸含量及根系活力随处理浓度的升高和处理时间的延长而显著升高;处理1 d后,根尖H2O2和NO荧光信号随处理浓度的升高而增强。综上所述,三七幼苗能够通过调节抗氧化酶系统、渗透胁迫物质及抗逆胁迫信号物质应对干旱胁迫,当PEG6000超过5.0%(即溶液水势为-0.50 MPa)时可对三七幼苗产伤害,应及时补水抗旱。

关键词：三七干旱胁迫抗氧化酶渗透物质根系活力信号物质

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三七对镉胁迫的生理响应及富集特性研究

中国中药杂志 2015年第15期40卷 2903-2908页

作者：李子唯杨野崔秀明廖沛然葛进王承潇杨晓艳刘大会昆明理工大学生命科学与技术学院昆明市道地药材可持续发展利用重点实验室云南昆明650500 云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650231

以二年生三七为试验材料,水培条件下研究了镉胁迫(0,2.5,5,10μmol·L-1)对三七抗氧化酶系统和光合参数的影响及三七对镉的吸收分配规律。结果表明:2.5μmol·L-1镉处理可诱导SOD,POD,APX等酶活性的升高,10μmol·L-1镉处理则对SOD,POD,... 详细信息

以二年生三七为试验材料,水培条件下研究了镉胁迫(0,2.5,5,10μmol·L-1)对三七抗氧化酶系统和光合参数的影响及三七对镉的吸收分配规律。结果表明:2.5μmol·L-1镉处理可诱导SOD,POD,APX等酶活性的升高,10μmol·L-1镉处理则对SOD,POD,APX,CAT均产生抑制作用;镉处理对三七各部位CAT活性均具有抑制作用;三七净光合速率,蒸腾速率,气孔导度均随镉处理浓度的升高而降低,胞间CO2浓度则呈先下降后上升的趋势;三七各器官镉含量表现为须根>剪口>主根>叶片>茎;叶,茎,剪口,须根,主根镉富集系数均随镉处理浓度的升高而降低;各器官中镉含量与迁移系数均随镉处理浓度的升高而上升。综上所述,镉胁迫可对三七抗氧化酶系统和光合系统产生影响,三七对镉具有富集作用,应合理选择三七种植基地以减少对镉的吸收,合理选取三七入药部位,以降低镉摄入风险。

关键词：三七镉抗氧化酶光合参数富集系数迁移系数