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N-花生四烯酸氨基乙醇通过CB1受体及脂筏介导抑制结肠癌细胞的生长

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中华肿瘤杂志 2011年第4期33卷 256-259页

作者：廖宇圣吴杰王萍张妲武汉市中心医院消化内科 430014

目的研究内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇（AEA）对结肠癌细胞系CaCo-2增殖及凋亡的影响，阐明CBl受体和脂筏所起的作用，进一步明确大麻素系统在结肠癌发生、发展中的作用及其分子机制。方法分别以不同浓度的AEA、AEA＋SRl41716A（CB... 详细信息

目的研究内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇（AEA）对结肠癌细胞系CaCo-2增殖及凋亡的影响，阐明CBl受体和脂筏所起的作用，进一步明确大麻素系统在结肠癌发生、发展中的作用及其分子机制。方法分别以不同浓度的AEA、AEA＋SRl41716A（CBI受体拮抗剂）、AEA＋AM630（CB2受体拮抗剂）和AEA甲基-B-环糊精（MCD，脂筏的耗竭剂）孵育结肠癌细胞CaCo-2。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖活性，annexinVPE-7AAD双染流式细胞术检测细胞的凋亡，利用Westernblot方法检测CBI、CB2、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）和caspase-3蛋白的表达。结果AEA呈剂量依赖性地抑制结肠癌细胞CaCo-2的增殖，5、10、20、40μmol／I。AEA的抑制率分别为（21．52±0．45）％、（42．16±0．21）％、（73．64±0．73）％和（83．28±0．71）％。SRl41716A和MCD均能拮抗AEA所导致的增殖抑制效应。20μmol／LAEA、20μmol／LAEA＋10μmoL／LSR141716A及20μmol／LAEA＋1mmol／LMCD的细胞增殖抑制率分别为（73．64±0．73）％、（16．15±0．75）％和（12．58±0．63）％。流式细胞术检测结果照示，AEA可致CaCo-2细胞凋亡，H只有MCD能有效地拈抗AEA所致的CaCo-2细胞凋亡。对照组、20μmol／LAEA组和20μmol／LAEA＋1mmol／LMCD组的细胞凋亡率分别为（2．95±0．73）％、（39．61±0．73）％和（14．10±0．64）％。Western blot检测结果显示，CB1、CB2、p-AKT及caspase-3蛋白在CaCo-2细胞中均有表达。AEA可抑制p-AKT的表达，促进caspase－3蛋白的表达，这两种效应均能被MCD拮抗。SR141716A能拮抗AEA对p-AKT蛋白表达的抑制作用。结论内源性大麻素AEA可以有效地抑制结肠癌细胞CaCo-2的增殖并促进其凋亡，其抑制增殖的效应通过CBl受体和脂筏介导，促凋亡效应通过脂筏介导。大麻素系统在结肠癌的发生、发展中起重要作用，其中脂筏尤为关键。

关键词： N-花生四烯酸氨基乙醇结肠肿瘤 CaCo-2细胞脂筏 CB1

BMP4对胃癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制

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山东医药 2017年第8期57卷 38-40页

作者：马松林张姮廖宇圣徐丹吴杰华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院武汉430014

目的探讨骨形态发生蛋白4(BMP4)在胃癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及其可能机制。方法传代培养胃癌细胞MGC-803,随机分为BMP4组、anti-BMP4组和对照组。BMP4组、anti-BMP4组分别加入基因重组BMP4、anti-BMP4抗体,对照组加入等量阴性血... 详细信息

目的探讨骨形态发生蛋白4(BMP4)在胃癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及其可能机制。方法传代培养胃癌细胞MGC-803,随机分为BMP4组、anti-BMP4组和对照组。BMP4组、anti-BMP4组分别加入基因重组BMP4、anti-BMP4抗体,对照组加入等量阴性血清。培养48 h,分别取三组细胞,检测细胞迁移能力(细胞划痕实验)、侵袭能力(Transwell小室法),采用qRT-PCR法、Western blotting法检测Snail mRNA和蛋白表达。结果 BMP4组划痕愈合率为(80.6±7.3)%,anti-BMP4组为(43.2±2.6)%,对照组为(39.9±1.7)%;BMP4组侵袭细胞数为(83.2±5.3)个,anti-BMP4组为(49.7±3.1)个,对照组为(46.9±4.6)个;BMP4组划痕愈合率、侵袭细胞数均明显高于anti-BMP4组和对照组(P均0.05)。BMP4组Snail mRNA的相对表达量为4.3±0.20,anti-BMP4组为1.4±0.23,对照组为1.0±0.17;BMP4组Snail蛋白的相对表达量为5.3±0.59,anti-BMP4组为1.9±0.29,对照组为2.1±0.17;BMP4组Snail mRNA和蛋白的相对表达量均明显高于anti-BMP4组、对照组(P均0.05)。结论 BMP4能促进胃癌细胞的迁移及侵袭,其机制可能与上调Snail表达有关。

关键词：胃癌骨形态发生蛋白4 细胞迁移细胞侵袭

FAM96A在人肝癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

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安徽医科大学学报 2018年第4期53卷 630-634页

作者：廖宇圣张姮黄曼玲田俊华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院消化内科武汉430014 华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系武汉430030

目的检测96序列相似的家庭成员A(FAM96A)在人肝癌组织中的表达及其与肝癌生物学特征的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法检测FAM96A蛋白在肝癌组织和癌旁组织、Hep G2细胞和L02细胞中的mRNA及蛋... 详细信息

目的检测96序列相似的家庭成员A(FAM96A)在人肝癌组织中的表达及其与肝癌生物学特征的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法检测FAM96A蛋白在肝癌组织和癌旁组织、Hep G2细胞和L02细胞中的mRNA及蛋白表达量,比较其差异,并分析FAM96A蛋白表达差异与肝癌临床病理特征之间的关系。结果 Real-time PCR检测结果显示,FAM96A在肝癌组织中的mRNA表达低于癌旁组织(t=21.773,P0.05)。结论 FAM96A在人肝癌组织中表达显著下降,其表达水平与肝癌的发生发展、侵袭转移密切相关。

关键词： 96序列相似的家庭成员A 肝癌表达侵袭转移临床意义

长链非编码RNA SNHG16在胰腺癌中的表达及功能

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华中科技大学学报（医学版） 2020年第1期49卷 11-16页

作者：王剑马松林周婷婷廖宇圣华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院消化内科武汉430014

目的探讨长链非编码RNA SNHG16(SNHG16)在胰腺癌中的表达及其功能。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测SNHG16在46例胰腺癌癌组织和癌旁组织中的表达。采用卡方检验分析其表达水平与临床病理参数的相关性。Kaplan-Meier生存分析比... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA SNHG16(SNHG16)在胰腺癌中的表达及其功能。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测SNHG16在46例胰腺癌癌组织和癌旁组织中的表达。采用卡方检验分析其表达水平与临床病理参数的相关性。Kaplan-Meier生存分析比较SNHG16表达水平不同的患者生存率差异。qRT-PCR检测SNHG16在4种胰腺癌细胞系及正常胰腺导管上皮细胞系中的表达。在胰腺癌细胞系AsPC-1中敲低SNHG16表达,采用活细胞计数(CCK-8)和流式细胞术分别测定细胞增殖和凋亡水平,Transwell实验测定细胞侵袭能力,TOP/FOP闪光荧光素酶报告系统检测Wnt/β-Catenin信号激活状态,蛋白印迹法检测c-myc、β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果胰腺癌癌组织和细胞系中SNHG16表达显著上调(均P<0.01)。SNHG16高表达与患者肿瘤分化差、晚期TNM分期和淋巴结转移显著相关(均P<0.05)。SNHG16高表达组患者总生存率显著低于SNHG16低表达患者(P=0.003)。敲低SNHG16表达可显著抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力,并促进细胞凋亡。敲低SNHG16表达可抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活和c-myc、β-catenin和cyclin D1的表达。结论胰腺癌组织中SNHG16的表达上调,其表达水平与胰腺癌预后相关,SNHG16可能通过Wnt/β-catenin通路而促进胰腺癌细胞增殖和侵袭,并抑制凋亡,是胰腺癌潜在分子标志物。

关键词：长链非编码RNA SNHG16 胰腺癌增殖侵袭

FAM96A在人肝癌组织中表达及其对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

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山东医药 2017年第41期57卷 9-11页

作者：廖宇圣张姮黄曼玲田俊华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院武汉430070 华中科技大学同济医学院基础医学院

目的观察96序列相似的家庭成员A(FAM96A)在人肝癌组织中的表达并探讨其对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应及免疫印迹法检测FAM96A蛋白在肝癌组织和癌旁组织、HepG2细胞和L02细胞中的mRNA及蛋... 详细信息

目的观察96序列相似的家庭成员A(FAM96A)在人肝癌组织中的表达并探讨其对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应及免疫印迹法检测FAM96A蛋白在肝癌组织和癌旁组织、HepG2细胞和L02细胞中的mRNA及蛋白表达量。采用脂质体转染法将含人FAM96A全长序列的pc DNA3.1-myc-FAM96A重组质粒转染至HepG2细胞中,取对数生长期的HepG2细胞,24 h后分为FAM96A组和对照组,分别转染pc DNA3.1-myc-FAM96A质粒和pc DNA3.1-vector空白质粒。采用MTT法及流式细胞技术检测两组HepG2细胞增殖活力和凋亡率。结果 FAM96A mRNA在肝癌组织、癌旁组织中的相对表达量分别为0.704±0.178、1.707±0.267,在HepG2细胞、L02细胞中的相对表达量分别为0.627±0.251、1.654±0.285,两者比较,P均<0.05。FAM96A蛋白在肝癌组织中的表达低于癌旁组织、在HepG2细胞中的表达低于L02细胞,P均<0.05。FAM96A组细胞增殖活力低于对照组(P<0.05),FAM96A组、对照组细胞凋亡率分别为33.06%±3.15%、5.08%±0.75%,两组比较,P<0.05。结论 FAM96A在人肝癌组织中表达下降,过表达FAM96A可抑制肝癌细胞增殖且诱导其凋亡。

关键词：肝肿瘤 96序列相似的家庭成员A 细胞增殖细胞凋亡

PI3K、p-AKT及HIF-1α在胰腺癌中的表达及意义

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中国组织化学与细胞化学杂志 2008年第5期17卷 502-506页

作者：廖家智廖宇圣赵秋柯晓煜华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科武汉430030

目的检测PI3K、p-AKT及HIF-1α三种蛋白在胰腺癌组织中的表达并探讨其与临床病理因素的关系及三者之间的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测43例胰腺癌组织、9例胰腺炎组织和8例正常胰腺组织中PI3K、p-AKT及HIF-1α三种蛋白的表达。... 详细信息

目的检测PI3K、p-AKT及HIF-1α三种蛋白在胰腺癌组织中的表达并探讨其与临床病理因素的关系及三者之间的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测43例胰腺癌组织、9例胰腺炎组织和8例正常胰腺组织中PI3K、p-AKT及HIF-1α三种蛋白的表达。结果PI3K、p-AKT的阳性表达主要位于肿瘤细胞胞浆,HIF-1α的阳性表达主要位于细胞核或细胞浆。PI3K、p-AKT及HIF-1α在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为62.79%、67.44%和69.77%,三者均显著高于在正常胰腺组织和慢性胰腺炎组织中的表达,差异有统计学意义(P0.05)。PI3K、p-AKT及HIF-1α三者间的表达呈正相关。结论PI3K、p-AKT及HIF-1α的表达在胰腺癌的生长、浸润转移中起重要作用,PI3K-AKT信号通路激活可能促进HIF-1α的表达。

关键词：胰腺癌 PI3K p-AKT HIF-1α

CCR7在人肝癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

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华中科技大学学报（医学版） 2017年第6期46卷 669-672页

作者：廖宇圣张姮李晖黄曼玲胡美周婷婷吴杰华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院消化内科武汉430070

目的观察趋化因子受体CCR7在肝癌中的表达情况,并探讨CCR7表达水平与临床病理特征的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、免疫印迹(Western blot)及免疫组织化学技术检测CCR7蛋白在肝癌组织和配对癌旁组织、人肝癌细胞H... 详细信息

目的观察趋化因子受体CCR7在肝癌中的表达情况,并探讨CCR7表达水平与临床病理特征的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、免疫印迹(Western blot)及免疫组织化学技术检测CCR7蛋白在肝癌组织和配对癌旁组织、人肝癌细胞HepG2和人正常胎肝细胞L02中的mRNA及蛋白表达量,比较其差异,并分析CCR7蛋白表达水平与肝癌临床病理特征之间的相关性。结果免疫组化检测结果显示CCR7在肝癌组织和癌旁组织中的蛋白表达均定位于细胞质,且CCR7蛋白在癌旁组织与肝癌组织中的阳性表达率分别为24.2%(15/62)和66.1%(41/62),两者差异有统计学意义(χ2=22.013,P0.05)。结论 CCR7在人肝癌组织中表达显著增高,其表达水平与肝癌的发生发展、侵袭转移密切相关。

关键词：趋化因子受体肝癌侵袭转移

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老年胆总管结石内镜下治疗特殊性的临床分析

中华肝胆外科杂志 2011年第9期17卷 781-783页

作者：范彦吴杰黄晓东廖宇圣万悦王爱萍湖北省武汉市中心医院消化内科 430014

胆总管结石在老年人中患病率较高。由于年龄大以及常伴有多种慢性全身性疾病，外科手术风险性明显增加。内镜下治疗胆总管结石具有创伤小、恢复快、并发症少的优点。现将近年我院老年胆总管结石内镜下治疗特殊性的体会报道如下。

关键词：胆总管结石内镜下治疗老年人临床分析慢性全身性疾病手术风险性患病率并发症

Wnt3a对结肠癌SW480细胞增殖的影响及作用机制

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山东医药 2016年第37期56卷 18-20页

作者：马松林张姮廖宇圣徐丹吴杰华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院武汉430014

目的探讨Wnt3a对结肠癌SW480细胞增殖的调控效应及其作用机制。方法将培养好的结肠癌细胞SW480随机分为对照组和Wnt3a组,对照组仅给予DMEM培养基处理,Wnt3a组给予100 ng/m L Wnt3a培养。用MTT法检测细胞增殖情况,计算相对活细胞百分比;... 详细信息

目的探讨Wnt3a对结肠癌SW480细胞增殖的调控效应及其作用机制。方法将培养好的结肠癌细胞SW480随机分为对照组和Wnt3a组,对照组仅给予DMEM培养基处理,Wnt3a组给予100 ng/m L Wnt3a培养。用MTT法检测细胞增殖情况,计算相对活细胞百分比;用平板克隆形成实验检测细胞克隆形成率(PE);用流式细胞术检测细胞周期分布;用Western blotting法检测细胞内醛脱氢酶1B1(ALDH1B1)蛋白表达,RT-PCR技术检测ALDH1B1 mRNA表达。结果 Wnt3a诱导24、48、72 h,Wnt3a组相对活细胞百分比高于对照组(P均<0.05)。Wnt3a诱导7 d,Wnt3a组PE高于对照组(P<0.05)。Wnt3a诱导24 h,Wnt3a组G1期细胞百分比低于对照组,G2期细胞百分比高于对照组(P均<0.05)。Wnt3a诱导48 h,Wnt3a组ALDH1B1蛋白、mRNA相对表达量高于对照组(P均<0.05)。结论 Wnt3a可能通过诱导ALDH1B1高表达促进结肠癌SW480细胞增殖。

关键词：结肠肿瘤 SW480细胞 Wnt3a 醛脱氢酶1B1 细胞增殖