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作者：廖作庄广西医科大学

学位级别：硕士

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的甲基化结构修饰,测定EGCG衍生物对人肝癌多药耐药细胞的逆转活性,从EGCG衍生物中初步筛选出低毒、高效、稳定的MDR逆转剂。方法:（1）以碘甲烷为甲基供体,N为保护气,采用化学合成的方法研究... 详细信息

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的甲基化结构修饰,测定EGCG衍生物对人肝癌多药耐药细胞的逆转活性,从EGCG衍生物中初步筛选出低毒、高效、稳定的MDR逆转剂。方法:（1）以碘甲烷为甲基供体,N为保护气,采用化学合成的方法研究EGCG的甲基化结构修饰,并通过NMR对反应产物进行结构鉴定。（2）甲基四唑蓝（MTT）法检测敏感细胞株BEL-7402和耐药细胞株BEL-7402/5-FU对多种化疗药物的IC,确定相应耐药倍数。（3）甲基四唑蓝（MTT）法检测EGCG衍生物对肝癌细胞及其耐药株的毒性作用,根据LOGIT软件求得10%的细胞生长受到抑制所需药物浓度(IC)。选取低于IC的EGCG浓度进行逆转耐药性浓度依赖实验。（4）荧光双标记荧光显微镜观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡并计算凋亡率。结果:（1）完成EGCG的甲基化结构修饰,并从反应产物中分离纯化出4个EGCG甲基化衍生物,确证了其化学结构。（2）5-FU诱导培养的BEL7402/5-FU细胞对5-FU具有明显的耐药性,耐药指数为49.4,对ADM、VCR有交叉抗药性,对柔红霉素、阿糖胞苷抗药性不明显。（3）EGCG和EGC对肝癌细胞生长有一定抑制作用。随着浓度增加,肿瘤细胞存活率逐步降低。对BEL7402 IC分别为964.1μmol·L和731.0μmol·L。对BEL7402/5FU IC分别为2343.7和1585.3μmol·L;IC分别为74.4μmol·L和87.2μmol·L。1a、2a、3a和4a对肝癌细胞生长有一定抑制作用。随着浓度增加,肿瘤细胞存活率逐步降低。对BEL7402 IC分别为2121.9、89.4、152.1、164.0μmol·L;对BEL7402/5FU IC分别为648.6、119.5、272.4、185.6μmol·L,IC分别为76.8、19.5、56.8、8.8μmol·L。1b、2b和3b对肝癌细胞生长有一定抑制作用。随着浓度增加,肿瘤细胞存活率逐步降低。对BEL7402 IC分别为144.2、87.1、476.0μmol·L;对BEL7402/5FU IC分别为235.8、116.4、420.7μmol·L,IC分别为28.1、19.0、46.5μmol·L。4b对肿瘤细胞生长无抑制作用。1c、2c、3c和4c对肝癌细胞生长有一定抑制作用。随着浓度增加,肿瘤细胞存活率逐步降低。对BEL7402 IC分别为4.17、127.4、101.8、177.2μmol·L;对BEL7402/5FU IC分别为6.20、131.2、147.6、256.4μmol·L。对BEL7402/5FU IC分别为0.30、6.8、17.3、43.4μmol·L。选取IC以下浓度药物,EGCG(65.5μmol·L)、EGC(81.7μmol·L)、1a(105.3μmol·L)、2a(23.7μmol·L)、3a(48.6μmol·L)、4a(8μmol·L)、1b(11.0μmol·L)、2b(7.4μmol·L)、3b(46.1μmol·L)、2c(6.8μmol·L)、3c(14.8μmol·L)、4c(50μmol·L)联合5-FU作用,使肝癌耐药细胞株IC下降。对BEL-7402/5-FU细胞株逆转倍数分别为5.4、2.7、2.9、2.9、4.1、2.3、5.4、3.4、7.6、4.8、2.4、4.6倍。与单独应用5-FU相比,3a(48.6μmol·L)、1b(11.0μmol·L)、3b(46.1μmol·L)、2c(6.8μmol·L)、4c(50μmol·L)联合5-FU作用IC下降明显;EGC(81.7μmol·L)、1a(105.3μmol·L)、2a(23.7μmol·L)、4a(8μmol·L)、2b(7.4μmol·L)、3c(14.8μmol·L)联合5-FU作用IC下降不明显。其中3b(46.1μmol·L)的逆转效率比阳性对照剂EGCG强,1b(11.0μmol·L)的逆转效率与阳性对照剂EGCG相似。（4）药物作用后荧光显微镜下可见肝癌细胞AnnexinV-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色。凋亡检测结果显示,联合用药组细胞凋亡率均高于单独用5-FU组。与EGCG对照组凋亡率（30.17±2.92）%相比,2a(22.7μmol·L)、4a(8.0μmol·L)、1b(28.1μmol·L)、2b(7.4μmol·L)、3b ( 44.3μmol·L )、2c(6.8μmol·L)、4c ( 40.0μmol·L )联合5-FU(7692.3μmol·L)凋亡

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯衍生物逆转肝癌细胞多药耐药

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表没食子儿茶素没食子酸酯类似物的合成及体外逆转肝癌多药耐药性的研究(英文)

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中国天然药物 2011年第4期9卷 274-279页

作者：欧冰凝廖作庄梁钢唐安洲广西医科大学药学院南宁530021 广西医科大学第一附属医院耳鼻喉科南宁530021

目的:评价表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)类似物逆转肝癌多药耐药性及分析其构效关系。方法:合成EGCG类似物并通过1H,13CNMR和二维核磁共振确定结构;首次用MTT法研究表没食子儿茶素(EGC)及EGCG类似物对正常肝细胞LO2,肝癌细胞BEL-7402... 详细信息

目的:评价表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)类似物逆转肝癌多药耐药性及分析其构效关系。方法:合成EGCG类似物并通过1H,13CNMR和二维核磁共振确定结构;首次用MTT法研究表没食子儿茶素(EGC)及EGCG类似物对正常肝细胞LO2,肝癌细胞BEL-7402,和耐药肝癌细胞BEL-7402/5-FU的细胞毒性,及对BEL-7402/5-FU的逆转作用。结果:共合成并纯化得到4个化合物:5,7,3′,4′,5′,3″,4″,5″-八乙酰基-EGCG(AcEGCG),5,7,3′,4′,3″,4″,5″-七乙酰基-ECG(AcECG),7,3′,4′,5′,3″,4″,5″-七乙酰基-EGCG(Ac-A)和3′,4′,5′,3″,4″,5″-六乙酰基-EGCG(Ac-B),其中Ac-A和Ac-B的结构首次被报道。在细胞毒方面,化合物AcECG,Ac-A,Ac-B和EGC对BEL-7402和BEL-7402/5-FU细胞的细胞毒都比EGCG增强,而AcEGCG对BEL-7402/5-FU的细胞毒比EGCG的减弱。在逆转多药耐药性作用方面,AcEGCG和AcECG,特别是AcEGCG对耐药肝癌细胞BEL-7402/5-FU的逆转作用比同浓度的EGCG显著增强(P<0.05);而Ac-A和Ac-B对BEL-7402/5-FU基本无逆转作用,可认为EGCG分子中的羟基一旦乙酰化,全部乙酰化产物比部分乙酰化产物有更强的逆转BEL-7402/5-FU多药耐药作用;EGC基本无逆转BEL-7402/5-FU多药耐药作用。结论:EGCG分子中的没食子酰基是逆转BEL-7402/5-FU多药耐药作用的活性基团;AcEGCG从结构上看比EGCG更稳定,逆转肝癌多药耐药作用也较EGCG增强,因此AcEGCG在逆转肝癌多药耐药作用方面比EGCG更具潜力。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯表没食子儿茶素类似物合成逆转多药耐药性

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肉桂多酚的药理作用及其机制研究进展

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右江医学 2018年第3期46卷 359-362页

作者：廖作庄广西医科大学第二附属医院药学部南宁530007

肉桂（cinnamomi cortex）,原名菌桂、牡桂,为樟科常绿乔木植物肉桂（cittrlalllolltum cassia presl）的干燥树皮,具有悠久的用药历史。其性味辛、甘,大热,归肾、脾、心、肝经,具有补火助阳、散寒止痛、温通经脉的功效,主要分布于我国... 详细信息

肉桂（cinnamomi cortex）,原名菌桂、牡桂,为樟科常绿乔木植物肉桂（cittrlalllolltum cassia presl）的干燥树皮,具有悠久的用药历史。其性味辛、甘,大热,归肾、脾、心、肝经,具有补火助阳、散寒止痛、温通经脉的功效,主要分布于我国广西、广东、云南等地。

关键词：肉桂多酚药理作用作用机制

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白花蛇舌草注射液逆转人肝癌细胞BEL-7402/5-FU的多药耐药作用

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西安交通大学学报（医学版） 2015年第4期36卷 554-557页

作者：廖作庄韦丽美徐灵源梁钢右江民族医学院附属医院药剂科广西百色533000 百色市人民医院人事科广西百色533000 广西医科大学药学院药理学教研室广西南宁530021

目的研究白花蛇舌草注射液对BEL-7402/5-FU细胞多药耐药的逆转作用,并探讨其作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对BEL7402/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测细胞凋亡;ELISA双抗体一步夹心法测定酪氨酸激酶含量。... 详细信息

目的研究白花蛇舌草注射液对BEL-7402/5-FU细胞多药耐药的逆转作用,并探讨其作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对BEL7402/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测细胞凋亡;ELISA双抗体一步夹心法测定酪氨酸激酶含量。结果无毒剂量的白花蛇舌草注射液(6μL/mL)联合5-FU对BEL-7402/5-FU细胞的IC50为636.5μmol/L,比单独应用5-FU的IC50(1 071.6μmol/L)明显下降,逆转倍数为1.68;加白花蛇舌草注射液后,5-FU对BEL-7402/5-FU细胞的凋亡比例明显增加,且显著下调BEL-7402/5-FU细胞的酪氨酸激酶含量。结论白花蛇舌草注射液对BEL-7402/5-FU细胞的多药耐药性具有一定的逆转作用,其机制可能与下调酪氨酸激酶有关。

关键词：白花蛇舌草肝癌细胞多药耐药凋亡酪氨酸激酶

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木棉花提取物对H_2O_2诱导血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

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中药药理与临床 2017年第6期33卷 69-72页

作者：卢秋玉陈晓宇唐爱存申庆荣廖作庄广西壮族自治区人民医院南宁530021 广西中医药大学第一附属医院南宁530023 广西医科大学第二附属医院药剂科南宁530007

目的:探讨木棉花提取物对过氧化氢(H_2O_2)所诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECS)氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVECS,采用MTT法检测木棉花提取物对正常HUVECS细胞毒性作用;给予不同浓度木棉花提取物(15,30,60 mg/L)... 详细信息

目的:探讨木棉花提取物对过氧化氢(H_2O_2)所诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECS)氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVECS,采用MTT法检测木棉花提取物对正常HUVECS细胞毒性作用;给予不同浓度木棉花提取物(15,30,60 mg/L)预处理保护HUVECS 24 h后,采用0.5 mmol/L H_2O_2诱导损伤3 h建立氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞增殖活力,ELISA法测定细胞上清液中一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)含量和谷胱甘肽-S转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性;同时检测细胞中丙二醛(MDA)的含量及过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;采用流式细胞仪检测活性氧(ROS)和细胞内钙离子含量。结果:木棉花提取物对HUVECs细胞无毒性作用;与H_2O_2损伤模型组比较,15、30、60 mg/L剂量组的木棉花提取物能明显提高H_2O_2诱导损伤HUVECs的增殖活力,提高细胞上清液NO含量和SOD、GST活性,降低LDH漏出量;能增强细胞内CAT、GSH-Px的活性,降低MDA水平;同时能减少细胞内ROS表达,下调细胞内钙离子浓度。结论:木棉花提取物对H_2O_2诱导的内皮细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与通过抑制氧化应激、抗过氧化损伤以及清除细胞内ROS,抑制细胞内钙离子介导的细胞凋亡有关。

关键词：木棉花提取物过氧化氢血管内皮细胞氧化应激损伤活性氧

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以就业为导向的药事管理学教学体会

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广州化工 2019年第7期47卷 186-188页

作者：廖作庄广西医科大学第二附属医院广西南宁530007

药事管理学是药学类专业重要的必修课之一,也是国家执业药师考试的四门考试科目之一,现阶段的药事管理学教学主要以传统的讲授式为主,学生学习的兴趣和积极性不高,教学效果不明显。本文以药学就业岗位为基础,将药事管理学教学内容与就... 详细信息

药事管理学是药学类专业重要的必修课之一,也是国家执业药师考试的四门考试科目之一,现阶段的药事管理学教学主要以传统的讲授式为主,学生学习的兴趣和积极性不高,教学效果不明显。本文以药学就业岗位为基础,将药事管理学教学内容与就业方向及特点紧密结合,总结分析药事管理学教学中的心得体会,提出了以就业为导向的药事管理学教学模式,以调动学生学习的积极性,顺利完成预期的教学目标。

关键词：药事管理学教学方法就业导向

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运用PDCA循环提高医院新职工岗前培训效果

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经济师 2019年第5期 261-262页

作者：韦丽美廖作庄广西医科大学第二附属医院人力资源部广西医科大学第二附属医院药学部广西南宁530007

新职工岗前培训是医院提升人力资源质量的重要途径,文章运用柯氏评估模式对新职工岗前培训效果进行评估,并通过PDCA循环管理方法,分析了新职工岗前培训中存在的问题,找到要因,改进方案,解决要因,最终提高了新职工岗前培训效果。

关键词： PDCA循环医院岗前培训效果

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肉桂多酚对链脲佐菌素致糖尿病小鼠的保护作用

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西安交通大学学报（医学版） 2019年第1期40卷 162-166页

作者：廖作庄徐灵源王金妮谭宏棣韦丽美广西医科大学第二附属医院广西南宁530007 右江民族医学院附属医院广西百色533000

目的探讨肉桂多酚对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)致糖尿病小鼠的保护作用及其分子机制。方法建立单剂量STZ 240mg/kg诱导糖尿病小鼠模型,随机分成5组:STZ模型对照组、二甲双胍阳性组(0.3g/kg)及肉桂多酚低、中、高剂量组(0.3、0.6、1... 详细信息

目的探讨肉桂多酚对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)致糖尿病小鼠的保护作用及其分子机制。方法建立单剂量STZ 240mg/kg诱导糖尿病小鼠模型,随机分成5组:STZ模型对照组、二甲双胍阳性组(0.3g/kg)及肉桂多酚低、中、高剂量组(0.3、0.6、1.2g/kg),持续每天灌胃,共14d。并设置正常对照组。末次给药后,血糖试纸测定空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG),生化法测定血清胰淀粉酶含量,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清胰岛素和胰高血糖素浓度,免疫组化法检测胰岛细胞中胰岛素阳性细胞数量,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测胰脏细胞中蛋白激酶B(AKT)及其磷酸化水平。结果与STZ模型对照组小鼠比较,肉桂多酚干预组小鼠的血糖明显降低(P<0.05),血清胰岛素增加而胰高血糖素降低(P<0.05),胰岛细胞中胰岛素阳性细胞显著增加(P<0.05),胰脏细胞中蛋白激酶B(AKT)及其磷酸化水平同时增加(P<0.05),且表现为一定的剂量依赖性。结论肉桂多酚对STZ所致糖尿病小鼠胰脏损害表现出有效的细胞保护作用,其分子机制可能通过调节胰岛细胞AKT信号通路促进胰岛β细胞分泌胰岛,从而发挥降血糖药理活性。

关键词：肉桂多酚链脲佐菌素糖尿病胰岛素 AKT通路

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矮陀陀提取物对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用及机理的初步研究

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中药材 2021年第12期44卷 2928-2931页

作者：陶林吴霜文建文廖作庄苏延旭谭雯雯杨力龙广西医科大学第二附属医院药物临床试验机构办公室广西南宁530007 广西中医药大学第一附属医院药学部广西南宁530007

目的:探讨矮陀陀提取物的体内抗肿瘤作用及相关作用机制。方法:选取SPF级雄性健康昆明种小鼠72只,以12只作为正常对照组,剩余60只建立H_(22)荷瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠按体质量随机分为5组:模型组、环磷酰胺(20 mg/kg)阳性对照组及矮陀陀... 详细信息

目的:探讨矮陀陀提取物的体内抗肿瘤作用及相关作用机制。方法:选取SPF级雄性健康昆明种小鼠72只,以12只作为正常对照组,剩余60只建立H_(22)荷瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠按体质量随机分为5组:模型组、环磷酰胺(20 mg/kg)阳性对照组及矮陀陀低(20 mg/kg)、中(40 mg/kg)、高(80 mg/kg)剂量组,每组12只。环磷酰胺组隔天腹腔注射给药,矮陀陀各组灌胃给药,1次/d,连续14 d。实验结束后称取各组小鼠肿瘤质量计算抑瘤率,采用免疫印迹法(Westen blot)和实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测各组小鼠肿瘤组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及磷酸蛋白激酶(p-Akt)蛋白和mRNA表达;称取免疫脏器质量计算胸腺指数和脾脏指数,采用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血清IL-2、TNF-α水平。结果:与模型组比较,环磷酰胺组和矮陀陀中、高剂量组平均瘤质量显著降低(P<0.01);环磷酰胺组、矮陀陀高剂量组肿瘤组织中PI3K、p-Akt mRNA及蛋白表达显著量降低(P<0.01);矮陀陀各剂量组的胸腺、脾脏指数显著升高(P<0.05或P<0.01),而环磷酰胺组胸腺及脾脏指数显著降低(P<0.01);矮陀陀高剂量组血清IL-2、TNF-α水平显著升高(P<0.01),环磷酰胺组血清IL-2、TNF-α水平显著降低(P<0.01)。结论:矮陀陀醇提取物能在小鼠体内抑制H_(22)移植瘤的生长,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路、上调IL-2、TNF-α水平及增强免疫功能有关。

关键词：矮陀陀 H_(22)移植瘤抗肿瘤免疫功能作用机制

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黑骨藤药理作用研究进展

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右江医学 2014年第3期42卷 361-363页

作者：廖作庄杨凤莲王俊利右江民族医学院附属医院百色533000 右江民族医学院药学院百色533000

黑骨藤（Periploca forrestii Schltr）为萝藦科（Asclepiadaceae）杠柳属（Peri ploca）植物黑龙骨的干燥根或全株,主要分布于我国广西、云南、贵州、四川、西藏等地。一直作为草藤科类治疗风湿最为有效的中草药,有万藤之王的美誉。随... 详细信息

黑骨藤（Periploca forrestii Schltr）为萝藦科（Asclepiadaceae）杠柳属（Peri ploca）植物黑龙骨的干燥根或全株,主要分布于我国广西、云南、贵州、四川、西藏等地。一直作为草藤科类治疗风湿最为有效的中草药,有万藤之王的美誉。随着对其药理作用研究的不断深入,黑骨藤在许多方面表现出了独特的药理活性,现对黑骨藤的药理作用作一简要综述。

关键词：黑骨藤药理作用进展

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