检索结果-南通市图书馆

基于流式细胞技术SARS⁃CoV⁃2假病毒中和试验方法的建立

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病毒学报 2023年第4期39卷 913-922页

作者：张绪磊温莺芬钟可馨邢晓敏庾蕾广州医科大学附属市八医院广州510060

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS⁃CoV⁃2)是新型冠状病毒肺炎感染(Coronavirus disease 2019,COVID⁃19)的致病病毒。面对此类高传播风险及高致病性病毒,常采用复制缺陷型假病毒替代... 详细信息

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS⁃CoV⁃2)是新型冠状病毒肺炎感染(Coronavirus disease 2019,COVID⁃19)的致病病毒。面对此类高传播风险及高致病性病毒,常采用复制缺陷型假病毒替代活病毒用于疫苗及药物的抗病毒活性评估。本研究旨在建立了一种基于流式细胞技术(Flow cytometry,FCM)的高通量中和试验方法。使用HIV⁃1慢病毒骨架蛋白包装系统,将psPAX2、pLVX⁃eGFP、SARS⁃CoV⁃2 S三质粒共转染HEK293T细胞,包装一种带增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,eGFP)的假病毒。通过优化S蛋白密码子序列、采用S蛋白C⁃端氨基酸(Amino acids,AA)截短和包装时间的优化,确定了假病毒包装最适条件。包装假病毒的滴定采用293T⁃hACE2细胞作为感染靶细胞,经流式细胞仪测定eGFP荧光细胞比率即为感染假病毒细胞比率。采用包装的野生型(Wild type,WT)和Omicron假病毒对感染Omicron变异株的COVID⁃19患者血浆抗体中和活性进行了检测。结果显示,12例COVID⁃19患者血浆对SARS⁃CoV⁃2 WT和Omicron假病毒均具有中和作用,平均半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为631.2和139.0(血浆稀释倍数),且对WT株中和活性大于Omicron变异株。研究中我们将建立的中和试验方法与荧光素酶报告基因检测方法(Luciferase assay,LUCA)进行了比较,结果表明建立的FCM方法与常规使用的LUCA法具有同等的敏感性。本研究建立的基于流式细胞技术SARS⁃CoV⁃2假病毒中和试验方法,不需要裂解靶细胞等后续步骤即可直接对细胞进行检测。为疫苗的评估及抗病毒药物的筛选提供了一种高通量方法,同时为抗病毒机制的研究提供了一种手段。

关键词：新型冠状病毒假病毒流式细胞技术荧光素酶 eGFP 血浆抗体

价值共创视角下高校突发事件网络舆情回应有效性分析

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中国延安干部学院学报 2023年第6期16卷 118-127页

作者：张春颜庾蕾天津工业大学经济与管理学院天津西青300387

相关主体的有效回应是应对高校突发事件网络舆情的重要举措。分析突发事件网络舆情的影响因素,探究主体的舆情回应逻辑具有重要现实意义。基于价值共创理论,分别从渠道、透明性、风险感知、回应主体、情绪、个性、共鸣度七个维度对28个... 详细信息

相关主体的有效回应是应对高校突发事件网络舆情的重要举措。分析突发事件网络舆情的影响因素,探究主体的舆情回应逻辑具有重要现实意义。基于价值共创理论,分别从渠道、透明性、风险感知、回应主体、情绪、个性、共鸣度七个维度对28个高校突发事件进行定性比较分析,得出不同要素的六种组合路径,尝试在互动关系中评价高校突发事件网络舆情回应的有效性,以核心条件和内容为依据将其归纳为主体驱动策略、舆情降“热”策略和权威干预策略。

关键词：高校网络舆情回应有效性价值共创定性比较分析

用荧光标记MVR-PCR方法研究中国汉族人群DYF155S1基因座多态性

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Acta Genetica Sinica 2003年第1期30卷 15-19页

作者：庾蕾伍新尧黄艳梅蔡贵庆许传超童大跃中山大学中山医学院法医系广州510089

建立简便、实用的DYF15 5S1基因座基因分型的银染和荧光标记半自动分析方法 ,对中国汉族 15 5个无关男性个体血样本DNA进行分型 ,两种方法分型结果一致。 15 5人共检出 66种等位基因 ,有 3 8个等位基因仅出现 1次。根据图谱中第一条DNA... 详细信息

建立简便、实用的DYF15 5S1基因座基因分型的银染和荧光标记半自动分析方法 ,对中国汉族 15 5个无关男性个体血样本DNA进行分型 ,两种方法分型结果一致。 15 5人共检出 66种等位基因 ,有 3 8个等位基因仅出现 1次。根据图谱中第一条DNA片段及DNA条带数从小至大命名 ,频率最高的为 18和 2 2号等位基因 ,其第一条DNA片段大小为 180bp ,DNA条带数为连续的 16和 17个 ,频率均为 0 0 65。这一位点的基因多样性 (h)为 0 9789。 15 5人中有 2 5人表现为连续DNA谱带中有 1个或 2个DNA条带的丢失 (nullrepeat) ,序列分析证明丢失的DNA条带位置对应于 3型核心序列。结果表明 ,本文建立的分析方法能很好地揭示DYF15 5S1基因座 5′端多态性 ,是目前仅作1次PCR能获得个体Y染色体多态信息较高的技术。用本方法建立的中国汉族人群DYF15 5S1基因座等位基因频率资料 ,为群体遗传学研究及法医学应用提供了基础资料。

关键词：荧光标记MVR-PCR方法中国汉族人群 DYF155S1基因座 MSY1 DNA多态性

广州汉族人群D12S391和D11S554基因座序列变异

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Acta Genetica Sinica 2003年第8期30卷 781-784页

作者：庾蕾伍新尧蔡贵庆区敬华曹露媚中山大学中山医学院法医系广州510080

为研究高度变异的STR基因座核心序列结构 ,对广州汉族人群突变率较高的D12S391和D11S5 5 4基因座等位基因进行了序列分析。结果显示D12S391基因座核心序列结构为 (AGAT) 8～ 17(AGAC) 6～ 10 (AGAT) 0～ 1,其较小片段等位基因 (15～ 18... 详细信息

为研究高度变异的STR基因座核心序列结构 ,对广州汉族人群突变率较高的D12S391和D11S5 5 4基因座等位基因进行了序列分析。结果显示D12S391基因座核心序列结构为 (AGAT) 8～ 17(AGAC) 6～ 10 (AGAT) 0～ 1,其较小片段等位基因 (15～ 18)仅表现为第 1个重复单位 (AGAT)数目的变异 ,而较大片段等位基因 (19～ 2 7) ,可表现为第 2或第 3个重复单位数目的变异。发现有 4种新的等位基因 ,分别命名为 2 2″、2 3″、2 4 和 2 7。D11S5 5 4基因座核心序列结构更复杂 ,有 5种核心序列 ,其中 3种具有相同的基本结构 (AAAGG) (AAAG) 4 (AAAGG) 2～ 3 (AAAG) 13～ 19。其大片段等位基因(2 19～ 2 4 9)核心序列结构中 ,既有四核苷酸重复 ,还有五核苷酸重复 ,以及单个硷基的变异、硷基插入或缺失。两基因座均存在序列异质性。结果表明D12S391和D11S5 5 4基因座属复杂重复类型 ,为其准确分型增加了难度 ,首先需建立相应群体的等位基因分型标准物。

关键词：短串联重复序列序列分析 D12S391基因座 D11S554基因座

中国维吾尔族人群MSY1(DYF155S1)基因座多态性及其结构特点

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遗传 2004年第1期26卷 23-30页

作者：黄艳梅庾蕾童大跃蔡贵庆伍新尧中山大学中山医学院法医系广州510080 深圳市疾病预防控制中心深圳518020

应用荧光标记MVR PCR、Amp FLP与DNA序列分析技术等检测106例中国维吾尔族人群无关男性个体血纱样品,揭示了中国维吾尔族人群Y特异的小卫星MSY1(DYF155S1)基因座5′和3′端多态性及其基因结构特点。DYF155S1基因座的多态性表现为3个方面... 详细信息

应用荧光标记MVR PCR、Amp FLP与DNA序列分析技术等检测106例中国维吾尔族人群无关男性个体血纱样品,揭示了中国维吾尔族人群Y特异的小卫星MSY1(DYF155S1)基因座5′和3′端多态性及其基因结构特点。DYF155S1基因座的多态性表现为3个方面:(1)长度多态性;(2)5′端多态性;(3)3′端多态性。106例无关个体共检出37个不同长度的片段,5′端检出68个类型,3′端检出23个类型。综合这3方面多态性,106例个体间没有相同,其基因多样性(h)超过0.9999。DNA序列分析发现该基因座5′端表现有7种模块结构,3′端有2种模块结构。DYF155S2片段缺失率约为4.7%。MVR PCR、Amp FLP与DNA序列分析技术结合起来可以更充分地揭示人群Y染色体特异的小卫星MSY1(DYF155S1)基因座多态性,并提出命名方式,从而为人类遗传学及法医学研究提供了有用的方法和基础资料。

关键词：中国维吾尔族人群 MSY1(DYF155S1)基因座多态性结构特点

内皮型一氧化氮合酶基因A-922G多态性与缺血性脑卒中易感性的关联研究

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卫生研究 2008年第1期37卷 1-3,7页

作者：程锦泉刘建平张仁利庾蕾彭绩韩胜红聂绍发深圳市疾病预防控制中心深圳518020 深圳市慢性病防治院华中科技大学同济医学院

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因5’侧翼区-922A/G多态性与缺血性脑卒中关系。方法采用1∶1配比病例-对照研究设计,选择深圳市两家综合性医院的309例缺血性脑卒中患者为病例组,同时选择年龄、性别匹配的309例健康者作为对照。采... 详细信息

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因5’侧翼区-922A/G多态性与缺血性脑卒中关系。方法采用1∶1配比病例-对照研究设计,选择深圳市两家综合性医院的309例缺血性脑卒中患者为病例组,同时选择年龄、性别匹配的309例健康者作为对照。采用TaqmanMGB探针荧光定量PCR技术检测-922A/G变异,同时按照流行病学方法设计调查表进行问卷调查。结果-922A/G变异基因型（AA、AG、GG）频率缺血性脑族中组分别为78.96%、17.80%和3.24%;对照组基因型分布频率分别为85.11%、13.59%和1.29%。病例组的G等位基因频率（12.14%）明显高于对照组（8.09%）（P=0.018）;携带至少一个G等位基因的基因型个体患缺血性脑卒中的风险为AA基因型的1.523倍（95%CI：1.005-2.309）;条件logistic回归分析显示,在调整吸烟、饮酒、腰臀比、体重指数和高血压病史等因素的影响后,A-922G变异对缺血性脑卒中仍具有影响,OR为2.156,95%CI：1.081-4.299。结论eNOS基因-922A/G多表性可能与缺血性脑卒中的易感性有关联。

关键词：缺血性脑卒中一氧化氮合酶基因多态性

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血型定型试剂效价快速检测法

药物分析杂志 1998年第S1期18卷 90-92页

作者：薛绍礼庾蕾王晓琴熊江霞姚余有李平安徽医科大学分子生物学研究所

低剂量三氯乙烯诱导人正常肝细胞损伤耐受差异表达基因的研究

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卫生研究 2005年第4期34卷 403-406页

作者：卫秦芝庄志雄袁建辉黄海燕李习艺杨晓华庾蕾中山大学公共卫生学院广州510080 深圳市疾病预防控制中心

目的寻找低剂量三氯乙烯(TCE)诱导人正常肝细胞(L02)损伤耐受差异表达的基因。方法参照本实验室用MTT法所得的TCE对L02毒性剂量-效应关系,选择5μmolL的三氯乙烯为低剂量,40μmolL为高剂量,按以下方式对细胞进行染毒:空白对照、低剂量... 详细信息

目的寻找低剂量三氯乙烯(TCE)诱导人正常肝细胞(L02)损伤耐受差异表达的基因。方法参照本实验室用MTT法所得的TCE对L02毒性剂量-效应关系,选择5μmolL的三氯乙烯为低剂量,40μmolL为高剂量,按以下方式对细胞进行染毒:空白对照、低剂量、高剂量、损伤耐受组(先用低剂量刺激24小时,再用高剂量刺激6小时),然后用荧光差异显示PCR(FluoroDDPCR)寻找不同方式刺激差异表达的基因,并对差异表达基因进行克隆、鉴定。结果按方法所示的方式处理细胞,处理完毕后提取各组细胞总RNA,进行荧光差异显示PCR,找到51个差异条带。对其中的11个差异条带进行克隆鉴定同源性比较,发现其中9个已知基因,2个新基因。结论用荧光差异显示PCR方法寻找TCE诱导L02损伤耐受过程差异表达的基因,通过鉴定基因,为进一步研究TCE诱导L02的损伤耐受的机理提供科学依据。

关键词：三氯乙烯损伤耐受荧光差异显示PCR

低剂量的甲醛诱导MRC5损伤耐受差异表达基因的研究

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卫生研究 2005年第3期34卷 265-268页

作者：卫秦芝庄志雄袁建辉李习艺杨晓华黄海燕庾蕾中山大学公共卫生学院广州510080 深圳市疾病预防控制中心

目的　用荧光差异显示PCR(fluoroDD PCR)方法寻找低剂量的甲醛(FA)诱导人胚肺成纤维细胞(MRC 5 )损伤耐受差异表达的基因。方法　用MTT方法得到FA对MRC 5毒性的剂量-反应关系。根据剂量-反应关系选择对MRC 5几乎没有损伤或有增殖的剂量... 详细信息

目的　用荧光差异显示PCR(fluoroDD PCR)方法寻找低剂量的甲醛(FA)诱导人胚肺成纤维细胞(MRC 5 )损伤耐受差异表达的基因。方法　用MTT方法得到FA对MRC 5毒性的剂量-反应关系。根据剂量-反应关系选择对MRC 5几乎没有损伤或有增殖的剂量作为低剂量,对细胞有明显损伤的剂量为高剂量,然后用低剂量、高剂量、损伤耐受模式(低剂量预刺激后继而用高剂量刺激)三种方式处理细胞,通过荧光差异显示PCR技术寻找不同处理组与对照组比较差异表达的基因。对其中的11个差异条带进行二次PCR、克隆、测序,在GeneBank上通过Blast鉴定基因。结果　根据FA对MRC 5毒性的剂量-反应关系,选择10 0 μmol L为低剂量、10mmol L为高剂量。然后按方法中所述的方式处理细胞后,用荧光差异显示PCR的方法发现有6 1个差异表达的基因。对其中的11个差异条带进行鉴定,发现有2个已知基因,分别与nuclearfactorofactivatedT cells 5 (NFAT5 )和tetratricopeptiderepeatdomain 3(TPRD 3)高度同源,其余9个为新基因。结论　FA在低剂量可以促进MRC 5的增殖,通过荧光差异显示PCR获得6 1个FA诱导MRC 5损伤耐受差异表达的基因,通过对其中11个差异条带的鉴定,为进一步研究FA诱导MRC 5损伤耐受的机制提供线索。

关键词：甲醛损伤耐受荧光差异显示PCR