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脓毒症急性肺损伤时HSPA12B对肺血管通透性的影响及其机制

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脓毒症急性肺损伤时HSPA12B对肺血管通透性的影响及其机制

作者：康秋香第二军医大学

学位级别：硕士

脓毒症是临床上常见的、严重威胁病人生命的感染性综合征,进一步发展导致脓毒症休克、多器官功能损伤,发病率及死亡率高。其中,急性肺损伤(ALI)是脓毒症最常见的并发症之一,其发生发展的关键机制是肺内皮屏障功能障碍,肺血管通透性增加... 详细信息

脓毒症是临床上常见的、严重威胁病人生命的感染性综合征,进一步发展导致脓毒症休克、多器官功能损伤,发病率及死亡率高。其中,急性肺损伤(ALI)是脓毒症最常见的并发症之一,其发生发展的关键机制是肺内皮屏障功能障碍,肺血管通透性增加,进一步导致肺水肿、严重低氧血症。肺血管通透性增加是其主要的病理生理特征。因此,保护肺血管内皮细胞、维持正常的肺内皮屏障功能及肺血管通透性对于ALI的干预治疗具有重要的临床意义。热休克蛋白A12B(HSPA12B)是HSP70超家族中的一员,不同于其他热休克蛋白,它主要表达于血管内皮细胞,是内皮细胞特异的热休克蛋白,参与了血管的生成与稳定。HSPA12B表达上调可以减轻脓毒症导致的心功能障碍,也可以减轻缺血再灌注时脑组织的损伤。但是,HSPA12B对脓毒症时肺脏功能有无保护作用,尤其是对肺内皮通透性有无影响及其可能的机制,尚未见研究。本研究通过离体与在体两大部分实验,探讨脓毒症时HSPA12B对内皮细胞通透性的影响及其可能的机制。离体实验,我们采用脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),研究HSPA12B的表达变化情况及其发生变化的可能机制;构建HSPA12B高表达质粒,研究HSPA12B高表达对内皮细胞通透性的影响以及其作用机制。在体实验,我们构建CLP小鼠模型,观察HSPA12B表达下调对脓毒症小鼠肺通透性的影响。第一部分LPS处理HUVEC时HSPA12B的表达变化及其可能机制目的探讨HSPA12B在LPS处理的HUVEC中的表达变化及其机制。方法1.培养HUVEC,用终浓度为1μg/ml的LPS刺激HUVEC,分别于0h、3h、6h、9h、12h、24h收集细胞,应用RT-PCR法及Western blot法分别检测HSPA12B的m RNA及蛋白质水平。2.培养HUVEC,分别用NF-κB、p38抑制剂(NF-κB inhibitor、SB203580)及其对照试剂DMSO对细胞进行预处理,然后用LPS刺激HUVEC,12h后收集细胞,Western blot法检测HSPA12B的蛋白质水平。结果***处理HUVEC后,HSPA12B m RNA和蛋白质水平均在0-12h内逐渐升高,12h达高峰。2.与DMSO相比,使用NF-κB inhibitor、SB203580后可以降低LPS诱导的HSPA12B的蛋白质表达水平。结论内毒素对HUVEC中HSPA12B表达具有一定影响,HSPA12B的表达在0-12h内逐渐升高,12h达高峰,随后开始下降;LPS诱导的HSPA12B表达的改变与NF-κB、p38信号通路相关。第二部分HSPA12B对LPS诱导HUVEC通透性改变的影响目的研究HSPA12B表达上调对LPS诱导的HUVEC通透性改变的影响。方法HUVEC分为4组:①control组(未进行任何处理);②LPS(1μg/ml)组;③LPS+HSPA12B高表达组(转染质粒p IRES2-EGFP-3Flag-HSPA12B);④LPS+阴性对照质粒组(转染p IRES2-EGFP-3Flag)。分别进行相应的处理后,检测HUVEC的跨内皮电阻抗(TEER)值。结果control组、LPS组、(LPS+HSPA12B高表达)组、(LPS+阴性对照质粒)组的TEER值分别为:36±2?、25±1?、28±1?、45±2?。与LPS组和(LPS+阴性对照质粒)组比较,HSPA12B高表达组的TEER值均明显升高(P<0.001)。结论HSPA12B可以降低LPS刺激下HUVEC的通透性,可能对血管内皮屏障功能有保护作用。第三部分HSPA12B影响HUVEC通透性的可能机制目的探讨HSPA12B对LPS刺激下HUVEC通透性的影响机制。方法将HUVEC分为四组:①control组(未进行任何处理);②LPS(1μg/ml)组;③LPS+HSPA12B高表达组(转染质粒p IRES2-EGFP-3Flag-HSPA12B);④LPS+阴性对照质粒组(转染p IRES2-EGFP-3Flag)。LPS处理12h后收集细胞,Western blot法检测粘附分子VE-cadherin、ICAM-1、E-selectin的表达,以及通透性相关激酶MLC、SRC、cdc42的表达及其活性;免疫荧光检测VE-cadherin的表达水平。结果Western blot检测结果表明:HUVEC经LPS刺激12h后,与转染阴性对照质粒组相比,HSPA12B高表达组的粘附分子VE-cadherin表达水平明显上调;HSPA12B高表达组的激酶MLC、SRC、cdc42的表达也增强,而其活性形式P-MLC、P-SRC、P-CDC42水平并无差异。免疫荧光结果显示,HSPA12B高表达组的VE-cadherin

关键词：热休克蛋白A12B 脐静脉内皮细胞脂多糖 NF-κB p38 跨内皮电阻抗内皮通透性粘附分子激酶脓毒症急性肺损伤肺通透性

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高考语病题之并列词语的命题规律解析

语文天地 2014年第10期 8-9页

作者：康秋香江西省赣县中学

做高考语病题时除了掌握分析句子结构的方法外,了解一定的技巧也能起到事半功倍的效果。而语病易发之处在并列词语或短语,笔者选取近几年的高考试题进行了分析、归纳、总结,发现并列词语极易发生以下问题:并列词语或短语之间有概念上的... 详细信息

做高考语病题时除了掌握分析句子结构的方法外,了解一定的技巧也能起到事半功倍的效果。而语病易发之处在并列词语或短语,笔者选取近几年的高考试题进行了分析、归纳、总结,发现并列词语极易发生以下问题:并列词语或短语之间有概念上的交叉、领属或包含关系;并列词语或短语部分归类不当;并列词语或短语不能和句中的成分完全搭配;并列词语或短语之间结构不一致;并列词语或短语之间有逻辑关系的不当等。下面就这些问题做一一分析。

关键词：命题规律

热休克蛋白A12B降低脂多糖诱导的血管内皮细胞通透性

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第二军医大学学报 2015年第5期36卷 483-487页

作者：康秋香陈依余桂芳张旭朱科明第二军医大学长海医院麻醉科ICU 上海200433 上海交通大学医学院附属第三人民医院麻醉科上海201999

目的探讨脂多糖诱导下血管内皮细胞热休克蛋白A12B（HSPAl2B）表达的改变及其对血管内皮通透性的影响。方法体外传代培养人脐静脉内皮细胞，并将其分为空白组（未进行任何处理）、脂多糖（1μg／mL）诱导组、脂多糖＋HSPAl2B高表达组（... 详细信息

目的探讨脂多糖诱导下血管内皮细胞热休克蛋白A12B（HSPAl2B）表达的改变及其对血管内皮通透性的影响。方法体外传代培养人脐静脉内皮细胞，并将其分为空白组（未进行任何处理）、脂多糖（1μg／mL）诱导组、脂多糖＋HSPAl2B高表达组（转染HSPAl2B过表达质粒）和脂多糖＋阴性质粒对照组（转染阴性对照质粒）。采用电阻抗检测仪检测脐静脉内皮细胞的跨内皮电阻抗，流式细胞仪检测血管内皮钙黏素（VE-cadherin）的表达，蛋白质印迹、PCR检测HSPAl2B的表达改变。结果脐静脉内皮细胞经脂多糖诱导后，细胞中HSPAl2B表达在O～12h内上调，12h时达高峰。HSPAl2B能使脐静脉内皮细胞的跨内皮电阻抗值明显升高（P〈O．001），并能完全对抗脂多糖诱导造成的跨内皮电阻抗值的下降（P〈O．001）。HSPAl2B能使脐静脉内皮细胞细胞膜上VE-cadherin的表达上调。结论HSPAl2B可能通过上调VE-cadherin表达降低血管内皮细胞的通透性，从而保护血管内皮的屏障功能。

关键词：热休克蛋白A12B 脂多糖类人脐静脉内皮细胞跨内皮电阻抗

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经口裂超声扫查诊断胎儿腭裂的探讨

中国超声医学杂志 2012年第10期28卷 938-940页

作者：尹春林罗琼秀刘燕飞贺新兰黄金娟康秋香杨引洪吉安市妇幼保健院超声科吉安市妇幼保健院产科吉安市妇幼保健院口腔科

目的探讨二维超声经胎儿口裂扫查诊断腭裂的价值。方法对胎儿完成超声系统检查后,分别经胎儿口裂及颌下三角扫查硬腭及软腭。结果经口裂扫查法胎儿硬腭显示率94.82%(238/251)、软腭显示率91.63%(230/251)。经颌下三角扫查法胎儿硬腭显示... 详细信息

目的探讨二维超声经胎儿口裂扫查诊断腭裂的价值。方法对胎儿完成超声系统检查后,分别经胎儿口裂及颌下三角扫查硬腭及软腭。结果经口裂扫查法胎儿硬腭显示率94.82%(238/251)、软腭显示率91.63%(230/251)。经颌下三角扫查法胎儿硬腭显示率13.15%(33/251)、软腭显示率14.34%(36/251)。结果显示经口裂扫查法对软硬腭的显示率显著高于经颌下三角扫查法。结论经口裂扫查法能提高硬腭及软腭的显示率,明确有无腭裂及其程度,能提高腭裂的产前检出率。

关键词：口裂超声扫查胎儿腭裂

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高频超声诊断小儿肠套叠的临床分析

当代医学 2021年第14期27卷 144-145页

作者：康秋香钟准鸣吉安市妇幼保健院功能科江西吉安343000 江西省宜春市万载县人民医院急诊科江西宜春336100

目的分析高频彩色多普勒超声在小儿肠套叠中的应用价值。方法选取本院2017年10月至2019年10月收治的73例疑似肠套叠患儿,对所有患儿行高频彩色多普勒超声检查、水压灌肠治疗,以确诊结果为金标准,分析高频彩色多普勒超声诊断灵敏度、特... 详细信息

目的分析高频彩色多普勒超声在小儿肠套叠中的应用价值。方法选取本院2017年10月至2019年10月收治的73例疑似肠套叠患儿,对所有患儿行高频彩色多普勒超声检查、水压灌肠治疗,以确诊结果为金标准,分析高频彩色多普勒超声诊断灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值,并分析与确诊结果一致性及诊断影像学特点。结果水压灌肠治疗结果表明,73例疑似肠套叠患儿中,65例确诊为肠套叠,8例为其他肠道疾病。高频彩色多普勒超声诊断灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.92%(63/65)、87.50%(7/8)、95.89%(70/73)、98.44%(63/64)、77.78%(7/9);高频彩色多普勒超声诊断结果与确诊结果一致性较高(Kappa=0.800)。结论高频彩色多普勒超声诊断小儿肠套叠具有较高灵敏度、特异度及准确度,可为临床治疗提供重要参考价值。

关键词：小儿肠套叠高频彩色多普勒超声诊断价值

彩色多普勒超声检查在小儿常见急腹症诊断中的临床价值探讨

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基层医学论坛 2020年第20期24卷 2907-2908页

作者：康秋香杨引洪黄金娟吉安市妇幼保健院江西吉安343000

目的探讨彩色多普勒超声诊断小儿常见急腹症的临床价值。方法选择我院2018年8月—2019年8月收治的经临床确诊的急腹症患儿126例,均接受彩色多普勒超声检查,观察其超声图像特征,分析疾病类型与病理诊断结果,计算诊断符合率。结果超声检... 详细信息

目的探讨彩色多普勒超声诊断小儿常见急腹症的临床价值。方法选择我院2018年8月—2019年8月收治的经临床确诊的急腹症患儿126例,均接受彩色多普勒超声检查,观察其超声图像特征,分析疾病类型与病理诊断结果,计算诊断符合率。结果超声检查腹股沟疝嵌顿符合率为92.86%,其中左侧9例,右侧17例,漏诊2例;肠套叠符合率为95.95%,其中结肠肝曲47例,结肠脾曲23例,未见明显包块4例;急性肠梗阻符合率为100%,其中小肠梗阻4例,结肠梗阻2例;肠系膜淋巴结肿大符合率为100.00%,其中右侧腹腔6例,脐周2例;急性阑尾炎符合率为90.00%,其中化脓性4例,单纯性3例,周围脓肿1例,坏疽性1例,未见明显异常1例。结论小儿常见急腹症应用彩色多普勒超声检查具有较高的诊断价值,可准确判断疾病类型,为临床诊疗、预后评估提供可靠依据。

关键词：急腹症小儿彩色多普勒超声诊断价值

产前超声诊断中节段分析法联合四腔心平面头侧偏斜法检测胎儿先心病的效果

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基层医学论坛 2020年第19期24卷 2746-2748页

作者：陈彩萍刘飚康秋香永丰县中医院江西永丰331500 永丰县妇幼保健院江西永丰331500 吉安市妇幼保健院江西吉安343000

目的观察产前超声诊断中节段分析法联合四腔心平面头侧偏斜法检测胎儿先天性心脏病(先心病)的效果。方法回顾性分析选2015年1月—2018年10月在我院完成产前超声诊断先心病检查的孕妇80例临床资料(均为胎儿先心病),产前分别对所有孕妇进... 详细信息

目的观察产前超声诊断中节段分析法联合四腔心平面头侧偏斜法检测胎儿先天性心脏病(先心病)的效果。方法回顾性分析选2015年1月—2018年10月在我院完成产前超声诊断先心病检查的孕妇80例临床资料(均为胎儿先心病),产前分别对所有孕妇进行超声四腔心平面头侧偏斜法和节段分析法联合四腔心平面头侧偏斜法检测。诊断后随访至孕期结束,并以新生儿心脏检查、死胎或引产胎儿的尸解结果作为"金标准",评估对比两种诊断方法胎儿先心病检出情况,及17周~26周、27周~32周、33周~36周孕妇的漏诊率。结果节段分析法联合四腔心平面头侧偏斜法检测胎儿先天性心脏病、复杂先天性心脏病及节段畸形的检出率均高于超声四腔心平面头侧偏斜法,差异有统计学意义(P<0.05);节段分析法联合四腔心平面头侧偏斜法检测不同孕周漏诊率均低于超声四腔心平面头侧偏斜法,差异有统计学意义(P<0.05);超声四腔心平面头侧偏斜法检测33周~36周漏诊率明显高于其他孕周,差异有统计学意义(P<0.05)。结论产前超声诊断中采用节段分析法联合四腔心平面头侧偏斜法检测可有效提高胎儿先心病检出率,值得临床推广。

关键词：先天性心脏病胎儿产前超声诊断节段分析法四腔心平面头侧偏斜法

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脑-胎盘率与围产期不良妊娠的相关性

现代诊断与治疗 2021年第23期32卷 3823-3825页

作者：王丽娟杨引洪周希袁金兰康秋香吉安市妇幼保健院江西吉安343000

目的分析脑-胎盘率(CPR)与围产期不良妊娠的相关性。方法收集我院2019年5月~2020年5月经常规检查后发生妊娠高血压症、妊娠糖尿病、妊娠胆汁淤积症等不良妊娠情况的23例孕妇临床资料,将其纳入围产期不良妊娠组;另收集同期我院经常规检... 详细信息

目的分析脑-胎盘率(CPR)与围产期不良妊娠的相关性。方法收集我院2019年5月~2020年5月经常规检查后发生妊娠高血压症、妊娠糖尿病、妊娠胆汁淤积症等不良妊娠情况的23例孕妇临床资料,将其纳入围产期不良妊娠组;另收集同期我院经常规检查后未发生围产期不良妊娠情况的74例正常孕妇临床资料,将其纳入良好妊娠组。所有孕妇均行超声检查,获取胎儿血流指标,分析胎儿血流指标与孕妇围产期不良妊娠的相关性。结果不良妊娠组CPR值低于良好妊娠组,脐动脉搏动指数(PI)与大脑中动脉PI高于良好妊娠组,差异有统计学意义(P0.7,均具有一定评估价值,且CPR评估效果最佳。结论 CPR与孕妇围产期不良妊娠密切相关,临床可通过监测孕妇CPR值变化诊断孕妇围产期不良妊娠。

关键词：脑胎盘率围产期不良妊娠

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经阴道超声结合腹部加压法对异位妊娠的诊断

实用临床医学（江西） 2014年第9期15卷 85-86页

作者：尹春林康秋香杨引洪吉安市妇幼保健院超声科江西吉安343000

目的探讨经阴道超声结合腹部加压法诊断异位妊娠的价值。方法回顾性分析以异位妊娠收入住院的157例患者的经阴道超声声像图特征,并与临床最终诊断结果相对照。结果 157例患者中临床最后诊断为异位妊娠156例(包括宫内妊娠并异位妊娠1例)... 详细信息

目的探讨经阴道超声结合腹部加压法诊断异位妊娠的价值。方法回顾性分析以异位妊娠收入住院的157例患者的经阴道超声声像图特征,并与临床最终诊断结果相对照。结果 157例患者中临床最后诊断为异位妊娠156例(包括宫内妊娠并异位妊娠1例),宫内妊娠1例;经阴道超声结合腹部加压法检出异位妊娠154例,漏诊异位妊娠2例,检出宫内妊娠1例,检出异位妊娠敏感性为98.72%(154/156)、准确性为98.73%(155/157)。结论经阴道超声能够为临床诊断异位妊娠提供可靠的线索。

关键词：异位妊娠阴道超声腹部加压法