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貉细小病毒分离鉴定及免疫原性研究

貉细小病毒分离鉴定及免疫原性研究

作者：康洪涛中国农业科学院

学位级别：硕士

貉细小病毒性肠炎是一种急性、高度接触性传染病，近年来已成为严重危害养貉业的重要传染病之一。1984年貉细小病毒性肠炎在我国黑龙江省首次发生。1988夏咸柱等从不同地区肠炎病貉分离出3株细小病毒，从而首次证实了貉细小病毒在我国... 详细信息

貉细小病毒性肠炎是一种急性、高度接触性传染病，近年来已成为严重危害养貉业的重要传染病之一。1984年貉细小病毒性肠炎在我国黑龙江省首次发生。1988夏咸柱等从不同地区肠炎病貉分离出3株细小病毒，从而首次证实了貉细小病毒在我国的存在。近年来，貉细小病毒性肠炎的流行有愈演愈烈的趋势，目前国内还没有专门针对貉细小病毒性肠炎的疫苗，大多采用水貂细小病毒肠炎灭活疫苗或是犬细小病毒弱毒疫苗进行免疫，虽然三种病毒在免疫学上具有交叉免疫保护，但免疫效果不够理想。因此针对貉细小病毒性肠炎安全高效疫苗的研制势在必行。为研制貉细小病毒性肠炎灭活疫苗，筛选出针对貉细小病毒性肠炎安全、高效的疫苗备选株。本研究应用CRFK细胞分别从辽宁和河北省发病貉的粪便中进行病毒分离，并通过形态学、血清学、分子生物学、动物回归及免疫接种等方法对分离株进行鉴定。成功分离出2株貉细小病毒，命名为LN10-1株和HeB10-1株。其中LN10-1株的VP2蛋白上决定宿主范围的93位氨基酸位点发生了突变（Asn→Lys）。VP2基因种系发生分析显示，LN10-1株位于猫泛白细胞综合征病毒（Feline panleukopenia virus，FPLV）、蓝狐细小病毒（Blue fox parvovirus，BFPV）、水貂肠炎病毒（Mink enteritis virus，MEV）组成的食肉类动物细小病毒聚类分支与由犬细小病毒（Canineparvovirus，CPV）组成的聚类分支之间。推测LN10-1株可能正处于FPLV与CPV进化的中间状态，或是CPV适应新宿主（貉）而形成的一种新病毒。分别由LN10-1株和HeB10-1株制备病毒含量为106.0TCID50灭活疫苗免疫结果显示，分离株免疫组接种21d其血凝抑制效价及中和抗体效价均达到攻毒保护水平（HI≥1:80;SN≥1:64），接种28d分离株免疫组细小病毒中和抗体效价可达到1:256以上。分离的两株貉细小病毒株可以作为针对貉细小病毒性肠炎灭活疫苗的候选株。为探索细小病毒基因组拷贝数与病毒含量之间相关性，本研究建立了利用荧光定量PCR技术定量检测貉细小病毒基因组拷贝数的方法。通过对RDPV LN10-1株VP2基因片段上的长度为92bp的保守片段进行PCR扩增，构建标准重组质粒，由已知浓度的重组质粒通过荧光定量PCR体系建立标准曲线，通过标准曲线得出RDPV LN10-1株样品的目标片段拷贝数。对拷贝数值与TCID50值进行相关性分析，分析结果显示基因组拷贝数值与病毒TCID50值存在极显著的正相关关系（P＜0.01）。与血凝实验方法测定病毒滴度相比，其更能准确的代表活病毒的含量。本研究为探索利用定量荧光定量PCR方法进行细小病毒含量测定提供了实验依据，对动物生物疫苗的生产检验具有一定的实践意义。

关键词：貉细小病毒分离鉴定 VP2基因免疫原性荧光定量PCR

经鼻内窥镜手术与传统手术矫正鼻中隔疗效比较

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中国基层医药 2013年第6期20卷 907-908页

作者：康洪涛奉化市人民医院耳鼻喉科浙江省奉化315500

目的比较经鼻内窥镜手术与传统手术矫正鼻中隔的临床疗效。方法80例鼻中隔偏曲患者依据治疗方式不同分为治疗I组（采用传统鼻中隔矫正术）40例和治疗Ⅱ组（经鼻内窥镜鼻中隔矫正术）40例，比较两组手术时间、术中出血量、临床疗效。结... 详细信息

目的比较经鼻内窥镜手术与传统手术矫正鼻中隔的临床疗效。方法80例鼻中隔偏曲患者依据治疗方式不同分为治疗I组（采用传统鼻中隔矫正术）40例和治疗Ⅱ组（经鼻内窥镜鼻中隔矫正术）40例，比较两组手术时间、术中出血量、临床疗效。结果经治疗后，治疗I组手术时间（52．3±7．4）rain、术中出血量（33．3±8．5）ml，明显多于治疗Ⅱ组的（43．3±5．6）min、（20．1±7．8）ml（t=6．13、7．24，均P〈0．05）；治疗I组治愈15例、有效15例、无效10例、总有效率75％，治疗Ⅱ组治愈22例、有效18例、无效0例、总有效率100％，两组总有效率差异有统计学意义（）（2=28．57，P〈0．05）。结论经鼻内窥镜治疗鼻中隔偏曲创伤小、出血量少、疗效显著。

关键词：鼻中隔内窥镜鼻中隔矫正术

2′3′-cGAMP增强灭活狂犬病毒在小鼠体内的免疫反应

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2′3′-cGAMP增强灭活狂犬病毒在小鼠体内的免疫反应

中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：康洪涛中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

环二核苷酸(Cyclic dinucleotidcs,CDNs)是一种在细菌和后生动物体内普遍存在的小分子第二信使,可结合内质网固有受体干扰素基因激活因子(stimulator of interfron genes,STING),激活机体干扰素通路,从而启动宿主免疫应答。干扰素通路... 详细信息

环二核苷酸(Cyclic dinucleotidcs,CDNs)是一种在细菌和后生动物体内普遍存在的小分子第二信使,可结合内质网固有受体干扰素基因激活因子(stimulator of interfron genes,STING),激活机体干扰素通路,从而启动宿主免疫应答。干扰素通路凋节先天性和适应性免疫应答,在抗狂犬病毒(RABV)感染过程巾发挥重要作用。

关键词：兽医学环二核苷酸狂犬病毒免疫反应

来源： cnki会议评论

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煤矿高浓度胶结充填开采覆岩变形规律

煤矿安全 2015年第4期46卷 23-26页

作者：满建峰彭杨皓康洪涛中国矿业大学(北京)资源与安全工程学院北京100083

为了研究煤矿高浓度胶结充填开采覆岩变形规律,以新阳矿十采区10203充填开采工作面为背景,应用理论分析、数值模拟和相似模拟的方法对充填开采工作面上覆岩层的变形特征进行了研究。结果表明:充填开采主关键层不发生破断,只有微小的变形... 详细信息

为了研究煤矿高浓度胶结充填开采覆岩变形规律,以新阳矿十采区10203充填开采工作面为背景,应用理论分析、数值模拟和相似模拟的方法对充填开采工作面上覆岩层的变形特征进行了研究。结果表明:充填开采主关键层不发生破断,只有微小的变形;覆岩变形以垂直方向的整体弯曲下沉运动为主,上覆岩层不发生断裂和垮落,无明显的垮落带;与垂直方向相比,水平方向的移动变形量很小,基本可以忽略。根据上述结论,将充填开采地表移动变形的研究重点放在垂直方向的岩层移动和地表沉陷方面是合理的。

关键词：高浓度胶结充填充填开采覆岩变形地表沉陷垮落带

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广告在科技期刊中的作用

编辑学报 1991年第4期3卷 221-223页

作者：刘金生郑玉生梁建修康洪涛中国农业科学院棉花研究所河南安阳455112

1 增强经营意识党的十一届三中全会以来,由于科学技术的发展,各类刊物大量增加;加之成本增加,办刊经费压缩,导致期刊普遍出现提价;因而订户减少,发行量下降和亏损加剧。据1989年中国农业科学院科技期刊调查结果,全院共创办各类科技期... 详细信息

1 增强经营意识党的十一届三中全会以来,由于科学技术的发展,各类刊物大量增加;加之成本增加,办刊经费压缩,导致期刊普遍出现提价;因而订户减少,发行量下降和亏损加剧。据1989年中国农业科学院科技期刊调查结果,全院共创办各类科技期刊75种,其中94.3％的期刊相应调价,发行量也比1980-1987年减少53.3％,并有96.

关键词：广告科技期刊作用

反流性咽喉炎患者幽门螺杆菌感染的临床诊治研究

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中华医院感染学杂志 2015年第7期25卷 1465-1466,1469页

作者：徐丽芬康洪涛吕立辉宁波市奉化市人民医院耳鼻咽喉科浙江宁波315500

目的研究反流性咽喉炎患者幽门螺杆菌(Hp)感染的临床治疗方法,分析慢性咽喉炎与Hp感染的关联性,以提高诊治率。方法选取医院2012年6月-2013年6月收治的540例慢性咽喉炎患者,根据临床体征分为慢性反流性咽喉炎组(反流组)350例和普通慢性... 详细信息

目的研究反流性咽喉炎患者幽门螺杆菌(Hp)感染的临床治疗方法,分析慢性咽喉炎与Hp感染的关联性,以提高诊治率。方法选取医院2012年6月-2013年6月收治的540例慢性咽喉炎患者,根据临床体征分为慢性反流性咽喉炎组(反流组)350例和普通慢性咽喉炎组(普通组)190例;通过14 C-UBT筛查分组治疗,并对Hp阳性患者治疗后的Hp转阴率和临床疗效进行分析,采用SPSS13.0进行统计分析。结果 Hp阳性检出率反流组92.9%,普通组为69.5%,两组患者Hp阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05);两组Hp阳性患者经治疗两周后停药4周复查Hp结果差异无统计学意义,Hp阳性患者经治疗停药4周后总有效率普通组为77.9%、反流组为89.8%,两组患者临床体征均有好转。结论 Hp感染与胃食管反流病和反流性咽喉炎有关,通过Hp筛查后将慢性咽喉炎分类治疗可以提高临床诊治。

关键词：反流性咽喉炎幽门螺杆菌感染

股指虽有反弹动力延续整理因素仍未消除 007

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上海证券报

作者：康洪涛

从目前的情况来看，市场在没有突破半年线的强大压力之前不会选择明确的方向。而本周将进入一个特殊的“海量垃圾报表”时段，短期A股的抵抗性反弹演化成新一轮上涨的基础还不具备。但从盘面看，题材股却十分活跃。由于上周人民币4天...

从目前的情况来看，市场在没有突破半年线的强大压力之前不会选择明确的方向。而本周将进入一个特殊的“海量垃圾报表”时段，短期A股的抵抗性反弹演化成新一轮上涨的基础还不具备。但从盘面看，题材股却十分活跃。由于上周人民币4天升幅超去年全年，热钱两月涌入万亿，?

关键词：

来源： cnki报纸评论

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高层建筑结构设计相关技术问题

科技信息 2013年第14期 421-422页

作者：康洪涛王兴洋辽宁省建设科学研究院沈阳市于洪区建设工程质量监督站

高层建筑目前在我们的城市建设当中所占的比例越来越大，而建筑结构设计方面的变化也越来越多，很多新兴的结构设计方案以迅猛的速度呈现在我们的城市建设中。建筑类型与功能越来越复杂，高层建筑的数量日渐增多，高层建筑的结构体系也... 详细信息

高层建筑目前在我们的城市建设当中所占的比例越来越大，而建筑结构设计方面的变化也越来越多，很多新兴的结构设计方案以迅猛的速度呈现在我们的城市建设中。建筑类型与功能越来越复杂，高层建筑的数量日渐增多，高层建筑的结构体系也越来越多样化，高层建筑结构设计也越来越成为高层建筑结构工程设计工作的难点与重点。面对如此形势，应该把高层建筑的结构设计放在首位加以研究。

关键词：建筑结构设计高层建筑技术结构设计方案建筑结构工程城市建设建筑类型结构体系

肉食兽类细小病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立与应用

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中国兽医科学 2013年第8期43卷 843-849页

作者：康洪涛赵建军柴秀丽胡博张海玲张蕾白雪邵西群闫喜军吴威中国农业科学院特产研究所经济动物疫病研究室吉林长春130112 吉林特研生物技术有限责任公司吉林长春130122

为建立检测肉食兽类细小病毒荧光定量PCR方法和探索细小病毒基因组拷贝数与病毒含量之间的相关性,在肉食兽类细小病毒VP2基因区分别设计了1对保守引物和1条TaqMan-MGB标记的水解探针,通过对貉细小病毒(RDPV)LN10-1株VP2基因上的长度为9... 详细信息

为建立检测肉食兽类细小病毒荧光定量PCR方法和探索细小病毒基因组拷贝数与病毒含量之间的相关性,在肉食兽类细小病毒VP2基因区分别设计了1对保守引物和1条TaqMan-MGB标记的水解探针,通过对貉细小病毒(RDPV)LN10-1株VP2基因上的长度为92bp的保守片段进行PCR扩增,构建标准重组质粒,由已知浓度的重组质粒通过荧光定量PCR体系建立标准曲线,建立了检测肉食兽类细小病毒基因组拷贝数的荧光定量PCR方法。结果显示,该检测方法在3.50×102～3.50×107 copies/μL范围内与Cp值呈良好的线性关系(R2可达0.999),最低检测浓度为35.0copies/μL。通过标准曲线得出RDPVLN10-1株样品的目标片段拷贝数,将拷贝数值与TCID50值进行相关性分析;分析结果显示,基因组拷贝数值与病毒TCID50值之间存在极显著的正相关关系(P<0.01),血凝效价与病毒TCID50值存在显著的正相关关系(P<0.05)。结果表明,与用血凝效价测定病毒含量的方法相比,用本试验建立的荧光定量PCR技术测得的病毒拷贝数值更能准确地代表活病毒的含量。

关键词：肉食兽类细小病毒荧光定量PCR TCID50 血凝效价相关性分析