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一株内生砖红镰刀菌促进烟草生长和增强青枯病抗性

中国菌物学会2023年学术年会

作者：郑雯何张江康冀川贵州大学生命科学学院贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心

癌细胞保护性自噬是阻碍临床抗肿瘤药物发挥药效的主要因素之一,开发特异性较强的癌细胞自噬抑制剂对癌症化疗有重要意义。课题组前期分离获得了一株毛筒壳科(Tubeufiaceae)腐生真菌即明孢新卷丝孢菌Neohelicomyces hyalosporus。研究发...

癌细胞保护性自噬是阻碍临床抗肿瘤药物发挥药效的主要因素之一,开发特异性较强的癌细胞自噬抑制剂对癌症化疗有重要意义。课题组前期分离获得了一株毛筒壳科(Tubeufiaceae)腐生真菌即明孢新卷丝孢菌Neohelicomyces hyalosporus。研究发现,该菌株合成大量具有生物活性化合物,包括生物碱、萜类、内酯类及核苷类化合物,其中7个化合物为首次报道的新天然产物。化合物活性研究表明,其中一个内酯化合物PEO7在低剂量时不具有细胞毒性,但与抗肿瘤药物顺铂联用,显著增强了顺铂对卵巢癌A2780的抑制作用,相较于顺铂单独给药,联合用药抑制率增强了20-50%(P<0.01)。进一步研究发现,PEO7可显著抑制肿瘤细胞自噬,增强顺铂诱导的细胞凋亡,而联合施用自噬激活剂雷帕霉素和EBSS恢复了癌细胞的自噬水平,导致其对A2780的抑制率显著下降。此外,细胞自噬与凋亡相关蛋白表达水平检测发现,联合用药组自噬相关蛋白LC3、p62及抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低,促凋亡相关蛋白Caspase 3、Bax表达量显著上调。由此推测,化合物PEO7是通过介导自噬相关蛋白的表达,抑制癌细胞保护性自噬,从而增强抗肿瘤药物顺铂的活性。该研究结果丰富了癌细胞自噬抑制剂候选物质库,为开发特异性真菌源的癌细胞自噬抑制剂奠定基础。

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来源： cnki会议评论

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菌物学报 2022年第10期41卷 1658-1671页

作者：查兴平李永杰汪健康肖青黄建明何张江康冀川贵州大学/教育部西南药用生物资源工程研究中心贵州贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵州贵阳550025

课题组前期报道了一株对马铃薯具有促生防病作用的内生砖红镰刀菌Fusarium lateritium(FL617)。为拓展该菌株的应用范围,本研究以同为茄科作物的烟草为研究对象,探究了砖红镰刀菌对其生长和抗病的影响。结果表明,与对照组相比,处理组叶... 详细信息

课题组前期报道了一株对马铃薯具有促生防病作用的内生砖红镰刀菌Fusarium lateritium(FL617)。为拓展该菌株的应用范围,本研究以同为茄科作物的烟草为研究对象,探究了砖红镰刀菌对其生长和抗病的影响。结果表明,与对照组相比,处理组叶表面积、主根数、叶片数、叶绿素a和叶绿素b含量分别提高了5.0、3.9、1.4、1.3和1.3倍;该结果表明砖红镰刀菌对烟草具有促生作用。生测结果表明,砖红镰刀菌增强了烟草对青枯病的抗病性,其青枯病病情指数下降约30%。植物激素合成相关基因表达模式分析,发现处理组植物激素合成相关基因表达显著上调(1.6–39.9倍);用青枯病菌Ralstonia solanacearum感染寄主植物后分析其水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)和R基因信号相关基因的转录模式,发现与对照组相比,处理组SA、JA相关基因均显著上调(1.2–8.3倍),仅有一个R基因显著下调(50%)。进一步用GFP标记的菌株进行荧光定殖观察,发现植物根系周围簇生着带有绿色荧光信号的真菌菌丝,表明砖红镰刀菌可以定殖于烟草根系。综上所述,推测砖红镰刀菌F.lateritium能够通过定殖于烟草根系介导植物激素、免疫防御相关基因的表达从而影响植株的生长发育和抗病性。

关键词：内生砖红镰刀菌定殖烟草促生作用抗病性

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李玉毛筒腔菌的形态学和系统学研究

菌物研究 2023年第1期21卷 14-23页

作者：卢永仲马建肖兴娟张丽娟肖沅嫔康冀川贵州理工学院食品药品制造工程学院贵阳550003 贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心贵阳550025

毛筒腔菌属真菌形态特征独特,具有产生多种活性次级代谢产物的潜力。从中国海南省一条淡水溪流中采集到一株卷旋型丝孢菌标本,并通过ITS,LSU,RPB2和TEF1α多基因系统发育分析结合形态学特征,确定了其分类定位。结果表明该物种为毛筒腔... 详细信息

毛筒腔菌属真菌形态特征独特,具有产生多种活性次级代谢产物的潜力。从中国海南省一条淡水溪流中采集到一株卷旋型丝孢菌标本,并通过ITS,LSU,RPB2和TEF1α多基因系统发育分析结合形态学特征,确定了其分类定位。结果表明该物种为毛筒腔菌属新种——李玉毛筒腔菌。

关键词：无性型真菌卷旋型丝孢菌分类学形态学分子系统发育学

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内生砖红镰刀菌对番茄生长和抗病的影响

华中农业大学学报 2022年第3期41卷 173-180页

作者：肖青李永杰汪健康查兴平黄建明何张江康冀川贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵阳550025

为探究内生真菌砖红镰刀菌在番茄生长及抗病过程中的作用,使用1×10^(7) CFU/mL砖红镰刀菌芽生孢子悬液浸根处理发芽的番茄,结果显示:处理50 d后番茄株高较对照组增加了1.15倍;叶绿素a、叶绿素b含量较对照组分别增加1.16倍和1.47倍;根... 详细信息

为探究内生真菌砖红镰刀菌在番茄生长及抗病过程中的作用,使用1×10^(7) CFU/mL砖红镰刀菌芽生孢子悬液浸根处理发芽的番茄,结果显示:处理50 d后番茄株高较对照组增加了1.15倍;叶绿素a、叶绿素b含量较对照组分别增加1.16倍和1.47倍;根系生物量较对照增加1.38倍;砖红镰刀菌处理组对番茄枯萎病的病情指数(45.16%)较对照组(74.15%)下降;浸根处理20 d时植物生长素合成关键基因SlYUC5、水杨酸合成关键基因SlICS1表达水平与未处理对照组相比无显著差异;处理30及40 d后,SlYUC5表达水平较对照组相比表达显著上升,SlICS1表达水平较对照组显著降低;茉莉酸合成途径关键基因SlLOXD在20 d时表达水平较对照组显著下调38.73%(P<0.01),而在30 d时其表达量与对照组无显著差异,40 d后,其表达量较对照组显著上调(2.33倍,P<0.01);试验组中植物抗性相关蛋白基因SlPR1a在20、30和40 d的表达量被显著上调了7.89倍、5.77倍和1.8倍(P<0.01)。进一步用GFP标记菌株进行荧光定殖观察并通过qPCR法计算其定殖率,14 h后在番茄根系观察到镰刀菌菌丝存在,并随处理时间延长定殖率逐渐上升。综上,推测砖红镰刀菌能够通过内生定殖于番茄根系介导植物激素相关基因表达从而影响植株的长生发育和抗病。

关键词：内生真菌砖红镰刀菌番茄促生抗病

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蜗孢属两个新种和一个中国新记录

菌物学报 2023年第1期42卷 263-277页

作者：卢永仲马建肖兴娟张丽娟马小彦肖沅嫔康冀川贵州理工学院食品药品制造工程学院贵州贵阳550003 贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心贵州贵阳550025

蜗孢属隶属于子囊菌门Ascomycota毛筒壳科Tubeufiaceae,它们形态特征独特,能够产生多种活性次级代谢产物,具有一定的应用前景。本研究从中国海南省采集的腐木标本上分离到3种卷旋型丝孢真菌,通过ITS、LSU、RPB2和TEF1α多基因系统发育... 详细信息

蜗孢属隶属于子囊菌门Ascomycota毛筒壳科Tubeufiaceae,它们形态特征独特,能够产生多种活性次级代谢产物,具有一定的应用前景。本研究从中国海南省采集的腐木标本上分离到3种卷旋型丝孢真菌,通过ITS、LSU、RPB2和TEF1α多基因系统发育分析证据结合形态学特征,确定了它们的分类地位。结果表明,其中2个物种为蜗孢属新种,1个物种为中国新记录。为纪念李玉院士在中国菌物学界做出的贡献,本文特将其中一个新物种命名为李玉蜗孢菌。

关键词：卷旋型丝孢菌毛筒壳科腐生真菌真菌分类学分子系统学

酒糟生物有机肥和微生物菌剂对土壤微生物数量及高粱产量的影响

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农业现代化研究 2013年第4期34卷 502-506页

作者：吕军文庭池郭坤亮康冀川贵州大学西南药用生物资源教育部工程研究中心贵州贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵州贵阳550025

在大田试验条件下,研究了施用酒糟生物有机肥和微生物菌剂对土壤微生物数量、酶活性及高粱产量的影响。结果表明:微生物数量和酶活性都随生育期推进表现为先增高后降低的趋势。施用酒糟生物有机肥和微生物菌剂的土壤,微生物数量和酶活... 详细信息

在大田试验条件下,研究了施用酒糟生物有机肥和微生物菌剂对土壤微生物数量、酶活性及高粱产量的影响。结果表明:微生物数量和酶活性都随生育期推进表现为先增高后降低的趋势。施用酒糟生物有机肥和微生物菌剂的土壤,微生物数量和酶活性明显高于复合肥和普通有机肥,且随酒糟生物有机肥施用量的增加而增大,在处理Ⅲ达到拐点,再增加施肥各指标变化不显著。同时,施用酒糟生物有机肥+微生物菌剂的最高产量高于复合肥和普通有机肥。从总体上讲,施用酒糟生物有机肥+微生物菌剂的施肥方式效果好、产量高,是有机高粱生产的新模式。

关键词：酒糟生物有机肥微生物菌剂微生物数量酶活性高粱产量

蛹虫草液体种制备及发酵生产菌丝体和虫草菌素工艺优化

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食品科学 2012年第5期33卷 144-149页

作者：文庭池李光荣康冀川康超雷帮星贵州大学西南药用生物资源教育部工程研究中心贵州贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵州贵阳550025

为获得蛹虫草液体种制备和液体发酵生产菌丝体和虫草菌素的最佳工艺,以蛹草拟青霉Peacilomyces militarisBCEC07菌株为菌种,通过对接种量(孢子浓度)的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体母种制作效果的影响;通过单因素和正交试验,优化... 详细信息

为获得蛹虫草液体种制备和液体发酵生产菌丝体和虫草菌素的最佳工艺,以蛹草拟青霉Peacilomyces militarisBCEC07菌株为菌种,通过对接种量(孢子浓度)的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体母种制作效果的影响;通过单因素和正交试验,优化生产虫草菌素各营养因子的最佳种类和配比。结果表明:在1.5×1010孢子数的接种量时制作的母种最适合用于蛹虫草液体发酵产菌丝体和虫草菌素;蔗糖、蛋白胨、MgSO4.7H2O、K2HPO4和NAA是最适合的碳源、氮源、无机盐及生长因子;工艺优化后得出蛹虫草液体发酵产菌丝体的最佳配方为30g/L蔗糖、25g/L蛋白胨、1.5g/L KH2PO4、0.5g/L MgSO4.7H2O和4.0mg/L NAA;产虫草菌素的最佳配方为:30g/L蔗糖、25g/L蛋白胨、1.5g/L KH2PO4、0.5g/L MgSO4.7H2O和3.0mg/L NAA。优化后生物量和虫草菌素总产量分别提高了43.00%(达31.60g/L)和31.60%(达645.12mg/L)。为进一步提高蛹虫草菌丝体及虫草菌素的单位产量提供参考。

关键词：蛹虫草液体发酵虫草菌素生物量液体种工艺优化

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氧化铝脱色纯化虫草素工艺研究

时珍国医国药 2012年第11期23卷 2807-2809页

作者：何珺谭琪明文庭池康冀川贵州大学贵州省生化工程中心贵州贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵州贵阳550025

目的探索氧化铝柱层析脱色纯化蛹虫草培养基中虫草素的工艺。方法以蛹虫草小麦培养基原料,水加热提取,采用酸性氧化铝干柱层析、醇沉去杂、重结晶来纯化得到高纯度虫草素。结果氧化铝柱层析参数:层析剂为酸性氧化铝,30%乙醇为洗脱溶剂,... 详细信息

目的探索氧化铝柱层析脱色纯化蛹虫草培养基中虫草素的工艺。方法以蛹虫草小麦培养基原料,水加热提取,采用酸性氧化铝干柱层析、醇沉去杂、重结晶来纯化得到高纯度虫草素。结果氧化铝柱层析参数:层析剂为酸性氧化铝,30%乙醇为洗脱溶剂,洗脱用量为2倍柱体积,酸性氧化铝用量为蛹虫草小麦培养基重量:酸性氧化铝重量为1g∶3g。氧化铝脱色液浓缩,浸膏乙醇超声溶解,沉淀过滤,滤液冷置结晶,晶体重结晶即得白色针状虫草素晶体。结论该工艺可简捷有效地将蛹虫草小麦培养基中0.2%虫草素纯化至97%虫草素,同时也适合于虫草发酵液、虫草菌丝体虫草素的分离纯化。

关键词：氧化铝柱层析虫草素纯化

HPLC测定银杏黄酮苷元固体分散体胶囊剂的含量

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中国现代应用药学 2010年第8期27卷 723-726页

作者：钱一鑫康冀川何珺贵州大学西南药用生物资源教育部工程研究中心贵阳550025

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定银杏黄酮苷元固体分散体胶囊中有效成分的含量。方法以HypersilODS(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱;甲醇-4‰醋酸水溶液(48:52)为流动相;流速为0.8mL·min-1,检测波长360nm,柱温45℃。结果槲皮素和山奈素5... 详细信息

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定银杏黄酮苷元固体分散体胶囊中有效成分的含量。方法以HypersilODS(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱;甲醇-4‰醋酸水溶液(48:52)为流动相;流速为0.8mL·min-1,检测波长360nm,柱温45℃。结果槲皮素和山奈素5～100μg·mL-1浓度内线性关系良好,异鼠李素在3.4～68.0μg·mL-1浓度内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.31%,99.35%和98.18%,RSD分别为2.12%,2.28%和1.65%(n=6),精密度良好。结论本方法灵敏、准确、专属性强,可作为该制剂的含量测定方法。

关键词：银杏黄酮苷元固体分散体胶囊 HPLC 含量测定