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热辐射方向调控研究进展

光学学报 2024年

作者：李强应云斌仇旻浙江大学极端光学技术与仪器全国重点实验室和光电科学与工程学院西湖大学工学院

自然界物体产生的热辐射通常是波长连续、非偏振和全方向的。将热辐射限制在特定的波长范围和特定方向内的能力对于提高器件的能量利用效率具有重要意义。随着纳米技术的快速发展，热辐射方向调控研究正朝着微纳热辐射器发展。为此，本... 详细信息

自然界物体产生的热辐射通常是波长连续、非偏振和全方向的。将热辐射限制在特定的波长范围和特定方向内的能力对于提高器件的能量利用效率具有重要意义。随着纳米技术的快速发展，热辐射方向调控研究正朝着微纳热辐射器发展。为此，本文介绍了纳米光子结构实现热辐射方向调控的主要研究方法，列举了热辐射方向调控的主要应用，并总结了目前热辐射方向调控研究仍存在的问题，最后对热辐射方向调控及其应用的未来发展进行了展望。

关键词：热辐射微纳热辐射器纳米光子结构辐射方向调控

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冷喷涂增材制造技术应用研究进展

表面技术 2024年第16期53卷 19-34,67页

作者：吴应东卢静孙澄川陈子斌谢晖季华实验室广东佛山528200 湖南大学机械与运载工程学院长沙410082 香港理工大学工业与系统工程学系香港999077

冷喷涂增材制造(CSAM)技术作为一种新兴的快速增材制造技术,凭借其独特的“气动加速-固态沉积”的工艺特性,以及增材效率高、成形尺寸规模不受限等应用优势,已逐渐成为金属增材制造领域的新热点。通过将CSAM技术与包括选区激光熔化(SLM... 详细信息

冷喷涂增材制造(CSAM)技术作为一种新兴的快速增材制造技术,凭借其独特的“气动加速-固态沉积”的工艺特性,以及增材效率高、成形尺寸规模不受限等应用优势,已逐渐成为金属增材制造领域的新热点。通过将CSAM技术与包括选区激光熔化(SLM)、选区电子束熔化(SEBM)、电弧熔丝沉积(WAAM)、激光金属直接成形(LMDF)以及搅拌摩擦增材制造(FSAM)在内的几种典型金属增材制造技术,进行了制造效率及成本、成形尺寸规模、成形精度、产品机械性能及工艺适用材料等方面的分析对比,并总结了CSAM在当下增材制造应用中的优势和不足。基于改善CSAM目前存在成形质量欠佳、复杂结构成形能力不足等问题,重点综述了近年来关于CSAM工艺研究、喷涂部件改良以及喷涂策略创新三方面的相关研究进展。此外,针对CSAM技术现阶段在旋转增材成形、自由增材成形、损伤修复及再制造等方面的具体应用情况进行总结与讨论。最后,提出了CSAM目前面临的挑战和潜在的发展方向并强调了其在快速增材制造方面的应用价值及意义。

关键词：冷喷涂增材制造金属制造效率成形质量喷涂策略

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基于结构域活性分析的大肠杆菌T蛋白结构研究

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生物物理学报 2006年第5期22卷 338-344页

作者：应跃斌宋见惠黄鹏陈枢青浙江大学药学院生物化学与分子生物学研究室杭州310058 浙江大学医学院杭州310058

大肠杆菌T蛋白含有三个结构域:分支酸变位酶、预苯酸脱氢酶和调节结构域。文章作者分段克隆了T蛋白的分支酸变位酶、预苯酸脱氢酶和调节结构域等片段,并对其进行了活性研究。研究发现,定位于N末端的分支酸变位酶结构域的比活性虽然不高... 详细信息

大肠杆菌T蛋白含有三个结构域:分支酸变位酶、预苯酸脱氢酶和调节结构域。文章作者分段克隆了T蛋白的分支酸变位酶、预苯酸脱氢酶和调节结构域等片段,并对其进行了活性研究。研究发现,定位于N末端的分支酸变位酶结构域的比活性虽然不高,而稳定性较好;同时拥有调节结构域和预苯酸脱氢酶结构域的C末端片段,其预苯酸脱氢酶比活性的剩余百分率虽然高于分支酸变位酶结构域,但稳定性较差。作者进而表达了C末端切除38个氨基酸的T/1-336片段,发现预苯酸脱氢酶活性彻底丧失,而其分支酸变位酶和调节结构域的活性却基本保留。这说明T蛋白中分支酸变位酶结构域拥有一个相对独立、完整的结构,而预苯酸脱氢酶结构域和调节结构域交织共存,结构松散。

关键词：大肠杆菌 T蛋白分支酸变位酶预苯酸脱氢酶调节结构域

金黄色葡萄球菌肠毒素SEC2的纯化与活性研究

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中国医药工业杂志 2006年第10期37卷 665-668页

作者：应跃斌潘映秋张伟陈枢青浙江大学药学院生物制药研究室浙江杭州310058

从金黄色葡萄球菌发酵液中纯化金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)。发酵液经超滤浓缩、硫酸铵沉淀、阴离子交换色谱和分子筛色谱,获得了纯度为90%的SEC2,总收率23%。体外刺激脾淋巴细胞增殖实验以及体外肿瘤细胞增殖抑制试验表明该蛋白具备... 详细信息

从金黄色葡萄球菌发酵液中纯化金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)。发酵液经超滤浓缩、硫酸铵沉淀、阴离子交换色谱和分子筛色谱,获得了纯度为90%的SEC2,总收率23%。体外刺激脾淋巴细胞增殖实验以及体外肿瘤细胞增殖抑制试验表明该蛋白具备良好的超抗原活性。

关键词：肠毒素超抗原纯化

大肠杆菌P蛋白和T蛋白的调节结构域互换研究(英文)

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第4期22卷 296-300页

作者：薛乔孙红颖应跃斌陈枢青浙江大学药学院生物制药研究室杭州310031

在细菌、真菌及植物中,分支酸是一种位于关键分叉点上的中间代谢物,是所有芳香族氨基酸合成的共同前体.它可在双功能酶分支酸变位酶(CM)和预苯酸脱水酶(PDT)的催化下合成苯丙氨酸,在另一个双功能酶分支酸变位酶和预苯酸脱氢酶(PDH)的催... 详细信息

在细菌、真菌及植物中,分支酸是一种位于关键分叉点上的中间代谢物,是所有芳香族氨基酸合成的共同前体.它可在双功能酶分支酸变位酶(CM)和预苯酸脱水酶(PDT)的催化下合成苯丙氨酸,在另一个双功能酶分支酸变位酶和预苯酸脱氢酶(PDH)的催化下合成酪氨酸.前者被称为P蛋白,后者被称为T蛋白.大肠杆菌P蛋白和T蛋白有着类似的结构,P蛋白由CMp、PDT和调节结构域3个独立结构域组成,其变构调节因子是苯丙氨酸.T蛋白只有CMt和PDH两个独立结构域组成,起变构调节作用的调节结构域与PDH密不可分,其变构调节因子是酪氨酸.为了研究P蛋白和T蛋白的调节结构域的变构调节作用,应用融合蛋白技术将P蛋白和T蛋白的调节结构域进行了互换.结果发现,互换了的调节结构域仍然具有变构调节作用,而且调节结构域的互换导致了变构调节因子的互换,说明调节结构域对酶活性的调节作用是非专一的,而其R结构域与调节因子的结合却是专一的.

关键词：大肠杆菌 P蛋白 T蛋白调节结构域分子元件

金葡菌肠毒素C_2的克隆表达及其生物学活性

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药学学报 2006年第5期41卷 406-411页

作者：薛乔应跃斌潘映秋李丹曦孙红颖陈枢青浙江大学药学院生物制药研究室浙江杭州310031

目的克隆金葡菌肠毒素C2全长基因,构建SEC2的表达载体,实现其可溶性表达,并对纯化的rSEC2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)从金葡菌FR I1230菌株基因中得到肠毒素SEC2的基因,将其克... 详细信息

目的克隆金葡菌肠毒素C2全长基因,构建SEC2的表达载体,实现其可溶性表达,并对纯化的rSEC2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)从金葡菌FR I1230菌株基因中得到肠毒素SEC2的基因,将其克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌进行表达并对融合蛋白进行亲和色谱纯化。通过考察重组SEC2对淋巴细胞的增殖作用及其对肿瘤细胞杀伤活性的影响,对其超抗原活性和免疫学活性进行研究。结果得到正确的肠毒素SEC2基因序列并得到高效表达的融合蛋白,MTT法结果表明,重组SEC2表现出良好的促淋巴细胞增殖活性,且能够增强淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结论本研究成功克隆了SEC2基因,表达并纯化出具有抗肿瘤生物学活性的重组SEC2蛋白,为进一步对其分子抗肿瘤作用机制进行研究以及构建靶向抗肿瘤融合蛋白奠定了基础。

关键词： GST-SEC2 超抗原融合表达大肠杆菌 MTT法

金黄色葡萄球菌肠毒素C2中缺口的形成及影响因素的研究

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浙江大学学报（医学版） 2009年第5期38卷 505-510页

作者：应跃斌孙红颖丁丁李丹曦薛乔陈枢青浙江大学药学院药理毒理与生化药学研究所浙江杭州310058

目的：探索影响金黄色葡萄球菌肠毒素C2（SEC2）断裂的因素。方法：将纯化的肠毒素在不同条件下处理,观察环境因素对其断裂程度的影响。结果：重组SEC2断裂的位置可能位于其分子93位半胱氨酸与110位半胱氨酸之间。重组SEC2在37℃下、24 ... 详细信息

目的：探索影响金黄色葡萄球菌肠毒素C2（SEC2）断裂的因素。方法：将纯化的肠毒素在不同条件下处理,观察环境因素对其断裂程度的影响。结果：重组SEC2断裂的位置可能位于其分子93位半胱氨酸与110位半胱氨酸之间。重组SEC2在37℃下、24 h内会完全产生断裂,在碱性条件下则加速其断裂的形成;H2O2会导致重组SEC2产生非特异性降解。当溶液中有β-巯基乙醇（2%）、苯甲基磺酰胺（5-10 mmol/L）、咪唑（1 mol/L）或大肠杆菌粗提物时,重组SEC2的断裂可被有效抑制。结论：肠毒素C2容易在特定位点发生断裂,可能与蛋白质本身结构有关。

关键词：肠毒素类葡萄球菌,金黄色超抗原重组融合蛋白质类生物降解温度氢离子浓度蛋白酶抑制药

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重组人凝血因子Ⅷ结构改造的研究进展

药物生物技术 2015年第1期22卷 69-73页

作者：江海燕应跃斌王海彬白骅浙江海正药业股份有限公司浙江台州318000

血源凝血因子Ⅷ是血液凝固过程中关键因子,为治疗甲型血友病的特效药,但存在价格昂贵、给药频率高和潜在的病毒污染风险等缺点;且由于血液制品来源有限,凝血因子Ⅷ类药物在国内供不应求。随着基因工程技术的发展,药用重组人凝血因子Ⅷ... 详细信息

血源凝血因子Ⅷ是血液凝固过程中关键因子,为治疗甲型血友病的特效药,但存在价格昂贵、给药频率高和潜在的病毒污染风险等缺点;且由于血液制品来源有限,凝血因子Ⅷ类药物在国内供不应求。随着基因工程技术的发展,药用重组人凝血因子Ⅷ得以实现,在此基础上大量针对重组人凝血因子Ⅷ的结构改造研究不断涌现,部分产品已投放市场。文章主要对哺乳动物细胞表达的各类改构重组人凝血因子Ⅷ的原理和研究进展进行综述。由于存在提高蛋白质稳定性及延长药物半衰期等优势,结构改造将是重组人凝血因子Ⅷ类药物未来的技术发展方向。

关键词：重组人凝血因子Ⅷ 蛋白质改造血友病 B结构域缺失氨基酸突变 PEG修饰 Fc融合

重组金黄色葡萄球菌肠毒素C2的表达及生物学活性分析

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免疫学杂志 2007年第2期23卷 144-147,151页

作者：应跃斌李丹曦潘映秋薛乔孙红颖陈枢青浙江大学药学院生物制药研究室杭州310031

目的克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因,添加亲和纯化标签进行原核表达,并对表达产物进行生物学活性分析。方法通过PCR从pGEM-T-SEC2质粒中亚克隆得到带有编码6个组氨酸的核苷酸序列的基因片断,构建了表达质粒pET-28a-SEC2,转化至... 详细信息

目的克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因,添加亲和纯化标签进行原核表达,并对表达产物进行生物学活性分析。方法通过PCR从pGEM-T-SEC2质粒中亚克隆得到带有编码6个组氨酸的核苷酸序列的基因片断,构建了表达质粒pET-28a-SEC2,转化至大肠杆菌BL21中诱导表达。利用亲和层析纯化rSEC2,并采用MTT法对纯化后的rSEC2和天然SEC2生物学活性进行研究和比较。结果表达质粒pET-28a-SEC2通过测序,表明已连入正确表达目的蛋白的核苷酸序列。含有该质粒的表达菌株经IPTG诱导,产生约占菌体总蛋白40%的可溶性重组蛋白。SDS-PAGE显示,经Ni2+亲和柱纯化的目的蛋白达到了电泳纯。MTT法表明该rSEC2和天然SEC2均有显著的超抗原活性。结论成功构建了pET-28a-SEC2表达质粒,获得了与天然SEC2有着类似超抗原活性的高纯度rSEC2,为进一步研究该蛋白的抗肿瘤活性奠定了基础。

关键词：肠毒素超抗原克隆表达组氨酸标签亲和纯化