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反相高效液相色谱法测定西番莲中的有机酸

热带作物学报 2015年第8期36卷 1511-1517页

作者：王琴飞李莉萍高玲王明应东山张如莲中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与品种创制重点实验室农业部热带作物种子种苗质量监督检验测试中心海南儋州571737

采用Waters Atlantis C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以2%甲醇-98%0.01 mol/L K2HPO4溶液（用H3PO4调节p H2.8）作为流动相,流速为0.6 m L/min,柱温为30℃,进样量为10μL,检测波长为210 nm,建立高效液相色谱同时分析西番莲中10种有... 详细信息

采用Waters Atlantis C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以2%甲醇-98%0.01 mol/L K2HPO4溶液（用H3PO4调节p H2.8）作为流动相,流速为0.6 m L/min,柱温为30℃,进样量为10μL,检测波长为210 nm,建立高效液相色谱同时分析西番莲中10种有机酸的方法。结果表明：该方法相对标准偏差为0.22%-4.00%,平均回收率在88.0%-109.6%,各种酸的线性相关系数r〉0.999 2,检测限为0.001-0.22μg/m L;采用外标法定量。在紫果和黄果西番莲中检测到7种有机酸,其含量趋势呈现为柠檬酸〉L-苹果酸〉L-乳酸〉琥珀酸〉L-抗坏血酸〉酒石酸〉富马酸。该方法具有灵敏度高、测试组分多、速度快等优点,适用于西番莲中多种有机酸的测定。

关键词：反相高效液相色谱法西番莲有机酸

花生种子中芪化物的合成与抗黄曲霉菌产毒的相关性研究

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热带作物学报 2015年第2期36卷 344-352页

作者：王琴飞王明李莉萍高玲应东山张如莲中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与品种创制重点实验室农业部热带作物种子种苗质量监督检验测试中心海南儋州571737

以花生种子为试材,采用孢子浓度为1×106(个/m L)的黄曲霉菌接种花生种子,对抗产毒和易产毒品种间4种主要芪化物(resveratrol,ε-viniferin,δ-viniferin,pterostilbene)合成变化,相关抗性酶活性(PAL、POD、PPO)进行了比较,探讨了不同... 详细信息

以花生种子为试材,采用孢子浓度为1×106(个/m L)的黄曲霉菌接种花生种子,对抗产毒和易产毒品种间4种主要芪化物(resveratrol,ε-viniferin,δ-viniferin,pterostilbene)合成变化,相关抗性酶活性(PAL、POD、PPO)进行了比较,探讨了不同品种间芪化物的合成与抗黄曲霉菌产毒之间的相关性。结果表明:花生种子芪化物的合成速度与抗产毒有关。在接种黄曲霉菌第3天时,抗产毒品种黔花生3号4种芪化物含量达到峰值,含量为47.37μg/g,为对照的54倍;易产毒品种花育22号芪化物含量仅5.5μg/g;抗产毒品种芪化物含量和相关抗性酶(PAL、POD、PPO)活性都高于易产毒品种;在16个考察的花生品种中,发现了4个芪化物含量较高,病情指数和黄曲霉毒素含量相对较低的花生品种;相关分析发现,不同花生品种芪化物含量与病情指数、黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素总量呈极显著负相关,相关系数(r)分别为-0.789、-0.851、-0.850。因此,花生接种第3天时的芪化物含量可作为筛选和培育花生抗产毒品种的重要化学指标。

关键词：花生芪化物黄曲霉菌抗性

山刺番荔枝叶片挥发性成分的SPME-GC/MS分析

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果树学报 2015年第5期32卷 929-933页

作者：乔飞丛汉卿党志国王荣香邓穗生应东山陈业渊中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所.农业部华南作物基因资源与种质创制重点开放实验室海南儋州571737

【目的】鉴定山刺番荔枝叶片芳香气味的组成。【方法】采用固相微萃取结合气相色谱/质谱法,分析鉴定了山刺番荔枝叶片中的挥发性化学成分组成。【结果】共检出挥发性物质76种,包括烯类、醛类、醇类、脂类、酮类等,其中烯类物质种类最多... 详细信息

【目的】鉴定山刺番荔枝叶片芳香气味的组成。【方法】采用固相微萃取结合气相色谱/质谱法,分析鉴定了山刺番荔枝叶片中的挥发性化学成分组成。【结果】共检出挥发性物质76种,包括烯类、醛类、醇类、脂类、酮类等,其中烯类物质种类最多、含量最高。萜类物质蒎烯含量超过25%。对挥发性物质的香味进行分析,发现其包含25种香型,其中松柏香和木香荷载较大,而叶片中的辛香味应主要来自叶醛和苯甲醛。此外,还从挥发性成分中检出了抗癌活性物质β-榄香烯。【结论】本研究为山刺番荔枝叶片精油和药物的开发提供了参考。

关键词：山刺番荔枝叶片挥发性物质固相微萃取气相色谱/质谱

HPLC测定黄曲霉菌侵染后花生种子中6种芪化物

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中国油料作物学报 2013年第4期35卷 428-435页

作者：王琴飞应东山洪彩香李莉萍王明张如莲中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室海南儋州571737

为建立一种同时检测受黄曲霉菌侵染后花生种子中白藜芦醇糖苷(Piceid)、白皮杉醇(Piceatannol)、白藜芦醇(Resveratrol)、两种白藜芦醇二聚体(ε-viniferin、δ-viniferin)和紫檀芪(Pterostilbene)的高效液相色谱(HPLC)方法,探索不同种... 详细信息

为建立一种同时检测受黄曲霉菌侵染后花生种子中白藜芦醇糖苷(Piceid)、白皮杉醇(Piceatannol)、白藜芦醇(Resveratrol)、两种白藜芦醇二聚体(ε-viniferin、δ-viniferin)和紫檀芪(Pterostilbene)的高效液相色谱(HPLC)方法,探索不同种植年度和地区的花生种子,在受黄曲霉菌侵染后6种芪化物的合成规律,采用PurospherSTAR RP-18e色谱柱(Hiber150×4.6mm,5μm);流动相为乙腈、水和2%甲酸水溶液三元梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长306nm,流速1mL/min。结果显示,6种芪化物线性范围在1～100mg/L之间与峰面积的线性关系良好,相关系数在0.999 0～0.999 9之间;精密度、重复性和稳定性的标准偏差(RSD)都低于4.7%;检出限为0.01～0.05mg/L;加标回收率在95.2%～102.0%之间(n=3);所测两个品种的花生种子在受到黄曲霉菌侵染后,6种芪化物总含量在不同种植年度间变化差异较小,分别为1.23和0.40μg/g;在不同种植地区间变化差异较大,分别为33.69和71.08μg/g,品种间芪化物合成量与侵染率呈负相关。

关键词：花生白藜芦醇芪化物高效液相色谱法(HPLC)

我国芒果主栽品种遗传多样性分析及指纹图谱构建

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南方农业学报 2015年第7期46卷 1154-1159页

作者：王明应东山王琴飞李莉萍张如莲中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部热带作物品种资源利用重点开放实验室海南儋州571737

【目的】研究芒果主栽品种遗传多样性,构建指纹图谱,为芒果品种创新及选育提供理论依据。【方法】利用115对SSR引物对30个芒果品种进行遗传多样性分析和聚类分析,分析其亲缘关系。【结果】从115对SSR引物中筛选出64对多态性引物,扩增条... 详细信息

【目的】研究芒果主栽品种遗传多样性,构建指纹图谱,为芒果品种创新及选育提供理论依据。【方法】利用115对SSR引物对30个芒果品种进行遗传多样性分析和聚类分析,分析其亲缘关系。【结果】从115对SSR引物中筛选出64对多态性引物,扩增条带总数为343条,多态性比例为73.2%。每对引物可检测到等位位点3.9个,基因多样性为0.54,Shannon’s信息指数为1.00,多样性信息平均指数为0.49,具有较高的遗传多样性。聚类分析结果表明,可将30份主栽品种分为四大类,第Ⅰ类包括14份材料;第Ⅱ类包括11份材料,主要为国外引种而获得的品种;第Ⅲ类包括4份材料,为缅三、帕拉英达、白玉和红象牙;第Ⅳ类仅有一份材料,为马切苏。选用7对SSR标记M42、M49、M54、M55、M96、M99和M103构建了30份芒果种质的数字化指纹图谱,可完全区分30份芒果主栽品种。【结论】30份芒果材料的基因组遗传较复杂,遗传信息较丰富,具有较高的遗传多样性。

关键词：芒果主栽品种 SSR分子标记聚类分析指纹图谱

H_2O_2诱导不同品种花生叶片中白藜芦醇合成变化

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西南农业学报 2016年第9期29卷 2086-2092页

作者：王琴飞汪彪张如莲应东山王明李莉萍中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室/农业部热带作物种子种苗质量监督检验测试中心海南儋州571737 海南大学儋州校区应用科技学院海南儋州571737

花生叶片中白藜芦醇含量较少或检测不到,合理的诱导方式可以使花生植株中白藜芦醇积累。实验以花生幼苗叶片为材料,研究了H2O2诱导不同品种花生幼苗中白藜芦醇合成差异,同时对花生种皮颜色、种子单粒重与其叶片中白藜芦醇合成差异的相... 详细信息

花生叶片中白藜芦醇含量较少或检测不到,合理的诱导方式可以使花生植株中白藜芦醇积累。实验以花生幼苗叶片为材料,研究了H2O2诱导不同品种花生幼苗中白藜芦醇合成差异,同时对花生种皮颜色、种子单粒重与其叶片中白藜芦醇合成差异的相关性进行了探讨。结果表明,H2O2能诱导不同品种的花生幼苗叶片中白藜芦醇的显著增加,并在24～36 h达到合成高峰;在考察的浅褐色、浅红色、粉色和深红色品种中白藜芦醇最高含量分别达到了7.2、35.5、7.6和16.9μg/g。花生叶片中白藜芦醇的原始含量和诱导后合成最大值与花生种子的种皮颜色无关。8个相同种皮颜色的花生品种,种子单粒重与未诱导的花生叶片中白藜芦醇含量呈显著负相关,相关系数（r）为-0.827;考察的四类种皮颜色的17个花生品种中,种子单粒重与未诱导的花生叶片中白藜芦醇含量极显著负相关,相关系数（r）为-0.742;不同品种花生叶片中白藜芦醇诱导合成潜力与种子单粒重相关性不显著。研究表明,H2O2能花生幼苗中白藜芦醇的增加,种子单粒重可作为评价花生品种中原始白藜芦醇含量高低的依据;花生合成白藜芦醇的潜力与诱导后放置合适时间有关,花生种皮颜色不能作为筛选高含量白藜芦醇花生品种的依据。

关键词：白藜芦醇 H2O2 花生品种诱导

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野生稻优良基因资源的研究与应用进展

热带农业科学 2014年第1期34卷 34-41页

作者：李莉萍应东山张如莲中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室海南儋州571737

野生稻是栽培稻的野生近缘种,作为重要的基因资源,具有诸多的优良性状,如野生稻对病虫害的抗性、对各种逆境的耐受性以及胞质雄性不育等,已被广泛应用于现代栽培稻的育种改良,成为栽培稻遗传改良的丰富基因源和不可替代的物质基础。本... 详细信息

野生稻是栽培稻的野生近缘种,作为重要的基因资源,具有诸多的优良性状,如野生稻对病虫害的抗性、对各种逆境的耐受性以及胞质雄性不育等,已被广泛应用于现代栽培稻的育种改良,成为栽培稻遗传改良的丰富基因源和不可替代的物质基础。本文综述了野生稻优良基因的发掘和种质资源的利用现状,总结了野生稻保护和利用目前存在的问题,并对其在水稻育种中的应用潜力做出了展望。

关键词：野生稻优良基因应用进展

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HPLC测定西番莲中叶黄素和β-胡萝卜素

热带作物学报 2016年第3期37卷 609-614页

作者：王琴飞张如莲徐丽高玲应东山王明李莉萍中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与品种创制重点实验室农业部热带作物种子种苗质量监督检验测试中心海南儋州571737

为建立西番莲果肉中叶黄素和β-胡萝卜素的快速提取和HPLC检测方法,以西番莲果肉为试材,对叶黄素和β-胡萝卜素的提取和检测方法进行优化。结果表明:2种类胡萝卜素的最佳提取条件为1 050μL的乙酸乙酯-二氯甲烷-正己烷有机混合溶剂(64... 详细信息

为建立西番莲果肉中叶黄素和β-胡萝卜素的快速提取和HPLC检测方法,以西番莲果肉为试材,对叶黄素和β-胡萝卜素的提取和检测方法进行优化。结果表明:2种类胡萝卜素的最佳提取条件为1 050μL的乙酸乙酯-二氯甲烷-正己烷有机混合溶剂(64∶16∶4,V/V/V),10min左右可高效提取西番莲果肉中叶黄素和β-胡萝卜素。以C30色谱柱;流动相:甲醇-叔丁基甲醚(80:20,V/V)等度洗脱;流速:0.8 m L/min;进样量:20μL;柱温:30℃;检测波长:450 nm。该色谱条件下,叶黄素和β-胡萝卜素线性关系良好,相关系数(R2)分别为0.999 0和0.999 3;检出限为0.01μg/m L和0.02μg/m L;2种类胡萝卜素的平均回收率分别达到了98.47%、96.43%;样品稳定性和检测方法准确度较好,RSD黄果西番莲>紫果西番莲的趋势。该提取和检测方法具有速度快、有机溶剂用量少,灵敏度高等优点,能在短时间内实现大量西番莲样品中叶黄素和β-胡萝卜素的提取和检测。

关键词：西番莲叶黄素 β-胡萝卜素高效液相色谱法

激素和非生物胁迫对花生叶片白藜芦醇及其代谢产物合成的影响

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中国油料作物学报 2015年第3期37卷 301-309,321页

作者：王琴飞许强张如莲刘迪发应东山王明李莉萍中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室海南儋州571737 海南大学应用科技学院海南儋州571737

花生中白藜芦醇含量较低,但逆境可诱导大量白藜芦醇的积累。通过3种激素[水杨酸(SA)、乙烯利(ETH)、茉莉酸甲酯(Me JA)]和3种非生物胁迫[UV-C、H2O2、百草枯(PQ)]的方式在不同条件下进行诱导。结果表明:避光放置有利于UV-C处理后的花生... 详细信息

花生中白藜芦醇含量较低,但逆境可诱导大量白藜芦醇的积累。通过3种激素[水杨酸(SA)、乙烯利(ETH)、茉莉酸甲酯(Me JA)]和3种非生物胁迫[UV-C、H2O2、百草枯(PQ)]的方式在不同条件下进行诱导。结果表明:避光放置有利于UV-C处理后的花生叶片中白藜芦醇及其代谢产物的合成,4种芪化物(Res、PS、ε-viniferin、δ-viniferin)总含量为38.17μg/gFW;不避光(光照和黑暗交替16/8h)放置有利于H2O2、PQ、SA、ETH和Me JA处理后白藜芦醇及其代谢产物的合成,这5种处理芪化物总含量分别为32.76、32.21、0.49、2.42和1.42μg/gFW。在适当的剂量范围内,花生叶片中白藜芦醇及其代谢产物的积累随剂量的增加而增加,最佳的处理剂量分别为2.0h UV-C,1mmol/L PQ、1%H2O2、10mmol/L SA、50mmol/L ETH和50mmol/L Me JA;4种芪化物中以Res含量增加较为显著,而代谢产物的含量较低。研究表明,激素或非生物胁迫可诱导花生叶片中白藜芦醇及其代谢产物的积累,花生可作为一种获取白藜芦醇及其代谢产物的植物源。

关键词：花生白藜芦醇代谢产物激素非生物胁迫