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梅花鹿鹿茸茸皮提取物对伤口愈合的影响

时珍国医国药 2023年第8期34卷 1875-1878页

作者：罗恩晶王婷婷吕程王雨廷幺宝金董海司长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117

目的研究梅花鹿鹿茸茸皮对小鼠成纤维细胞增殖、迁移以及促进伤口愈合的影响。方法采用冷提冻干技术获得梅花鹿鹿茸茸皮水提物。体外培养小鼠成纤维细胞,应用CCK-8法和细胞迁移实验分别检测梅花鹿鹿茸茸皮提取物对小鼠成纤维细胞增殖和... 详细信息

目的研究梅花鹿鹿茸茸皮对小鼠成纤维细胞增殖、迁移以及促进伤口愈合的影响。方法采用冷提冻干技术获得梅花鹿鹿茸茸皮水提物。体外培养小鼠成纤维细胞,应用CCK-8法和细胞迁移实验分别检测梅花鹿鹿茸茸皮提取物对小鼠成纤维细胞增殖和迁移的影响;采用免疫荧光技术检测小鼠成纤维细胞中Collagen III基因的表达,同时采用qRT-PCR检测Col1a1、Fibronection、TGF-β1、CD90基因的mRNA表达水平。除此之外,建立小鼠皮肤损伤模型,观察梅花鹿鹿茸茸皮提取物对伤口愈合的影响。结果梅花鹿鹿茸茸皮提取物能促进小鼠成纤维细胞增殖并提高细胞迁移率;同时能提高胶原沉积,促进Col1a1、Fibronection、Tgf-β1、CD90 mRNA的表达水平(P<0.05);并且促进小鼠伤口愈合。结论梅花鹿鹿茸茸皮通过上调Col1a1、Fibronection、Tgf-β1、CD90基因的表达水平来促进伤口愈合的作用机制,为鹿茸的生长机制及组织修复损伤提供临床治疗的理论依据。

关键词：梅花鹿茸皮小鼠成纤维细胞胶原沉积伤口愈合

传统中医理论指导下的中药防治骨质疏松研究进展

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中国中医基础医学杂志 2022年第4期28卷 649-653页

作者：管孟琪周振薇幺宝金冷向阳长春中医药大学长春130117 长春中医药大学人参科学研究院长春130117

骨质疏松症是一种全身代谢性骨骼系统疾病,主要表现为骨量减少、骨微结构破坏、骨脆性增加并易发生骨折等症状。随着人口老龄化的愈发严重,中国乃至全世界都面临着许多与老龄化有关的代谢性疾病的难题,骨质疏松作为目前骨科临床多见的... 详细信息

骨质疏松症是一种全身代谢性骨骼系统疾病,主要表现为骨量减少、骨微结构破坏、骨脆性增加并易发生骨折等症状。随着人口老龄化的愈发严重,中国乃至全世界都面临着许多与老龄化有关的代谢性疾病的难题,骨质疏松作为目前骨科临床多见的老年病,已经严重影响了人们的生活质量。大量的研究表明,中药可显著提高骨质疏松患者的骨密度并改善其临床症状,在骨质疏松症防治过程中具有独特的优势,中药在疾病治疗中的科学性也逐渐被全世界认可。本文基于国内外防治骨质疏松的研究成果,将传统中医理论与现代医学理论相结合,对“补肾壮骨”“补益肝肾”“调补脾肾”和“活血化瘀”等中医理论指导下的中药防治骨质疏松的研究进行了归纳和总结,为中药防治骨质疏松研究提供新的思路与想法。

关键词：中药骨质疏松雌激素成骨细胞破骨细胞

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鹿筋胶原蛋白提取条件优化

延边大学农学学报 2020年第1期42卷 69-75页

作者：张鹏程幺宝金冷向阳长春中医药大学吉林长春130021

为对鹿筋胶原蛋白提取条件进行优化,该试验采用单因素分析及正交试验筛选出鹿筋胶原蛋白提取条件,以及提取产物对体外培养MC3T3成骨细胞的增殖作用。结果表明:最佳提取条件为醋酸体积分数5%,浸泡时间48 h,煎煮时间1.5 h,胃蛋白酶用量1∶... 详细信息

为对鹿筋胶原蛋白提取条件进行优化,该试验采用单因素分析及正交试验筛选出鹿筋胶原蛋白提取条件,以及提取产物对体外培养MC3T3成骨细胞的增殖作用。结果表明:最佳提取条件为醋酸体积分数5%,浸泡时间48 h,煎煮时间1.5 h,胃蛋白酶用量1∶1000,酶解时间6 h,鹿筋胶原蛋白回收率58.56%,蛋白质含量48.4%。优化后的条件下提取的鹿筋胶原蛋白对MC3T3细胞具有显著的增殖作用,其增殖作用呈量效关系,当浓度为8 mg/mL时,增殖作用最为显著。因此,鹿筋胶原蛋白提取条件优化后,回收率增加;鹿筋胶原蛋白对体外培养的成骨细胞具有明显的增殖作用,为其产品的开发提供理论依据。

关键词：鹿筋胶原提取工艺

园参、野山参、西洋参中水溶性蛋白成分的比较研究

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时珍国医国药 2010年第1期21卷 51-53页

作者：幺宝金赵雨邢楠楠张梅长春中医药大学中医药与生物工程研发中心吉林长春130117

目的对园参、野山参及西洋参中水溶性蛋白成分进行比较研究,为人参药材的鉴别和质量评价提供依据。方法采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)及凝胶电泳图像分析软件,比较三者在蛋白分布及含量上的差异。结果园参、野山参、西洋参的S... 详细信息

目的对园参、野山参及西洋参中水溶性蛋白成分进行比较研究,为人参药材的鉴别和质量评价提供依据。方法采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)及凝胶电泳图像分析软件,比较三者在蛋白分布及含量上的差异。结果园参、野山参、西洋参的SDS-PAGE图谱及凝胶分析图谱存在很大差异。结论可以通过SDS-PAGE法对园参、野山参、西洋参进行鉴别、质量评价及药效关系探究。

关键词：园参野山参西洋参水溶性蛋白 SDS—PAGE

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梅花鹿三岔茸活性蛋白表达谱分析研究

时珍国医国药 2018年第7期29卷 1607-1609页

作者：刘宇昕赵雨张梅刘美欣胡耀中幺宝金长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 长春中医药大学创新实践中心吉林长春130117

目的对梅花鹿三岔茸中的活性蛋白表达谱进行分析研究,为鹿茸的质量评价和临床应用提供理论依据。方法采用同位素标记蛋白质定性定量及液相色谱-质谱联用分析技术对梅花鹿三岔茸活性蛋白进行定性和定量分析,比较三岔茸生长过程中活性蛋... 详细信息

目的对梅花鹿三岔茸中的活性蛋白表达谱进行分析研究,为鹿茸的质量评价和临床应用提供理论依据。方法采用同位素标记蛋白质定性定量及液相色谱-质谱联用分析技术对梅花鹿三岔茸活性蛋白进行定性和定量分析,比较三岔茸生长过程中活性蛋白的功能分类及蛋白表达差异。结果梅花鹿三岔茸生长过程中显著性变化的差异表达蛋白主要为细胞外基质和钙结合蛋白,这些蛋白主要参与调控血液系统循环和神经生长及发育。结论三岔茸中富含大量具有生物学活性的功能蛋白类成分,并且在不同生长阶段活性蛋白的类型和表达量截然不同。这些研究结果为研究梅花鹿茸质量评价和临床应用具有重要意义。

关键词：梅花鹿三岔茸蛋白质定性定量液相色谱-质谱联用活性蛋白

骨痹止痛丸对肾阳虚大鼠软骨调控作用机制研究

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环球中医药 2022年第5期15卷 738-744页

作者：杨朔杨杰章敬程幺宝金冷向阳长春中医药大学中医学院 130117 长春中医药大学人参科学研究院 130117

目的探讨骨痹止痛丸对肾阳虚大鼠软骨的保护作用及调控机制。方法根据随机数字表法将30只SPF级6周龄雄性大鼠分为对照组、肾阳虚组、骨痹止痛丸组,每组10只。对照组大鼠后肢肌肉注射0.9%生理盐水0.3 mL,每日1次,连续22天。肾阳虚组大鼠... 详细信息

目的探讨骨痹止痛丸对肾阳虚大鼠软骨的保护作用及调控机制。方法根据随机数字表法将30只SPF级6周龄雄性大鼠分为对照组、肾阳虚组、骨痹止痛丸组,每组10只。对照组大鼠后肢肌肉注射0.9%生理盐水0.3 mL,每日1次,连续22天。肾阳虚组大鼠后肢肌肉注射氢化可的松混悬液2.5 mg/100 g,每日1次,连续进行22天。骨痹止痛丸组大鼠后肢肌肉注射氢化可的松混悬液2.5 mg/100 g,每日1次,连续22天,从第8天开始,以1.05 g/(kg·d)的剂量给予骨痹止痛丸水溶液灌胃给药,每日1次,连续进行15天,直至第22天。给药期间记录大鼠体质量变化。连续给药22天后麻醉大鼠,腹主动脉取血;处死大鼠,取肾脏和膝关节软骨组织,以苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法进行病理切片观察。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)法检测各组大鼠膝关节软骨中Col2a1、Col9a1、Col10a1、Col11a1、Acan、Comp、Hapln1、Ibsp、Wwp2、Sox9、Sox5、Sox4等基因的表达水平。酶联免疫吸附法(enzyme cinked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组大鼠血清促肾上腺皮质激素(adreno cortico tropic hormone,ACTH)、皮质醇(cortisol,CORT)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和睾酮(testosterone,T)水平。结果(1)与对照组比较,肾阳虚组血清ACTH、T、LH、CORT水平显著降低(P<0.05),经骨痹止痛丸给药治疗后,以上指标显著上升(P<0.05)。(2)膝关节软骨病理切片结果:肾阳虚组大鼠膝关节软骨层表面塌陷,凹凸不平,软骨层明显变薄,软骨细胞固缩,软骨基质成分明显减少。骨痹止痛丸组软骨层增厚,表面光滑连续,相比肾阳虚组软骨层中软骨细胞数量、软骨基质和同源软骨细胞数目增加,软骨层下骨小梁成分增宽,分布数量增加。肾脏病理切片结果:对照组肾脏肾小管和肾小球均未见异常变化;肾阳虚组肾小球扩张,近曲小管变性,远曲小管扩张。骨痹止痛丸组肾小球扩张程度减轻,肾小管功能状态改善,近曲小管未见明显变性,远曲小管未见明显扩张。(3)qRT-PCR检测结果:肾阳虚组较对照组的Col2a1、Col9a1、Col10a1、Col11a1、Acan、Comp、Hapln1、Ibsp、Wwp2、Sox9、Sox5、Sox4等基因表达明显下调(P<0.05);与肾阳虚组相比,骨痹止痛丸组以上基因表达明显上调(P<0.05)。结论骨痹止痛丸能够有效改善大鼠肾阳虚的病理状态,并通过调控Col2a1、Col9a1、Col10a1、Col11a1、Acan、Comp、Hapln1、Ibsp、Wwp2、Sox9、Sox5、Sox4等基因的表达,从而达到保护软骨的效果。

关键词：骨痹止痛丸肾主骨肾阳虚软骨机制

健骨胶囊对成骨样细胞MC3T3-E1增值及分化作用的机制研究

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中国骨质疏松杂志 2021年

作者：贾玉岩周振薇王旭凯杨宇安刘茜幺宝金冷向阳长春中医药大学中医学院长春中医药大学吉林省人参科学研究院长春中医药大学附属医院骨科长春中医药大学附属医院继续教育学院

目的探讨国医大师刘柏龄“健骨胶囊”对MC3T3-E1成骨细胞分化及增殖的影响。方法制备健骨胶囊水提物，采用CCK-8法和细胞迁移实验检测健骨胶囊提取物对MC3T3-E1细胞增殖和细胞迁移的影响；茜素红染色检测MC3T3-E1细胞的矿化能力；实...

目的探讨国医大师刘柏龄“健骨胶囊”对MC3T3-E1成骨细胞分化及增殖的影响。方法制备健骨胶囊水提物，采用CCK-8法和细胞迁移实验检测健骨胶囊提取物对MC3T3-E1细胞增殖和细胞迁移的影响；茜素红染色检测MC3T3-E1细胞的矿化能力；实时荧光定量PCR检测成骨分化基因Runx2、OCN、OPN、Col1a1、ALP、Bcl2、RASSF1A等mRNA表达水平；蛋白质印迹法Westernblot检测Col1a1、Bcl2的蛋白表达水平。结果健骨胶囊提取物能促进MC3T3-E1细胞增殖、使细胞迁移率提高；同时健骨胶囊提取物组能明显提高MC3T3-E1细胞钙化能力(P＜0.01)，促进Runx2、OCN、OPN、Col1a1、ALP、Bcl2的mRNA的表达(P＜0.05))，上调Col1a1、Bcl2蛋白量的表达。结论健骨胶囊能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖及细胞迁移能力，并通过上调成骨基因的表达水平，如Runx2、OCN、OPN、Col1a1、ALP、Bcl2等，提高MC3T3-E1细胞的成骨能力。

关键词：

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哈蟆油水溶性总蛋白抗疲劳活性的研究

食品工业科技 2011年第11期32卷 417-419页

作者：张梅赵雨李芸彤幺宝金曲晓波长春中医药大学中医药与生物工程研发中心吉林长春130117 吉林大学公共卫生学院吉林长春130021

研究了哈蟆油水溶性总蛋白的抗疲劳药理活性。采用中性缓冲液浸提,硫酸铵沉淀法制备哈蟆油水溶性总蛋白。设立哈蟆油水溶性总蛋白低、中、高三个剂量组(0.075、0.15、0.30g/kg),同时设立空白对照组,小鼠灌胃给药30d。观察小鼠体重、负... 详细信息

研究了哈蟆油水溶性总蛋白的抗疲劳药理活性。采用中性缓冲液浸提,硫酸铵沉淀法制备哈蟆油水溶性总蛋白。设立哈蟆油水溶性总蛋白低、中、高三个剂量组(0.075、0.15、0.30g/kg),同时设立空白对照组,小鼠灌胃给药30d。观察小鼠体重、负重游泳时间、尿素氮含量、肝糖原含量、血乳酸含量等指标的变化。实验结果表明,哈蟆油水溶性总蛋白可延长小鼠负重游泳时间,降低血清尿素氮含量,显著增加肝糖原含量,显著降低血乳酸含量,对小鼠的体重无明显影响。证明了哈蟆油水溶性总蛋白具有一定的抗疲劳作用。

关键词：哈蟆油水溶性总蛋白抗疲劳

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圣科健骨胶囊对大鼠血清差异蛋白的影响

中成药 2019年第4期41卷 789-793页

作者：幺宝金果淑凤袁劲松刘佳赵大庆长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 北京世纪圣科科技发展有限公司北京100010 长春中医药大学药学院吉林长春130117

目的探讨圣科健骨胶囊对大鼠血清差异蛋白的影响。方法采用iTRAQ技术结合生物信息学分析,比较空白组和圣科健骨胶囊组大鼠血清中的差异蛋白,筛选与圣科健骨胶囊健骨功效相关的功能蛋白。结果与空白组比较,圣科健骨胶囊组大鼠血清中的差... 详细信息

目的探讨圣科健骨胶囊对大鼠血清差异蛋白的影响。方法采用iTRAQ技术结合生物信息学分析,比较空白组和圣科健骨胶囊组大鼠血清中的差异蛋白,筛选与圣科健骨胶囊健骨功效相关的功能蛋白。结果与空白组比较,圣科健骨胶囊组大鼠血清中的差异蛋白主要为参与蛋白水解调节、外源刺激反应调节、压力反应调节、大分子复合物亚基组织和肽酶活性调节等生物进程的功能蛋白,其中显著上调者主要包括Greb1、Prkd3、Tns4、Serpina3m等调控骨形成及骨质密度的功能蛋白,显著下调者主要包括Zfhx2、Nfkbiz、Kng1、Hpn、Prkcsh等参与骨关节炎和风湿性关节炎炎性反应的相关因子。结论圣科健骨胶囊的健骨功效主要是通过上调参与调控骨密度和骨形成过程的功能蛋白表达来实现的,同时可通过抑制相关炎性因子表达来防治骨关节炎和风湿性关节炎。

关键词：圣科健骨胶囊血清差异蛋白