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凝结芽孢杆菌对镉暴露下鲤肝脏镉含量、抗氧化能力及炎症反应的影响

第四届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：常绪路方呈祥彭方武汉大学生命科学学院

北极因其独特的气候条件,终年被冰雪覆盖。随着全球变暖进程的加速,北极冰川正逐步消退。本研究从北极斯瓦尔巴德群岛新奥尔松地区的Midtre Lovenbreen冰川退缩前沿8个不同时间暴露点(0-7号采样点,其中0号采样点暴露时间最短,暴露时间... 详细信息

北极因其独特的气候条件,终年被冰雪覆盖。随着全球变暖进程的加速,北极冰川正逐步消退。本研究从北极斯瓦尔巴德群岛新奥尔松地区的Midtre Lovenbreen冰川退缩前沿8个不同时间暴露点(0-7号采样点,其中0号采样点暴露时间最短,暴露时间随样品编号增加而增长)

关键词：北极可培养细菌平板计数 16S rRNA基因序列

来源： cnki会议评论

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水产学报 2023年第4期47卷 152-160页

作者：常绪路陈永艳康美如冯军厂张建新河南师范大学水产学院

为了探究凝结芽孢杆菌SCC-19对镉暴露下鲤肝脏镉含量、抗氧化能力以及炎症反应的影响，实验选取平均体重为(34.00±1.16) g的鲤450尾，随机分为5组(每组3个重复，每个重复30尾)，即对照组、0.5 mg/L Cd2+组、0.5 mg/L Cd2++107CFU/g凝... 详细信息

为了探究凝结芽孢杆菌SCC-19对镉暴露下鲤肝脏镉含量、抗氧化能力以及炎症反应的影响，实验选取平均体重为(34.00±1.16) g的鲤450尾，随机分为5组(每组3个重复，每个重复30尾)，即对照组、0.5 mg/L Cd2+组、0.5 mg/L Cd2++107CFU/g凝结芽孢杆菌组，0.5 mg/L Cd2++108CFU/g凝结芽孢杆菌组以及0.5 mg/L Cd2++109CFU/g凝结芽孢杆菌组(分别记为DK、D、DA、DB和DC)，养殖8周。结果显示，与镉暴露组相比，凝结芽孢杆菌SCC-19能够有效降低鲤肝脏中镉含量，显著提高金属硫蛋白(MT)的水平，降低血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性。此外，凝结芽孢杆菌组鲤肝脏总抗氧化能力(TAOC)、抗超氧阴离子自由基能力(ASA)和抑制羟自由基能力(AHA)水平显著高于镉暴露组，而活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)水平显著低于镉暴露组。另外，凝结芽孢杆菌SCC-19可以恢复鲤肝脏因镉暴露造成的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β)、转化生长因子-β (TGF-β)等基因的异常表达。研究表明，凝结芽孢杆菌SCC-19可以减少镉暴露下鲤肝脏镉含量，缓解氧化应激，抑制炎症反应。研究结果有助于探索凝结芽孢杆菌做为饲料添加剂缓解水产动物镉毒性的可能性。

关键词：鲤镉益生菌肝脏氧化损伤

基于宏基因组学研究怀地黄对鲤鱼肠道微生物群落组成的影响

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河南师范大学学报（自然科学版） 2022年第5期50卷 124-130,I0005,I0006,I0007页

作者：常绪路康美如冯军厂张建新河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心河南新乡453007

鲤鱼(Cyprinus carpio L.)是我国淡水养殖鱼类的主要品种之一,其养殖过程中病害给养殖业带来重大经济损失.已有研究表明怀地黄(Rehmannia glutinosa,RG)作为饲料添加剂,具有提高鲤鱼免疫力和抵抗病害的功能,但机制尚不明确.利用宏基因... 详细信息

鲤鱼(Cyprinus carpio L.)是我国淡水养殖鱼类的主要品种之一,其养殖过程中病害给养殖业带来重大经济损失.已有研究表明怀地黄(Rehmannia glutinosa,RG)作为饲料添加剂,具有提高鲤鱼免疫力和抵抗病害的功能,但机制尚不明确.利用宏基因组技术研究饲料中添加4%(质量分数)怀地黄对鲤肠道微生物群落组成的影响.结果表明梭杆菌门(Fusobacteria),变形杆菌门(Proteobacteria),拟杆菌门(Bacteroidetes),广古菌门(Euryarchaeota),奇古菌门(Thaumarchaeota),短尾噬菌体(Siphoviridae),肌尾噬菌体(Myoviridae),长尾噬菌体(Podoviridae),子囊菌门(Ascomycota)和担子菌门(Basidiomycota)是鲤肠道主要微生物类群.怀地黄可以增加鲤鱼肠道中益生菌、短链脂肪酸产生菌和产甲烷古菌的丰度,同时降低一些鱼类病毒的丰度.研究结果表明,饲料中添加怀地黄可以改善鲤鱼肠道微生物组成,提高有益菌的丰度而降低有害微生物的含量.研究结果为解析怀地黄增强鲤鱼免疫力的机制奠定了基础.

关键词：怀地黄鲤鱼肠道微生物组宏基因组

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微生物β-甘露聚糖酶的研究进展

中国酿造 2019年第4期38卷 7-10页

作者：张建新宋宜乐冯军厂常绪路河南师范大学水产学院河南新乡453007

β-1,4-D-甘露聚糖酶是一种广谱诱导型多功能酶,广泛存在于植物、动物和微生物中,其主要存在于微生物中,主要水解产物为甘露寡糖。该文对β-甘露聚糖酶的来源、酶结构、催化机制及过去和现在的应用进行了综述,并对β-甘露聚糖酶在动物... 详细信息

β-1,4-D-甘露聚糖酶是一种广谱诱导型多功能酶,广泛存在于植物、动物和微生物中,其主要存在于微生物中,主要水解产物为甘露寡糖。该文对β-甘露聚糖酶的来源、酶结构、催化机制及过去和现在的应用进行了综述,并对β-甘露聚糖酶在动物生产、饲料、食品、医药、石油开采及生物技术等方面的广泛应用进行介绍,为β-甘露聚糖酶的基础研究和开发提供参考和依据。

关键词： β-甘露聚糖酶来源结构催化机制应用

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水产微生物学课程思政教育的探索与实践

河南水产 2021年第2期 36-38页

作者：常绪路张建新河南师范大学水产学院河南新乡453007

涉农专业应落实立德树人根本任务,深入挖掘专业课程中蕴含的思想政治教育元素,培养学生家国情怀。本文以河南师范大学水产养殖专业核心课程-水产微生物学课程为例,分析水产养殖专业课开展课程思政教育的必要性,并从课程概况、思政目标... 详细信息

涉农专业应落实立德树人根本任务,深入挖掘专业课程中蕴含的思想政治教育元素,培养学生家国情怀。本文以河南师范大学水产养殖专业核心课程-水产微生物学课程为例,分析水产养殖专业课开展课程思政教育的必要性,并从课程概况、思政目标、课程思政融入点、实施路径以及效果评价方面开展课程思政教育的探索和实践。

关键词：水产养殖水产微生物学课程思政

饲料中添加单株和多株乳酸乳球菌对鲤肠道健康、先天免疫和抗氧化能力的影响

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中国水产科学 2023年第6期30卷 711-722页

作者：刘小贝刘莎莎崔文姗袁逍常绪路张建新冯军厂河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心

为研究饲料中添加单株和多株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)对鲤(Cyprinus carpio)肠道健康、先天免疫应答和抗氧化能力的影响,将480尾健康鲤随机分为8组, CK (对照)组饲喂普通饲料,处理组分别饲喂添加乳酸乳球菌的7种饲料:G1组(Lactoc... 详细信息

为研究饲料中添加单株和多株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)对鲤(Cyprinus carpio)肠道健康、先天免疫应答和抗氧化能力的影响,将480尾健康鲤随机分为8组, CK (对照)组饲喂普通饲料,处理组分别饲喂添加乳酸乳球菌的7种饲料:G1组(Lactococcus lactis Q-8)、G2组(L. lactis Q-9)、G3组(L. lactis Z-2)、G4组(L. lactis Q-8+L. lactis Q-9)、G5组(Claudin Q-8+L. lactis Z-2)、G6组(L. lactis Q-9+L. lactis Z-2)、G7组(L. lactis Q-8,+L. lactis Q-9+***-2),饲喂60d。结果显示,饲料中添加乳酸乳球菌可显著提高鲤肠道蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性和紧密连接蛋白基因(***, ZO-1)表达量,且多菌株处理组效果更显著(P0.05)。处理组对肝胰脏抗氧化能力的调节作用显著高于对照组(P<0.05),其中G7组对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的调节作用更为显著(P<0.05)。上述结果表明,该3种乳酸乳球菌均能有效改善鲤的肠道健康、先天免疫应答和抗氧化能力,并且联合使用的效果优于单一菌株。

关键词：鲤乳酸菌肠道健康先天免疫抗氧化活性

乳酸乳球菌Q-9胞外多糖对鲤先天免疫应答、抗氧化活性和抗病性能的影响

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水产学报 2020年第9期44卷 1477-1487页

作者：冯军厂蔡忠良陈永艳常绪路刘慧芬赵燕静张建新河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心水产动物疾病控制河南省工程实验室

为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响,实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养,检测头肾细... 详细信息

为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响,实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养,检测头肾细胞的增殖能力和吞噬活性,以及孵育液中一氧化氮(NO)和细胞因子的合成量。将300尾健康鲤[(47.66±0.43) g]随机分为5组,对照组(阴性和阳性)灌喂无菌的磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline, PBS),处理组分别灌喂不同浓度的EPS-9 (250、500和1 000μg/mL),1次/天,连续处理7 d后取血液和肝胰腺组织。随后,阳性组和处理组腹腔注射嗜水气单胞菌,阴性组用无菌PBS处理,感染24 h后取血液和肝胰腺组织。分别检测血清中NO和细胞因子的合成量,及溶菌酶(LZM)和碱性磷酸酶(AKP)的活性;肝胰腺组织中的抗氧化(T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px和MDA)指标。体外结果显示,EPS-9能显著增强鲤头肾细胞的增殖能力和吞噬活性,并提高NO、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的合成量。体内结果显示,与阴性对照组相比,EPS-9灌喂处理能显著上调血清中NO和促炎细胞因子的合成量,LZM和AKP活性,以及肝胰腺的抗氧化水平。嗜水气单胞菌感染后,NO、促炎细胞因子的合成量及LZM、AKP的活性均显著低于阳性对照组。但无论感染与否,EPS-9处理组血清中抗炎细胞因子的合成量均显著升高。研究表明,EPS-9在体内和体外均具备提高鲤的非特异性免疫、抗氧化活性和抗病原菌感染的能力,可作为一种安全有效的添加剂应用于水产养殖。

关键词：鲤乳酸菌胞外多糖免疫应答抗氧化活性抗病能力

椰果内生枯草芽孢杆菌YZ-21产β-甘露聚糖酶的纯化及酶学性质研究

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河南师范大学学报（自然科学版） 2020年第3期48卷 95-102页

作者：张建新郭祥瑞穆广亚冯军厂常绪路河南师范大学水产学院河南新乡453007

[目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH 4)2SO 4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,... 详细信息

[目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH 4)2SO 4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,最优方法为双水相萃取法,在双水相体系为16%(NH 4)2SO 4、18%PEG2000、2%NaCl条件下,纯化倍数最高可以达到3.06,酶回收率达到99.26%;酶学性质研究表明,β-甘露聚糖酶的最适反应pH为7.0,最适的反应温度是40℃,pH稳定性在3.0~7.0,热稳定范围在35~55℃之间;Ca^2+,Ba^2+,Mg^2+,K^+,Co^2+对酶都有激活作用,而Ca^2+激活作用最强,Cu^2+,Na^+,Zn^2+,Mn^2+,EDTA对酶有抑制作用.[结论]利用双水相萃取法较好纯化了β-甘露聚糖酶,酶学性质良好,可以广泛应用于饲料添加剂、纸浆漂白和食品加工等领域.

关键词： β-甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌分离纯化酶学性质

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鲤细胞因子多克隆抗体的制备及检测

水产学报 2018年第10期42卷 1615-1625页

作者：冯军厂常绪路朱振祥郭祥瑞赵燕静刘慧芬张建新聂国兴河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心水产动物疾病控制河南省工程实验室

为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载... 详细信息

为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载体,制备多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,并以此作为实验工具,检测经嗜水气单胞菌感染后鲤血清中炎性细胞因子的合成变化。结果显示,基因TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β融合蛋白分子量分别约为31.8、31.7、35.3、32.5、18.0和33.6 ku;抗体效价达到2.4×106;在病原菌感染后的不同阶段,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和抗炎细胞因子IL-10、TGF-β呈现出不同的合成变化。研究表明,制备的抗体具有较高的效价、亲和力和特异性,可用于鲤细胞因子的定量研究,该抗体的获得为鲤免疫应答与细胞因子合成的系统研究奠定了基础。同时,获取的鲤细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β的抗体亦可用于其他鱼类细胞因子蛋白质水平的定量研究。

关键词：鲤细胞因子原核表达抗体效价病原菌 ELISA