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黄芩苷通过调控PI3K/AKT信号通路抑制登革病毒感染诱导的人静脉内皮细胞的自噬

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南方医科大学学报 2024年第7期44卷 1272-1283页

作者：程瑶王远迎姚飞扬胡盼陈铭勰吴宁贵州医科大学基础医学院化学与生物化学实验室贵州贵阳561113

目的探究2型登革病毒(DENV-2)感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)对细胞自噬的影响及黄芩苷(BA)抗DENV-2感染的具体作用机制。方法HUVECs体外培养,设置对照组:HUVECs正常培养;DENV-2感染组:HUVECs+DENV-2;黄芩苷组:HUVECs+DENV-2+BA。用DENV-2感染HUVECs通过透射电镜观察自噬;Western blotting检测细胞自噬相关蛋白LC3、P62的表达,采用溶酶体红色荧光探针染色法观察DENV-2感染后HUVECs内溶酶体的pH变化;蛋白质组学筛查DENV-2感染HUVECs后差异蛋白的表达情况;使用CCK-8法测定黄芩苷对HUVECs活性的影响;RT-qPCR检测细胞内病毒RNA的复制情况;检测病毒NS1蛋白的表达情况;通过透射电镜观察细胞自噬;采用Lyso-Tracker Red染色法观察黄芩苷对DENV-2感染后HUVECs内溶酶体酸化的影响;检测细胞自噬相关蛋白ATG5、Beclin-1、LC3、P62的表达,自噬小体和溶酶体融合的关键蛋白STX17、SNAP29、VAMP8表达情况及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达。结果DENV-2感染可诱导细胞自噬小体的形成;DENV-2感染后LC3Ⅱ/LC3 I表达逐渐增高,48 h达到峰值(P<0.05);p62表达水平在感染前中期无明显变化,48 h后降低(P<0.05);Lysotracker red染色结果显示DENV-2感染组红色亮点较多,且染色明亮。CCK-8结果显示50μg/mL被视为黄芩苷对HUVECs细胞的最大无毒剂量。RT-qPCR结果显示随着黄芩苷浓度增加药物对病毒的抑制作用增强。黄芩苷可降低DENV-2 NS1蛋白的表达(P<0.001)。与DENV-2组相比,经过黄芩苷(50μg/mL)处理后,自噬减少,加入黄芩苷后抑制溶酶体酸化。黄芩苷组48 h LC3 II/LC3 I比值降低(P<0.05),48 h时p62表达增加(P<0.05)。经过黄芩苷处理后DENV-2诱导的自噬相关蛋白Beclin-1、ATG 5、STX17、SNAP29和VAMP8的表达下调(P<0.01)。蛋白组学结果显示PI3K-AKT通路在DENV的发病机制中可能发挥重要作用。加入PI3K抑制剂(LY294002)后,DENV-2的RNA表达水平降低,各组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达水平的蛋白表达水平降低(P<0.01)。用黄芩苷处理后,DENV-2感染组PI3K、AKT的mRNA表达水平均显著降低(P<0.05),而mTOR mRNA表达无明显变化。DENV-2感染组上调的p-PI3K、p-AKT的蛋白表达水平均降低(P<0.05),而p-mTOR表达无明显变化。DENV-2诱导的LC3、P62蛋白表达降低(P<0.05);在黄芩苷治疗组中也抑制了病毒诱导的自噬。结论DENV-2感染可促进HUVECs细胞自噬的发生,黄芩苷可抑制DENV-2的RNA和NS1蛋白的表达,可能通过抑制自噬发生及自噬体和溶酶体融合,降低DENV-2诱导的自噬,其作用机制可能是通过PI3K/AKT信号通路调控。

关键词：登革病毒黄芩苷自噬 PI3K/AKT 人脐静脉内皮细胞

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干部教育培训视域下案例教学创新研究

特区实践与理论 2024年第1期 58-63页

作者：贾飞扬深圳改革开放干部学院教研部改革开放史研究中心(深圳市人文社科重点研究基地)

案例教学作为理论联系实际的有效方法,近年来广泛应用于干部教育培训中。但总体来看还难以匹配政策层面的要求和高质量发展的需求,文章通过综合问卷调查发现,案例教学正面临着案例资源转化效果不理想、教师教学能力不足、教学效果评估... 详细信息

案例教学作为理论联系实际的有效方法,近年来广泛应用于干部教育培训中。但总体来看还难以匹配政策层面的要求和高质量发展的需求,文章通过综合问卷调查发现,案例教学正面临着案例资源转化效果不理想、教师教学能力不足、教学效果评估机制缺乏针对性和保障体系建设不完善等现实困境。由此,文章建议积极推进案例教学改革,加强实践案例向案例教学的有效转化,培养高素质的案例教学师资队伍,完善有效的案例教学评估机制,构建可持续性的案例教学保障体系,进一步推进干部教育培训的高质量发展。

关键词：案例教学干部教育挑战对策

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震撼世界的洞穴奇观

现代商业银行 2024年第14期 86-91页

作者：胡飞扬

腾龙洞中景观千姿百态，神秘莫测；洞外风光秀色可餐，令人流连忘返。水洞口的卧龙吞江瀑布落差20余米，吼声如雷，气势磅礴。腾龙洞集奇山秀水、宏大洞穴、层林怪石、幽深峡谷于一体，闻名遐迩。因风景雄奇险峻、天下无双，世界各地游...

腾龙洞中景观千姿百态，神秘莫测；洞外风光秀色可餐，令人流连忘返。水洞口的卧龙吞江瀑布落差20余米，吼声如雷，气势磅礴。腾龙洞集奇山秀水、宏大洞穴、层林怪石、幽深峡谷于一体，闻名遐迩。因风景雄奇险峻、天下无双，世界各地游客纷至沓来。2024年3月27日，从联合国总部传来喜讯，在联合国教科文组织执行局第219次会议上，恩施大峡谷—腾龙洞国家地质公园被正式批准为世界地质公园。腾龙洞风景区，闻名遐迩，震撼世界，位于中国西部名城湖北省利川市境内，这里山清水秀、风景如画。

关键词：

基于EPC模式的装配式建筑施工安全管理策略分析

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中国科技期刊数据库工业A 2024年第5期 0075-0078页

作者：龙飞扬萍乡市城市建设投资集团有限公司江西萍乡337000

在进入到现代社会以来,我国建筑工程事业逐步涌现出了多种新型工程项目建设模式,其中装配式房屋工程项目建设模式具备诸多的技术优势,获得了业界相关技术人员的好评和青睐。而在装配式房屋工程项目建设工作当中,通过EPC工程总承包模式应... 详细信息

在进入到现代社会以来,我国建筑工程事业逐步涌现出了多种新型工程项目建设模式,其中装配式房屋工程项目建设模式具备诸多的技术优势,获得了业界相关技术人员的好评和青睐。而在装配式房屋工程项目建设工作当中,通过EPC工程总承包模式应用,能够大大提高装配式建筑施工工作开展速率,无论是在施工方案设计、现场施工工作开展,还是在质量保障等方面都有着极高的应用价值。与此同时,设计部门要与施工单位进行紧密的沟通协作,不断优化和完善装配式建筑方案设计内容和施工图纸。但由于我国装配式建筑EPC工程总承包施工模式发展周期较为短暂,在装配式建筑安全管理工作当中仍旧存在不足和缺陷,相关工作人员需要从多方面对安全管理工作进行优化和改进,其中包含了现场施工人员的管理、现场施工信息化模拟、方案设计内容的优化等方面,进而真正体现出EPC模式在装配式建筑施工安全管理过程当中的作用和价值。

关键词： EPC工程总承包模式装配式建筑施工安全管理策略

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来山东,一起“上春山”

走向世界 2024年第19期 60-63页

作者：飞扬不详

“二月天杨柳醉春烟,三月三来山青草漫漫,最美是人间四月的天,一江春水绿如蓝……”央视龙年春晚,一首《上春山》把春日美好唱进了无数人的心田。春水初生、春林初盛、春风十里,不如走出家门,来山东,一起“上春山”,看齐鲁春色美如画卷... 详细信息

“二月天杨柳醉春烟,三月三来山青草漫漫,最美是人间四月的天,一江春水绿如蓝……”央视龙年春晚,一首《上春山》把春日美好唱进了无数人的心田。春水初生、春林初盛、春风十里,不如走出家门,来山东,一起“上春山”,看齐鲁春色美如画卷。春日的泰山,每一步都是风景,每一处都有惊喜。岱庙内,牡丹园里的300余株精品牡丹竞相开放,姹紫嫣红、争奇斗艳,与古色古香的朱墙、质朴的黛瓦相得益彰。人们漫步其间,感受一种悠闲惬意和历史的厚重。桃花源里桃花满谷,霞光一片,落红处,桃花芬芳,馨香四溢。

关键词：一江春水春林三月三美如画牡丹园桃花

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借名买房,一场意料之外的风波

心灵的救赎，审视的责任——《赎罪》与《大浴女》之比较

恋爱婚姻家庭 2024年第1期 50-52页

作者：飞扬

一套秘密购买的房子,一个隐藏心底的秘密.他"借名"去购置了一套房产,想给自己一个安全的栖身场所,万万没有想到的是,带来的却是无边无际的烦恼……纠葛不断,同一屋檐下心力交瘁今年 40 岁的余永刚是土生土长的湖南长沙人.年轻时,他在当...

一套秘密购买的房子,一个隐藏心底的秘密.他"借名"去购置了一套房产,想给自己一个安全的栖身场所,万万没有想到的是,带来的却是无边无际的烦恼……纠葛不断,同一屋檐下心力交瘁今年 40 岁的余永刚是土生土长的湖南长沙人.年轻时,他在当地一家外资企业做工期间,结识了青春靓丽的工友廖丽萍.两人兴趣相仿,渐渐走到一起.

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长江小说鉴赏 2024年第8期 110-113页

作者：谢飞扬中南财经政法大学新闻与文化传播学院

英国作家麦克尤恩的《赎罪》与中国作家铁凝的《大浴女》在主题构造与情节模式上拥有相似的赎罪设计。出于复杂的家庭关系与时代背景，主人公布里奥尼与尹小跳年少时都曾因过错造成了无法挽回的后果，成了其后成长过程中难以卸下的精神... 详细信息

英国作家麦克尤恩的《赎罪》与中国作家铁凝的《大浴女》在主题构造与情节模式上拥有相似的赎罪设计。出于复杂的家庭关系与时代背景，主人公布里奥尼与尹小跳年少时都曾因过错造成了无法挽回的后果，成了其后成长过程中难以卸下的精神枷锁，贯穿主人公的人生经历与故事情节演进，迫使读者同之一道踏上自我救赎之旅。在背负罪感的漫长精神苦旅中，主人公各自以识罪、赎罪的方式经历了由自我放逐到构建内心净土的过程，最终达成了对自我生存困境的审视。两部作品虽然诞生于不同的文化土壤，在具体情节上存在不同的创作表现，但又拥有共通的艺术创作内核，即对道德责任的自觉承担、对自我审视良知的呼唤。

关键词：《赎罪》《大浴女》比较文学