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RIP2对大肠杆菌的抗菌作用及其机制研究

RIP2对大肠杆菌的抗菌作用及其机制研究

作者：席琼暨南大学

学位级别：硕士

目的受体相互作用蛋白2(receptor-interacting protein 2, RIP2)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,在信号转导途径中起关键作用,作为NOD样受体(NOD-like receptors, NLRs)信号通路的下游因子,衔接NLRs并激活NF-κB信号传导通路,在先天性免疫反... 详细信息

目的受体相互作用蛋白2(receptor-interacting protein 2, RIP2)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,在信号转导途径中起关键作用,作为NOD样受体(NOD-like receptors, NLRs)信号通路的下游因子,衔接NLRs并激活NF-κB信号传导通路,在先天性免疫反应和清除病原体感染的炎症反应中起着重要作用。肠道细菌感染是临床实践中最常见的细菌感染之一,在其感染过程中可以被宿主NLRs识别,并通过RIP2信号分子激活细胞核内转录因子NF-κB的转录,并表达各种炎性细胞因子,从而引发宿主的多种防御机制。蛋白激酶-丝裂原活化蛋白激酶信号通路参与细胞的生长发育及细胞间各种功能等生理过程,其中p38MAPK主要参与炎症反应和应激反应。本研究将构建的RIP2基因转染至肠道细胞后,RT-PCR和Western blot检测观察mRNA转录水平和蛋白表达水平;将大肠杆菌感染已转染RIP2的SW480细胞,计数细胞胞内细菌数量变化;应用p38 MAPK通路抑制剂SB203580作用于各实验组细胞,计数胞内大肠杆菌活菌数的变化;并用Western blot法检测各实验组磷酸化p38表达水平,观察RIP2清除大肠杆菌的作用同p38MAPK信号通路的关系。方法本实验用阳离子聚合物JetPeiTM将人RIP2基因(pEGFP-C2-PIP2)转染至人结肠癌SW480细胞株,以转染空质粒(pEGFP-C2-PIP2)及未转染的SW480细胞株作为对照组,应用RT-PCR和Western blot法检测细胞外源性RIP2 mRNA和RIP2蛋白的表达;并用LB培养基培养大肠杆菌ATCC25922,收集细菌后用紫外分光光度计于600nm波长测定其OD值,将其绘制曲线后确定细菌浓度;按一定比例将活菌感染SW480细胞,分别在不同的时间点内(4h、24h、36h)用TritonX-100裂解细胞,裂解液涂布细菌平板培养,计数菌落并观察大肠杆菌菌落数的变化;用大肠杆菌刺激已转染RIP2、转染空质粒和未转染质粒的SW480细胞24小时,平板培养菌落观察3组组间大肠杆菌活菌数的变化;应用p38 MAPK通路抑制剂SB203580作用于实验组细胞,与未加抑制剂各组细胞相比较,计数胞内大肠杆菌活菌数的变化;用Western blot法观察转染RIP2及细菌刺激前后细胞内磷酸化p38蛋白表达量。结果与对照组相比,转染RIP2组其mRNA转录水平和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01,P<0.05),表明RIP2表达质粒成功转染SW480细胞;大肠杆菌感染SW480细胞后,随着时间的推移,胞内的大肠杆菌数量也随之增长,说明大肠杆菌在SW480细胞内的生长呈增加趋势;将大肠杆菌刺激细胞24h后,转染RIP2细胞组的活菌数较转染空质粒组和未转染质粒组胞内活菌数数量明显减少,其差异有统计学意义(P<0.01),说明转染RIP2的SW480细胞能清除胞内大肠杆菌;而加入SB203580阻断p38 MAPK信号通路后,转染RIP2细胞组内活菌数量增加;并且转染RIP2组磷酸化p38蛋白表达量明显高于转染空质粒的对照组组,转染RIP2组间用大肠杆菌刺激后细胞磷酸化p38蛋白表达量高于未用细菌刺激的对照组,并且高于转染空质粒的对照组;而加入p38MAPK通路抑制剂SB203580后p38蛋白表达量减少。结论***2质粒成功转染SW480细胞,且mRNA转录水平较对照组明显增高(P<0.01),蛋白表达水平较对照组增高(P<0.05);2.大肠杆菌感染SW480细胞后,细胞内活菌数量随时间的延长不断增加;而将RIP2转染SW480细胞后,胞内大肠杆菌数量明显减少,说明RIP2可清除胞内大肠杆菌。3. SB203580阻断p38 MAPK信号通路后,能逆转RIP2清除胞内大肠杆菌的作用;并且RIP2可诱导磷酸化p38 MAPK的表达,表明RIP2清除大肠杆菌作用可能与p38 MAPK信号通路有关

关键词：受体相互作用蛋白2(RIP2) 基因转染清除作用 P38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)

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NOD样受体在炎症反应中的调控作用

生命科学 2010年第5期22卷 454-458页

作者：席琼胡巢凤暨南大学医学院病理生理教研室广州510632

天然免疫(innate immunity)是机体免疫系统直接抵御病原体入侵的最初阶段,通过机体自身的特异性模式识别受体(pattern-recognition receptors,PRRs)来识别病原体特有的保守结构病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)。细胞内NOD样受体(NLRs)是胞浆型PRRs中的一个重要家族,病原体侵袭细胞可上调其表达,启动机体的免疫应答和炎症反应,在机体天然免疫应答中发挥独特的功能。最近有研究证明,NLRs的突变与一些人类免疫性疾病相关,并且在细菌感染和炎症反应的控制中起重要作用。该文将讨论NLRs在炎症疾病中的调控作用。

关键词： NLRs 炎症小体炎症调控

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平安银行B分行员工薪酬激励研究

平安银行B分行员工薪酬激励研究

作者：席琼河北工业大学

学位级别：硕士

作为市场经济体制的产物,商业银行正处于快速发展阶段,它追求利益最大化,但在发展的同时,商业银行也为客户提供多元化的金融服务,是当今世界经济活动的中心,对全球的金融组织产生深远影响。而且,随着互联网技术的快速发展,互联网与金融... 详细信息

作为市场经济体制的产物,商业银行正处于快速发展阶段,它追求利益最大化,但在发展的同时,商业银行也为客户提供多元化的金融服务,是当今世界经济活动的中心,对全球的金融组织产生深远影响。而且,随着互联网技术的快速发展,互联网与金融不断渗透,整个金融行业发生了巨大变化。当前,我国商业银行在发展过程中,不仅要在内部银行业竞争中取胜,还要在外部市场竞争中获得生存,这对商业银行人才管理提出了更高的要求。在现今时代,人才流动较为频繁,他们自主选择能力越来越强,不局限于某一地方,银行属于高流动行业,每个银行都在不同程度的争抢相关人才,以此来刺激银行的发展。金融市场竞争日趋紧张,尤其是银行间的竞争更为严重,而员工是银行的重要资源,也是银行竞争取得成功的关键,才能让银行在市场中占据脚跟,但这也需要银行制定强有力的员工薪酬制度,激励员工工作,满足员工的需求,激发员工的工作热情。但想要发挥薪酬激励在银行发展中的作用,就需要银行采取科学合理的薪酬激励措施,合理的薪酬手段能够保障银行的稳定运行。在员工薪酬激励方面,当前平安银行B分行制定了相应的管理办法,但作用并不突出,没有完全发挥薪酬激励的作用。因此,本研究对B分行员工薪酬激励现状进行分析,发现当前分行存在薪酬制度问题,薪酬水平问题,薪酬结构问题以及薪酬分配问题,然后针对性提出相应的完善措施,改善平安银行B分行员工薪酬激励现状。

关键词：平安银行薪酬激励薪酬满意度调查

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基于三角模糊数的供应链合作伙伴优化算法

统计与决策 2006年第24期22卷 36-37页

作者：尚耀华席琼玉刘佳力西安建筑科技大学管理学院西安交通大学管理学院西安710049 西北大学经济管理学院

本文在描述供应链合作伙伴选择原理的基础上,提出了基于层次分析法(AHP)和三角模糊数的供应链合作伙伴选择新方法,总结了该方法的应用步骤。

关键词：供应链伙伴选择层次分析法

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中西医结合治疗心肌病的临床疗效观察

中国地方病防治 2016年第7期31卷 815-815,818页

作者：宋清富席琼张磊张家口经开区卫生局河北张家口075000 张家口市地方病防治所张家口市医学会

目的观察中西医结合治疗心肌病的临床疗效。方法将84例心衰患者随机分为治疗组和对照组,对照组采用慢性心功能不全规范治疗,治疗组在规范治疗的基础上加用中药通脉汤口服。结果治疗组可以有效地改善心衰患者的临床症状,喘憋、心悸、倦... 详细信息

目的观察中西医结合治疗心肌病的临床疗效。方法将84例心衰患者随机分为治疗组和对照组,对照组采用慢性心功能不全规范治疗,治疗组在规范治疗的基础上加用中药通脉汤口服。结果治疗组可以有效地改善心衰患者的临床症状,喘憋、心悸、倦怠乏力等临床症状的改善均大于对照组;治疗组心衰改善总有效率为88.09%,对照组总有效率为64.28%,两组比较P<0.05。结论中西医结合治疗能有效地改善心衰患者的临床症状。

关键词：地方性心肌病通脉汤温阳益气活血利水法中西医结合治疗

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中药复方应用于单纯性甲状腺肿临床疗效观察

中国地方病防治 2017年第3期32卷 297-297,299页

作者：张磊吴建明席琼张家口市医学会河北张家口075599 河北省赤城县疾病预防控制中心张家口市地方病防治所

单纯性甲状腺肿又称非毒性甲状腺肿,是由于缺碘、碘过量、致甲状腺肿物质或先天性缺陷等因素,导致甲状腺激素生成障碍或需求增加,使甲状腺激素相对不足、垂体分泌TSH增多致甲状腺代偿性肿大,但不伴有甲状腺功能异常。肿大甲状腺组织继... 详细信息

单纯性甲状腺肿又称非毒性甲状腺肿,是由于缺碘、碘过量、致甲状腺肿物质或先天性缺陷等因素,导致甲状腺激素生成障碍或需求增加,使甲状腺激素相对不足、垂体分泌TSH增多致甲状腺代偿性肿大,但不伴有甲状腺功能异常。肿大甲状腺组织继而不规则增生和再生,出现结节则称结节性甲状腺肿。中医治疗甲状腺肿大一般建议采用靶向调控-TSH平衡疗法。

关键词：单纯性甲状腺肿甲状腺组织非毒性甲状腺肿中药复方中医治疗临床疗效结节性甲状腺肿垂体分泌外科手术生成障碍

SNX10基因突变致婴儿恶性石骨症1例并文献复习

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中南大学学报（医学版） 2021年第1期46卷 108-112页

作者：周婷曾彩霞席琼杨作成中南大学湘雅三医院儿科长沙410013

中南大学湘雅三医院儿科收治1例SNX10基因突变致婴儿恶性石骨症(infantile malignant osteopetrosis,IMO)患儿。该患儿临床表现为贫血、肝脾肿大、生长发育迟缓,X线检查提示全身骨密度广泛增高,临床诊断为IMO。基因测序为SNX10基因c.61... 详细信息

中南大学湘雅三医院儿科收治1例SNX10基因突变致婴儿恶性石骨症(infantile malignant osteopetrosis,IMO)患儿。该患儿临床表现为贫血、肝脾肿大、生长发育迟缓,X线检查提示全身骨密度广泛增高,临床诊断为IMO。基因测序为SNX10基因c.61C>T纯合突变。通过对国内外相关文献进行复习,发现贫血、视听力障碍、肝脾肿大是IMO的主要临床症状,SNX10基因突变是导致IMO的罕见原因,造血干细胞移植是其有效的治疗手段。

关键词：婴儿恶性石骨症 SNX10 造血干细胞移植

由SCN4A基因错义突变导致的严重新生儿发作性喉痉挛1例及文献复习

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中南大学学报（医学版） 2021年第12期46卷 1430-1436页

作者：席琼易璐周文娟陈佳杨作成中南大学湘雅三医院儿科长沙410013

严重新生儿发作性喉痉挛(severe neonatal episodic laryngospasm,SNEL)是一种离子通道病,该病因钠电压门控通道4亚基(sodium voltage-gated channel alpha subunit 4 gene,SCN4A)基因突变导致反复发作性咽喉肌强直而危及新生儿生命。现报告1例在出生后出现阵发性发绀和四肢强直的新生儿病例,随访期间,患儿还出现四肢肌肥大和生长发育迟缓。全外显子测序证实该患儿存在SCN4A基因新型杂合突变(c.2395G>A,***799Thr)。卡马西平是治疗该病的有效药物。此病例扩展了我们对SCN4A基因突变表型的认识。总结已报道的16例SNEL病例特点,发现他们主要发生p.G1306E位点错义突变。相似症状表现为新生儿期上气道肌紧张和喂养困难,长大后多数患者表现为不同程度的发作性肌强直和进行性的肌肥大。一些患者出现"运动员"特征外貌,但几乎所有患者肌电图均有肌强直放电。

关键词：钠电压门控通道4亚基基因通道病肌强直钠离子通道

抗感染药物联合微波对小儿支气管肺炎的疗效观察

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中国医药指南 2010年第25期8卷 116-117页

作者：席琼湖南省长沙市中南大学湘雅三医院儿科 410013

目的观察抗感染药物联合微波治疗小儿支气管肺炎的临床疗效。方法将84例小儿支气管肺炎患者随机分为两组各42例。对照组用常规西医治疗,治疗组在对照组的基础上加用微波治疗。结果治疗组综合疗效优于对照组(P<0.05),且治疗组咳嗽、咯痰... 详细信息

目的观察抗感染药物联合微波治疗小儿支气管肺炎的临床疗效。方法将84例小儿支气管肺炎患者随机分为两组各42例。对照组用常规西医治疗,治疗组在对照组的基础上加用微波治疗。结果治疗组综合疗效优于对照组(P<0.05),且治疗组咳嗽、咯痰及肺部ā音消失时间优于对照组(P<0.05)。结论抗感染结合微波治疗小儿支气管肺炎能明显缩短治疗时间,减轻患儿的痛苦。

关键词：小儿支气管肺炎抗感染微波