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赤霉素对根瘤菌运移、定殖及苜蓿幼苗生长的影响

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中国农业科学 2017年第23期50卷 4545-4557页

作者：苗阳阳师尚礼康文娟甘肃农业大学草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中-美草地畜牧业可持续研究中心

【目的】研究赤霉素对荧光标记根瘤菌运移和定殖的动态及接种对甘农5号紫花苜蓿(Medicago sativa L.Gannong No.5)幼苗生长的影响,为增强根瘤菌向苜蓿体内尤其向繁殖器官转移并定殖的能力,促进苜蓿种植业发展提供理论依据和技术支持。... 详细信息

【目的】研究赤霉素对荧光标记根瘤菌运移和定殖的动态及接种对甘农5号紫花苜蓿(Medicago sativa L.Gannong No.5)幼苗生长的影响,为增强根瘤菌向苜蓿体内尤其向繁殖器官转移并定殖的能力,促进苜蓿种植业发展提供理论依据和技术支持。【方法】分别向Ensifer meliloti LZgn5f(gn5f)和Ensifer meliloti 12531f(12531f)两种根瘤菌液内添加0.5、1、10和100 mg·L赤霉素,测定第1、3、5、7和9天两种根瘤菌OD600吸光度值,同时将添加不同赤霉素的菌液分别浇灌于幼苗根部,于接种后第15、30、45和60天检测根瘤菌在根和地上各组织内运移和定殖及对苜蓿幼苗生长的情况。【结果】添加10 mg·L赤霉素稍可促进12531f生长,但效果并不明显;而1 mg·L赤霉素对gn5f生长初期效果较好,但随着时间的延长则无明显作用。10 mg·L赤霉素促进12531f运移并定殖到下部茎、上部茎和上部叶内,1 mg·L赤霉素促进gn5f运移并定殖到下部茎和下部叶内,以无菌水为对照的各组织内未检测到两种荧光标记根瘤菌。单独接种12531f和gn5f,均促进了叶绿素的形成,而添加赤霉素后接种均抑制了叶绿素的形成,但12531f添加10 mg·L赤霉素、gn5f添加1 mg·L赤霉素接种可使幼苗单株结瘤数、单株根瘤重、单株叶片数、株高、根长、地上干重和根干重则均达最高。其中12531f添加10 mg·L赤霉素接种后苜蓿单株结瘤数分别高出对照和单独接菌处理75.71%和11.82%,但差异不显著(P>0.05);单株根瘤重分别高出对照和单独接菌处理1 136.11%和55.05%,差异显著(P0.05);单株根瘤重分别高出对照和单独接菌处理697.22%和105.00%,差异显著(P0.05);地上干重分别高出对照和单独接菌处理125.98%和121.80%,差异显著(P<0.05);根干重分别高出对照和单独接菌处理864.43%和762.21%,差异显著(P<0.05)。【结论】分别添加10 mg·L和1 mg·L赤霉素后利于12531f和gn5f在苜蓿体内的运移和定殖并对结瘤、叶片生长、株高、根长、生物量均有促进作用,表明适宜赤霉素浓度可作为促进目标根瘤菌运移和定殖的方法,进而促进植株生长。

关键词：紫花苜蓿赤霉素荧光标记根瘤菌运移定殖生长特性

2,4-表油菜素内酯对盐胁迫下紫花苜蓿种子萌发及幼苗生长的影响

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草原与草坪 2015年第1期35卷 1-8,19页

作者：寇江涛师尚礼甘肃农业大学草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中-美草地畜牧业可持续发展研究中心甘肃兰州730070

为明确外源2,4-表油菜素内酯(24-epibrassinolide,EBR)对盐胁迫下紫花苜蓿幼苗伤害的缓解作用,以中苜3号和陇中苜蓿为材料,在150mmol/L NaCl胁迫下,研究不同浓度EBR处理对紫花苜蓿种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:(1)150mmol/L NaC... 详细信息

为明确外源2,4-表油菜素内酯(24-epibrassinolide,EBR)对盐胁迫下紫花苜蓿幼苗伤害的缓解作用,以中苜3号和陇中苜蓿为材料,在150mmol/L NaCl胁迫下,研究不同浓度EBR处理对紫花苜蓿种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:(1)150mmol/L NaCl胁迫显著抑制了苜蓿种子萌发、幼苗生长及根系活力,降低了幼苗的地上、地下生物量;(2)外源EBR可有效的缓解NaCl胁迫对苜蓿种子萌发、幼苗生长及根系活力的抑制作用,并具有明显的浓度效应;(3)综合发芽试验、幼苗生长试验,在150mmol/L NaCl胁迫下,10-1μmol/L EBR处理显著地提高了苜蓿种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和胚芽长、胚根长、萌发期幼苗干重,并显著增加了苜蓿幼苗的叶片数、茎粗、株高、主根长、侧根数和地上、地下生物量,提高了苜蓿萌发期、幼苗期的根系活力水平,对盐胁迫下苜蓿幼苗的缓解效果最好。说明外源EBR能够促进NaCl胁迫下紫花苜蓿种子的萌发及幼苗的生长发育,EBR在诱导植物抗盐性上具有积极作用。

关键词：紫花苜蓿 NaCl 胁迫 2,4-表油菜素内酯种子萌发幼苗生长根系活力

秋水仙素对‘根茎型清水紫花苜蓿’幼苗变异率和成活率的影响

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甘肃农业大学学报 2015年第6期50卷 104-111页

作者：李悦师尚礼甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室中-美草地畜牧业可持续发展研究中心甘肃兰州730070

通过秋水仙素诱变对‘清水紫花苜蓿’萌动种子诱变后幼苗变异率的测定,并观察其幼苗成活率及部分生长指标的变化情况,结果表明:采用秋水仙素不同质量浓度(0.05%、0.10%、0.20%)溶液对清水紫花苜蓿萌动种子分别处理4、8、12h,0.10%的秋... 详细信息

通过秋水仙素诱变对‘清水紫花苜蓿’萌动种子诱变后幼苗变异率的测定,并观察其幼苗成活率及部分生长指标的变化情况,结果表明:采用秋水仙素不同质量浓度(0.05%、0.10%、0.20%)溶液对清水紫花苜蓿萌动种子分别处理4、8、12h,0.10%的秋水仙素溶液处理幼苗变异率较高,8h处理时间产生较大变异.总体上幼苗变异率随着秋水仙素质量浓度的提高和时间的延长呈现增加趋势,质量浓度与时间互作处理0.1%+8h苜蓿幼苗变异率最大为35.73%;其次0.2%+4h处理,为30.6%;再次0.1%+12h处理,为28.80%.而苜蓿幼苗成活率与处理质量浓度及处理时间呈负相关关系.秋水仙素处理后苜蓿幼苗的生长速度、叶宽、叶厚、茎粗与真叶数出现不同程度增加;苗长、根长、叶长、叶型指数、节间距与节间数则出现不同程度减小;处理苗第30d的株高在0.05%、0.1%质量浓度处理4h时较对照苗增加.苜蓿幼苗变异的秋水仙素最适剂量为0.1%+8h.

关键词：秋水仙素变异率成活率

红、黄、绿三种颜色荧光质粒导入大肠杆菌中的稳定性表达

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甘肃农业大学学报 2018年第3期53卷 193-198页

作者：杨晓玫师尚礼甘肃农业大学草业学院甘肃兰州730070

【目的】红、黄、绿3种颜色荧光蛋白质粒导入大肠杆菌的热稳定表达是实现质粒与受体菌杂交获得荧光标记菌的关键,荧光标记菌的构建,可极大地丰富荧光标记菌的颜色类别,为微生物示踪研究提供丰富的工具.【方法】采用大肠杆菌DH5α热激转... 详细信息

【目的】红、黄、绿3种颜色荧光蛋白质粒导入大肠杆菌的热稳定表达是实现质粒与受体菌杂交获得荧光标记菌的关键,荧光标记菌的构建,可极大地丰富荧光标记菌的颜色类别,为微生物示踪研究提供丰富的工具.【方法】采用大肠杆菌DH5α热激转导法构建荧光标记菌.【结果】黄色和绿色蛋白质粒在原液浓度基础上,稀释10倍进行热激转导,红色蛋白质粒原液直接进行热激转导,可将携带红、黄、绿3种颜色荧光蛋白的质粒DNA成功导入大肠杆菌.【结论】经PCR重复检测,条带明显并符合红、黄、绿3种颜色荧光质粒基因序列大小,3种颜色荧光质粒热稳定表达水平较高.

关键词：大肠杆菌质粒转导荧光蛋白基因表达

紫花苜蓿与百脉根原生质体培养及不对称体细胞杂交

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核农学报 2015年第1期29卷 40-48页

作者：李玉珠师尚礼甘肃农业大学草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中美草地畜牧业可持续发展研究中心甘肃兰州730070

本研究拟通过原生体培养和不对称细胞杂交实现白脉根与苜蓿种间基因重组,为改良苜蓿饲用品质提供新的技术手段,用酶解法分离清水紫花苜蓿（Medicago sativa L.cv.‘Qingshui’）及里奥百脉根（Lotus corniculatus L.cv.‘Leon’）愈伤... 详细信息

本研究拟通过原生体培养和不对称细胞杂交实现白脉根与苜蓿种间基因重组,为改良苜蓿饲用品质提供新的技术手段,用酶解法分离清水紫花苜蓿（Medicago sativa L.cv.‘Qingshui’）及里奥百脉根（Lotus corniculatus L.cv.‘Leon’）愈伤组织来源的原生质体,研究了酶解时间、酶液组合、甘露醇浓度、预处理条件、继代时间及培养方法等对原生质体分离和培养效果的影响。采用改良的PEG-高Ca2＋-高p H法进行了不对称体细胞杂交,通过荧光染色鉴别异核体并测定融合率。结果表明,采用继代培养第8~12天的苜蓿和百脉根愈伤组织,0.55 mol·L-1CPW溶液中预处理1h或预暗培养24 h,甘露醇浓度为0.55~0.6 mol·L-1时,清水紫花苜蓿在2%纤维素酶＋0.5%果胶酶＋0.3%崩溃酶的酶液中酶解10 h,里奥百脉根在2%纤维素酶＋0.5%果胶酶＋0.3%半纤维素酶的酶液中酶解12 h,经2~3个月的固液＋固体培养模式可分别获得较好的原生质体分离效果及愈伤组织再生植株。清水紫花苜蓿原生质体经3 mmol·L-1IOA处理10 min,里奥百脉根经50μg·m L-1R-6G处理10 min后融合,PEG（6000）最适浓度为35%,异源融合率为3.1%,最终获得了苜蓿与百脉根的杂种愈伤组织,为进一步培育抗臌胀病型苜蓿种质提供了新的材料。

关键词：紫花苜蓿百脉根原生质体培养不对称体细胞杂交

绿洲灌溉区与旱作区连作苜蓿土壤理化性质的研究

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草地学报 2014年第2期22卷 306-311页

作者：崔星师尚礼甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室中-美草地畜牧业可持续研究中心甘肃省草业工程实验室甘肃兰州730070

为研究连作模式下不同气候区苜蓿(Medicago sativa L.)土壤理化指标地域分布的差异性,对甘肃省灌区和旱作区连作苜蓿土壤的全氮(TSN)、有机碳(SOC)及土壤团粒结构等指标进行研究。结果表明:灌区SOC含量均高于旱作区,90~100 cm土层差值最... 详细信息

为研究连作模式下不同气候区苜蓿(Medicago sativa L.)土壤理化指标地域分布的差异性,对甘肃省灌区和旱作区连作苜蓿土壤的全氮(TSN)、有机碳(SOC)及土壤团粒结构等指标进行研究。结果表明:灌区SOC含量均高于旱作区,90~100 cm土层差值最大,达3.41 g·kg^(-1);0~100 cm土层灌区SOC含量为6.81~12.49 g·kg^(-1),均值为9.25 g·kg^(-1),比旱作区高22%。旱作区TSN含量随土壤深度增加而减小,含量为(1.03士0.01)^(0.44士0.04)g·kg^(-1);0~30 cm土层灌区TSN含量相对较稳定,30~60 cm土层则急剧下降,70~100 cm内又较为稳定,TSN含量维持在(0.66士0.01)g·kg^(-1)。灌区苜蓿土壤的分形维数均低于旱作的,0~40 cm土层内随土壤深度增加而增大(P0.25 mm土壤团粒质量在干筛和湿筛处理下均呈现降低趋势;0~20 cm土层的土壤分形维数小于20~40 cm的,在干筛条件下,>5 mm的土壤团聚体含量最高,5~2 mm的次之,0.5~0.25 mm的最少。因此,苜蓿土壤SOC和TSN含量随着灌溉水平的差异表现出显著变化,且灌区苜蓿土壤团粒结构优于旱作区更适合苜蓿耕作,但旱区苜蓿土壤0~30 cm土层保水性等同于灌区的,说明连作苜蓿具有较强的抗旱性。

关键词：苜蓿土壤全氮有机碳分形维数灌区旱作区

73份俄罗斯百脉根的营养价值和相对饲喂价值的评价

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草原与草坪 2017年第1期37卷 67-78页

作者：张本瑜师尚礼甘肃农业大学草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中-美草地畜牧业可持续发展研究中心甘肃兰州730070

以里奥、迈瑞伯及佐治亚3份中国材料为对照,对引进的73份俄罗斯百脉根种质材料的干物质、粗蛋白、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维、粗灰分5项营养指标及相对饲喂价值进行测定,并采用灰色关联度法及聚类分析法对各种质材料的营养价值和相对... 详细信息

以里奥、迈瑞伯及佐治亚3份中国材料为对照,对引进的73份俄罗斯百脉根种质材料的干物质、粗蛋白、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维、粗灰分5项营养指标及相对饲喂价值进行测定,并采用灰色关联度法及聚类分析法对各种质材料的营养价值和相对饲喂价值进行综合评价。结果表明:73份俄罗斯百脉根种质材料营养成分含量差异明显,相对饲喂价值变异系数最大,为23.33%,变异明显;中性洗涤纤维的变异系数较大,为15.05%,变异明显;酸性洗涤纤维及粗蛋白变异较明显,变异系数分别为12.65%、11.95%;粗灰分变异不明显,变异系数为8.40%;干物质的变异系数最小,仅为1.28%,变异最不明显。通过灰色关联度及聚类分析,将73份俄罗斯百脉根种质材料分为4类,第1类材料营养价值高,相对饲喂价值高,包括Zxy09p-6485等13份材料;第2类材料营养价值较高,相对饲喂价值较高,包括Zxy08p-4868等20份材料;第3类材料营养价值中等,相对饲喂价值中等,包括Zxy06p-2376等17份材料;第4类材料营养价值低,相对饲喂价值低,包括Zxy06p-1785等23份材料;对照里奥及佐治亚处于第3类,迈瑞伯处于第4类,73份俄罗斯百脉根种质材料中有36份材料的营养价值及相对饲喂价值均优于3份对照材料,可适当推广种植。

关键词：俄罗斯百脉根营养价值相对饲喂价值灰色关联度分析

代谢互补抑制剂碘乙酰胺和罗丹明对3种豆科牧草原生质体活力和再长的影响

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核农学报 2012年第3期26卷 615-622,601页

作者：李玉珠师尚礼陶茸甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室甘肃省草业工程实验室中美草地畜牧业可持续发展研究中心甘肃兰州730070

研究了不同浓度代谢互补抑制剂碘乙酰胺(IOA)和罗丹明6G(R-6G)处理与里奥百脉根(Lotuscorniculatus L.cv.Leon)、扁蓿豆(Melilotoides ruthenica(L.)Sojak)及清水紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.Qingshui)3种豆科牧草愈伤组织原生质体活力和再生力之间的相关性。结果表明,3～10mmol/L的IOA和40～70μg/ml的R-6G分别处理10min,可使3种豆科牧草原生质体的活力及植板率明显下降,各处理浓度与原生质体活力和植板率之间均存在极显著的负相关(p<0.01)。培养第7天,所有处理均可见再生的小细胞团;培养30～40d,抑制剂临界浓度下原生质体丧失形成愈伤组织的能力。IOA对原生质活力的抑制作用更明显,R-6G对植板率的影响更显著,并可使原生质体发出红色荧光,有利于细胞融合时亲本原生质体的标识。适宜3种豆科牧草的抑制剂及临界浓度分别是:百脉根5mmol/L IOA或50μg/ml R-6G;扁蓿豆7mmol/L IOA或70μg/ml R-6G;清水紫花苜蓿3mmol/L IOA或40μg/mL R-6G。

关键词：原生质体代谢互补抑制剂原生质体活力植板率荧光

陇中苜蓿响应干旱胁迫的生理基础及蛋白质组学研究

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陇中苜蓿响应干旱胁迫的生理基础及蛋白质组学研究