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克伦生葡萄内生菌Acremonium sclerotigenum的分离鉴定及致腐能力研究

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食品与发酵工业 2022年第15期48卷 131-136页

作者：李培谦药震冯宝珍师守国运城学院生命科学系山西运城044000

为明确储藏期克伦生葡萄果实内生真菌和致病菌主要类群,通过形态学、分子生物学方法确定菌株分类地位,并探讨了内生菌对不同果实的致腐能力。研究结果表明,健康克伦生葡萄果实内生菌株K1~13在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养性状一致,菌... 详细信息

为明确储藏期克伦生葡萄果实内生真菌和致病菌主要类群,通过形态学、分子生物学方法确定菌株分类地位,并探讨了内生菌对不同果实的致腐能力。研究结果表明,健康克伦生葡萄果实内生菌株K1~13在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养性状一致,菌落白色,表面平展,呈绒状,其形态与枝顶孢属(Acremonium)形态特征吻合;转录间隔区ITS和核糖体28S rDNA序列构建进化树分析,其与Acremonium sclerotigenum聚为一簇,因此将其确定为菌核枝顶孢(***)。将***接种健康葡萄、番茄和苹果均能引起果实腐烂,证明了其致腐特性。同时从腐烂克伦生葡萄果实上分离纯化到灰葡萄孢(Botrytis cinerea)和链格孢(Alternaria sp.)菌株。内生菌***对灰葡萄孢、链格孢均无拮抗作用。该研究首次报道了具有致腐特性的葡萄内生菌,丰富了葡萄内生菌种的资源,为葡萄采后病害防治提供了技术和理论支持。

关键词：采后病害内生菌菌核枝顶孢致腐能力

中条山野生葡萄产香酵母的筛选及其混菌发酵对葡萄酒香气成分的影响

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微生物学通报 2023年第1期50卷 262-272页

作者：柴红师守国李善菊李新山西农业大学食品科学与工程学院山西晋中030801 运城学院生命科学系山西运城044000

【背景】产香酵母可赋予葡萄酒独特的香气,因此,分离筛选优良产香酵母对酿造具有地域风味的特色葡萄酒具有重要意义。【目的】从中条山野生葡萄中筛选产香酵母,进行种群鉴定和生理生化特性研究,并将其应用于葡萄酒发酵过程,研究其对葡... 详细信息

【背景】产香酵母可赋予葡萄酒独特的香气,因此,分离筛选优良产香酵母对酿造具有地域风味的特色葡萄酒具有重要意义。【目的】从中条山野生葡萄中筛选产香酵母,进行种群鉴定和生理生化特性研究,并将其应用于葡萄酒发酵过程,研究其对葡萄酒香气成分的影响。【方法】采用稀释涂布平板法从中条山野葡萄中分离筛选酵母菌,对其进行分子生物学鉴定。优选其中具有显著香气的产香酵母,与酿酒酵母F15进行混合发酵,采用气相色谱质谱联用(gas chromatograph-mass spectrometer,GC-MS)对香气成分进行分析,采用半定量法测定香气成分含量。【结果】共分离获得各种菌株13株,26S rRNA基因D1/D2区序列分析表明它们分布于Issatchenkia、Torulaspora、Pichia、Saccharomyces和Rhodotorula等5个不同属内。优选其中一株香气较为浓郁的酵母菌株Issatchenkia orientalis strain XS-6开展研究,结果发现该菌株最高耐受乙醇浓度为8%,最高耐受NaCl浓度为6%,最适生长温度为38℃。与酿酒酵母F15混菌发酵的葡萄酒中共检测出31种香气成分。香气物质总含量较单菌发酵增加19.8%,其中11种香气成分含量增加明显,尤其是具有玫瑰香气的苯乙醇。醇类与酯类物质含量较单菌发酵增加19.6%,并发现了香草酸乙酯(ethyl vanillate)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)等7种新的酯类物质。【结论】产香酵母XS-6对乙醇、NaCl、温度等具有良好的耐受性,而且与酿酒酵母F15混菌发酵对西拉葡萄酒香气成分具有明显的影响,可能在改善葡萄酒风味方面具有潜在的应用价值。

关键词：中条山野生葡萄产香酵母混菌发酵东方伊萨酵母香气成分

“阳光玫瑰”叶片矿质元素含量测定及黄化原因分析

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运城学院学报 2022年第6期40卷 10-14页

作者：师守国牛民泽运城学院生命科学系山西运城044000

阳光玫瑰的营养价值和经济价值都很丰富,近年来深受果农们的喜爱,是很多果农的主要经济来源之一。随着种植面积的不断扩大,黄化病也逐渐愈演愈烈,黄化病是对葡萄重要种植地区影响产量的主要病害之一,黄化病一旦发生葡萄的产量和品质受... 详细信息

阳光玫瑰的营养价值和经济价值都很丰富,近年来深受果农们的喜爱,是很多果农的主要经济来源之一。随着种植面积的不断扩大,黄化病也逐渐愈演愈烈,黄化病是对葡萄重要种植地区影响产量的主要病害之一,黄化病一旦发生葡萄的产量和品质受到都会受到较大的影响,对果农种植的积极性和葡萄产业的发展都有很大的打击。因此,进一步探究“阳光玫瑰”叶片矿质元素含量及黄化原因具有重要意义。本实验用原子吸收光谱法测定阳光玫瑰不同黄化程度中矿质元素钙、铁、镁和钾的含量,通过对比分析矿质元素的含量进一步分析叶片黄化的原因,通过营养诊断阳光玫瑰种植,指导合理施肥提供依据,以达到树体营养元素互相平衡,为黄化病的矫治技术提供理论依据。

关键词：阳光玫瑰叶片矿质元素黄化

苹果GR和GST基因cDNA片段的克隆与表达分析

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苹果GR和GST基因cDNA片段的克隆与表达分析

作者：师守国西北农林科技大学

学位级别：硕士

抗坏血酸-谷胱甘肽（ASA–GSH）循环作为植物体内主要抗氧化系统,是由三个相互依赖的氧化还原偶AA/DHA、GSH/GSSG和NADPH/NADP+组成,保证了活性氧有效清除并维持了细胞的动态平衡。GSH在植物胁迫响应中的作用在很大程度上依赖于其细胞... 详细信息

抗坏血酸-谷胱甘肽（ASA–GSH）循环作为植物体内主要抗氧化系统,是由三个相互依赖的氧化还原偶AA/DHA、GSH/GSSG和NADPH/NADP+组成,保证了活性氧有效清除并维持了细胞的动态平衡。GSH在植物胁迫响应中的作用在很大程度上依赖于其细胞内浓度、氧化还原状态、GSH与GSSG的比率并与相关代谢的酶类活性的提高、诱导密切相关。谷胱甘肽还原酶（GR）是一个黄素蛋白酶,利用NADPH作为电子供体催化氧化型谷胱甘肽（GSSG）形成还原型谷胱甘肽（GSH）,它是ASA-GSH循环中的一个关键酶,保护植物免受氧化胁迫,尤其在植物的光合器官中表现更是突出;谷胱甘肽转移酶（GST）是一类细胞质酶,也是一种多功能的解毒酶,促使谷胱甘肽结合反应的关键酶,催化谷胱甘肽和含亲电子基团的辅基形成谷胱甘肽衍生物,从而达到解毒的目的。本试验以‘皇家嘎拉’苹果叶片为试材,克隆了GR和GST基因cDNA片段并对其在不同发育阶段的叶片进行半定量RT-PCR表达分析,为进一步研究其代谢生理和分子机理,表达时空的特异性,以及GR和GST在ASA-GSH循环中的作用奠定基础。主要研究结果如下: 1.用SDS-热酚法和试剂盒提取了‘皇家嘎拉’苹果叶片的总RNA,试验表明改进的SDS-热酚法可提出高质量的RNA,且成本低廉;试剂盒法提出的RNA虽然有DNA污染但经过DNA酶处理也可得到较高产率的RNA,能达到是试验的要求,而且提取时间较短,因此两种方法都可行。 2.根据GeneBank中已经登录的几个编码植物GR和GST基因保守序列设计两对引物,运用RT-PCR扩增到两个中间片段,序列同源性分析表明苹果GR cDNA序列与豇豆、豌豆、拟南芥相似性分别为85%、82%、78%;GST cDNA序列与水稻、拟南芥、烟草的相似性分别为72%、60%、50%。 3.半定量RT-PCR分析结果表明,GR在10d左右叶龄的表达量最大,在其余时间几乎不表达;GST在5d和10d都有较高的表达量,随生长时间的延长,其表达量减弱。

关键词：苹果 GR GST 基因克隆表达分析

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中条山野葡萄籽中原花青素的提取工艺

北方园艺 2018年第10期 136-143页

作者：师守国吴哲运城学院生命科学系山西运城044000

以中条山的野生复叶葡萄籽为材料,采用香草醛比色法和超声波辅助法,采用单因素试验研究了原花青素提取率影响因子,通过正交优化和多重比较得出优化方案。结果表明:提取液用2.0mL测定更为合适;原花青素含量低的提取液颜色深,相反,则颜色... 详细信息

以中条山的野生复叶葡萄籽为材料,采用香草醛比色法和超声波辅助法,采用单因素试验研究了原花青素提取率影响因子,通过正交优化和多重比较得出优化方案。结果表明:提取液用2.0mL测定更为合适;原花青素含量低的提取液颜色深,相反,则颜色浅。同时在单因素的基础上,经过正交优化和多重比较获得最佳工艺条件为:料液比1∶55g·mL^(-1),超声波功率60W,温度60℃,时间55min。在此工艺条件下,原花青素的提取率为1.983%。

关键词：野生葡萄籽原花青素超声提取

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不同萃取头对木香薷挥发性物质成分分析

江苏农业科学 2014年第8期42卷 301-303页

作者：师守国李善菊运城学院生命科学系山西运城044000

采用顶空固相微萃取(HS-SPME)与气质联用(GC-MS)相结合对药用植物木香薷中的气体成分进行了初步分析,比较了3种不同涂层纤维的萃取头对木香薷气体成分的萃取效果和特点。结果表明,在相同试验条件下75μm的CAR/PDMS萃取头萃取效果最佳。

关键词：顶空固相微萃取气质联用木香薷萃取头挥发性物质

枣果实黄烷酮-3-羟化酶基因(F3H)的克隆及生物信息学分析

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北方园艺 2016年第14期 89-93页

作者：师守国户婷婷运城学院生命科学系山西运城044000

以枣果实为试材,采用同源克隆的方法,利用转录组测序结果设计F3 H基因特异引物序列,成功克隆得到了枣果实F3 H基因全长,对其进行了生物信息学分析,并对该基因含量变化与花色苷的关系进行了研究。结果表明:F3 H基因全长1 336bp,编码367... 详细信息

以枣果实为试材,采用同源克隆的方法,利用转录组测序结果设计F3 H基因特异引物序列,成功克隆得到了枣果实F3 H基因全长,对其进行了生物信息学分析,并对该基因含量变化与花色苷的关系进行了研究。结果表明:F3 H基因全长1 336bp,编码367个氨基酸残基。根据基因序列比对结果,枣果实F3 H基因编码的氨基酸序列与龙眼(Dimocarpus longan)、橄榄(Canarium album)、荔枝(Litchi chinensis)及川桑(Morus notabilis)的一致性分别为90%、90%、89%、89%。半定量RT-PCR法分析表明,该基因在枣果实的红熟期表达量最大,其次为枣果实的半红期,而枣果实的绿熟期表达量最低;该基因表达量变化与花色苷含量变化一致。

关键词：花色苷克隆半定量分析生物信息学

微波提取中条山野葡萄皮渣中白藜芦醇工艺的研究

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食品工业 2018年第3期39卷 72-75页

作者：师守国王未清运城学院生命科学系运城044000

试验运用了微波加热提取技术,对中条山野葡萄皮渣中的白黎芦醇提取工艺进行了研究,筛选出最佳提取的操作参数,从而获得较高的野葡萄皮渣中白黎芦醇的提取率,目的在于更好的开发、利用中条山野葡萄资源。利用微波加热对野葡萄进行提取时... 详细信息

试验运用了微波加热提取技术,对中条山野葡萄皮渣中的白黎芦醇提取工艺进行了研究,筛选出最佳提取的操作参数,从而获得较高的野葡萄皮渣中白黎芦醇的提取率,目的在于更好的开发、利用中条山野葡萄资源。利用微波加热对野葡萄进行提取时,用乙醇作提取剂。在单因素试验的基础上,采用4因素3水平正交试验模式。微波提取白黎芦醇的最佳工艺参数:乙醇体积分数为70%、料液比为1︰20(g/m L)、微波时间为30 min、微波功率为250W。在此条件下提取率可大大提高。

关键词：野葡萄皮渣微波提取白藜芦醇

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兰州百合基因枪转化方法的研究

西北植物学报 2010年第4期30卷 677-682页

作者：师守国梁东王顺才马锋旺西北农林科技大学园艺学院农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西杨陵712100

以兰州百合试管苗鳞片叶为受体,通过基因枪转化法将脱氢抗坏血酸还原酶基因(DHAR)转入兰州百合,并用GUS染色、PCR扩增和Southern杂交等技术进行转基因株系的检测.结果表明:以兰州百合鳞片叶为受体材料,在轰击压力1 100 psi、轰击距离6 c... 详细信息

以兰州百合试管苗鳞片叶为受体,通过基因枪转化法将脱氢抗坏血酸还原酶基因(DHAR)转入兰州百合,并用GUS染色、PCR扩增和Southern杂交等技术进行转基因株系的检测.结果表明:以兰州百合鳞片叶为受体材料,在轰击压力1 100 psi、轰击距离6 cm时,抗性率高达14%,转化率为1.5%;10 mg/L的潮霉素对鳞片叶具有很好筛选作用.GUS分析发现,转化株系叶片为蓝色;PCR检测和Southern杂交进一步证实抗性株系为转基因植株,且为单拷贝.

关键词：兰州百合遗传转化脱氢抗坏血酸还原酶