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作者：巫松辉南方医科大学

学位级别：硕士

骨质疏松症（osteoporosis,OP）是一种以骨量减少、骨组织微结构退化为特征,以致骨的脆性增高而骨折危险性增加的一种全身性系统性代谢性骨病。据估计,全球范围内现有2亿多OP患者,其中亚洲地区成为OP高发地区,中国患者已超过9000万。目... 详细信息

骨质疏松症（osteoporosis,OP）是一种以骨量减少、骨组织微结构退化为特征,以致骨的脆性增高而骨折危险性增加的一种全身性系统性代谢性骨病。据估计,全球范围内现有2亿多OP患者,其中亚洲地区成为OP高发地区,中国患者已超过9000万。目前OP在世界常见病、多发病中居第7位。OP导致的骨折等并发症可致残、致死,治疗耗资大,给患者、家庭和社会带来沉重的负担。随着人口老年化,这情况显得更为突出。OP不仅是一个医疗问题,也是一个需要迫切关注的社会问题。当前对OP的药物治疗以抑制骨吸收为主,少数药物可以促进骨形成,但效果都不确切,且药物治疗存在较大副作用。Wolff定律认为,骨的结构特点是适应功能需要而铸造的,并随着功能需要的改变而进行重建;骨的功能是承受活动期间骨组织的机械应变,并随着功能需要所产生的应力的变化而进行功能适应性重建;骨组织内骨细胞接受到的变化着的应力是这种重建的原始动力。而低于引起骨组织损伤的机械振动信号具有很强的成骨效应,它不仅可防止骨丢失,还可以改善骨结构和生物力学性能。因此,振动疗法是一种具有无创、副作用小的非药物治疗OP的新型模式。振动作为一种力学刺激,需要一定的频率和强度才能有效传递至成骨效应细胞诱发成骨反应,过低的强度和频率难以到达有效部位或不能成为诱发成骨的阈上刺激,而过高的振动强度对人体是有危害的。骨对机械信号很敏感,研究证明短时间的振动能通过降低骨吸收,促进成骨细胞的增殖和分化,提高成骨速度,增加松质骨量而提高骨的数量和质量。振动的成骨效应已经形成共识,但其具体的机制尚不清楚。目前主要有骨血灌注,骨功能适应和振动在骨组织的传导等观点,其确切的信号传导通路也不清楚。振动在改善骨质量的同时还可在一定程度上预防或改善肌萎缩,维持或增强肌力,有助于改善或增强平衡能力。目前短时高频低强度的振动用于OP相关研究已得到广泛关注。为了能更好的适合人体解剖学特点,我们改良全身垂直振动方式研究设计了复合振动仪,希望在改变振动方式的同时保持振动的成骨效应。其特点在于：1、产生自然的交替运动模式：振动过程中人体姿势被动处于轻微不平衡状态,患者必须积极主动调节姿势维持身体平衡,进而使患者骨盆产生一个交替的上下晃动运动训练。骨盆的这种交替的上下晃动运动模式是人体行走和跑动的动作基础,因此复合振动给人体提供了一个符合人体解剖学特点的训练刺激;2、复合振动时人体反复地姿态调节维持身体平衡,增大了肌肉的收缩力度,强化了神经—肌肉系统的参与并加大了对骨组织的力学刺激,在一定程度上加强了人体的平衡能力训练;3、复合振动是在垂直振动基础之上,增强神经肌肉系统在振动过程中的参与,更强调神经肌肉系统在防治OP中的作用。课题组早期得出的研究结果主要有：1、振动频率对成骨细胞细胞周期、增殖能力、碱性磷酸酶活性均有影响,实验研究表明振动促进成骨细胞增殖及分化的适宜频率为15～45Hz;2、定的复合振动可以增加去势大鼠的骨密度,改善骨微结构、提高骨强度;3、复合振动在改善骨质量的同时还可在一定程度上预防或改善肌萎缩,维持或增强肌力,减轻或改善外周末梢神经功能退变,可能有助于改善或增强平衡能力。虽然复合振动在成骨细胞和动物层次得到很好的成骨效应,但对唯一引起骨吸收的破骨细胞尚未进行研究。总之,机械振动信号是一个复杂的网络,其具体的作用机制还需要进一步研究。骨重建是一个骨组织自我更新的过程：破骨细胞不断吸收旧骨,成骨细胞则不断形成新骨补充骨吸收部分。当骨骼成熟后,破骨细胞在骨重建过程中维持骨量稳定发挥重要作用。破骨细胞增多或活性增强,导致骨吸收增加,骨重塑失衡,导致很多骨骼系统疾病的发生,如：OP,类风湿性关节炎,转移性骨肿瘤。破骨细胞来源于造血干细胞单核巨噬细胞系,由多核巨噬细胞组成,主要分布在骨质表面、骨内血管通道周围,具有特殊的骨吸收功能,在人体生理性骨重建和病理性骨破坏过程中发挥重要作用。因破骨细胞属于终末细胞,不能分化传代,分离纯化困难,限制了对破骨细胞功能的深入研究。RAW264.7细胞是小鼠源性破骨细胞前体细胞,来自Abelson小鼠白血病病毒所致的肿瘤,代表破骨细胞分化的早期阶段。核因子-κB受体活化因子配体（receptor activator of NF-κB ligand, RANKL）/RANK/骨保护素（osteoprotegerin, OPG）调节轴的发现,让我们对破骨细胞及其骨生理作用的认识更加深入。随着对破骨细胞分化调控机制的深入认识,RANKL在破骨细胞分化、成熟和活化过程中的作用备受关注。RANKL与破骨细胞前体表面上的RANK结合为破骨细胞的分化成熟提供了关键的信号。RANKL能诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,因此RAW264.7细胞被广泛用于破骨细胞分化研究。高频低强度复合振动（low-magnitude, high-frequency compound vibratio

关键词：高频低强度振动 RANKL RAW264.7细胞破骨细胞细胞分化

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RANKL诱导破骨细胞前体细胞分化成熟

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中国老年学杂志 2011年第6期31卷 963-965页

作者：巫松辉钟招明陈建庭南方医科大学南方医院脊柱骨病外科广东广州510515

目的用核因子-KB受体活化因子配体（RANKL）诱导破骨细胞前体细胞分化成熟，建立获取成熟破骨细胞的方法。方法用破骨细胞前体细胞RAW264．7细胞为模型，RANKL诱导培养4～9d，抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察TRAP阳性多核细胞形成... 详细信息

目的用核因子-KB受体活化因子配体（RANKL）诱导破骨细胞前体细胞分化成熟，建立获取成熟破骨细胞的方法。方法用破骨细胞前体细胞RAW264．7细胞为模型，RANKL诱导培养4～9d，抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察TRAP阳性多核细胞形成，罗丹明-鬼笔环肽荧光染色观察纤维性肌动蛋白（F-actin）环，DAPI染色观察细胞核，甲苯胺蓝染色观察牛骨片表面的吸收陷窝情况。结果RANKL可诱导RAW264．7细胞形成TRAP染色阳性的多核细胞，形成F-actin环，骨片吸收陷窝明显。结论RANKL可诱导RAW264．7细胞向成熟破骨细胞分化，该诱导模型可用于破骨细胞分化研究。

关键词： RAW264.7细胞 RANKL 破骨细胞细胞分化

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复合振动抑制RAW264．7细胞分化成熟

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中国骨质疏松杂志 2011年第7期17卷 564-567页

作者：巫松辉钟招明查丁胜陈建庭南方医科大学南方医院脊柱骨病外广州510515

目的研究复合振动对核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的RAW264.7细胞分化的影响,探讨复合振动对破骨细胞分化的影响及机制。方法 RAW264.7细胞RANKL诱导培养3或4d并施加复合振动干预,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP阳... 详细信息

目的研究复合振动对核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的RAW264.7细胞分化的影响,探讨复合振动对破骨细胞分化的影响及机制。方法 RAW264.7细胞RANKL诱导培养3或4d并施加复合振动干预,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP阳性多核细胞形成的变化,real-time RT-PCR分析破骨细胞特异性基因组织蛋白酶K(cathepsin K),金属蛋白酶-9(MMP-9)和TRAP表达的变化。结果复合振动能抑制RANKL诱导破骨细胞形成,下调破骨细胞特异基因cathepsin K,MMP-9和TRAP的表达。结论 RANKL促进RAW264.7细胞向破骨细胞分化,并增加特异基因的表达,但RANKL的促进作用受复合振动抑制。这进一步的阐释复合振动抗骨质疏松的作用机制。

关键词： RAW264.7细胞 RANKL 破骨细胞细胞分化

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微创复位内固定治疗老年性Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折效果分析

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中国医学创新 2020年第27期17卷 36-39页

作者：巫松辉广东省普宁市人民医院广东普宁515300

目的:分析微创复位内固定在老年性Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折治疗中的有效性和优越性。方法:选取2018年7月-2019年6月于本院诊治的86例老年性Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折患者,应用双色球法分为对照组与观察组,各43例。对照组行切开复位内... 详细信息

目的:分析微创复位内固定在老年性Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折治疗中的有效性和优越性。方法:选取2018年7月-2019年6月于本院诊治的86例老年性Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折患者,应用双色球法分为对照组与观察组,各43例。对照组行切开复位内固定术,观察组行微创复位内固定术。随访1年,比较两组临床疗效、手术相关指标、术后跟骨解剖参数与术后并发症发生情况。结果:两组治疗有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组手术时间和住院时间均短于对照组,且术中出血量少于对照组(P0.05)。观察组术后并发症发生率为4.65%,明显低于对照组的18.60%(P<0.05)。结论:微创复位内固定术可缩短老年性Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折患者的手术时间与住院时间,减少术中出血量与术后并发症,临床应用价值高。

关键词：跟骨骨折微创复位内固定术老年性 SandersⅡ型 SandersⅢ型 Bohler角 Gissane角

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中老年人正位腰椎及髋部骨密度扫描对骨质疏松诊断敏感性的比较

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中国骨质疏松杂志 2010年第12期16卷 940-941,939页

作者：吴骞陈建庭钟招明李丽巫松辉刘富强南方医科大学南方医院脊柱骨病外科广州510515

目的比较双能X线骨密度仪腰椎正位扫描及髋部扫描对骨质疏松诊断的敏感性。方法通过病史询问排除腰椎骨折的患者后,随机选取来我院骨密度室行骨密度检测的40至82岁中老年人340名(其中男性108名,女性232名)作为研究对象。采用双能X线骨... 详细信息

目的比较双能X线骨密度仪腰椎正位扫描及髋部扫描对骨质疏松诊断的敏感性。方法通过病史询问排除腰椎骨折的患者后,随机选取来我院骨密度室行骨密度检测的40至82岁中老年人340名(其中男性108名,女性232名)作为研究对象。采用双能X线骨密度仪对被检者腰部正位及髋部行骨密度检测,分析比较此两测量部位对骨质疏松症诊断的敏感性。结果男性被检者髋部骨密度扫描骨质疏松的检出率为62.03%高于腰椎正位的23.14%,结果有统计学差异,各年龄组髋部最低T分值均低于腰椎正位最低T分值,各组结果均有统计学差异。女性被检者髋部骨密度扫描骨质疏松的检出率为56.89%高于腰椎正位的50%,结果有统计学差异,各年龄组髋部最低T分值均低于腰椎正位最低T分值,各组结果均无统计学差异。结论中老年人髋部T评分低于正位腰椎;髋部骨密度扫描较正位腰椎骨密度扫描对骨质疏松的诊断具有更高的敏感性;髋部T评分在骨质疏松诊断中的意义更为重要。

关键词：敏感性骨密度髋部正位腰椎

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前侧入路手术治疗32例股骨远端C型骨折疗效分析

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中国矫形外科杂志 2013年第16期21卷 1684-1686页

作者：叶少腾巫松辉陈凯宁苏伟坤罗育润蓝创新陈晓明广东省普宁市人民医院骨科 515300

[目的]评估前侧入路锁定钢板内固定治疗股骨远端C型骨折的疗效。[方法]2009年1月～2012年2月在本院治疗的股骨远端C型骨折共32例,男18例,女14例,年龄17岁～65岁,平均35.9岁,开放性骨折11例,合并髌骨骨折4例,脑出血1例,无神经、血管损伤... 详细信息

[目的]评估前侧入路锁定钢板内固定治疗股骨远端C型骨折的疗效。[方法]2009年1月～2012年2月在本院治疗的股骨远端C型骨折共32例,男18例,女14例,年龄17岁～65岁,平均35.9岁,开放性骨折11例,合并髌骨骨折4例,脑出血1例,无神经、血管损伤。从手术时间、术中出血量、膝关节功能恢复满意率等方面评价治疗效果。[结果]31例完成随访,1例失去随访,随访时间13～47个月,平均23.3个月;手术时间65～145 min,平均96.8 min;术中出血量150～450 ml,平均270 ml;膝关节功能满意率达87.1%。[结论]前侧入路是显露股骨远端C型骨折的有效方法,能较容易地实现关节面解剖复位,具有早期关节功能锻炼、重建关节功能等优点,明显改善患者的生活质量。

关键词：股骨远端骨折手术入路内固定

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经皮椎体后凸成形术的骨水泥分布形态对骨质疏松性椎体压缩骨折患者近期预后的影响

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江西医药 2021年第1期56卷 45-48页

作者：温财源巫松辉吴楚城广东省普宁市人民医院骨外科普宁515300

目的探讨经皮椎体后凸成形术(PKP)的骨水泥分布形态对骨质疏松性椎体压缩骨折患者近期预后的影响。方法回顾性选取2018年4月-2020年4月行PKP治疗的骨质疏松性椎体压缩骨折患者180例为研究对象。患者术后均采用X线片观察骨水泥分布形态,... 详细信息

目的探讨经皮椎体后凸成形术(PKP)的骨水泥分布形态对骨质疏松性椎体压缩骨折患者近期预后的影响。方法回顾性选取2018年4月-2020年4月行PKP治疗的骨质疏松性椎体压缩骨折患者180例为研究对象。患者术后均采用X线片观察骨水泥分布形态,并根据骨水泥分布形态分为A组(致密型,n=118)和B组(弥散型,n=62)。术后患者均门诊随访至少半年。比较两组手术时间、术中出血量、术后住院时间、骨水泥量等手术相关指标以及并发症发生率。并比较两组术前和术后半年的Oswestry功能障碍指数、Cobb角和目测类比评分。结果A组和B组的手术时间、术中出血量、术后住院时间、骨水泥量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,B组骨水泥渗漏、椎体再骨折发生率较高(P松性椎体压缩骨折患者近期预后情况。

关键词：经皮椎体后凸成形术骨水泥分布形态骨质疏松椎体压缩骨折近期预后

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大鼠椎体生长板软骨细胞的改良培养及传代特征

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中国矫形外科杂志 2011年第2期19卷 136-140页

作者：李涛陈建庭朱青安许子星查丁胜刘富强巫松辉吴骞肖文德南方医科大学南方医院脊柱骨病科广州市510515

[目的]建立体外培养及鉴定大鼠椎体生长板软骨细胞的方法,观察软骨细胞的传代特征。[方法]采用改良胰酶和Ⅱ型胶原酶序贯消化法对4只1周龄SD大鼠椎体生长板软骨细胞进行体外分离、培养。原代细胞传代后采用细胞HE染色和甲苯胺蓝染色对... 详细信息

[目的]建立体外培养及鉴定大鼠椎体生长板软骨细胞的方法,观察软骨细胞的传代特征。[方法]采用改良胰酶和Ⅱ型胶原酶序贯消化法对4只1周龄SD大鼠椎体生长板软骨细胞进行体外分离、培养。原代细胞传代后采用细胞HE染色和甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行鉴定,采用MTT比色法绘制细胞生长曲线。将细胞传代至第6代,采用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞的形态,采用免疫细胞化学染色鉴定各代软骨细胞Ⅱ型胶原的表达。[结果]MTT比色法显示,传3代以前的软骨细胞的生长曲线近似"S"形,从第4 d开始细胞呈对数生长,第9 d达平台期,至第11 d开始出现生长抑制。体外培养的软骨细胞随着传代次数的增加,细胞形态由原代的多角形逐渐变为长梭形。传3代以前的软骨细胞Ⅱ型胶原免疫细胞化学呈强阳性。[结论]本研究所采用的软骨细胞分离和培养方法,能在短时间内获得高纯度的软骨细胞,传3代及以前的细胞具有软骨细胞的特征性表型,增殖较快,这一方法为更深入地从细胞水平研究椎体的纵向生长奠定了基础。

关键词：椎体生长板软骨细胞细胞培养

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探讨股骨近端锁定钢板(LPFP)与股骨近端抗旋髓内钉(PFNA)治疗股骨转子下骨折的临床效果

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齐齐哈尔医学院学报 2018年第16期39卷 1907-1909页

作者：陈凯宁巫松辉温财源普宁市人民医院骨科广东普宁515300

目的观察在股骨下转子下骨折患者采取股骨近端锁定钢板(LPFP)与股骨近端抗旋髓内钉(PFNA)治疗的临床效果分析。方法回顾性分析2013年1月—2018年1月我院收治的70例股骨下转子骨折患者,其中采取LPFP手术方式35例设置为LPFP组,PFNA手术方... 详细信息

目的观察在股骨下转子下骨折患者采取股骨近端锁定钢板(LPFP)与股骨近端抗旋髓内钉(PFNA)治疗的临床效果分析。方法回顾性分析2013年1月—2018年1月我院收治的70例股骨下转子骨折患者,其中采取LPFP手术方式35例设置为LPFP组,PFNA手术方式35例设置为PFNA组。将两组患者手术进行时间,术中平均出血量,平均住院时间,术后负重时间、术后并发症,住院费用,术后2周、3个月、6个月随访Harris髋关节功能评定分对照分析。结果 PFNA组在手术时间、术中出血量、住院时间、负重时间及平均费用与LPFP组比较有明显优势,LPFP组并发症发生率为28.57%、PFNA组为8.57%,差异具有统计学意义(P0.05)具有可比性;术后两组Harris评分均稳步上升,其中PFNA组明显高于LPFP组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论在股骨下转子骨折患者中,采取PFNA治疗,具有手术操作时间短、术中出血量少、固定稳固,可提早下地活动、进行早期髋关节功能锻炼,且术后并发症较少,效果优于LPFP手术方案。

关键词：股骨近端锁定钢板(LPFP) 股骨近端抗旋髓内钉(PFNA) 股骨转子下骨折临床效果分析

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不同年龄大鼠胸椎椎体生长板的组织学观察及增殖能力测定

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南方医科大学学报 2011年第2期31卷 353-356,364页

作者：李涛陈建庭朱青安许子星查丁胜刘富强巫松辉吴骞肖文德南方医科大学南方医院脊柱骨病科广东广州510515

目的比较不同年龄大鼠胸椎椎体生长板的组织学差异并对不同年龄大鼠椎体生长板软骨细胞的增殖能力进行测定。方法采用番红O-固绿染色法对1 d及1、4、8、16、28周龄大鼠胸椎椎体生长板进行染色鉴定,测定生长板软骨肥大区、增殖区、静止... 详细信息

目的比较不同年龄大鼠胸椎椎体生长板的组织学差异并对不同年龄大鼠椎体生长板软骨细胞的增殖能力进行测定。方法采用番红O-固绿染色法对1 d及1、4、8、16、28周龄大鼠胸椎椎体生长板进行染色鉴定,测定生长板软骨肥大区、增殖区、静止区的高度。采用改良的胰酶和Ⅱ型胶原酶序贯消化法对以上年龄阶段大鼠胸椎椎体生长板软骨细胞进行原代培养。采用实时定量PCR检测不同年龄大鼠胸椎椎体生长板体外培养软骨细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的基因表达水平,采用Western blot法测定不同年龄大鼠胸椎椎体生长板体外培养软骨细胞PCNA蛋白的表达。结果 1 d及1周大鼠肥大区和增殖区明显高于其他年龄组(P<0.01);4周大鼠增殖区高于28周大鼠(P<0.05);1 d及1周大鼠静止区高于其他年龄组(P<0.05),4周大鼠静止区高于16周、28周大鼠(P<0.05)。16周大鼠椎体生长板静止区内开始出现骨化现象,28周龄大鼠椎体生长板静止区大部分出现骨化现象。PCNA在基因和蛋白水平的表达随年龄增加而降低。结论 1 d及1周大鼠椎体生长板各区的高度明显高于年龄较大的大鼠。16周大鼠椎体生长板静止区内开始有骨长入,28周龄大鼠椎体生长板静止区大部分出现骨化现象。随年龄增加椎体生长板软骨细胞的增殖能力逐渐下降。

关键词：生长板脊柱软骨细胞增殖细胞核抗原

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