检索结果-南通市图书馆

作者：巩芳芳郑州大学

学位级别：硕士

目的DNA 甲基转移酶 1（DNA（cytosine-5）methyltransferase 1,DNMT1）是肺癌等恶性肿瘤的重要生物标志之一。检测其在生物样本中的表达活性和水平对癌症的早期诊断和预后有很重要的意义。本研究拟采用磁性纳米颗粒作为固相载体,采用... 详细信息

目的DNA 甲基转移酶 1（DNA（cytosine-5）methyltransferase 1,DNMT1）是肺癌等恶性肿瘤的重要生物标志之一。检测其在生物样本中的表达活性和水平对癌症的早期诊断和预后有很重要的意义。本研究拟采用磁性纳米颗粒作为固相载体,采用自组装核酸探针信号放大技术建立检测DNMT1表达活性和水平的新方法,为临床样本中DNMT1活性和水平的检测提供新选择,为肿瘤的早期诊断提供新思路。方法1.自组装核酸探针信号放大技术检测DNMT1活性方法的建立首先,利用链霉亲和素和生物素的高亲和力将生物素化的DNMT1作用序列（Biotin-S1’-S2’）固定到链霉亲和素磁珠上。其次,利用自组装的方法构建荧光信号放大探针聚四甲基罗丹明（聚TAMRA）。之后,将构建好的聚TAMRA通过DNA杂交作用连接到Biotin-S1’-S2’上,利用聚TAMRA上含有多个荧光染料TAMRA实现荧光检测信号的放大。最后加入目标物DNMT1和限制性内切酶BssHⅡ。当DNMT1存在时,可将半甲基化的Biotin-S1’-S2’完全甲基化,使其不被BssHⅡ识别和切断,荧光信号较强;当DNMT1不存在时,BssHⅡ可识别并切断半甲基化Biotin-S1’-S2’,聚TAMRA荧光探针被洗去,荧光信号变弱。对链霉亲和素磁珠、Biotin-S1’-S2’、S3-TAMRA、聚TAMRA的用量以及链霉亲和素磁珠和生物素结合的时间进行单因素法优化,建立检测浓度依赖性DNMT1活性的方法,并对所建立的检测方法进行方法学评价。2.自组装核酸探针信号放大技术检测DNMT1水平方法的建立利用碳二亚胺盐酸盐（EDC）/N-羟基琥珀酰亚胺（sulfo-NHS）活化法将DNMT1单克隆抗体（McAbDNMT1）固定在羧基磁珠上,构成免疫磁珠。免疫磁珠可以特异性捕获待测物DNMT1,清洗后加入DNMT1多克隆抗体（PcAbDNMT1）和生物素化羊抗兔IgG（羊抗兔IgG-Bio）,构成双抗夹心免疫磁珠;在桥联介质链霉亲和素存在的情况下将生物素化聚荧光素（Biotin-聚FAM）连接到双抗夹心免疫磁珠上,形成双抗夹心免疫磁珠和Biotin-聚FAM的复合物。免疫磁珠可以捕获样品中的目标物DNMT1,Biotin-聚FAM可以实现信号放大。对羊抗兔IgG-Bio稀释比、链霉亲和素、Biotin-聚FAM的用量进行了单因素法优化,建立检测DNMT1表达水平的方法,并对该方法进行方法学评价。结果1.自组装核酸探针信号放大技术检测DNMT1活性方法的建立（1）聚TAMRA的表征:琼脂糖凝胶电泳结果显示聚TAMRA由长短不一的双链DNA组成,其放大效果是单独的S3-TAMRA的2倍。（2）DNMT1 作用序列的选择及固定:在 Biotin-S1-S2、Biotin-S1-1-S2、Biotin-S1-2-S2、Biotin-S1’-S2’四种 DNMT1 作用序列中,Biotin-S1’-S2’作为DNMT1的作用底物时,DNMT1-可以很好的发挥其催化功能,因此选择-Biotin-S1’-S2’作为DNMT1的作用序列。实验测得Biotin-S1’-S2’与链霉亲和素磁珠的平均结合效率为79.37%,表明其能成功固定在链霉亲和素磁珠上。（3）.条件优化:对建立的方法进行单因素优化,最优条件为25 μL链霉亲和素磁珠为最佳用量,Biotin-S1’-S2’的最佳浓度为300 nmol/L,S3-TAMRA的最佳浓度为600nmol/L,聚TAMRA的最优浓度为300 nmol/L,链霉亲和素磁珠和生物素的结合时间为20 min。（4）标准曲线和方法学评价:在1mmol/L～100 nmol/L线性范围内,对应的标准曲线为 Y=168.59X+74211.43（X 为 CDNMT1,Y 为荧光强度 F）,r=0.9863。检出限为0.5nmol/L,相对标准偏差（RSD）范围为0.64%-11.20%,低、中、高三个浓度标准溶液的加标回收率分别为78.9%、115.2%、102.9%。2.自组装核酸探针信号放大技术检测.DNMT1水平方法的建立（1）Biotin-聚FAM的表征:琼脂糖凝胶电泳显示Biotin-聚FAM由长短不一的DNA双链构成,最长的链可达到500 bp,可起到信号放大作用。（2）免疫磁珠的表征:免疫磁珠的扫描电镜显示,相较于羧基磁珠而言免疫磁珠表面更为粗糙,可以初步判断McAbDNMT1成功修饰到羧基磁珠表面,免疫磁珠构建成功。对免疫磁珠的免疫活性进行ELISA实验,结果表明其保留了抗体的免疫活性。（3）条件优化:采用单因素方法对实验条件进行优化,得到链霉亲和素的最佳浓度为8 μmol/L,羊抗兔IgG-Bio的最佳稀释比为1:600,Biotin-聚FA

关键词：核酸探针自组装信号放大荧光 DNMT1活性 DNMT1水平

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独立学院思想政治教育生态环境建设研究

独立学院思想政治教育生态环境建设研究

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作者：巩芳芳华东师范大学

学位级别：硕士

党和国家非常重视大学生的思想政治教育,2004年8月,中共中央、国务院正式下发了《关于进一步加强和改进大学生思想政治教育的意见》(即中央16号文件),这是新时期加强和改进大学生思想政治教育的纲领性文件,中共中央宣传部、教育部等之... 详细信息

党和国家非常重视大学生的思想政治教育,2004年8月,中共中央、国务院正式下发了《关于进一步加强和改进大学生思想政治教育的意见》(即中央16号文件),这是新时期加强和改进大学生思想政治教育的纲领性文件,中共中央宣传部、教育部等之后又下发了一系列贯彻落实它的配套文件,这些文件的相继出台说明党和国家已经把大学生思想政治教育提升到国家战略层面上来。作为高等教育的新生事物,独立学院正在快速成长,其思想政治教育不容忽视。而且,由于独立学院有别于公办高校的特殊的办学机制,再加上外部环境、生源特点、发展阶段等多方面因素的影响,其思想政治教育面对的形势更为复杂。运用传统的思想政治教育模式不能够满足时下独立学院思想政治教育的实际需要,注重思想政治教育生态环境建设,从系统的角度出发充分发挥社会中一切与独立学院思想政治教育利益相关的人或群体的思想政治教育的“显性职能”或“隐性职能’强化思想政治教育实施过程中的信息传输,将思想政治教育生态环境建设与思想政治教育信息生态环境建设有机结合,多方协同,形成合力,共同致力于提高思想政治教育的成效乃是大势所趋。基于此,对独立学院思想政治教育生态环境建设加以研究具有一定现实意义和理论价值。本研究以文献研究为主,在分析独立学院思想政治教育生态环境的现状及存在问题的基础上,结合当前独立学院发展的现实情况,运用相关理论对独立学院思想政治教育生态环境建设进行探讨,提出了相应的对策和建议,对独立学院提升思想政治教育成效具有一定的启示和参考作用。第一部分为绪论,首先强调党和国家对大学生思想政治教育工作的重视。其次,通过现有院校数量、在校生人数两方面的官方统计数据将普通高等院校和独立学院进行对比,展现独立学院在我国高等教育中的重要作用。第三,通过归纳概括独立学院学生的总体特点,突出独立学院思想政治教育面临的挑战及重要意义。第四,运用马克思“人创造环境,同样,环境也创造人”的观点探讨整体环境建设对思想政治教育的作用并简析思想政治教育的生态性,强调开展思想政治教育实践活动应加强思想政治教育生态环境建设。第五,归纳分析国内外研究现状,提出本文研究的思路、内容及研究意义。第二部分主要阐明了本文研究的理论基础。首先界定了文章中涉及的独立学院、思想政治教育生态环境、独立学院思想政治教育生态环境三个核心概念,重点分析了独立学院思想政治教育生态环境的构成要素及其相互关系,并对社会及其诸要素的关系作了探讨。其次简要介绍了教育生态学、利益相关者、信息生态学、建构主义教育思想四种理论,并对四理论应用于思想政治教育的有效性和必要性进行了分析。第三部分主要介绍了独立学院思想政治教育生态环境建设的现状、存在的主要问题及成因。目前独立学院基本实现校区独立,思想政治教育活动顺利开展,党团社团组织活动成效显著,在思想政治教育微观环境建设方面进展顺利。但在思想政治教育生态环境建设方面还存在系统性不强、信息生态环境意识缺乏、校园文化体系不完善、教学模式缺少针对性、对教师的思想政治教育关注不足、未重视专业课中的思想政治教育“渗透”、家庭教育的迷失和扭曲、社会认同度低等问题,同时简要分析了上述问题的成因,主要在于独立学院仍处于成长期,软件建设尚有待时日,而且作为新生事物缺少成熟的指导方案加以借鉴。第四部分主要针对独立学院思想政治教育生态环境建设存在的主要问题探讨相应的对策和建议。首先要确立两种理念,包括从系统角度出发定义环境大框架、强化信息生态环境建设理念。其次要加强思想政治教育主体及自身环境建设,包括以和谐校园为抓手推进校园文化建设、改进独立学院思想政治理论课教学模式、重视课堂教学中教书与育人的互相促进。第三要注重家庭的配合。主要突出强调家庭对教育对象的素质养成影响。第四要注重传媒环境的净化。主要强调增强传媒社会责任,确保正确舆论导向。第五要突出受教育者的主体性。主要在于促成受教育者思想政治教育的内化。本部分研究的主旨在于以局部生态环境的优化来促进独立学院思想政治教育生态环境整体的优化,彰显思想政治教育过程中的信息传递实质。

关键词：独立学院思想政治教育生态环境

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基于CIS理论的独立学院校园文化体系研究

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中国成人教育 2015年第8期 67-69页

作者：刘彩生巩芳芳江苏科技大学

独立学院校园文化建设具有重要意义,独立学院借助CIS理论可以构建与校园精神文化、制度文化和物质文化相应的理念识别系统(BIS)、行为识别系统(MIS)和视觉识别系统(VIS),形成以CIS为理论基础的系统化的校园文化体系。独立学院校园文化... 详细信息

独立学院校园文化建设具有重要意义,独立学院借助CIS理论可以构建与校园精神文化、制度文化和物质文化相应的理念识别系统(BIS)、行为识别系统(MIS)和视觉识别系统(VIS),形成以CIS为理论基础的系统化的校园文化体系。独立学院校园文化体系在建设过程应注重系统实施、强化管理和信息传递。

关键词：独立学院 CIS理论校园文化体系

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幼儿园班级管理中幼儿自我意识的培养策略

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天津教育 2020年第4期 145-146页

作者：巩芳芳甘肃省天水市甘谷县第一幼儿园

学前教育是我国教育系统的主要组成部分,能够为幼儿的人生发展奠定基础,促进其健康成长。尤其是在学前教育改革工作全面开展的当下,教师也应该创新教学与管理理念,满足幼儿的个人发展需求。幼儿的心智尚未成熟,通过合理的手段培养其自... 详细信息

学前教育是我国教育系统的主要组成部分,能够为幼儿的人生发展奠定基础,促进其健康成长。尤其是在学前教育改革工作全面开展的当下,教师也应该创新教学与管理理念,满足幼儿的个人发展需求。幼儿的心智尚未成熟,通过合理的手段培养其自我意识,能够帮助幼儿更好地认识世界,这也是当前幼儿园班级管理工作的重点。幼儿的年龄与心理都存在一定特殊性,教师应该遵循以人为本的管理理念,使幼儿在与他人、社会接触的过程中逐步形成正确的价值观念。幼儿自我意识的培养,也是促使幼儿深刻认识自我的重要途径,能够在自我心理倾向于心理特征的不断调整当中,更好地融入社会生活当中。幼儿园班级管理工作应该顺应教育改革的趋势,制定针对性管理方案,增强幼儿自我意识。

关键词：幼儿园班级管理自我意识培养策略

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庆阳市大豆品种比较试验研究

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甘肃农业 2019年第9期 96-97页

作者：巩芳芳甘肃省庆阳市种子管理站

通过对庆阳市境内种植的5类75个大豆品种开展比较试验,筛选出了适宜当地种植的不同豆类品种,对加快加快优质新品种的开发利用步伐,提高豆类良种在农业科技进步中的贡献率有着积极的现实意义。

关键词：大豆品种比较产量

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分析新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变

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当代护士（上旬刊） 2018年第4期25卷 89-91页

作者：巩芳芳安徽省合肥市滨湖医院合肥230000

目的分析新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变。方法选取2013年1月~2016年1月收治的100例低血糖性新生儿为研究对象,将其分为症状性低血糖组(50例)与无症状性低血糖组(50例),对比两组新生儿的脑电图异常率。结果症状性低血糖组新生儿的血... 详细信息

目的分析新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变。方法选取2013年1月~2016年1月收治的100例低血糖性新生儿为研究对象,将其分为症状性低血糖组(50例)与无症状性低血糖组(50例),对比两组新生儿的脑电图异常率。结果症状性低血糖组新生儿的血糖水平高于无症状性低血糖组(P<0.05),持续时间长于无症状性低血糖组(P<0.05);症状性低血糖组新生儿的首次脑电图异常率与复查脑电图异常率均显著高于无症状性低血糖组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变会在一定程度上影响临床预后。

关键词：新生儿低血糖脑损伤脑电图改变临床预后

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分析新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变

分析新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变

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2019长三角围产医学学术会议暨浙江省围产医学学术大会

作者：巩芳芳安徽省合肥市滨湖医院

目的:分析新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变。方法:选取2013年1月～2016年1月收治的100例低血糖性新生儿为研究对象,将其分为症状性低血糖组(50例)与无症状性低血糖组(50例),对比两组新生儿的脑电图异常率。结果:症状性低血糖组新生儿... 详细信息

目的:分析新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变。方法:选取2013年1月～2016年1月收治的100例低血糖性新生儿为研究对象,将其分为症状性低血糖组(50例)与无症状性低血糖组(50例),对比两组新生儿的脑电图异常率。结果:症状性低血糖组新生儿的血糖水平高于无症状性低血糖组(P<0.05),持续时间长于无症状性低血糖组(P<0.05);症状性低血糖组新生儿的首次脑电图异常率与复查脑电图异常率均显著高于无症状性低血糖组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新生儿低血糖脑损伤时的脑电图改变会在一定程度上影响临床预后。

关键词：新生儿低血糖脑损伤脑电图改变临床预后

来源： cnki会议评论

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轻音乐联合抚触对新生儿监护病房患儿睡眠的效果探讨

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世界睡眠医学杂志 2020年第9期7卷 1567-1568页

作者：巩芳芳中国科学技术大学附属第一医院(省立医院)南区合肥230036

目的:分析在新生儿监护中实施轻音乐联合抚触的效果,及对患儿睡眠质量的影响。方法:选取2019年6月至2020年6月中国科学技术大学附属第一医院(省立医院)南区新生儿监护病房收治的早产儿100例作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组50... 详细信息

目的:分析在新生儿监护中实施轻音乐联合抚触的效果,及对患儿睡眠质量的影响。方法:选取2019年6月至2020年6月中国科学技术大学附属第一医院(省立医院)南区新生儿监护病房收治的早产儿100例作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组50例。对照组患儿接受常规监护,观察组患儿在常规监护的基础上实施轻音乐联合抚触,比较2组患儿血氧饱和度、心率和睡眠时间。结果:观察组患儿的血氧饱和度和睡眠时间明显长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿心率明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:轻音乐联合抚触可有效提高新生儿监护病房患儿的睡眠质量,对于改善患儿的身心健康效果显著,值得推广应用。

关键词：新生儿抚触轻音乐睡眠

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