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SRAP标记技术优化与湖北油茶遗传多样性研究

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SRAP标记技术优化与湖北油茶遗传多样性研究

作者：左雪枝华中农业大学

学位级别：硕士

油茶是我国南方特有的木本食用油树种。湖北省是油茶的主产区之一,了解湖北省油茶的遗传基础是油茶种质资源保护、品种改良和开发利用的基础,也是发展壮大油茶产业的前提。本研究采用SRAP标记对湖北省武汉新洲、黄石阳新、咸宁横沟桥、... 详细信息

油茶是我国南方特有的木本食用油树种。湖北省是油茶的主产区之一,了解湖北省油茶的遗传基础是油茶种质资源保护、品种改良和开发利用的基础,也是发展壮大油茶产业的前提。本研究采用SRAP标记对湖北省武汉新洲、黄石阳新、咸宁横沟桥、黄冈红安和恩施鹤峰5个居群的油茶遗传多样性进行分析,计算了5个居群间的遗传多样性指数和样品间的遗传距离,构建了样品间的遗传关系树状图,从分子水平上揭示了我省油茶种质资源现状,探明了湖北省不同地区油茶种质资源间的亲缘关系,为我省油茶种质资源建立统一的分类标准提供参考,为杂交育种的亲本选配提供理论依据;同时也证明了SRAP标记技术在油茶遗传基础育种研究中的可行性,同时为利用SRAP标记进一步进行油茶的分子辅助选择育种研究打下了坚实的基础。主要研究结果如下： 1.建立了油茶SRAP-PCR的反应体系并筛选合适的引物。通过单因素法对SRAP反应体系进行优化,SRAP-PCR体系优化结果是：Mg2+浓度1.6mmol/L、引物浓度0.21μmol/L、dNTPs浓度110μ mol/L、模板DNA量90ng、Taq DNA聚合酶用量1.5U;反应程序中第二次退火温度最适为49℃。随后在36对引物组合中筛选出了11对重复性好、多态性高的引物。 2.利用建立的体系,用11对引物对48个个体进行扩增,获得清晰的扩增条带64条,其中多态性条带60条,占93.75%;各材料间的遗传相似性系数（GS）在0.469至0.906之间,平均GS值为0.653;居群平均有效等位基因数（Ne）、平均Nei’s遗传多样性（H）、平均Shannon信息指数（Ⅰ）分别为1.5161、0.2748、0.3899,聚类分析将居群分为2大类群,这些结果表明供试油茶具有较为丰富的遗传多样性。

关键词：油茶湖北省 SRAP 遗传多样性

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冬虫夏草研究进展

安徽农业科学 2007年第27期35卷 8521-8522,8598页

作者：孙爱红左雪枝荆楚理工学院湖北荆门448000

冬虫夏草是著名的传统中药,具有多种药用功效。综述了近几年国内外冬虫夏草在无性型的确证、液体发酵、活性成分分离分析、药理学等方面的研究进展,提出了有待进一步研究商榷的问题。

关键词：冬虫夏草无性型液体发酵活性成分药理学

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油茶内生真菌多样性与抑菌性研究

河南农业科学 2017年第4期46卷 68-74页

作者：张婷左雪枝徐艳荆楚理工学院生物工程学院湖北荆门448000

为弄清油茶内生真菌的种类、分布特点及应用潜能,采集湖北省5个地区不同季节的油茶样品,分离其内生真菌并进行多样性分析和抑菌性分析。结果表明,共分离得到内生真菌1 612株,经形态学鉴定可归于24属,未产孢的菌株暂归为无孢菌群(66株)... 详细信息

为弄清油茶内生真菌的种类、分布特点及应用潜能,采集湖北省5个地区不同季节的油茶样品,分离其内生真菌并进行多样性分析和抑菌性分析。结果表明,共分离得到内生真菌1 612株,经形态学鉴定可归于24属,未产孢的菌株暂归为无孢菌群(66株)。青霉属(Pencillium)、链格孢属(Alternaria)、刺盘孢属(Colletotrichum)为优势类群,分别占总菌株数的21.09%、19.11%、14.70%。多样性分析结果显示,对于不同地区而言,黄冈地区油茶内生真菌的Shannon-Wiener指数(H')最高,为2.44;就不同组织部位来看,茎中内生真菌的Shannon-Wiener指数(H')最高,为2.52;就不同季节而言,秋季油茶内生真菌的Shannon-Wiener指数(H')最高,为2.58。总体而言,油茶中内生真菌的菌群较为稳定,地区间及组织部位间样品内生真菌组成有一定的相似性。抑菌性结果显示,在挑选的24株内生真菌中,有17株内生真菌的发酵提取物具有抑菌活性,其中3株表现出较好的抑菌效果,分别属于青霉属、链格孢属、叶点霉属(Phyllosticta),这说明油茶内生真菌的抑菌性较强,值得进一步研究。

关键词：油茶内生真菌分离率多样性抑菌性

稻田固氮解磷解钾菌筛选及其复合菌剂对土壤培肥作用

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中国土壤与肥料 2014年第2期 82-87页

作者：方华舟左雪枝荆楚理工学院生物工程学院湖北荆门448000

用固氮、解磷、解钾培养基,分别从稻田土壤中分离获得9个固氮菌株(A1-A9)、7个解磷菌株(B1-B7)和6个解钾菌株(C1-C6)。对各菌株固氮、解磷、解钾能力及水稻促生效果分析表明,最突出菌株分别为A5、B2、C5;各菌株等比例混合组成复合菌剂... 详细信息

用固氮、解磷、解钾培养基,分别从稻田土壤中分离获得9个固氮菌株(A1-A9)、7个解磷菌株(B1-B7)和6个解钾菌株(C1-C6)。对各菌株固氮、解磷、解钾能力及水稻促生效果分析表明,最突出菌株分别为A5、B2、C5;各菌株等比例混合组成复合菌剂接入灭菌稻田土壤,30 d后可使土壤总氮、有效磷、速效钾分别增加21.32%、32.17%、45.57%;初步鉴定各菌株分别为固氮菌属(Azotobacter sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)和芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。复合菌剂处理稻田土壤,水稻苗高、鲜重、干重及植株全氮、全磷、全钾显著优于对照组,说明筛选菌株可在稻田土壤氮、磷、钾转换及培肥过程中起重要作用。

关键词：稻田固氮菌解磷菌解钾菌土壤养分

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牛粪堆肥中高效菌株的筛选与应用效果

中国土壤与肥料 2014年第1期 95-100页

作者：左雪枝方华舟荆楚理工学院生物工程学院湖北荆门448000

为了探索牛粪快速腐熟原理及方法，以糖、淀粉、蛋白质、纤维素、油脂培养基为筛选培养基，以菌株增殖倍数、菌株性能等为筛选条件，从牛粪常温堆肥中筛选不同原料高效功能菌，并组成功能菌剂；以不同原料菌及单菌株发酵试验对发酵机制... 详细信息

为了探索牛粪快速腐熟原理及方法，以糖、淀粉、蛋白质、纤维素、油脂培养基为筛选培养基，以菌株增殖倍数、菌株性能等为筛选条件，从牛粪常温堆肥中筛选不同原料高效功能菌，并组成功能菌剂；以不同原料菌及单菌株发酵试验对发酵机制进行研究。结果表明，芽孢杆菌、假单胞菌、木霉及曲霉等为重要功能菌，组成功能菌剂发酵升温快，进入高温期仅需4d，发酵腐熟时间可缩短至19—20d；发酵及升温效果依次为糖原料功能菌〉淀粉原料功能菌〉蛋白质原料功能菌〉纤维素原料功能菌；芽孢杆菌、假单胞菌、木霉、曲霉利用糖、淀粉、蛋白质及纤维素能力强，升温及腐熟效果好。各菌株充分利用基质各成分，紧密协同生长及代谢，迅速进入高温期，是堆肥快速发酵及腐熟的主要作用机制。

关键词：牛粪发酵菌株复合菌剂堆肥温度腐解机制

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不同光照和干湿温度下红花石蒜花期的比较

科技信息(学术研究) 2006年第9期 388-389页

作者：左雪枝荆门职业技术学院

观察了自然与栽培两种条件下红花石蒜的花期长短、光照强度与干湿温度,结果表明两种条件的光照强度差异显著,干湿温度只有A区的b0点与其它测试点差异显著,说明影响石蒜开花时间与花期长短的主要因素是光照强弱,干湿温度也有一定的影响,... 详细信息

观察了自然与栽培两种条件下红花石蒜的花期长短、光照强度与干湿温度,结果表明两种条件的光照强度差异显著,干湿温度只有A区的b0点与其它测试点差异显著,说明影响石蒜开花时间与花期长短的主要因素是光照强弱,干湿温度也有一定的影响,但无光照强度显著。

关键词：生长条件红花石蒜花期

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牛粪自然好氧发酵微生物变化规律

环境工程学报 2013年第1期7卷 333-339页

作者：方华舟安冬梅王培清左雪枝易庆平孙爱红齐莹荆楚理工学院生物工程学院荆门448000

以新鲜牛粪进行好氧堆肥,每间隔3 d取样,以牛肉蛋白胨、高氏一号、PDA、豆芽汁为培养基,以稀释法,进行发酵微生物分离、培养、计数和鉴定。结果表明,新鲜牛粪中微生物主要为细菌;发酵过程中,细菌数量大于放线菌、霉菌约104～105倍,细菌... 详细信息

以新鲜牛粪进行好氧堆肥,每间隔3 d取样,以牛肉蛋白胨、高氏一号、PDA、豆芽汁为培养基,以稀释法,进行发酵微生物分离、培养、计数和鉴定。结果表明,新鲜牛粪中微生物主要为细菌;发酵过程中,细菌数量大于放线菌、霉菌约104～105倍,细菌是发酵过程中的优势微生物;中温性细菌是升温阶段主要作用菌群;嗜热放线菌及嗜热细菌是高温阶段优势菌群;霉菌是降温阶段优势菌群。进一步鉴定表明,细菌类群中的芽孢杆菌、纤维单胞菌,放线菌类群中的小多孢菌、小单孢菌、高温放线菌,霉菌类群中的木霉、曲霉、青霉等为发酵过程中的优势种类。酵母菌未参与发酵过程。

关键词：牛粪好氧堆肥细菌放线菌霉菌种类数量

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油茶产黄酮内生真菌的诱变育种

江苏农业科学 2018年第1期46卷 206-209页

作者：张婷左雪枝荆楚理工学院生物工程学院湖北荆门448000

以实验室保存的从油茶中分离出来的、具有产黄酮能力的内生真菌JS-Ye6为研究对象,为提高其产黄酮能力,先通过单因素诱变即紫外线(UV)诱变、亚硝酸(HNO_2)诱变分别获得最佳正突变菌株YZ-8、YY-4,它们的黄酮产量提高率分别为37.04%、16.2... 详细信息

以实验室保存的从油茶中分离出来的、具有产黄酮能力的内生真菌JS-Ye6为研究对象,为提高其产黄酮能力,先通过单因素诱变即紫外线(UV)诱变、亚硝酸(HNO_2)诱变分别获得最佳正突变菌株YZ-8、YY-4,它们的黄酮产量提高率分别为37.04%、16.26%;然后采用复合诱变法对菌株YZ-8、YY-4分别进行HNO_2诱变、UV诱变,结果显示UV-HNO_2复合诱变的效果优于HNO_2-UV复合诱变的效果,并最终筛选得到最佳正突变菌株Y-UH-2,黄酮产量为0.022 4 mg/mL,比对照菌株JS-Ye6产量提高53.4%,且菌株连续传代稳定性较好。

关键词：紫外诱变亚硝酸诱变复合诱变黄酮产量内生真菌JS-Ye6 诱变育种

不同光照强度对蛹虫草菌丝及子实体生长的影响

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北方园艺 2015年第16期 140-144页

作者：左雪枝朱运英方华舟荆楚理工学院生物工程学院湖北荆门448000 荆门市广场游园管理处湖北荆门448000

以优质蛹虫草D1为试验菌种,分别对蛹虫草生长各主要阶段设置不同光照强度,对蛹虫草液体菌种制作、发菌及菌丝体生长、转色、原基分化、子实体生长等主要生长阶段进行单因子对照试验,通过比较各试验组菌丝及子实体形态、色泽、生长趋势... 详细信息

以优质蛹虫草D1为试验菌种,分别对蛹虫草生长各主要阶段设置不同光照强度,对蛹虫草液体菌种制作、发菌及菌丝体生长、转色、原基分化、子实体生长等主要生长阶段进行单因子对照试验,通过比较各试验组菌丝及子实体形态、色泽、生长趋势、产量、质量等主要性能特征,以实际栽培产量及商品性能为主要指标,探索蛹虫草不同生长阶段适宜光照强度及规律。结果表明：当光照强度分别为0～50、0～10、300～500、200～300lx时,蛹虫草各生长阶段生长及发育性能良好,出草产量较高。说明对蛹虫草不同生长阶段实行不同光照强度管理是保证和提高蛹虫草产量与质量的重要措施之一。

关键词：蛹虫草光照强度产量