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β-谷甾醇对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞功能的影响及机制

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中国药房 2023年第15期34卷 1847-1852页

作者：谷慧敏孟庆良左瑞庭展俊平马俊福刘亚伟河南省中医院风湿病科郑州450002 河南中医药大学骨伤学院郑州450002

目的研究β-谷甾醇对类风湿性关节炎(RA)滑膜成纤维细胞MH7A功能的影响及其机制。方法使用网络药理学筛选β-谷甾醇的作用靶点及治疗RA的靶点,两者取交集后进行拓扑分析寻找治疗RA的最关键靶点。用不同浓度(0、5、10、20、40μmol/L)... 详细信息

目的研究β-谷甾醇对类风湿性关节炎(RA)滑膜成纤维细胞MH7A功能的影响及其机制。方法使用网络药理学筛选β-谷甾醇的作用靶点及治疗RA的靶点,两者取交集后进行拓扑分析寻找治疗RA的最关键靶点。用不同浓度(0、5、10、20、40μmol/L)的β-谷甾醇处理MH7A细胞并用CCK-8法检测细胞活性,筛选β-谷甾醇的最适给药浓度。采用10 ng/mL肿瘤坏死因子(TNF-α)体外诱导MH7A细胞后,加入β-谷甾醇(最适给药浓度)处理。CCK-8法和EdU法检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell侵袭法分别检测细胞迁移及侵袭能力;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的水平;qRT-PCR法和Western blot法分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA和蛋白表达水平。MH7A细胞转染PPARα小干扰RNA,并通过上述实验方法检测PPARα敲低后β-谷甾醇对MH7A细胞增殖、迁移、侵袭、炎症因子分泌及PPARα蛋白表达的影响。结果 PPARα是β-谷甾醇治疗RA的最关键靶点,β-谷甾醇的最适给药浓度为20μmol/L。与模型组相比,β-谷甾醇组MH7A细胞活力显著降低、细胞增殖数显著减少(P<0.05),细胞迁移率显著降低、细胞侵袭数显著减少(P<0.05),IL-1β水平、IL-6水平均显著降低(P<0.05),PPARα mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.05)。与阴性对照小干扰RNA组相比,敲低PPARα后细胞活力上升35.6%(P<0.05),细胞增殖数、细胞迁移率和细胞侵袭数均显著增加(P<0.05),IL-1β水平及IL-6水平均显著升高(P<0.05)。结论 β-谷甾醇可以抑制TNF-α诱导的MH7A细胞的增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌,其作用机制与激活PPARα通路有关。

关键词： β-谷甾醇类风湿性关节炎过氧化物酶体增殖物激活受体α 增殖迁移侵袭炎症因子

胡桃醌对类风湿关节炎关节成纤维样滑膜细胞增殖和凋亡的影响

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中成药 2019年第10期41卷 2334-2339页

作者：左瑞庭王西彬河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)

目的探讨胡桃醌对类风湿关节炎关节成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)增殖和凋亡的影响。方法不同浓度胡桃醌(0、5、10、20、30、40、50μmol/L)孵育RA-FLSs 24 h,胡桃醌(30μmol/L)分别和不同终质量浓度Akt激动剂SC79(0、0.1、0.5、0.8、1.0、... 详细信息

目的探讨胡桃醌对类风湿关节炎关节成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)增殖和凋亡的影响。方法不同浓度胡桃醌(0、5、10、20、30、40、50μmol/L)孵育RA-FLSs 24 h,胡桃醌(30μmol/L)分别和不同终质量浓度Akt激动剂SC79(0、0.1、0.5、0.8、1.0、1.5、1.8μg/mL)同时孵育RA-FLSs 24h。BrdU和MTT法分别检测RA-FLSs的增殖能力和细胞活力,Annexin-V FITC/PI法和caspase-3活性检测试剂盒检测RA-FLSs凋亡,Western blot法检测Akt磷酸化和p21蛋白表达。结果与0μmol/L胡桃醌比较,胡桃醌(30、40、50μmol/L)显著抑制RA-FLSs细胞活力和增殖能力,促进其凋亡和caspase-3活性(P<0.01);30μmol/L胡桃醌能显著抑制Akt磷酸化,促进p21蛋白表达(P<0.01)。与30μmol/L胡桃醌比较,SC79(1.0μg/mL)与30μmol/L胡桃醌共同处理时,p21蛋白表达显著下降,并能促进RA-FLSs细胞凋亡,抑制其增殖(P<0.01)。结论胡桃醌可通过调节Akt磷酸化来调控p21表达,进而调节RA-FLSs增殖和凋亡过程,为类风湿关节炎的治疗提供价值。

关键词：胡桃醌 RA-FLSs 细胞增殖细胞凋亡 Akt p21

梣酮对LPS介导MH7A细胞增殖和迁移的影响

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中成药 2019年第8期41卷 1806-1810页

作者：左瑞庭王西彬河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)

目的研究梣酮对LPS介导类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A增殖和迁移的影响。方法 MH7A细胞随机分为对照组、LPS组及梣酮低、中、高剂量组(10、20、50μmol/L),各梣酮组预给药后LPS诱导MH7A细胞24 h。然后,CCK-8法检测细胞活性,试剂盒... 详细信息

目的研究梣酮对LPS介导类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A增殖和迁移的影响。方法 MH7A细胞随机分为对照组、LPS组及梣酮低、中、高剂量组(10、20、50μmol/L),各梣酮组预给药后LPS诱导MH7A细胞24 h。然后,CCK-8法检测细胞活性,试剂盒法检测LDH释放,BrdU掺入法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移,Western blot法检测MMP1、MMP9、MMP13、p-JNK、p-STAT3蛋白表达。结果梣酮对MH7A细胞活性、LDH释放无明显影响(P>0.05)。与LPS组比较,梣酮组显著抑制细胞增殖、侵袭和迁移(P<0.05),显著降低MMP1、MMP9、MMP13、p-JNK、p-STAT3蛋白表达(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论梣酮可抑制LPS介导MH7A细胞增殖和迁移,可能是通过调控JNK、STAT3信号通路实现的。

关键词：梣酮 MH7A细胞增殖迁移

金丝桃苷对IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞损伤的影响

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中成药 2021年第2期43卷 369-373页

作者：王西彬左瑞庭河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)脊柱科河南郑州450002 河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)风湿科河南郑州450002

目的探讨金丝桃苷对IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞活性、炎性因子水平、细胞外基质(ECM)平衡,以及核因子NF⁃κB信号通路的影响。方法分离培养BALB/c小鼠骶髂关节软骨细胞,并将其随机分成5组,对照组、IL⁃1β组、IL⁃1β+金丝桃苷(25... 详细信息

目的探讨金丝桃苷对IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞活性、炎性因子水平、细胞外基质(ECM)平衡,以及核因子NF⁃κB信号通路的影响。方法分离培养BALB/c小鼠骶髂关节软骨细胞,并将其随机分成5组,对照组、IL⁃1β组、IL⁃1β+金丝桃苷(25、50、100μg/mL)组。MTT检测细胞活性;ELISA试剂盒检测白介素(IL)⁃6、肿瘤坏死因子(TNF)⁃α、Ⅰ型胶原(Col⁃Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col⁃Ⅲ)水平;Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)⁃3、MMP⁃9、p⁃IκB⁃α和p⁃p65的表达。结果IL⁃1β处理显著抑制软骨细胞活性,提高IL⁃6和TNF⁃α水平,降低Col⁃Ⅰ和Col⁃Ⅲ的水平,并上调MMP⁃3、MMP⁃9、p⁃IκB⁃α和p⁃p65的表达;而金丝桃苷呈浓度依赖性抑制IL⁃1β诱导的细胞活性下降,IL⁃6和TNF⁃α水平上升,Col⁃Ⅰ和Col⁃Ⅲ水平下降,以及MMP⁃3、MMP⁃9、p⁃IκB⁃α和p⁃p65的表达上调。结论金丝桃苷能够抵抗IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞损伤,提高细胞活性、抑制炎性因子和ECM紊乱,这与其抑制NF⁃κB信号通路有关。

关键词：金丝桃苷软骨细胞炎性因子细胞外基质 NF⁃κB信号通路

负载重组人骨形态发生蛋白2磷酸钙骨水泥与纤维蛋白胶复合材料促进骨质疏松性骨折的愈合

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中国组织工程研究 2019年第14期23卷 2156-2161页

作者：李浩亮王西彬左瑞庭河南省中医院骨伤科河南省郑州市450000 河南省中医院脊柱科河南省郑州市450000 河南省中医院风湿骨病科河南省郑州市450000

背景:骨形态发生蛋白2是目前研究最广泛与诱导成骨活性最强的骨形态发生蛋白之一,但是单纯骨形态发生蛋白植入后会被组织液稀释及蛋白酶分解,不能保持持久的药物浓度,难以发挥有效的骨诱导作用。目的:实验以磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复... 详细信息

背景:骨形态发生蛋白2是目前研究最广泛与诱导成骨活性最强的骨形态发生蛋白之一,但是单纯骨形态发生蛋白植入后会被组织液稀释及蛋白酶分解,不能保持持久的药物浓度,难以发挥有效的骨诱导作用。目的:实验以磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料作为骨形态发生蛋白2的载体,观察其对骨质疏松性骨折的修复效果。方法:取54只雌性SD大鼠,切除双侧卵巢制作骨质疏松模型,3个月后制作股骨中段骨折模型,随机分成3组,每组18只,克氏针内固定组骨折断端不注射任何材料;复合材料组骨折断端注射0.5m L磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,载生长因子复合材料组骨折断端注射0.5m L负载重组人骨形态发生蛋白2的磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料。骨折后4,12周,进行股骨骨折标本X射线检查、Micro-CT检测、生物力学三点弯曲实验及病理观察。结果与结论:①载生长因子复合材料组骨折愈合评分高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05);②载生长因子复合材料组骨折后4,12周的骨体积分数、骨小梁厚度及骨小梁数量均高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05),骨小梁分离度均低于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05);③载生长因子复合材料组骨折后4,12周的最大载荷、刚度均高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05),骨折后4周的弹性模量高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05);④克氏针内固定组骨折后4周主要可见纤维软骨骨痂,骨折后12周骨痂重塑为板状骨,硬骨痂含量较少;复合材料组、载生长因子复合材料组骨折后4周可见明显的纤维性骨痂与软骨性骨痂,载生长因子复合材料组硬骨痂含量较复合材料组多,骨折后12周硬骨痂重塑为板状骨;⑤结果说明,负载重组人骨形态发生蛋白2的磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,可促进骨质疏松性骨折的愈合,提高骨强度。

关键词：骨质疏松性骨折磷酸钙骨水泥纤维蛋白胶复合材料重组人骨形态发生蛋白2 骨折愈合生物力学磷酸钙类骨形态发生蛋白质类组织工程

葫芦素B对IL-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响

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天津医药 2019年第12期47卷 1210-1214页

作者：王西彬左瑞庭河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)脊柱科 450002 河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)风湿科 450002

目的明确葫芦素B对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响。方法用不同浓度(0.5、1、5、10、20μmol/L)的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β(10μg/L)处理。采用CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶(... 详细信息

目的明确葫芦素B对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响。方法用不同浓度(0.5、1、5、10、20μmol/L)的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β(10μg/L)处理。采用CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及Caspase-3的活性,确定葫芦素B最佳处理浓度。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞胞外基质代谢相关的Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及蛋白多糖aggrecan、基质金属蛋白酶(MMP)-3及MMP-13的mRNA水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2(PGE2)的水平,同时检测一氧化氮(NO)的产生;采用Western blot分析葫芦素B对IL-1β介导的软骨细胞中核因子(NF)-κB信号通路活化的影响。结果葫芦素B剂量依赖性地减弱IL-1β对软骨细胞存活的抑制效应(P<0.05),同时抑制IL-1β诱导的LDH释放、细胞凋亡及Caspase-3活性(P<0.05),10μmol/L是其最佳实验剂量。与IL-1β处理组相比,葫芦素B处理可减缓IL-1β对CollagenⅡ、aggrecan的mRNA表达抑制效应(P<0.05)。此外,葫芦素B还可抑制IL-1β诱导的MMP-3及MMP-13的mRNA表达及释放(P<0.05),降低炎性介质NO、PGE2的产生(P<0.05)。同时,IL-1β可明显上调软骨细胞中p-IκB、p-p65 NF-κB的表达,而葫芦素B则可抑制上述分子的表达(P<0.05)。结论葫芦素B可能通过阻断NF-κB信号通路的激活抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤及代谢紊乱,提示其具有潜在的抗骨关节炎的功效。

关键词：软骨细胞骨关节炎白细胞介素1β NF-κB 炎性介质葫芦素B

桂苓甘露饮加减联合秋水仙碱治疗湿热蕴结型痛风性关节炎的临床观察

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中国实验方剂学杂志 2020年第16期26卷 113-118页

作者：左瑞庭孟庆良马俊福谷慧敏河南省中医院郑州450002

目的:观察桂苓甘露饮加减联合秋水仙碱治疗湿热蕴结型痛风性关节炎(GA)的临床疗效,并探讨其机制。方法:将210例GA患者随机分为中药组(70例),西药组(70例)和联合组(70例),分别口服桂苓甘露饮加减、秋水仙碱、桂苓甘露饮加减联合秋水仙碱... 详细信息

目的:观察桂苓甘露饮加减联合秋水仙碱治疗湿热蕴结型痛风性关节炎(GA)的临床疗效,并探讨其机制。方法:将210例GA患者随机分为中药组(70例),西药组(70例)和联合组(70例),分别口服桂苓甘露饮加减、秋水仙碱、桂苓甘露饮加减联合秋水仙碱,疗程均为30 d。观察治疗前后3组临床症状[关节疼痛视觉模拟评分(VAS)、自我感觉的总体评价(PGA)、疼痛数字评价量表(NRS)],血清和关节液中炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),尿酸(UA)],血液流变学指标[全血高切黏度(HCV),全血低切黏度(LCV),血液还原黏度(RV)];比较3组总有效率和不良反应发生率。结果:研究期间脱落6例。联合组总有效率97. 1%(67/69),高于中药组的80. 8%(55/68)(χ2=8. 153,P<0. 05)和西药组的79. 1%(53/67)(χ2=8. 735,P<0. 05)。与中药组和西药组治疗后比较,联合组临床症状VAS和NRS评分明显降低(P<0. 05),PGA评分明显升高(P<0. 05);联合组血清和关节液中炎性因子指标TNF-α,IL-1β和UA含量明显降低(P<0. 05);联合组血液流变学指标HCV,LCV,RV明显降低(P<0. 05)。与联合组治疗期间不良反应发生率比较,西药组的不良反应升高(χ2=5. 538,P<0. 05),中药组降低(χ2=6. 273,P<0. 05)。结论:桂苓甘露饮加减联合秋水仙碱具有增效减毒的作用,可明显改善湿热蕴结型GA患者的临床症状,不良反应发生率低。

关键词：桂苓甘露饮加减秋水仙碱湿热蕴结型痛风性关节炎

加味散膝汤联合塞来昔布治疗膝关节滑膜炎寒湿痹阻证的疗效观察

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中国实验方剂学杂志 2020年第7期26卷 98-103页

作者：左瑞庭孟庆良马俊福谷慧敏河南省中医院郑州450002

目的:观察加味散膝汤联合塞来昔布对膝关节滑膜炎寒湿痹阻证患者的临床疗效。方法:120例患者随机分为对照组和治疗组,各60例。对照组口服塞来昔布胶囊,治疗组口服塞来昔布胶囊+加味散膝汤,疗程均为30 d。治疗前后分别观察两组患者的疼... 详细信息

目的:观察加味散膝汤联合塞来昔布对膝关节滑膜炎寒湿痹阻证患者的临床疗效。方法:120例患者随机分为对照组和治疗组,各60例。对照组口服塞来昔布胶囊,治疗组口服塞来昔布胶囊+加味散膝汤,疗程均为30 d。治疗前后分别观察两组患者的疼痛视觉模拟评分(VAS),美国膝关节协会膝关节功能(AKS),关节炎影响评定量表(AIMS)和骨性关节炎指数量表(WOMAC);测量膝关节周径,关节腔积液和滑膜增生厚度;检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3),血清白细胞介素-1(IL-1)和血沉(ESR)的含量;观察两组有效率和不良反应。结果:治疗组总有效率94.8%(55/58),高于对照组的80.7%(46/57)(P<0.05);与本组治疗前比较,两组治疗后VAS,AIMS,WOMAC,膝关节周径,关节腔积液,滑膜增生厚度明显降低(P<0.05),AKS评分明显升高(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组VAS,AIMS,WOMAC,膝关节周径,关节腔积液,滑膜增生厚度明显降低(P<0.05),AKS评分明显升高(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组TNF-α,MMP-3,IL-1和ESR含量明显降低(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组TNF-α,MMP-3,IL-1和ESR含量明显降低(P<0.05)。治疗组不良反应发生率5.89%(4/58),低于对照组的22.81%(13/57)(P<0.05)。结论:散膝汤联合塞来昔布可有效改善膝关节滑膜炎寒湿痹阻证患者的临床症状,不良反应发生率低。

关键词：加味散膝汤塞来昔布寒湿痹阻证膝关节滑膜炎

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腰康细粒剂治疗湿热型腰椎间盘突出症的效果

中国医药导报 2014年第30期11卷 62-64页

作者：左瑞庭邢台医学高等专科学校中医系河北邢台054000

目的研究腰康细粒剂制备方法及其治疗湿热型腰椎间盘突出症的临床效果。方法将湿热型腰椎间盘突出症患者60例随机分为两组,治疗组服用腰康细粒剂,配合腰椎牵引、手法按摩治疗;对照组内服腰痛宁胶囊,采取与治疗组相同的物理治疗方法。治... 详细信息

目的研究腰康细粒剂制备方法及其治疗湿热型腰椎间盘突出症的临床效果。方法将湿热型腰椎间盘突出症患者60例随机分为两组,治疗组服用腰康细粒剂,配合腰椎牵引、手法按摩治疗;对照组内服腰痛宁胶囊,采取与治疗组相同的物理治疗方法。治疗4周后进行疗效评定。结果治疗组30例总有效率为96.67%,控显率为83.33%;对照组30例总有效率为80.00%,控显率为40.00%。两组总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗组控显率优于对照组(P<0.01)。结论腰康细粒剂治疗湿热型腰椎间盘突出症效果确切。

关键词：腰康细粒剂湿热型腰椎间盘突出效果