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多氯联苯138哺乳期暴露对小鼠子宫发育的影响及机制研究

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多氯联苯138哺乳期暴露对小鼠子宫发育的影响及机制研究

中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：阮金鹏马文溯肖敏唐晨何承勇左正宏厦门大学细胞应激生物学国家重点实验室

目的多氯联苯(PCBs)是一种持久性有机污染物和环境内分泌干扰物,虽然已经被禁止生产和使用,但其在环境及人体中仍广泛存在,对人类健康造成重大威胁。研究表明,PCBs暴露会导致内分泌紊乱,但有关PCBs哺乳期暴露对子宫发育的影响鲜有报道...

目的多氯联苯(PCBs)是一种持久性有机污染物和环境内分泌干扰物,虽然已经被禁止生产和使用,但其在环境及人体中仍广泛存在,对人类健康造成重大威胁。研究表明,PCBs暴露会导致内分泌紊乱,但有关PCBs哺乳期暴露对子宫发育的影响鲜有报道。本研究使用环境及人体中最为常见的3种PCBs单体中的PCB138对哺乳期雌性小鼠进行暴露,探究环境水平PCB138在生命早期暴露是否会影响小鼠子宫发育。方法选择10-12周龄C57BL/6小鼠,交配后产生子代,对出生后第3天(PND3)至PND21雌性仔鼠进行颈部皮下注射处理。处理组给予PCB138(0.5,5,50μg/kg/d)颈部皮下注射,对照组给予玉米油注射。仔鼠断奶后分笼饲养至6个月,在发情间期进行收样。(1)取小鼠血清检测雌激素、孕激素水平;(2)HE染色观察子宫组织病理变化、炎性细胞浸润情况;(3)天狼星红和Masson染色观察子宫组织纤维化情况,WB检测子宫组织中纤维化相关蛋白表达水平;(4) WB检测子宫组织中雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PGR)信号通路相关蛋白表达水平;(5) WB检测子宫组织中NF-κB信号通路相关蛋白表达水平;(6) WB检测子宫组织中TGFβ/Smad信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组小鼠相比,(1)暴露组小鼠子宫腔上皮细胞变薄,腺体膨大;(2) HE染色显示暴露组小鼠子宫组织出现炎性细胞浸润;(3)天狼星红和Masson染色显示暴露组小鼠子宫出现纤维化,胶原沉积相关蛋白α-SMA和CollagenⅠ表达水平升高;(4)血清激素水平检测结果显示暴露组小鼠血清雌激素水平明显下降,WB结果显示暴露组小鼠子宫ERα、PGR信号通路相关蛋白表达水平异常;(5) WB结果显示暴露组小鼠子宫NF-κB信号通路激活;(6) WB检测子宫TGFβ/Smad信号通路被激活。结论 PCB138哺乳期暴露可引起小鼠激素紊乱,干扰ERα和PGR的表达,引起子宫腔上皮细胞变薄、子宫腺体膨大,诱发子宫炎症和纤维化。

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二噁类化合物的生物检测方法研究进展

环境科学与技术 2017年第S2期40卷 192-196页

作者：阮金鹏周懿翕沈超左正宏滨海湿地生态系统教育部重点实验室厦门大学福建厦门361102

二噁英类化合物是一类典型的持久性有机污染物,具有高亲脂性,且稳定性高,能在生物体的多种组织中大量蓄积,并产生致畸致癌致突变等毒性作用,对人类的健康产生极大威胁。二噁英类化合物对生物体的毒性作用主要通过芳香烃受体信号通路介导... 详细信息

二噁英类化合物是一类典型的持久性有机污染物,具有高亲脂性,且稳定性高,能在生物体的多种组织中大量蓄积,并产生致畸致癌致突变等毒性作用,对人类的健康产生极大威胁。二噁英类化合物对生物体的毒性作用主要通过芳香烃受体信号通路介导,二噁英等外源性物质进入细胞后作为配体与胞内的芳香烃受体结合,激活芳香烃受体信号通路,引起一系列的生物效应。根据这一原理,目前已经有很多种生物检测方法应用于二噁英类化合物的检测。该文的主要目的是对目前常用的二噁英类化合物的生物检测方法做一个简单阐述和评价,为后续生物检测方法的改进和完善提供参考。

关键词：二噁英类化合物检测标准芳香烃受体生物检测

RNA m6A修饰差异调控纳米材料诱导的肺损伤

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RNA m6A修饰差异调控纳米材料诱导的肺损伤

中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：阮锋凯曾洁尹涵颖刘常乾左正宏何承勇厦门大学细胞应激生物学国家重点实验室

目的纳米材料的广泛应用于食品、化妆品、生物医药等领域,可能通过饮食、饮水、呼吸等途径暴露于人体,具有潜在健康风险。量子点和金属纳米材料是两类常见的纳米材料,其安全性仍有待进一步研究。RNA m6A甲基化调控多种生理过程,但其在...

目的纳米材料的广泛应用于食品、化妆品、生物医药等领域,可能通过饮食、饮水、呼吸等途径暴露于人体,具有潜在健康风险。量子点和金属纳米材料是两类常见的纳米材料,其安全性仍有待进一步研究。RNA m6A甲基化调控多种生理过程,但其在纳米材料诱导的损伤中作用和机制不明(Michaela et al.,2018,Science,361,1346)。方法 (1)体外实验中,利用肺上皮细胞对量子点(BPQDs,GOQDs,CdSe/ZnS QDs,InP/ZnS QDs)和金属及金属氧化物纳米材料(nTiO,nAg,nZnO,nFeO,nCuO)诱导细胞损伤及m6A甲基化水平行筛查;(2)结合MRIP-seq和RNA-seq测序及生化和分子生物学技术,检测不同纳米材料暴露后的损伤效应及受m6A调节的通路;(3)利用小干扰RNA或者抑制剂干预m6A通路及其上游通路后,检测对纳米材料诱导肺损伤的影响;(4)体内实验中,利用气管滴注的方式,将小鼠肺组织暴露于不同纳米材料及结合小分子抑制剂干预,检测纳米材料暴露对肺组织损伤的影响及其与m6A甲基化的关系。结果 (1)体外实验中,BPQDs,nTiO,nFeO,nZnO等均可诱导细胞内整体甲基化水平升高以及细胞损伤发生;(2)结合多组学测序和生化检测,我们发现BPQDs通过下调去甲基化蛋白ALKBH5表达,从而调节RNA m6A升高,硒离子稳态、脂氧合酶通路和花生四烯酸代谢通路相关分子SELLOW,COX6B2,NDUFB9和GPX4mRNA发生m6A修饰,后者被YTHDF2蛋白识别后发生降解,进而诱导肺细胞铁死亡(Ruan et al.,2021,Small Methods,5,2001045)。而nTiO通过脂质活性氧依赖性的方式激活p-ERK1/2增强甲基化蛋白METTL3的稳定性,进而促进m6A水平升高,其中TGF-β通路、炎症通路中抑制性分子AMH和MUC5B被m6A修饰,而后被YTHDF2识别并降解,进而促进肺炎症反应(Ruan et al.,2022,Environmental Pollution,119986);(3)利用小干扰RNA或者抑制剂干预ALKBH5和METTL3表达及其上游通路后,均可减轻BPQDs和nTiO诱导的肺损伤;脂质抗氧化剂Fer-1干预是减轻BPQDs和nTiO诱导的肺损伤的可行策略。(4)气管滴注将小鼠肺组织暴露于nTiO,可在肺组织中检测到m6A甲基化水平升高、ERK1/2通路、炎性因子通路、TGF-β通路和激活等肺损伤指标;而且Fer-1干预可减轻nTiO暴露诱导的肺损伤。结论不同类型纳米材料可通过改变甲基转移酶或者去甲基转移酶表达控制基因m6A甲基化修饰水平介导肺损伤的发生,Fer-1干预可作为不同纳米材料诱导肺损伤的有效干预手段,对纳米材料的安全性评估和防护提供潜在干预策略。

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肠道菌群在黑磷量子点诱导小鼠肾脏免疫损伤中的机制研究

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肠道菌群在黑磷量子点诱导小鼠肾脏免疫损伤中的机制研究

中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：阮锋凯曾洁刘常乾尹涵颖左正宏何承勇厦门大学细胞应激生物学国家重点实验室

目的黑磷量子点(BPQDs)是一种新型0维纳米材料,随着其应用范围增多,其生物安全性也越来越受关注。我们前期发现BPQDs急性暴露可以直接导致肾脏损伤(He et al. 2020. Small)。肠道是纳米材料暴露的主要器官之一,肠道菌群在BPQDs诱导的肾...

目的黑磷量子点(BPQDs)是一种新型0维纳米材料,随着其应用范围增多,其生物安全性也越来越受关注。我们前期发现BPQDs急性暴露可以直接导致肾脏损伤(He et al. 2020. Small)。肠道是纳米材料暴露的主要器官之一,肠道菌群在BPQDs诱导的肾脏损伤中的作用值得探究。本研究探索BPQDs可否通过影响肠道菌群间接诱发肾脏损伤及其机制。方法选择8～10周龄雄性Balb/c小鼠,处理组给予BPQDs(0.1和1 mg/kg/d)灌胃28天,挽救组给予益生菌VSL#3和罗伊氏乳酸杆菌(L.reu)干预以及短链脂肪酸乙酸干预。(1)收集小鼠肾脏、肠道、肠道内容物;(2) HE和糖原染色观察肠道病理变化,HE染色观察肾脏组织病理变化;(3) 16S宏基因组测序检测小鼠肠道内容物菌群构成;(4) GC-MS检测小鼠肠道内容物中短链脂肪酸水平;(5)流式细胞仪检测肾脏组织CD4T细胞和CD8T细胞比例变化;(6)ELISA和qPCR检测小鼠血清和肾脏组织中CD4T细胞和CD8T细胞相关细胞因子和marker基因水平;(7)Masson染色和WB检测肾脏组织中纤维化水平;(8) WB检测肾脏组织中NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组小鼠相比,(1)暴露组小鼠肾小球和肾小管面积增大,血尿酸和肌酐显著升高,提示BPQDs暴露可诱导肾脏损伤,益生菌和乙酸干预可挽救该效应;(2) HE和糖原染色显示暴露组小鼠肠道组织无明显损伤,肾脏组织出现炎性细胞浸润,益生菌和乙酸干预组小鼠肾脏炎症减轻;(3) 16S rDNA测序显示暴露组小鼠肠道内容物中拟杆菌门比例下降,乳酸杆菌属比例下降;(4) GC-MS检测结果显示暴露组小鼠肠道内容物中乙酸、丁酸等短链脂肪酸含量下降,益生菌和乙酸干预组小鼠肠道内容物中乙酸水平回升;(5)流式细胞术、ELISA和qPCR结果显示暴露组小鼠肾脏中Th17细胞比例及其炎症因子水平显著升高,益生菌和乙酸干预可挽救该效应;(6) Masson染色和WB检测肾脏组织纤维化水平升高,NF-κB信号通路激活,益生菌和乙酸干预组小鼠肾脏纤维化水平下降,NF-κB通路阻断。结论 BPQDs暴露可引起肠道菌群构成改变和肾脏免疫损伤,主要涉及肠道益生菌比例下降和短链脂肪酸代谢紊乱,肾脏Th17细胞比例升高;益生菌和乙酸干预可减轻BPQDs暴露引起的肠道短链脂肪酸代谢紊乱,间接调控肾脏免疫损伤。调节肠道菌群稳态是减轻BPQDs暴露诱导肾脏损伤的可行策略。

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BPQDs诱导的体内外肺损伤效应及其机制研究

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BPQDs诱导的体内外肺损伤效应及其机制研究

中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：曾洁阮锋凯吴鸣涛许佳滢左正宏何承勇厦门大学细胞应激生物学国家重点实验室

目的黑磷量子点(BPQDs)是一种新型0维纳米材料,由于其优异的理化性质,在电子、能源和生物医学等领域具有广泛应用前景,其生物安全性也越来越受关注。RNA m6A甲基化修饰,可调节RNA加工和控制广泛生物学过程,其在纳米材料毒性调控中作用...

目的黑磷量子点(BPQDs)是一种新型0维纳米材料,由于其优异的理化性质,在电子、能源和生物医学等领域具有广泛应用前景,其生物安全性也越来越受关注。RNA m6A甲基化修饰,可调节RNA加工和控制广泛生物学过程,其在纳米材料毒性调控中作用以及生物安全性评估中的潜在应用值得研究。铁死亡是一种新型的细胞死亡方式,其是否参与BPQDs诱导的细胞损伤尚未清楚。呼吸暴露是纳米材料最常见的方式,BPQDs导致的肺部体内外毒性及其机制,特别是RNA m6A甲基化和铁死亡在其中的作用值得研究,且有助于BPQDs的生物安全性评估。结果体内:(1)BPQDs单次气管滴注并观察其肺损伤效应。发现24 h小鼠肺损伤评分显著上升、支气管变厚、完整的肺泡数量减少并出现肺组织免疫浸润。观察3 h、6 h、12 h、24 h肺泡洗液中中性粒细胞、巨噬细胞的比例,发现24 h肺中的中性粒细胞显著上升。(2)通过透射电镜观察肺组织的细微结构,发现型肺泡中板层小体的数量剂量依赖性上升。(3)透射电镜观察及流式技术检测发现中性粒细胞的数量在24 h显著上升,(4)肺表面活性蛋白SP-A、SP-D和IL-1β的表达量显著上升。体外:(1)采用多种肺细胞对多种量子点材料进行生物安全性筛查,发现BPQDs通过抑制去甲基化酶ALKBH5的蛋白表达,显著提升肺细胞中的RNA m6A甲基化总体水平,提示BPQDs通过RNA m6A甲基化修饰影响下游生物学反应;(2)采用m6A-seq和RNA-seq联合分析发现,BPQDs暴露影响肺细胞中谷胱甘肽代谢、细胞硒离子反应和线粒体功能等铁死亡相关生物途径,提示BPQDs可能导致肺细胞发生铁死亡;(3)生化实验发现BPQDs暴露导致细胞脂质过氧化、GSH耗竭、铁过载和GPX4表达下调,且效应可以被铁死亡抑制剂挽救,进一步证实BPQDs暴露会导致肺细胞铁死亡;(4)抑制ALKBH5表达,可促进铁死亡发生,联合BPQDs处理,铁死亡发生进一步加剧,证实了RNA m6A甲基化修饰参与调控铁死亡发生。结论在体内,BPQDs的气管滴注使得小鼠急性肺损伤。并可能用过促进肺表面活性蛋白SP-A和SP-D促进先天免疫反应。在体外,肺细胞中,BPQDs通过降低去甲基化酶ALKBH5表达升高铁死亡相关基因mRNA m6A修饰,后者被YTHDF2识别并发生降解,最终诱导铁死亡。本研究为生物安全性评估提供了一种新思路和新指标,对于纳米材料安全性评价和纳米毒理学领域发展具有重要意义。

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金定鸭遗传多样性及分子标记的研究

厦门大学学报（自然科学版） 2004年第2期43卷 256-259页

作者：左正宏陈奕欣吕良炬厦门大学生命科学学院福建厦门361005

用40个随机引物对我国常见家鸭品种(系)、引进品种和野鸭基因组DNA进行RAPD分析,寻找金定鸭品种特征RAPD标记.通过多次重复实验,初步认为Y05 600可作为鉴别育成品种金定鸭的RAPD分子标记.再选用20个引物对金定鸭3个育成品系各12个个体进... 详细信息

用40个随机引物对我国常见家鸭品种(系)、引进品种和野鸭基因组DNA进行RAPD分析,寻找金定鸭品种特征RAPD标记.通过多次重复实验,初步认为Y05 600可作为鉴别育成品种金定鸭的RAPD分子标记.再选用20个引物对金定鸭3个育成品系各12个个体进行RAPD扩增,分析金定鸭的种质特征.结果显示:金定鸭I、II、III系的平均遗传相似系数分别为0.9157±0.0296、0.8552±0.0459、0.8816±0.0449;3个品系的变异系数分别为3.23%、5.37%、5.09%.育成品种金定鸭不同品系遗传一致性较高,但品系内的个体间仍存在着丰富的遗传多样性,不同品系之间存在着极显著的差异(p<0.01).

关键词：金定鸭遗传多样性分子标记 RAPD

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中华盒形藻有性生殖过程中的光效应和光受体

海洋科学 2004年第7期28卷 44-48页

作者：杨听林左正宏林均民厦门大学生命科学学院福建厦门361005

以采自厦门沿岸的中华盒形藻(BidduphiasinensisGreville)为实验材料 ,通过培养研究了光对该藻有性生殖的影响。结果表明 ,光诱导该藻有性生殖发生的临界日长为16h,且其性分化反应随光照时数的延长而增强 ;该藻性分化反应的有效光照强... 详细信息

以采自厦门沿岸的中华盒形藻(BidduphiasinensisGreville)为实验材料 ,通过培养研究了光对该藻有性生殖的影响。结果表明 ,光诱导该藻有性生殖发生的临界日长为16h,且其性分化反应随光照时数的延长而增强 ;该藻性分化反应的有效光照强度范围为40～80μmol/(m2·s) ,高峰出现在70μmol/(m2·s) ;光照强度低于光合补偿点的延长光 (8h光期 )无论置于主光期(8h)之前或之后均能引起精原孢囊的形成 ,白光作为延长光的诱导效果最为明显 ,蓝光其次 ,红光有效但不明显 ,远红光无效。由上得知 ,中华盒形藻有性生殖过程存在光周期现象 ,属长日植物 ,具有“光控”反应特征 ,但不典型。

关键词：中华盒形藻(Bidduphia sinensis Greville) 有性生殖光周期光受体

乡村振兴的绿色金融支持研究——基于新制度经济学产权理论视角

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财会通讯 2024年第6期 133-139页

作者：左正龙吉林财经大学应用数学学院吉林长春130117

乡村振兴的实现离不开绿色发展,而绿色发展离不开绿色金融支持。文章突破传统研究范式,基于新制度经济学分析框架,以产权理论为主导,围绕降低交易成本的主线,剖析了绿色金融支持乡村振兴的机制:产权明晰的资源配置效应、智能合约降低交... 详细信息

乡村振兴的实现离不开绿色发展,而绿色发展离不开绿色金融支持。文章突破传统研究范式,基于新制度经济学分析框架,以产权理论为主导,围绕降低交易成本的主线,剖析了绿色金融支持乡村振兴的机制:产权明晰的资源配置效应、智能合约降低交易成本、金融组织体系的金融抑制效应及金融立法的行为规范效应。基于目前绿色金融在助力乡村振兴中存在的问题,得出结论,关键在进一步明晰农地经营权,它是农地能否用作抵押融资的前提,也为后续的绿色产权立法指明了方向,随后的颁证确认为智能合约的引入奠定了基础。绿色金融组织体系则应重在化解“供给型”金融抑制。

关键词：产权理论乡村振兴智能合约绿色金融金融立法

褐菖鲉肝HSC70基因的环介导等温扩增技术的建立及在石油污染剂量效应研究中的应用

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生态毒理学报 2014年第3期9卷 524-530页

作者：莫正平陈荣黄火清左正宏厦门大学环境与生态学院近海海洋环境科学国家重点实验室厦门361102 厦门大学生命科学学院厦门361102

从褐菖鲉肝脏中克隆了热休克蛋白HSC70基因,利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立HSC70基因的定量检测方法。为检测该方法的可行性,将褐菖鲉分别暴露于石油水溶性成分(water-soluble fraction,WSF... 详细信息

从褐菖鲉肝脏中克隆了热休克蛋白HSC70基因,利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立HSC70基因的定量检测方法。为检测该方法的可行性,将褐菖鲉分别暴露于石油水溶性成分(water-soluble fraction,WSF)20、60、180μg·L-11 d后,利用real-time PCR及LAMP技术同时测定褐菖鲉肝HSC70 mRNA表达量,两种方法测定结果基本一致,证实LAMP技术可用于褐菖鲉肝HSC70基因的定量。为更细致了解石油WSF影响褐菖鲉肝脏HSC70基因表达的剂量-效应关系,将褐菖鲉分别暴露于25、50、75、100、125、150、175μg·L-1WSF中,5 d后采样,用LAMP技术定量检测HSC70 mRNA。结果表明,HSC70 mRNA表达量在50μg·L-1浓度组即被显著诱导,在75μg·L-1浓度下达到最大值,这说明褐菖鲉肝HSC70基因对石油污染较敏感,有潜力作为海洋石油污染的生物标志物。

关键词：环介导等温扩增褐菖鲉 HSC70 石油水溶性成分实时荧光定量PCR