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淫羊藿素通过调控铁死亡增加鼻咽癌细胞的放射敏感性

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南方医科大学学报 2023年第10期43卷 1665-1673页

作者：胡桐勾文峰任中昊刘改廷李祎亮左代英侯文彬中国医学科学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室天津300192 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016

目的探索淫羊藿素对鼻咽癌细胞放射增敏作用以及机制。方法通过MTT实验和克隆形成实验,观察淫羊藿素对鼻咽癌HONE1和HNE1细胞增殖能力的影响,筛选出给药剂量以及照射剂量。建立鼻咽癌细胞γ射线照射模型以及淫羊藿素给药模型,将细胞分... 详细信息

目的探索淫羊藿素对鼻咽癌细胞放射增敏作用以及机制。方法通过MTT实验和克隆形成实验,观察淫羊藿素对鼻咽癌HONE1和HNE1细胞增殖能力的影响,筛选出给药剂量以及照射剂量。建立鼻咽癌细胞γ射线照射模型以及淫羊藿素给药模型,将细胞分为空白组、淫羊藿素组、照射组和淫羊藿素与照射联合组。通过流式细胞术检测4组细胞活性氧(ROS)的变化、周期分布以及细胞凋亡情况,通过Westernblot实验检测DNA损伤标志蛋白γ-H2AX、周期相关蛋白CDC25C、p-CDC25C、和CyclinB1以及铁死亡标志蛋白ACSL4和GXP4的表达情况。构建HONE1细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察淫羊藿素与放射联合对肿瘤组织的生长情况的影响。结果淫羊藿素以剂量依赖性方式抑制鼻咽癌细胞活力,增强放射对鼻咽癌细胞增殖能力的抑制作用。流式细胞术及Westernblot实验显示,淫羊藿素与放射联合后促进鼻咽癌细胞ROS增多,γ-H2AX表达上调(P<0.001)。与单纯照射组相比,联合组会使鼻咽癌细胞发生G2期阻滞,CDC25C和CyclinB1表达下调,p-CDC25C表达上调(P<0.01)。联合组会促进鼻咽癌细胞发生细胞凋亡,铁死亡蛋白ACSL4表达上调而GXP4表达下调(P<0.001)。与空白组相比,其余3组的肿瘤生长速度明显减慢。与照射组相比,联合组肿瘤生长速度减慢,瘤体重量下降(P<0.001)。结论淫羊藿素可在体内、体外均增强鼻咽癌对放射的敏感性,可能主要是通过增强细胞活性氧促进鼻咽癌细胞发生铁死亡来达到放射增敏的作用。

关键词：淫羊藿素鼻咽癌放射增敏活性氧铁死亡

MDM2基因真核表达质粒构建及对人乳腺癌MCF-7细胞运动与侵袭能力的影响

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沈阳药科大学学报 2023年第1期40卷 57-62页

作者：郑大勇张彤彤常兴吴英良左代英沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016 华北理工大学药学院河北唐山063210

目的构建MDM2的pcDNA3.1真核表达质粒(pcDNA3.1-MDM2),并将其转染至人乳腺癌MCF-7中,考察MDM2蛋白过表达对乳腺癌转移的影响。方法采用PCR方法体外克隆MDM2基因全序列,并将其用同源重组技术连接到真核pcDNA3.1质粒载体上,构建真核表达质... 详细信息

目的构建MDM2的pcDNA3.1真核表达质粒(pcDNA3.1-MDM2),并将其转染至人乳腺癌MCF-7中,考察MDM2蛋白过表达对乳腺癌转移的影响。方法采用PCR方法体外克隆MDM2基因全序列,并将其用同源重组技术连接到真核pcDNA3.1质粒载体上,构建真核表达质粒,并进行测序鉴定,利用脂质体法转染至MCF-7细胞中。通过G418抗生素筛选出单克隆高表达细胞系,使用免疫印迹法考察MDM2蛋白表达。同时,通过划痕试验及transwell法来检测细胞的运动与侵袭能力。结果测序结果表明pcDNA3.1-MDM2基因序列准确无误,免疫印迹法表明稳定转染细胞系构建成功,划痕试验及transwell试验表明MDM2高表达细胞系的运动与侵袭能力增加。结论成功构建了pcDNA3.1-MDM2真核表达质粒,转染MCF-7细胞后,可稳定表达,并促进了MCF-7细胞的运动及侵袭,为研究MDM2蛋白表达对人乳腺癌转移的分子机制及作为诊疗的生物标志物奠定了基础。

关键词：乳腺癌 MDM2 肿瘤转移

基于网络药理学及分子对接探讨复方柳菊片治疗肺结核的作用机制

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中医临床研究 2023年第33期15卷 102-110页

作者：周容左代英杨明沈阳药科大学辽宁沈阳110016 江西国药有限责任公司江西南昌330052

目的:基于网络药理学方法研究复方柳菊片抗肺结核的活性成分、靶点,初步探讨其作用机制。方法:通过文献收集、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SwissADME数据库,以口服生物利用度≥30%、类药性≥0.18、类药性五规则作为活性化... 详细信息

目的:基于网络药理学方法研究复方柳菊片抗肺结核的活性成分、靶点,初步探讨其作用机制。方法:通过文献收集、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SwissADME数据库,以口服生物利用度≥30%、类药性≥0.18、类药性五规则作为活性化合物的筛选条件,借助TCMSP、Swiss Target Predition数据库得到化合物的作用靶点;借助OMIM、Gene Cards、DisGeNet等数据库得到疾病靶点,取交集,筛选出化合物与疾病共有靶点。采用Cytoscape 3.9.1软件构建可视化的“药物-成分-靶点-疾病”网络,利用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-protein Interaction,PPI)网络,应用DAVID生物学信息资源对关键靶点进行基因本体论(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。通过AutodockTools及Vina对活性成分与关键靶点进行半柔性分子对接。结果:预测筛选出复方柳菊片抗肺结核22个活性成分、126个作用靶点,PPI网络提示肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)、白细胞介素(Interleukin,IL)-6、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)、IL1B、血管内皮生长因子A(Vascular Endothelial Growth Factor A,VEGFA)、肿瘤蛋白p53(Tumor Protein p53,TP53)、丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)3、白细胞介素-8(C-X-C Motif Chemokine Ligand 8,CXCL8)、前列素内环氧化物合成酶2(Prostaglandin-endoperoxide Synthase 2,PTGS2)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)可能是复方柳菊片抗肺结核的核心靶点。GO功能富集分析显示,差异表达基因富集在细胞间质、细胞表面、细胞质膜、胞质等,通过调控酶结合、细胞因子活性等,在基因表达正向调控、细胞对脂多糖的反应、药物反应、炎症反应等方面发挥作用。KEGG通路富集分析结果显示,复方柳菊片靶点主要富集在疾病信号通路(hsa05161:乙型肝炎、hsa05160:丙型肝炎、hsa05152:肺结核)、信号转导信号通路(hsa01521:EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性、hsa04151:PI3K-Akt信号通路、hsa04066:HIF-1信号通路)、免疫信号通路(hsa04668:TNF信号通路、hsa04625:C型凝集素受体信号通路、hsa04659:Th17细胞分化、hsa04620:Toll样受体信号通路)。分子对接结果显示,活性成分与作用靶点均有良好的结合活性,其中luteolin、quercetin、kaempferol与AKT1具有强烈的结合活性。结论:复方柳菊片抗肺结核具有多靶点、多成分的特点。GO功能富集分析及KEGG富集分析显示,复方柳菊片有效成分可能通过多条信号通路,通过调控酶结合、细胞因子活性等发挥抗肺结核作用,同时也提示复方柳菊片在抗结核的同时具有保肝护肝的作用。通过网络药理学筛选,解释了复方柳菊片抗肺结核的作用机制,为后续深入开展其抗菌作用研究奠定了基础。

关键词：复方柳菊片活性成分网络药理学抗肺结核作用靶点

微透析结合HPLC-ECD测定头孢他啶在大鼠血中含量及其药动学研究

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中国药学杂志 2005年第12期40卷 931-933页

作者：左代英吴英良曹悦沈阳药科大学GLP实验室辽宁沈阳110016 辽宁省药品生物制品检定所辽宁沈阳110023

目的研究头孢他啶在大鼠血中的药动学。方法采用血液微透析技术结合高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD),以甲醇-0.25mol·L-1Na2HPO4(10:90)(pH7.0)为流动相,检测电压为800mV,在线分析静脉注射头孢他啶(90mg·kg-1)后大鼠的血药浓度,... 详细信息

目的研究头孢他啶在大鼠血中的药动学。方法采用血液微透析技术结合高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD),以甲醇-0.25mol·L-1Na2HPO4(10:90)(pH7.0)为流动相,检测电压为800mV,在线分析静脉注射头孢他啶(90mg·kg-1)后大鼠的血药浓度,经过体内回收率校正后,用3P87程序拟合药动学参数。结果头孢他啶在0.1-100.0μg·mL-1内线性关系良好(r=0.9998),所测血药浓度经3P87程序拟合后药-时曲线符合一室模型,t1/2为27.82min,cmax为189.40μg·mL-1,AUC为7603.00μg·min·mL-1。结论本方法操作简便,结果准确,能满足头孢他啶药动学分析的需要,为药动学研究提供了新的方法学上的参考。

关键词：头孢他啶微透析高效液相色谱-电化学检测法药动学

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孤独症谱系障碍儿童感知觉异常研究进展

中国神经精神疾病杂志 2024年第3期50卷 168-172页

作者：唐昊宇代英重庆医科大学附属儿童医院儿童保健科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童神经发育与认知障碍重庆市重点实验室重庆400010

感知觉异常是孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)患儿症状之一,对患儿的社交、学习和整体功能产生深远的影响。ASD感知觉异常的临床特征包括感觉高敏感性和感觉低敏感性,涉及的感知觉有听知觉、视知觉、嗅知觉、味知觉、触... 详细信息

感知觉异常是孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)患儿症状之一,对患儿的社交、学习和整体功能产生深远的影响。ASD感知觉异常的临床特征包括感觉高敏感性和感觉低敏感性,涉及的感知觉有听知觉、视知觉、嗅知觉、味知觉、触知觉、前庭功能。ASD感知觉的发生机制可能与执行功能缺陷、基因组学异常、兴奋抑制平衡失调及唤醒学说有关。本文为临床早期识别ASD患儿感知觉异常提供依据,以促进ASD患儿感知觉功能改善和生活质量提升。

关键词：孤独症谱系障碍感知觉异常重复刻板行为感觉高敏感性感觉低敏感性执行功能兴奋/抑制平衡

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新型冠状病毒疫苗研发进展

沈阳药科大学学报 2021年第7期38卷 762-769页

作者：杨玉莹左代英沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016

目的综述新型冠状病毒(SARS-CoV-2)疫苗的研究进展。方法通过查找国内外关于SARS-CoV-2疫苗研发的文献资料,从SARS-CoV-2的结构特点,针对SARS-CoV-2疫苗研发主要使用的五种技术路线(重组蛋白疫苗、病毒载体疫苗、核酸疫苗、灭活疫苗和... 详细信息

目的综述新型冠状病毒(SARS-CoV-2)疫苗的研究进展。方法通过查找国内外关于SARS-CoV-2疫苗研发的文献资料,从SARS-CoV-2的结构特点,针对SARS-CoV-2疫苗研发主要使用的五种技术路线(重组蛋白疫苗、病毒载体疫苗、核酸疫苗、灭活疫苗和减毒活疫苗)及其具有代表性的疫苗进行介绍。结果截止至2021年1月29日,全球共有200多种疫苗处于不同的研发阶段,其中有174种疫苗处于临床前研究阶段,有63种疫苗进入了临床试验阶段。结论尚无疫苗可以彻底防治SARS-CoV-2导致的2019新型冠状病毒肺炎(COVID-19),仍需加快研发速度,提高疫苗的有效性、安全性及免疫原性。

关键词：新型冠状病毒 2019新型冠状病毒肺炎疫苗研发进展

第三代ALK抑制剂Lorlatinib治疗非小细胞肺癌的最新研究进展

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沈阳药科大学学报 2020年第1期37卷 77-83页

作者：张晓宁刘洋左代英沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016

目的综述第三代间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)抑制剂Lorlatinib治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的最新研究进展。方法通过查阅文献资料,分别从ALK抑制剂研究概况、Lorlatinib的临床前药效学、... 详细信息

目的综述第三代间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)抑制剂Lorlatinib治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的最新研究进展。方法通过查阅文献资料,分别从ALK抑制剂研究概况、Lorlatinib的临床前药效学、临床疗效、作用机制、药物代谢动力学、安全性以及联合用药等方面进行介绍。结果针对第一、二代ALK抑制剂的耐药问题,Lorlatinib已被研发成功并批准上市;Lorlatinib具有更强的ALK和ROS1激酶选择性和抑制效力;Lorlatinib也具有良好的全身和颅内客观缓解率(objective response rate,ORR);作为ALK激酶的高效抑制剂,Lorlatinib能克服几乎所有的ALK耐药突变;Lorlatinib与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂如Gedatolisib、Pictilisib和Taselisib合用能改善治疗效果。结论第三代ALK抑制剂Lorlatinib改善了ALK阳性NSCLC患者靶向治疗现状,为ALK晚期NSCLC患者的治疗带来了曙光。

关键词： Lorlatinib 间变性淋巴瘤激酶间变性淋巴瘤激酶抑制剂非小细胞肺癌

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红人归胶囊治疗更年期综合征作用机制初探

沈阳药科大学学报 2008年第9期25卷 739-743页

作者：王芳张亚宏左代英吴英良沈阳药科大学图书馆辽宁沈阳110016 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016

目的进行红人归胶囊(HRG)治疗更年期综合征机制的研究。方法采用去势雌性(ovariec-tomized,OVX)大鼠作为更年期动物模型,放射性免疫法测定OVX大鼠血清雌二醇含量,高效液相色谱-电化学检测法测定下丘脑单胺神经递质及其代谢产物的含量,... 详细信息

目的进行红人归胶囊(HRG)治疗更年期综合征机制的研究。方法采用去势雌性(ovariec-tomized,OVX)大鼠作为更年期动物模型,放射性免疫法测定OVX大鼠血清雌二醇含量,高效液相色谱-电化学检测法测定下丘脑单胺神经递质及其代谢产物的含量,并测定其免疫器官的脏器系数。结果HRG可使OVX大鼠血清雌二醇含量升高,使下丘脑升高的5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物5-羟色胺酸(5-HIAA)含量明显下降,显著提高去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)含量,使升高的5-HT含量与NE含量的比值降低至接近正常;HRG能提高OVX大鼠胸腺系数和脾系数。结论HRG通过调节植物神经功能、生殖内分泌系统和免疫功能,多层次、多途径、多环节地作用于更年期衰退的神经内分泌免疫网络,从而起到稳定机体内环境,缓解更年期症状的作用。

关键词：更年期综合征红人归胶囊去势大鼠神经内分泌免疫调节

新生SD大鼠大脑皮层神经元与星形胶质细胞的混合培养

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药学学报 2013年第11期48卷 1729-1732页

作者：王承娜林丽段振芳钟飞左代英吴英良沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016

胶质细胞参与神经元发育的整个过程，对神经元有营养和保护作用[1]，神经元一胶质细胞之间的相互作用对中枢神经系统的功能起着重要作用[2]。然而，神经元一胶质细胞在体内相互作用的研究仍然具有一定的难度[3]，而体外实验大部分采取... 详细信息

胶质细胞参与神经元发育的整个过程，对神经元有营养和保护作用[1]，神经元一胶质细胞之间的相互作用对中枢神经系统的功能起着重要作用[2]。然而，神经元一胶质细胞在体内相互作用的研究仍然具有一定的难度[3]，而体外实验大部分采取神经元单独培养的方法[4]，对神经元一胶质细胞之间的相互作用研究较少。

关键词：神经元星形胶质细胞混合培养新生大鼠