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新辅助放化疗对直肠癌肿瘤组织中PD-1/PD-L1表达的影响

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新辅助放化疗对直肠癌肿瘤组织中PD-1/PD-L1表达的影响

作者：崔超越西安医学院

学位级别：硕士

目的:本研究通过使用免疫组化方法检测直肠癌患者术前活检标本、新辅助放化疗后直肠癌标本以及上、下切端直肠标本中PD-1、PD-L1的表达及CD8的表达。研究新辅助放化疗前后直肠癌组织中PD-1、PD-L1的表达以及CD8+T细胞的改变,探索新辅助... 详细信息

目的:本研究通过使用免疫组化方法检测直肠癌患者术前活检标本、新辅助放化疗后直肠癌标本以及上、下切端直肠标本中PD-1、PD-L1的表达及CD8的表达。研究新辅助放化疗前后直肠癌组织中PD-1、PD-L1的表达以及CD8+T细胞的改变,探索新辅助放化疗对免疫治疗可能存在的影响。方法:本研究共纳入21例就诊于陕西省人民医院的直肠癌患者,取其术前活检肿瘤组织(未接受新辅助放化疗的肿瘤组织)、手术切除肿瘤组织(接受新辅助放化疗的肿瘤组织)、手术标本上切端组织(接受化疗的自身正常肠壁组织)及手术标本下切端组织(接受了放化疗的自身正常肠壁组织)的石蜡包埋标本,采用MaxVision方法检测各组织PD-1/PD-L1/CD8表达情况。用卡方检验、非参数检验分析实验结果。结果:1、PD-1:(1).于直肠癌术前活检组织、手术切除肿瘤组织、手术标本上切端组织及手术标本下切端组织四种类型的标本中均存在不同水平PD-1阳性表达;(2).未接受放疗的直肠肠壁组织中PD-1阳性率为33.33%,接受放疗后阳性率为14.29%,放疗可降低正常直肠肠壁组织PD-1表达(X=4.902,P=0.027);(3).对接受新辅助放化疗后的肿瘤组织与下切端组织中PD-1的表达差异进行分析,发现肿肿瘤组织中淋巴细胞PD-1(42.86%)的表达高于放疗后的直肠肠壁组织(14.29%)(X=4.444,P=0.035);(4).直肠癌患者新辅助放化疗前后肿瘤组织中PD-1的表达无明显差异(P=0.834);(5).新辅助放化疗后肿瘤组织中PD-1的表达随TNM分期的升高而升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2、PD-L1:(1).于直肠癌术前活检组织、手术切除肿瘤组织中发现存在肿瘤细胞PD-L1的阳性表达;(2).于直肠癌手术切除肿瘤组织、手术标本上切端组织及手术标本下切端组织三种类型的标本中均发现有免疫细胞PD-L1阳性表达;(3).直肠癌手术切除肿瘤组织中不同ypN分期的肿瘤细胞PD-L1阳性表达存在差异,且差异有统计学意义(P=0.039);(4).直肠癌手术标本下切端组织中不同ypN分期的免疫细胞PD-L1阳性表达存在差异,且差异有统计学意义(P=0.004);3、CD8:(1).于直肠癌术前活检组织、手术切除肿瘤组织、手术标本上切端组织及手术标本下切端组织四种类型的标本中均发现有CD8阳性表达;(2).对术前活检组织与手术切除肿瘤组织、手术切除肿瘤组织与手术标本下切端组织中CD8表达差异进行分析,发现差异有统计学意义(P=0.001,P=0.001),新辅助放化疗可明显提高癌组织中CD8阳性的表达,且接受放化疗后癌组织中CD8表达高于正常组织。放疗对正常肠壁组织中CD8的表达无明显影响。结论:1、PD-1/肿瘤细胞PD-L1的表达可能与肿瘤的分期相关,随分期升高PD-1的表达升高、肿瘤细胞PD-L1的表达降低;2、放疗对正常直肠壁中CD8+T细胞的表达无明显影响,但可降低PD-1表达,使得淋巴细胞通过PD-1-PD-L1通路发生程序性死亡的可能性降低;3、新辅助放化疗可使直肠肿瘤组织中CD8+T细胞表达增多,同时使得肿瘤组织内淋巴细胞PD-1表达也升高,致使肿瘤浸润淋巴细胞可能更易于通过PD-1-PD-L1通路发生程序性死亡。

关键词：直肠癌新辅助放化疗程序性死亡受体1 程序性死亡受体1配体 CD8+T细胞

弯曲菌的多重PCR方法建立及其在牛养殖屠宰生产链中的流行病学分析

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弯曲菌的多重PCR方法建立及其在牛养殖屠宰生产链中的流行病学分析

作者：崔超越扬州大学

学位级别：硕士

弯曲菌(Campylobacter spp)是一种重要的人兽共患病原菌,在机体感染后会引发急性胃肠炎及多种并发症。在牛羊等反当动物中,空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni,C.jejuni,C.j)和结肠弯曲菌(Campylobacter coli,Ccoli,Cc)多引腹泻等肠道疾病... 详细信息

弯曲菌(Campylobacter spp)是一种重要的人兽共患病原菌,在机体感染后会引发急性胃肠炎及多种并发症。在牛羊等反当动物中,空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni,C.jejuni,C.j)和结肠弯曲菌(Campylobacter coli,Ccoli,Cc)多引腹泻等肠道疾病,而胎儿弯曲菌(Campylobacter fetus,C.f etus,C.f)则与牛的不孕不育及流产相关,对畜牧业造成了严重的经济损失。据报道,来自牛源的弯曲菌是导致人感染弯曲菌病的重要因素,牛源弯曲菌可以引起人的多种疾病,如菌血症、败血症、急性化脓性脑炎(脑膜脑炎、脑脊髓炎)、急性化脓性关节炎,亦能引起流产和不孕等。免疫机能不全、免疫力低下的老年人或有严重疾病的患者感染后易引发弯曲菌病,其在全球范围内均有相关病理报道,如俄罗斯、美国、加拿大、英国等都存在本病不同程度的流行,我国一些地区也有零星病例报道。近年来,为了探明牛源弯曲菌对牛养殖业及人的潜在风险,国外从养殖、屠宰及生产销售的各环节对进行了流行病学研究,而国内对于牛源弯曲菌的研究是零星的点状的,多集中于单一环节的研究,对养殖到屠宰生产链中的弯曲菌流行状况尚不明晰,需要进一步研究。因此,本研究的主要目的为:建立一种牛源弯曲菌的多重PCR方法并应用该方法对牛养殖屠宰生产链中的弯曲菌流行状况进行调查,对所得分离株进行全基因组测序并进行分子溯源分析,从基因组学角度解析在牛养殖生产链中的弯曲菌流行现状和传播规律。一、牛源弯曲菌多重PCR检测方法的建立以16SrRNA、ask、mapA和cstA基因作为靶基因,基于软件设计引物后建立了牛源弯曲菌多重PCR检测方法,进行扩增检测结果显示在目的片段处出现与预期大小相符的条带,引物序列覆盖区域与NCBI的Primer-Blast库中已有菌株比对同源性为100%。应用本研究建立的多重PCR方法对牛养殖屠宰场的样品进行检测,同时使用传统平板分离法及现有报道的其他PCR方法进行同步检测,1375份样品中,本研究多重PCR检测方法检出75株弯曲菌阳性,平均阳性率为5.45%,传统平板分离法的平均阳性率为4.87%(67/1375),其他PCR方法的平均阳性率为5.31%(73/1375),三种方法的检出率在统计学上无显著性差异(p>0.05);本研究方法与现有报道PCR方法的最低检测限在DNA水平上分别为:空肠弯曲菌19.23 pg/μL、0.93 pg/μL,结肠弯曲菌16.93 pg/μL、1.05pg/μL及胎儿弯曲菌14.37pg/μL、0.23 pg/μL;与传统平板分离法相比,本研究建立的方法检测耗时更短,与其他PCR方法相比,本研究建立的方法在一个体系中同时检测牛源常见的三种弯曲菌种属,耗材成本更低,因此更适合牛源弯曲菌规模化检测的需求。二、弯曲菌在牛养殖屠宰生产链中的流行病学分析本研究于2019年6月至2020年10月,对江苏省5家奶牛养殖加工场、1家肉牛养殖屠宰场及辽宁铁岭1家奶牛养殖场的牛肛门擦拭样、环境样品以及屠宰生产环节样品进行采集,共计采样6681份,包括养殖环节牛肛门擦拭样4125份,环境样1500份;屠宰环节牛宰前肛拭样20份,屠宰流程肉脏擦拭样150份,环境样410份;奶牛挤奶生产环节乳房擦拭样100份,环境样376份。结果显示,养殖屠宰生产环节共检出弯曲菌阳性样品366份,阳性率为5.48%,共分离空肠弯曲菌338株,结肠弯曲菌28株,未分离到胎儿弯曲菌。养殖、屠宰及生产环节中,弯曲菌在养殖环节的分离率(6.32%)显著高于屠宰(4.17%)及生产(3.20%)环节(p<0.05)。各环节中,空肠弯曲菌均为优势种属,分别占比91.41%(298/326)、100%(16/16)和 100%(24/24)。养殖环节中,小型规模养殖场的弯曲菌阳性率(9.47%)显著高于中型及大型规模养殖场(4.93%、4.42%);不同养殖模式中,成年牛与犊牛混合饲养模式的阳性率(9.47%)显著高于成年牛与犊牛分栏饲养模式(4.93%);在不同清洁方式的养殖场中,使用机械化清洁(清粪车、刮粪器)的养殖场弯曲菌阳性率(0.88%,0.20%)显著低于人工清理(6.20%)的养殖场;在不同年龄牛中,犊牛样品的弯曲菌阳性率(10.14%)显著高于成年牛样品(4.07%);肉牛分离株的阳性率(8.49%)显著高于奶牛(5.31%)。屠宰环节中,获得16份弯曲菌阳性样品,统计分析确定出其阳性率为2.76%(16/580),16株均为空肠弯曲菌,未检出结肠弯曲菌和胎儿弯曲菌阳性。肉样中分离出空肠弯曲菌3株,阳性率为0.52%;大肠、毛肚等脏器中分离到空肠弯曲菌7株,阳性率为1.21%;工作人员双手在屠宰结束后分离到空肠弯曲菌1株,阳性率为0.17%,宰牛用的刀具在屠宰结束后分离到空肠弯曲菌1株,阳性率为0.17%。挤奶生产环节中,获得阳性

关键词：弯曲菌牛的养殖和屠宰检测方法流行病学

腹茧症致机械性肠梗阻并穿孔1例报道并文献复习

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中国临床研究 2019年第3期32卷 410-413页

作者：崔超越王帅赵旭邱健西安医学院陕西西安710068 陕西省人民医院普外一科陕西西安710068

目的阐述腹茧症病理机制、诊断要点及治疗方法。方法回顾性分析收治的1例腹茧症,并进行国内外文献复习。结果本例患者术前肠梗阻原因不明,术中证实,术后病理确诊,随访一年无复发及不适。结论肠梗阻为腹茧症常见临床表现,应充分结合腹部C... 详细信息

目的阐述腹茧症病理机制、诊断要点及治疗方法。方法回顾性分析收治的1例腹茧症,并进行国内外文献复习。结果本例患者术前肠梗阻原因不明,术中证实,术后病理确诊,随访一年无复发及不适。结论肠梗阻为腹茧症常见临床表现,应充分结合腹部CT及MRI的影像学表现进行术前诊断,手术是有效的治疗方式。

关键词：腹茧症肠梗阻诊断要点治疗措施

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新疆石油污染土壤植物修复特性研究

干旱区研究 2013年第1期30卷 162-165页

作者：董亚明赵朝成蔡芸赵东风崔超越中国石油大学化学工程学院山东青岛266555 新疆维吾尔自治区环境保护厅新疆乌鲁木齐830063 东营市胜利第一中学山东东营257000

通过对芦苇(Phragmites australis)、柽柳(Tamarix chinensis)、沙枣(Elaeagnus angustifolia)修复新疆石油污染土壤效果的研究,结果表明:经过80 d的修复,石油烃去除率可达到26.50%～31.27%,明显高于空白的15.57%～20.34%,其中,饱和烃去除效果最好,可达39.34%～46.18%。植物根际微生物分析表明,植物能够明显提高根际微生物数量,且3种植物的根土比(R/S)达到23～169。植物修复区明显改善土壤酶活性,且芦苇>沙枣>柽柳,过氧化氢酶活性、多酚氧化酶活性和脱氢酶活性分别是空白试验的1.12～1.34倍、1.63～1.91倍和1.56～1.73倍。研究结果将为新疆地区石油污染土壤修复技术开发提供理论和技术支持。

关键词：石油土壤污染植物修复酶活性新疆

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无针免疫猪圆环病毒2型亚单位疫苗效果评价

中国动物检疫 2023年第3期40卷 131-135页

作者：张光际蔡伟胡佳伟崔超越吴莲玉魏旭峰泰州职业技术学院医学院江苏泰州225300 江苏美凤力医疗科技有限公司江苏泰州225300 江苏铂可医疗科技有限公司江苏泰州225300 无锡明慈心血管病医院江苏无锡214000

为评价用无针注射器接种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的安全性及免疫效果,为无针免疫的使用、推广提供数据支撑,将40头3~5周龄三元猪随机均分为4组,即有针注射1头份剂量组以及无针注射低(1/4头份)、中(1/2头份)、高(1头份)剂量组,分别于第1... 详细信息

为评价用无针注射器接种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的安全性及免疫效果,为无针免疫的使用、推广提供数据支撑,将40头3~5周龄三元猪随机均分为4组,即有针注射1头份剂量组以及无针注射低(1/4头份)、中(1/2头份)、高(1头份)剂量组,分别于第1、21天开展两次免疫,观察试验前后动物的临床症状、体重变化,并对第7、14、21、28、42天各组动物体内抗体水平变化及免疫效率等进行研究。结果显示:采用无针注射器进行免疫时动物疼痛反应较小,注射速度快,免疫后各组动物精神状态、饮食、饮水、自发活动等无异常;与有针注射组动物相比,减量注射(1/4头份)可以显著促进仔猪增重(P0.05);同等剂量亚单位疫苗注射免疫后,无针免疫组动物体内抗体水平更高(P<0.01),且各组动物体内抗体阳性率均可有效维持至试验结束。结果表明,用无针注射器接种猪圆环病毒2型亚单位疫苗安全性高、耐受性好、有效性稳定,无针注射器减量免疫可以达到有效保护作用的同时促进了仔猪生长,可尝试推广应用。

关键词：猪圆环病毒2型无针注射亚单位疫苗免疫效果评价

牛源弯曲菌多重PCR检测方法建立及与其他方法比较

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2021年第5期42卷 1-6页

作者：崔超越李凤鸣赖宏刚焦新安黄金林扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏高校动物重要疾病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室江苏扬州225009

以16S rRNA、ask、mapA和cstA基因为靶基因,基于软件设计引物,建立牛源弯曲菌多重PCR检测方法。通过反应条件的优化以及引物特异性、灵敏度的验证,并与其他方法进行临床样品的检测效率比较,建立同时检测3种牛源致病弯曲菌的多重PCR方法... 详细信息

以16S rRNA、ask、mapA和cstA基因为靶基因,基于软件设计引物,建立牛源弯曲菌多重PCR检测方法。通过反应条件的优化以及引物特异性、灵敏度的验证,并与其他方法进行临床样品的检测效率比较,建立同时检测3种牛源致病弯曲菌的多重PCR方法。结果表明:扩增的目的条带处出现与预期大小相符的单一明亮条带,引物序列与NCBI的Primer-Blast库已有的菌株同源性均大于99%。应用建立的多重PCR方法对牛养殖场、屠宰场的样品进行检测,同时使用传统平板分离法及现有报道的其他PCR方法进行对比验证,在1375份样品中,多重PCR检测方法、传统平板分离法及其他PCR方法的检出率分别为5.45%(75/1375)、4.87%(67/1375)和5.31%(73/1375),但3种方法的检出率无显著差异。多重PCR方法与现有报道的PCR方法在DNA水平上的最低检测限:空肠弯曲菌分别为19.23、0.93 pg·μL^(-1),结肠弯曲菌分别为16.93、1.05 pg·μL^(-1),胎儿弯曲菌分别为14.37、0.23 pg·μL^(-1)。多重PCR方法检测流程需1~2 d,且可同时检测3种弯曲菌。而现有报道的PCR方法检测流程需1~2 d,还需制备不同体系分别验证,材料成本更高,传统平板分离法鉴定耗时更久,需5~7 d。这一研究建立的多重PCR检测方法优势表现为操作方便、灵敏度和特异性较高,能同时检测牛源弯曲菌常见种属,可满足牛源弯曲菌规模化检测的需求。

关键词：牛源弯曲菌多重PCR 检测方法比较

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直肠癌根治术肠系膜下动脉的处理方式及争议

现代肿瘤医学 2019年第7期27卷 1255-1258页

作者：王帅崔超越黄开敏邱健西安医学院陕西西安710068

在直肠癌手术中结扎肠系膜下动脉(inferior mesenteric artery,IMA)是关键步骤之一,无论是高位结扎还是低位结扎各有优势与不足,目前制定合理的手术方式仍需要循证医学证据支持。就现阶段而言,依据个体及术中情况决定IMA结扎方式更为可... 详细信息

在直肠癌手术中结扎肠系膜下动脉(inferior mesenteric artery,IMA)是关键步骤之一,无论是高位结扎还是低位结扎各有优势与不足,目前制定合理的手术方式仍需要循证医学证据支持。就现阶段而言,依据个体及术中情况决定IMA结扎方式更为可靠。本文根据国内外相关文献对直肠癌根治术中IMA的不同处理方式及争议作一综述。

关键词：直肠癌肠系膜下动脉结扎

原发性腹膜后黏液性囊腺瘤1例报道及文献复习

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中国临床研究 2019年第6期32卷 835-837页

作者：崔超越段万里翟宇瑶任伟杜双宽程永毅西安医学院陕西西安710068 陕西省人民医院西安交通大学第三附属医院泌尿外科陕西西安710068 西安市第四医院西安交通大学附属广仁医院药剂科陕西西安710004

目的探讨原发性腹膜后黏液性肿瘤(PRMT)的临床特点,以期提高对该病的认识。方法回顾性分析陕西省人民医院2018年5月收治的1例原发性腹膜后黏液囊腺瘤(PRMC)患者的临床资料,并结合文献复习对其病理学、临床表现、诊断、治疗进行分析。结... 详细信息

目的探讨原发性腹膜后黏液性肿瘤(PRMT)的临床特点,以期提高对该病的认识。方法回顾性分析陕西省人民医院2018年5月收治的1例原发性腹膜后黏液囊腺瘤(PRMC)患者的临床资料,并结合文献复习对其病理学、临床表现、诊断、治疗进行分析。结果患者系2年前孕检时发现腹膜后囊肿及右腰背不适3d入院,除影像学提示“右侧腹膜后囊肿”外,血液常规及肿瘤标志物均无异常。行腹腔镜下右侧腹膜后囊肿切除术,术后病理确诊良性黏液性囊腺瘤。结论PRMT是罕见肿瘤,PRMC是其三种病理类型之一,无特异性血清学及影像学表现,术前诊断极为困难,主要依靠病理学确诊。主要的治疗方式为完整切除肿瘤,并防止复发。

关键词：腹膜后肿瘤黏液性囊腺瘤体腔上皮化生手术治疗无瘤原则复发