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重组B7-2腺病毒的构建及鉴定

生物技术 1998年第3期8卷 9-12页

作者：黄洪莲欧阳平王小宁钱其军车小燕崔贞福郭亚军吴孟超第一军医大学分子免疫研究所广州510515 第二军医大学肿瘤免疫和基因治疗中心上海200433

经聚合酶链式反应扩增出鼠源性B7－2基因，克隆在pAdCMV中，将此重组载体与质粒JM17共转染293细胞，进行同源重组，并经聚合酶链式反应筛途、鉴定重组腺病毒，结果成功地构建了两株重组B7—2腺病毒，在293细胞中大量扩增此重组病毒，并... 详细信息

经聚合酶链式反应扩增出鼠源性B7－2基因，克隆在pAdCMV中，将此重组载体与质粒JM17共转染293细胞，进行同源重组，并经聚合酶链式反应筛途、鉴定重组腺病毒，结果成功地构建了两株重组B7—2腺病毒，在293细胞中大量扩增此重组病毒，并对腺病毒上清进行空斑纯化和CsCL递度离心。空斑评价法测定纯化后两株重组mB7—2腺病毒的病毒滴度分别为4．2×109PFU／ml和3．

关键词： B7-2 基因重组腺病毒纯化鉴定

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肝癌切除加免疫化疗对术后复发的影响

中华外科杂志 1995年第1期33卷 35-37页

作者：周伟平吴孟超陈汉姚小平钱光相杨甲梅屠振兴崔贞福第二军医大学长海医院东方肝胆外科研究所

作者将１２１例原发性肝癌患者分成４组：（１）单纯手术切除组（ＯＰ组），３０例；（２）手术切除加化疗组（ＯＣ组），２７例；（３）手术切除加免疫治疗组（ＯＩ组），３１例；（４）手术切除加免疫化疗组（ＯＩＣ组），３３例。结... 详细信息

作者将１２１例原发性肝癌患者分成４组：（１）单纯手术切除组（ＯＰ组），３０例；（２）手术切除加化疗组（ＯＣ组），２７例；（３）手术切除加免疫治疗组（ＯＩ组），３１例；（４）手术切除加免疫化疗组（ＯＩＣ组），３３例。结果显示４组术后１年复发率分别为５６．７％、４０．７％、３２．３％及２７．３％，ＯＩ组及ＯＩＣ组术后复发率明显低于ＯＰ组及ＯＣ组，结果提示手术加免疫治疗有助于降低原发性肝癌的术后复发率。

关键词：肝肿瘤肝切除复发免疫化学药物疗法

腺病毒B7-1治疗小鼠肝癌及其免疫机理的初步研究

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细胞与分子免疫学杂志 1998年第3期14卷 161-164页

作者：黄洪莲王小宁车小燕钱其军崔贞福郭亚军吴孟超第一军医大学分子免疫学研究所第二军医大学肿瘤免疫和基因治疗中心

为了探讨肿瘤原位转染共刺激分子Ｂ７－１对小鼠肝癌的治疗作用及其机理，本文在建立了小鼠肝癌模型的基础上，采用表达小鼠Ｂ７－１的重组腺病毒直接瘤体内注射，结果可显著抑制小鼠肝癌的生长，明显延长荷瘤小鼠的存活期。肝癌组织Ｈ... 详细信息

为了探讨肿瘤原位转染共刺激分子Ｂ７－１对小鼠肝癌的治疗作用及其机理，本文在建立了小鼠肝癌模型的基础上，采用表达小鼠Ｂ７－１的重组腺病毒直接瘤体内注射，结果可显著抑制小鼠肝癌的生长，明显延长荷瘤小鼠的存活期。肝癌组织ＨＥ染色及免疫组织化学分析发现，经重组腺病毒ｍＢ７－１治疗的肿瘤内大片组织坏死出血，坏死组织与未坏死组织交界处有大量淋巴细胞浸润，浸润淋巴细胞表现为ＣＤ３＋，ＣＤ８＋，ＦａｓＬ＋和ｐｅｒｆｏｒｉｎ＋。ＲＴ－ＰＣＲ显示，ＦａｓＬ和穿孔素ｍＲＮＡ表达呈阳性。

关键词：肝肿瘤免疫机理腺病毒 B7-1 治疗

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圆孔工字型蜂窝梁扭转模态自由振动研究

振动与冲击 2024年第6期43卷 329-335,344页

作者：黄斌张文福南京工程学院建筑工程学院南京211167

从能量等效角度,提出了一种圆孔工字型截面蜂窝梁连续型模型,应用新的薄壁构件扭转理论:板-梁理论,建立了构件扭转模态自由振动能量泛函模型,明确了圆孔工字型截面蜂窝梁名义约束扭转惯性矩(翘曲常数)、自由扭转常数、转动惯量。通过变... 详细信息

从能量等效角度,提出了一种圆孔工字型截面蜂窝梁连续型模型,应用新的薄壁构件扭转理论:板-梁理论,建立了构件扭转模态自由振动能量泛函模型,明确了圆孔工字型截面蜂窝梁名义约束扭转惯性矩(翘曲常数)、自由扭转常数、转动惯量。通过变分运算,获得了平衡微分方程模型。基于扭转模态试函数,推导了圆孔工字型截面蜂窝梁自由振动扭转模态振动圆频率,并与有限元结果对比校验理论模型预测精度。开展了悬臂圆孔工字型蜂窝梁受集中扭矩作用的端部截面转角理论分析与有限元计算,进一步检验了基于板-梁理论建立的蜂窝梁连续模型的适用性。应用板-梁理论对圆孔工字型截面蜂窝梁自由振动扭转的分析过程及推导步骤,为其他开孔类型工字型蜂窝梁扭转模态自由振动研究提供了直接参考。

关键词：圆孔工字型截面蜂窝梁扭转自由振动板-梁理论蜂窝梁连续型模型能量泛函模型

肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞的凋亡

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第二军医大学学报 2001年第11期22卷 1021-1023页

作者：梁云陆斌李晓冬王华菁崔贞福李博华胡慧红杨扬郭亚军刘彦君第二军医大学科研部国际肿瘤研究所上海200433

目的 :研究肝癌细胞表面 Fas/ Fas L系统的变化及对其逃避机体免疫监控的影响。方法 :采用流式细胞术和RT- PCR检测肝癌细胞株 Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas和 Fas L的表达 ;观察化疗药物争光霉素诱导肝癌细胞 Fas L表达及 Fas L... 详细信息

目的 :研究肝癌细胞表面 Fas/ Fas L系统的变化及对其逃避机体免疫监控的影响。方法 :采用流式细胞术和RT- PCR检测肝癌细胞株 Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas和 Fas L的表达 ;观察化疗药物争光霉素诱导肝癌细胞 Fas L表达及 Fas L表达上调后的肝癌细胞触发淋巴细胞株 Jurkat细胞凋亡的作用。结果 :Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5肝癌细胞株Fas表达均阴性 ;Hep G2 Fas L m RNA的表达为阴性 ,而 Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas L m RNA的表达均阳性。经争光霉素(0 .6 mg/ m l)诱导后 ,上述肝癌细胞 Fas的表达无明显变化 ,而其 Fas L的表达却增加 ,与 Jurkat细胞混合孵育则触发后者发生显著性凋亡。结论 :肝癌细胞可能一方面降低或不表达 Fas而对 Fas介导的凋亡耐受 ,另一方面又增强自身 Fas L的表达以诱发与之接触的 T淋巴细胞凋亡 ,在完成免疫逃避的同时 ,可对周围的

关键词：肝肿瘤 T淋巴细胞细胞凋亡 Fas/FasL系统免疫监控

盾构滚刀切削桩基相互作用机理及关键参数分析研究——以海珠湾盾构隧道为例

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现代隧道技术 2024年第1期61卷 216-228页

作者：王德福中铁十四局集团大盾构工程有限公司南京211800

在城市中心区域修建盾构隧道过程中遭遇既有建(构)筑物桩基础时,盾构直接切削桩基是首选施工方案。依托海珠湾超大直径盾构隧道工程,采用数值模拟方法,建立滚刀-桩基-地层动态切削仿真模型,深入研究了盾构滚刀切削桩基的作用机理,对切... 详细信息

在城市中心区域修建盾构隧道过程中遭遇既有建(构)筑物桩基础时,盾构直接切削桩基是首选施工方案。依托海珠湾超大直径盾构隧道工程,采用数值模拟方法,建立滚刀-桩基-地层动态切削仿真模型,深入研究了盾构滚刀切削桩基的作用机理,对切削桩基过程中滚刀间距、刀圈贯入度、刀盘转速以及桩基相对刀盘的位置等关键参数进行敏感性分析,得到了滚刀切桩关键参数的最优取值。结果表明:当滚刀间距较大或刀圈贯入度过小时,滚刀切削桩基效果较好且利用率较高;当贯入度增大时,滚刀与地层-桩基模型相互作用的影响范围增大,有利于桩基材料的破坏剥落;贯入度与刀盘转速设置不当都会造成滚刀破桩荷载的增大;对于海珠湾超大直径盾构隧道工程,最优刀间距应取80 mm,最优贯入度应取45 mm,最优刀盘转速应取2 r/min。

关键词：盾构隧道滚刀切桩数值模拟相互作用机理参数分析

基于结构应力法的盾构刀盘安装焊缝抗疲劳设计

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隧道建设（中英文） 2024年第6期44卷 1313-1319页

作者：王德福中铁十四局集团大盾构工程有限公司江苏南京211899

为提升超大直径盾构刀盘安装焊缝在盾构施工过程中的抗疲劳性能,首先建立包括超厚钢板对接接头焊缝细节的有限元模型,以等效结构应力为核心参量将焊缝应力集中考虑在焊趾应力之中,然后对不同坡口角度和余高的接头疲劳寿命进行计算,得出... 详细信息

为提升超大直径盾构刀盘安装焊缝在盾构施工过程中的抗疲劳性能,首先建立包括超厚钢板对接接头焊缝细节的有限元模型,以等效结构应力为核心参量将焊缝应力集中考虑在焊趾应力之中,然后对不同坡口角度和余高的接头疲劳寿命进行计算,得出坡口角度和余高对超厚钢板焊缝接头疲劳寿命的影响规律,最后以优选的焊缝接头尺寸参数采用子模型技术建立包括各焊缝接头局部精细网格的子模型,利用等效结构应力法对刀盘整体安装焊缝疲劳寿命进行综合评估。研究发现:1)随着焊缝坡口角度的增大,其抗疲劳能力呈现先增大后减少的趋势,55°左右的坡口角度是设计对称X型接头的最优坡口角度;2)当接头采用不对称X型坡口时,焊缝小端处焊趾的疲劳寿命低于同等坡口角度大端处焊趾的疲劳寿命,坡口大端和小端的坡口角度分别选取为40°和55°时,能综合提高非对称X型坡口接头的抗疲劳性能;3)焊缝余高对接头疲劳性能的影响不如坡口角度显著,对称X型坡口焊缝及非对称X型坡口大端焊缝余高e=2~3 mm,非对称X型坡口小端焊缝余高e=1 mm,可以满足盾构刀盘的抗疲劳设计要求。

关键词：大直径盾构刀盘焊缝抗疲劳设计等效结构应力主S-N曲线

人肝癌细胞肿瘤抑制基因转染对阿霉素敏感性的影响

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第一军医大学学报 1998年第3期18卷 168-171页

作者：黄洪莲欧阳平王小宁钱其军车小燕崔贞福郭亚军吴孟超第一军医大学分子免疫研究所第二军医大学东方肝胆外科研究所

目的为了解肿瘤抑制基因ｐ５３和Ｒｂ基因与肝癌对药物敏感性之间的关系，本实验用逆转录病毒介导将野生型ｐ５３或Ｒｂ基因导入人肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１并观察其药物敏感性的改变。方法将野生型ｐ５３ｃＤＮＡ或ＲｂｃＤＮＡ克隆... 详细信息

目的为了解肿瘤抑制基因ｐ５３和Ｒｂ基因与肝癌对药物敏感性之间的关系，本实验用逆转录病毒介导将野生型ｐ５３或Ｒｂ基因导入人肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１并观察其药物敏感性的改变。方法将野生型ｐ５３ｃＤＮＡ或ＲｂｃＤＮＡ克隆在逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ，转染人肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１，筛选阳性克隆，同时以空载体ｐＬＸＳＮ和反义ｐ５３基因作为对照，免疫组化检测ｐ５３或Ｒｂ基因的表达。加入化疗药物４８ｈ后掺入３Ｈ－ＴｄＲ，１８ｈ后检测ＣＰＭ值。结果成功地构建了分别含野生型ｐ５３、Ｒｂ或反义ｐ５３的逆转录病毒载体，转染ＳＭＭＣ７７２１细胞系后获得了ｐ５３或Ｒｂ的表达；与亲代７７２１细胞相比，ｐ５３或Ｒｂ的表达阳性的７７２１细胞的生长速度均明显减慢，ｐ５３表达阳性的７７２１细胞对阿霉素的敏感性明显增强，同样条件下，Ｒｂ在７７２１细胞系内的表达则对阿霉素敏感性无影响。

关键词：阿霉素药物敏感性肝肿瘤 P53基因 Rb基因

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应用豌豆凝集素检测AFP异质体的初步研究

中华检验医学杂志 1989年第4期12卷 214-214页

作者：殷正丰崔贞福吴孟超中国人民解放军第二军医大学附属长海医院

应用不同的植物凝集素分析不同病理状态时AFP糖链的差异,以助于有关疾病的诊断,已受到较多关注。本文报告应用自制的豌豆凝集素(PSA)建立亲和交叉免疫电泳自显影法,初步检测61例良恶性肝病患者血清甲胎蛋白(AFP)异质体含量,并与扁豆凝集... 详细信息

应用不同的植物凝集素分析不同病理状态时AFP糖链的差异,以助于有关疾病的诊断,已受到较多关注。本文报告应用自制的豌豆凝集素(PSA)建立亲和交叉免疫电泳自显影法,初步检测61例良恶性肝病患者血清甲胎蛋白(AFP)异质体含量,并与扁豆凝集素(LCA)作了对照研究。方法:S6℃下取5 ml含。.75 mgPSA或LCA的l%琼脂糖液,在70、100 mm玻璃板一侧浇注20火100血m提胶条,距阴极端15 mm处打孔’加入5~50川AFP阳性血清(加样量取

关键词：甲胎蛋白类/分析外源凝集素类/诊断应用