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甲胎蛋白糖链异质体检测方法的探讨

临床检验杂志 1992年第1期10卷 22-23页

作者：崔贞福屠振兴殷正丰吴孟超第二军医大学长海医院肝胆外科研究所上海200433

甲胎蛋白(AFP)是一种单肽链糖蛋白,其糖链主要由甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡萄糖和唾液酸以寡聚糖形式组成。近来人们利用不同组织来源的AFP糖链结构的差异,应用植物凝集素分离AFP 异质体,对肝癌进行鉴别诊断和早期诊断。我所曾建立简便,... 详细信息

甲胎蛋白(AFP)是一种单肽链糖蛋白,其糖链主要由甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡萄糖和唾液酸以寡聚糖形式组成。近来人们利用不同组织来源的AFP糖链结构的差异,应用植物凝集素分离AFP 异质体,对肝癌进行鉴别诊断和早期诊断。我所曾建立简便,高度敏感的亲和交叉免疫电泳放射自显影法检测AFP 糖链异质体。经过多年的实践取得一定经验,现总结如下。

关键词：甲胎蛋白糖链异质体肝肿瘤诊断

血清β-N-乙酰氨基半乳糖苷酶的微量测定及其正常值

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上海医学 1991年第9期14卷 525-527页

作者：张世民吴孟超陈汉崔贞福第二军医大学肝胆外科研究所

以4-硝基苯基-N-乙酰氨基-β-半乳糖苷为底物,建立了分光光度测定β-N-乙酰氨基半乳糖苷酶(β-GalNAcase)的微量方法。用该法测定血清β-GalNAcase 活性的批内和批间变异系数分别为2.37%和2.71%。43例健康供血员血清β-GalNAcase 活性为... 详细信息

以4-硝基苯基-N-乙酰氨基-β-半乳糖苷为底物,建立了分光光度测定β-N-乙酰氨基半乳糖苷酶(β-GalNAcase)的微量方法。用该法测定血清β-GalNAcase 活性的批内和批间变异系数分别为2.37%和2.71%。43例健康供血员血清β-GalNAcase 活性为178.77±47.70nmol/ml/4h,男女之间和不同血型之间该酶的活性无显著性差异。

关键词：半乳糖苷酶血清测定正常值

识别肿瘤血管内皮细胞的嵌合性T细胞受体的构建与鉴定

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 688-689页

作者：王率殷正丰崔贞福吴宗娣吴孟超第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤学研究室上海200438

近年来发展了一种新的肿瘤免疫治疗策略，即将能够持异性识别并结合肿瘤细胞表面抗原、或受体的抗体或配体，与T细胞受体胞内成分融合成嵌合性T细胞受（chimeric T cell recepter, cTCR），赋予T细胞持久的、预先决定的新配体识别特异... 详细信息

近年来发展了一种新的肿瘤免疫治疗策略，即将能够持异性识别并结合肿瘤细胞表面抗原、或受体的抗体或配体，与T细胞受体胞内成分融合成嵌合性T细胞受（chimeric T cell recepter, cTCR），赋予T细胞持久的、预先决定的新配体识别特异性，转染cTCR的细胞毒T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte, CTL）选择性地靶向和杀伤肿瘤细胞。鉴于血管内皮生长因子受体在恶性肿瘤组织和正常组织中表达完全不同，本研究采用重叠延伸技术构建一种能识别肿瘤血管内皮细胞的cTCR，为进一步研究其功能提供实验基础。

关键词：肿瘤血管内皮细胞嵌合性T细胞受体构建鉴定基因重组

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血清α-甘露糖苷酶活性的比色测定法

临床检验杂志 1991年第1期9卷 16-17页

作者：张世民吴孟超陈汉崔贞福第二军医大学肝胆外科研究所上海200433

复合糖在正常的生命活动中起着十分重要的作用.体内复合糖代谢维持在一个相对恒定的状态,这种恒定状态直接取决于复合糖合成酶和分解酶之间的平衡.肿瘤时。

关键词：甘露糖苷酶活性比色法血清

肝癌血清岩藻糖基化AFP含量与α-L-岩藻糖苷酶活性的相关分析

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第二军医大学学报 1993年第2期14卷 143-146页

作者：殷正丰崔贞福虞紫茜屠振兴吴孟超第二军医大学肝胆外科研究所 200433

采用改良的分光光度法及豌豆凝集素亲和免疫电泳同步测定90例肝细胞癌(HCC)血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)活性和岩藻糖基化甲胎蛋白(AFP)含量。相关分析表明,HCC血清AFU活性与岩藻糖基化AFP相对含量无关(r=0.099),与岩藻糖基化AFP绝对含量... 详细信息

采用改良的分光光度法及豌豆凝集素亲和免疫电泳同步测定90例肝细胞癌(HCC)血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)活性和岩藻糖基化甲胎蛋白(AFP)含量。相关分析表明,HCC血清AFU活性与岩藻糖基化AFP相对含量无关(r=0.099),与岩藻糖基化AFP绝对含量亦无关(r=0.23)。将90例HCC按岩藻糖基化AFP相对含量不同(以25％为界)分组,两组血清AFU活性分别为535±220 nmol·ml^(-1)·h^(-1)和550±180 nmol·ml^(-1)·h^(-1),相差不显著(P>0.05)。若以血清AFU活性高低(以550 nmol·ml^(-1)·h^(-1)为界)分组,两组血清岩藻糖基化AFP相对含量分别为40％±23％和45％±22％,差异亦不显著(P>0.05)。提示,肝脏病变时AFP糖链结构的变化不是血清AFU参与的结果,可能来自于糖链生物合成途径的改变。

关键词：肝肿瘤甲胎蛋白岩藻糖苷酶

血清α-L-岩藻糖苷酶在肝细胞癌诊断中的意义

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癌症 1992年第2期11卷 100-103页

作者：张世民吴孟超陈汉崔贞福屠振兴第二军医大学肝胆外科研究所上海200433

用微量分光光度法对正常人、肝细胞癌(HCC)、良性肝病和其它疾病患者血清α—L-岩藻糖苷酶(SAFU)的活性进行了测定。结果表明,HCC患者SAFU活性(765.10±289.00nmol/ml·h) 明显高于正常人(409.33±83.95nmol/ml·h),67.80％的HCC患者SAF... 详细信息

用微量分光光度法对正常人、肝细胞癌(HCC)、良性肝病和其它疾病患者血清α—L-岩藻糖苷酶(SAFU)的活性进行了测定。结果表明,HCC患者SAFU活性(765.10±289.00nmol/ml·h) 明显高于正常人(409.33±83.95nmol/ml·h),67.80％的HCC患者SAFU活性高于正常值上限,而且与血清甲胎蛋白(AFP)无关。虽然相当一部分肝炎和肝硬化患者SAFU也增高,但这些病人往往伴有明显的肝功能异常。提示:SAFU活性可作为HCC的又一诊断指标。

关键词：细胞癌岩藻糖苷酶血清肝肿瘤

双功能单抗介导CD3AK细胞对人原发性肝癌的杀伤作用

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免疫学杂志 2002年第B6期18卷 4-6页

作者：施乐华崔贞福陶文照吴孟超第二军医大学东方肝胆外科医院上海200438

目的　了解CD3AK细胞在双功能单抗介导下对人原发性肝癌 (PLC)的杀伤作用。方法　用二次杂交瘤方法制备得双功能单抗 (GP95×CD3) ,将该单抗激活人淋巴细胞 ,分别测定后者对PLC细胞的体内外杀伤效应。结果　GP95×CD3能显著提高T细胞与... 详细信息

目的　了解CD3AK细胞在双功能单抗介导下对人原发性肝癌 (PLC)的杀伤作用。方法　用二次杂交瘤方法制备得双功能单抗 (GP95×CD3) ,将该单抗激活人淋巴细胞 ,分别测定后者对PLC细胞的体内外杀伤效应。结果　GP95×CD3能显著提高T细胞与癌细胞的结合率 ,对靶细胞的杀伤具有较强的特异性。体外试验明显增加细胞毒效应 ,裸鼠体内试验具有显著抑制肝癌生长的作用。结论　GP95×CD3在体内外均可介导CD3AK细胞对PLC的杀伤作用。

关键词： CD3AK细胞杀伤作用双功能单抗原发性肝癌治疗

在结肠癌细胞内高效表达内皮抑素的增殖型腺病毒载体的构建与鉴定

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第二军医大学学报 2004年第3期25卷 280-283页

作者：徐建国钱其军薛惠斌崔贞福王元和第二军医大学长征医院普通外科上海200003 东方肝胆外科医院基因及病毒治疗实验室上海200438

目的 :构建携带内皮抑素基因的增殖型腺病毒载体 ,寻找结肠癌的有效治疗方法。方法 :通过 RT- PCR克隆内皮抑素基因 ,2 93细胞内分别重组携带内皮抑素基因的增殖型 (CNHK2 0 0 - h E)和增殖缺陷型 (Ad- h E)腺病毒 ,分别体外感染结肠癌... 详细信息

目的 :构建携带内皮抑素基因的增殖型腺病毒载体 ,寻找结肠癌的有效治疗方法。方法 :通过 RT- PCR克隆内皮抑素基因 ,2 93细胞内分别重组携带内皮抑素基因的增殖型 (CNHK2 0 0 - h E)和增殖缺陷型 (Ad- h E)腺病毒 ,分别体外感染结肠癌细胞 HT- 2 9后比较两者在细胞病理效应、病毒增殖和内皮抑素表达量方面的差异。结果 :CNHK2 0 0 - h E感染结肠癌细胞96 h后可增殖 2 0 0 0多倍 ;感染后 7d肿瘤细胞死亡率达 96 .2 % ,而对正常肝细胞基本无杀伤作用 ;随着感染时间的延长 ,肿瘤细胞培养上清液中内皮抑素表达量不断增加 ,第 5天达 1 0 90 ng/ ml,显著高于 Ad- h E感染组 (P<0 .0 1 )。结论 :携带内皮抑素基因的增殖型腺病毒 CNHK2 0 0 - h

关键词：结肠癌高效表达内皮抑素增殖型腺病毒构建鉴定癌细胞

携带融合基因CTLA4-Ig重组腺病毒载体的构建及表达

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中华实验外科杂志 2003年第1期20卷 46-48,I002页

作者：朱斌杨甲梅钱其军崔贞福石文芳吴孟超第二军医大学附属东方肝胆外科医院肝胆外科研究所上海200438

目的　为进行基因转移阻断T细胞共刺激通路诱导移植免疫耐受的研究 ,构建携带融合基因CTLA4 Ig的重组腺病毒载体。方法　构建含人CTLA4 Ig的重组腺病毒载体质粒pShuttle Tracker CMV CTLA4 Ig ,与腺病毒骨架质粒 pAdEasy 1 △E1、△E3... 详细信息

目的　为进行基因转移阻断T细胞共刺激通路诱导移植免疫耐受的研究 ,构建携带融合基因CTLA4 Ig的重组腺病毒载体。方法　构建含人CTLA4 Ig的重组腺病毒载体质粒pShuttle Tracker CMV CTLA4 Ig ,与腺病毒骨架质粒 pAdEasy 1 △E1、△E3共转化大肠杆菌BJ5 183 ,经细菌内同源重组 ,获得重组腺病毒质粒pAd Tracker CTLA4 Ig ,转染 2 93细胞 ,制备携带CTLA4 Ig的重组腺病毒 ,体外感染L O2细胞 72h后ELISA检测其外分泌性表达。结果　获得携带CTLA4 Ig的重组腺病毒 ,滴度为 6× 10 1 3 PFU L ;在其感染的L O2细胞培养上清中能检测到可溶性重组蛋白CTLA4 Ig的表达 (P N =4.6 ,阳性 )。结论　制备的重组腺病毒在体外能有效感染L O2细胞 ,受感染细胞能表达、分泌可溶性的融合蛋白CTLA4 Ig ;为进行体内移植免疫耐受的基因治疗研究奠定基础。

关键词： CTLA4-Ig 重组腺病毒载体腺病毒基因转移基因表达基因治疗免疫耐受