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内质网应激反应在PMT1基因调控酿酒酵母细胞寿命和自噬中的作用

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微生物学报 2024年

作者：崔晓静袁頔杨晓迪张恒恒管文斌王俊芳庞晓飞崔红晶广东省医学免疫与分子诊断重点实验室广东医科大学附属东莞第一医院检验医学科广东医科大学医学技术学院广东医科大学第二临床医学院广东医科大学基础医学院山东省第二人民医院儿科

【目的】研究内质网应激反应在酿酒酵母蛋白O-甘露糖基转移酶-1 (protein O-mannosyltransferase-1， pmt1)基因调控细胞寿命和自噬中的作用。【方法】基于基因同源重组的原理，构建双基因缺失菌株(pho8Δ60 pmt1Δ)；在光学显微镜下计... 详细信息

【目的】研究内质网应激反应在酿酒酵母蛋白O-甘露糖基转移酶-1 (protein O-mannosyltransferase-1， pmt1)基因调控细胞寿命和自噬中的作用。【方法】基于基因同源重组的原理，构建双基因缺失菌株(pho8Δ60 pmt1Δ)；在光学显微镜下计数PMT1基因缺失酵母菌株(pmt1Δ)在衣霉素(内质网应激诱导剂)培养条件下的母细胞产生子代细胞的数量，统计菌株的复制性寿命；通过酶标仪检测pho8Δ60 pmt1Δ菌株在SD-N培养中(自噬诱导培养基)的碱性磷酸酶活性；通过Western blotting检测在衣霉素培养条件下细胞自噬标签Atg8蛋白的表达水平；通过RT-qPCR检测在衣霉素培养条件下pmt1Δ菌株中自噬相关基因ATG1和ATG8的表达情况。【结果】在衣霉素培养条件下，pmt1Δ菌株的复制性寿命缩短38.6%，差异有统计学意义；PMT1基因缺失酵母菌株的碱性磷酸酶活性上升；随衣霉素浓度增加，pmt1Δ菌株中融合蛋白GFP-Atg8和游离GFP蛋白的表达水平逐渐升高；在衣霉素培养条件下，pmt1Δ菌株中ATG1和ATG8基因表达上调。【结论】内质网应激反应减弱了PMT1基因缺失酵母细胞复制性寿命，增强了细胞自噬活性。

关键词：酿酒酵母衣霉素内质网应激自噬 PMT1

头孢哌酮钠舒巴坦钠致凝血功能异常的危险因素分析

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河北医科大学学报 2024年第1期45卷 76-81页

作者：崔琼曹佳淋崔晓静杨晓迪崔红晶广东省惠州市第三人民医院检验科广东惠州516005 广东医科大学基础医学院广东东莞523808

目的探讨头孢哌酮钠舒巴坦钠致凝血功能异常的危险因素分析。方法收集经第三代头孢菌素抗生素(头孢哌酮钠舒巴坦钠)治疗的100例患者为研究对象。根据患者是否出现凝血功能异常分为异常组(n=29)和正常组(n=71)。比较2组性别、年龄、体... 详细信息

目的探讨头孢哌酮钠舒巴坦钠致凝血功能异常的危险因素分析。方法收集经第三代头孢菌素抗生素(头孢哌酮钠舒巴坦钠)治疗的100例患者为研究对象。根据患者是否出现凝血功能异常分为异常组(n=29)和正常组(n=71)。比较2组性别、年龄、体温、脉搏、治疗疗程、白细胞计数(white cell count,WBC)、白蛋白、尿素氮、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、饮食情况、用药剂量、合并基础病等;通过多因素Logistic回归分析明确患者凝血功能异常的危险因素;通过Person系数分析WBC、白蛋白、尿素氮、CRP与凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血酶原时间(activated partial prothrombin time,APTT)的相关性。结果 2组性别、年龄、体温、脉搏、治疗疗程、TBIL、PCT、CRP、合并高血压、合并糖尿病比较差异无统计学意义(P>0.05);异常组白蛋白水平显著低于正常组,WBC、尿素氮、CRP水平、饮食11.385×10~9/L、白蛋白14.199μmol/L、CRP>17.629 mg/L是凝血功能异常的危险因素(P<0.05);相关性分析显示,WBC、尿素氮、CPR水平与PT、APTT均呈正相关,白蛋白与PT、APTT呈负相关(P<0.05)。结论头孢哌酮钠舒巴坦钠在抗感染过程中致凝血功能异常受到诸多因素影响,如较高的WBC、尿素氮、CPR水平,较低的白蛋白水平,较高的用药剂量,较少的饮食等,WBC、尿素氮、CPR水平越高及白蛋白水平越低,患者凝血功能越差。

关键词：头孢哌酮钠舒巴坦钠血液凝集障碍影响因素分析

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酵母细胞自噬检测方法的研究进展

国际老年医学杂志 2022年第5期43卷 612-615页

作者：崔晓静崔红晶刘新光广东医科大学医学分子诊断重点实验室衰老研究所东莞523808 广东医科大学医学技术学院东莞523808 广东医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室东莞523808

自噬可以在动物细胞的溶酶体或酵母和植物细胞的液泡中对细胞质成分进行降解,降解产生的小分子物质被再利用,维持细胞基本生理活动。以酵母为研究对象,细胞自噬启动的分子机制已被完整阐述,且检测细胞自噬活性的方法也得以精进。但相对... 详细信息

自噬可以在动物细胞的溶酶体或酵母和植物细胞的液泡中对细胞质成分进行降解,降解产生的小分子物质被再利用,维持细胞基本生理活动。以酵母为研究对象,细胞自噬启动的分子机制已被完整阐述,且检测细胞自噬活性的方法也得以精进。但相对于动物细胞自噬活性检测的方法而言,酵母细胞自噬检测方法有其优势和不足。本文旨在对几种酵母细胞自噬活性常用检测手段作一综述。

关键词：酵母自噬液泡检测方法

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皮肤切片制作的体会

实用医技杂志 2007年第36期14卷 5078-5079页

作者：谢玲崔红晶广东医学院组胚教研室广东湛江524023

皮肤是最大的器官，被覆于人体或动物的全身表面，它由上皮性的表皮及其下结缔组织性真皮组成。表皮和真皮内含有丰富的感觉神经末梢，皮肤及皮下组织内有许多附属器（毛发、皮脂腺和汗腺），因为皮肤组织的组织结构复杂、硬度不一、韧... 详细信息

皮肤是最大的器官，被覆于人体或动物的全身表面，它由上皮性的表皮及其下结缔组织性真皮组成。表皮和真皮内含有丰富的感觉神经末梢，皮肤及皮下组织内有许多附属器（毛发、皮脂腺和汗腺），因为皮肤组织的组织结构复杂、硬度不一、韧性较大等特点，在切片中常会出现有皱褶、易脱片等现象。皮肤较为坚硬不易切片，在制作切片过程中有一定的难度。本文根据我们长期做皮肤切片的经验，谈谈我们在制作皮肤切片方面的一些体会。

关键词：皮肤切片取材体会

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三七总苷对大鼠自身免疫性睾丸炎的拮抗作用

解剖学杂志 2008年第1期31卷 19-21页

作者：崔红晶安长新陈东郭洪胜贺晓舟广东医学院组织学与胚胎学教研室湛江524023

目的:研究三七总苷(PNS)对自身免疫性睾丸炎模型鼠睾丸组织形态及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和睾酮(T)含量的影响,以探讨PNS对睾丸炎的组织结构拮抗及作用机制。方法:建立大鼠睾丸炎模型,随机分为模型组和PNS拮抗组(200、400和800mg/k... 详细信息

目的:研究三七总苷(PNS)对自身免疫性睾丸炎模型鼠睾丸组织形态及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和睾酮(T)含量的影响,以探讨PNS对睾丸炎的组织结构拮抗及作用机制。方法:建立大鼠睾丸炎模型,随机分为模型组和PNS拮抗组(200、400和800mg/kg),镜下观察各组睾丸组织结构变化。结果:800mg/kg PNS剂量组睾丸系数、生精小管直径、血清TNF-α和T含量与模型组比较,差异有统计学意义,光镜所见睾丸组织结构接近正常对照组形态;200mg/kg PNS剂量组和模型组生精上皮坏死、脱落,睾丸间质水肿,不同程度炎性细胞增生浸润。结论:400、800mg/kg PNS剂量组对大鼠睾丸炎症损伤具有拮抗作用。

关键词：三七总苷睾丸炎生精小管大鼠

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自身免疫性睾丸炎中间质巨噬细胞的研究进展

国际泌尿系统杂志 2007年第5期27卷 661-664页

作者：崔红晶（综述）安长新（审校）广东医学院组织学与胚胎学教研室湛江524023

睾丸间质巨噬细胞（Macrophage，Mφ）在机体非特异性免疫中起十分重要的作用，是睾丸发生免疫紊乱性炎症的重要参与者，其分泌的大量炎症介质在男性不育中起着关键作用。近年，有关间质巨噬细胞与睾丸炎的报道日益增多，本文对自身免... 详细信息

睾丸间质巨噬细胞（Macrophage，Mφ）在机体非特异性免疫中起十分重要的作用，是睾丸发生免疫紊乱性炎症的重要参与者，其分泌的大量炎症介质在男性不育中起着关键作用。近年，有关间质巨噬细胞与睾丸炎的报道日益增多，本文对自身免疫性睾丸炎中间质Mφ的变化及其对生精细胞、非生精细胞的影响进行归纳总结，现综述如下。

关键词：睾丸炎巨噬细菌

酵母PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株构建

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广东医科大学学报 2023年第1期41卷 7-10,15页

作者：崔晓静杨晓迪袁頔王俊芳崔红晶广东医科大学医学分子诊断重点实验室衰老研究所广东东莞523808 广东医科大学医学技术学院广东东莞523808 广东医科大学第二临床医学广东东莞523808 广东医科大学基础医学院广东东莞523808

目的构建碱性磷酸酶PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株。方法依据基因同源重组原理,采用一步基因置换法构建编码Pho8蛋白N端60个氨基酸残基(包括跨膜结构域)缺失的PHO8基因缺失酵母(pho8△60)菌株;线性化载体p RS303-pho13-ko转化pho8△60... 详细信息

目的构建碱性磷酸酶PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株。方法依据基因同源重组原理,采用一步基因置换法构建编码Pho8蛋白N端60个氨基酸残基(包括跨膜结构域)缺失的PHO8基因缺失酵母(pho8△60)菌株;线性化载体p RS303-pho13-ko转化pho8△60菌株,进一步缺失PHO13基因,构建pho8△60和PHO13双基因缺失(pho8△60pho13△)菌株;通过缺陷型培养基筛选方法,PCR鉴定阳性克隆基因组DNA。结果pho8△60菌株电泳条带为1151 bp和180 bp,pho8△60pho13△菌株电泳条带分别为1872 bp和174 bp。结论成功构建pho8△60pho13△酵母菌株。

关键词：酿酒酵母碱性磷酸酶自噬衰老

静电纺丝法制备丹参素-聚己内酯纳米纤维支架

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中草药 2014年第13期45卷 1850-1854页

作者：林坚涛张衍宁黄浩赖国荣崔红晶尤婷婷潘文嘉张黎明王冠海广东医学院广东东莞523808 中山大学广东广州510275

目的利用静电纺丝技术制备丹参素-聚己内酯(DSS-PCL)纳米纤维支架。方法以二氯甲烷-N,N-二甲基甲酰胺(CH2Cl2-DMF)8∶2为溶剂,利用静电纺丝仪制备载丹参素的纳米纤维,通过扫描电镜(SEM)观察纤维形貌,通过体外释放实验考察载药纳米纤维... 详细信息

目的利用静电纺丝技术制备丹参素-聚己内酯(DSS-PCL)纳米纤维支架。方法以二氯甲烷-N,N-二甲基甲酰胺(CH2Cl2-DMF)8∶2为溶剂,利用静电纺丝仪制备载丹参素的纳米纤维,通过扫描电镜(SEM)观察纤维形貌,通过体外释放实验考察载药纳米纤维支架中丹参素的释放规律,通过MTT法和溶血率对载药纳米纤维支架的安全性进行初步评价。结果 CH2Cl2-DMF混合溶剂体系下药物和材料都能够很好地溶解并顺利电纺得到纳米纤维,平均纤维直径分别为210 nm和190 nm,体外释放实验表明药物的释放经过一个快速释放后进入缓慢释放。MTT法测得PCL及载有丹参素的纳米纤维对L929细胞存活率并无明显影响,溶血率实验测得各组纳米纤维的溶血率低于5%。结论静电纺丝法制备DSS-PCL纳米纤维的工艺简单易行,易于推广。

关键词：静电纺丝技术丹参素聚己内酯纳米纤维扫描电镜安全性 N,N-二甲基甲酰胺溶血率

SRO9基因参与调控酿酒酵母内质网应激反应

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微生物学通报 2016年第12期43卷 2627-2634页

作者：赵炜牛宇杰郑华珍周涛崔红晶刘新光广东医科大学衰老研究所广东东莞523808 广东省医学分子诊断重点实验室广东东莞523808

【目的】研究酵母SRO9基因在内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)中的作用。【方法】利用PCR介导的同源重组方法构建SRO9基因缺失菌株,检测其在内质网应激诱导剂衣霉素处理条件下的克隆形成能力;通过比色法检测细胞内的H2O2含... 详细信息

【目的】研究酵母SRO9基因在内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)中的作用。【方法】利用PCR介导的同源重组方法构建SRO9基因缺失菌株,检测其在内质网应激诱导剂衣霉素处理条件下的克隆形成能力;通过比色法检测细胞内的H2O2含量,超氧化物歧化酶SOD活性和细胞增殖能力;通过实时荧光定量PCR检测内质网应激靶基因和超氧化物歧化酶编码基因SOD1及SOD2的转录水平。【结果】相对于野生型酵母菌株,SRO9基因缺失酵母菌株对内质网应激诱导剂衣霉素的抗性增强,参与内质网应激反应的靶基因转录上调;细胞内H2O2含量下降,SOD1、SOD2转录水平降低,总SOD活性降低;对氧化剂CHP和VK3的抵抗性减弱,复制寿命明显缩短。【结论】SRO9基因缺失酵母细胞对内质网应激诱导剂衣霉素的抗性增强,原因可能是由于SRO9基因缺失激活了细胞的内质网应激反应。

关键词： SRO9 酿酒酵母内质网应激件