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垃圾渗滤液膜浓缩液混凝沉淀预处理技术研究

垃圾渗滤液膜浓缩液混凝沉淀预处理技术研究

作者：崔甜甜中国地质大学(北京)

学位级别：硕士

垃圾渗滤液是环境污染的重要组成部分,膜处理方法逐渐成为垃圾渗滤液处理领域的主要工艺。然而,经过膜处理后产生的垃圾渗滤液膜浓缩液却比垃圾渗滤液更难处理,其中含有大量难降解污染物和盐类化合物,处理不当将会对环境造成更为严重的... 详细信息

垃圾渗滤液是环境污染的重要组成部分,膜处理方法逐渐成为垃圾渗滤液处理领域的主要工艺。然而,经过膜处理后产生的垃圾渗滤液膜浓缩液却比垃圾渗滤液更难处理,其中含有大量难降解污染物和盐类化合物,处理不当将会对环境造成更为严重的污染。目前渗滤液膜浓液的处理技术受到国内外学者广泛关注,但研究多集中于对膜浓液的蒸发结晶等深度处理技术,而对其预处理方法研究较少。在此情况下,探讨具体的混凝沉淀预处理方法对处理膜浓液具有重要意义。本文通过对石家庄市卫生垃圾太行填埋场垃圾渗滤液膜浓缩液采用混凝沉淀-吸附的处理思路进行预处理,主要目的是确保后续蒸发工艺能够稳定运行,降低蒸发设备结垢堵塞风险,从而利用“混凝沉淀预处理+低温常压蒸发工艺”对膜浓液进行全面有效处理。考察pH、不同碱的投加量、温度、絮凝剂类型及投加量、药剂组合方式以及吸附条件等不同因素对膜浓液中易结垢易挥发污染物去除效果的影响,并选取COD去除率、Ca、Mg去除率、剩余泥量等指标分析不同因素对预处理效果的影响,确定最佳的预处理反应条件。研究结果表明:采用混凝沉淀方式对垃圾渗滤液膜浓缩液进行预处理,可有效降低COD、Ca及Mg浓度,对后续蒸发工艺的稳定运行具有重要意义。(1)NaOH溶液调节pH处理膜浓液的最佳pH值为11,Ca(OH)溶液调节pH处理膜浓液的最佳pH值为11,温度对COD去除率影响较为微弱,最佳实验温度为25℃,即在室温下进行;(2)采用不同絮凝剂处理膜浓液,PAC、合成有机絮凝剂和PAM三种絮凝剂联用时,最佳投加量为PAC投加1.5g/L,合成絮凝剂投加3.5g/L,PAM投加0.01g/L;(3)不同药剂组合方式对COD去除率影响较大,对Ca、Mg去除率普遍较高,选择“NaOH+Ca(OH)+NaCO+PAC+合成有机絮凝剂+PAM”组合作为最佳药剂组合方式,此时COD去除率为57.39%;(4)粉末活性炭吸附效果明显优于生物炭,采用“NaOH+Ca(OH)+NaCO+PAC+合成有机絮凝剂+PAM+粉末活性炭”组合方式处理膜浓液时,粉末活性炭的最佳投加量为20g/L,在此投加量下最佳吸附时间为1.5h,此时Ca去除率为99.57%,Mg去除率为97.00%,COD去除率为60.77%。

关键词：渗滤液膜浓缩液混凝沉淀吸附预处理

颅脑损伤患儿血浆内毒素变化及其临床意义探讨

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颅脑损伤患儿血浆内毒素变化及其临床意义探讨

作者：崔甜甜中国医科大学

学位级别：硕士

目的:研究颅脑损伤患儿血浆内毒素水平的变化及其临床意义。方法:病例组选择中国医科大学附属盛京医院PICU住院的颅脑损伤患儿29例,分别于颅脑损伤后1d、3d和5d采集外周血,10例健康儿童体检者为对照组,利用内毒素鳌定实验动态检测血浆... 详细信息

目的:研究颅脑损伤患儿血浆内毒素水平的变化及其临床意义。方法:病例组选择中国医科大学附属盛京医院PICU住院的颅脑损伤患儿29例,分别于颅脑损伤后1d、3d和5d采集外周血,10例健康儿童体检者为对照组,利用内毒素鳌定实验动态检测血浆内毒素水平,比较其颅脑损伤后1d、3d和5d的内毒素水平变化情况;评估内毒素水平与GCS的相关性;取颅脑损伤后1d、3d和5d的GCS评分均值,分为轻型、中型、重型组,比较其内毒素水平变化;根据儿童胃肠功能障碍诊断标准及多器官功能障碍(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)诊断标准分组,分析其内毒素变化;同时收集患儿发热情况、住院时间、喂养方式、手术史、机械通气、PCIS、ISS,评估临床中影响血浆内毒素水平的因素。结果:颅脑损伤后第1天、第3天及第5天的内毒素水平皆明显高于对照组(p<0.05),且第3天及第5天的内毒素水平高于第1天(p<0.05)。GCS评分与内毒素水平呈负相关(p<0.05)。重型颅脑损伤组内毒素水平高于轻型及中型组。MODS组内毒素水平高于非MODS组。胃肠功能障碍组内毒素水平高于非胃肠功能障碍组。入院时肠内喂养、GCS评分是内毒素血症的独立影响因素(p<0.05),PCIS评分与内毒素血症呈负相关,但不是其独立影响因素。结论:颅脑损伤后早期(伤后第3天)内毒素水平明显升高,与GCS评分显著相关,颅脑损伤越重,内毒素水平越高;胃肠功能障碍及MODS患儿血浆内毒素水平明显升高;入院时予肠内喂养可降低内毒素水平,GCS评分及PCIS评分越低,内毒素水平越高。

关键词：颅脑损伤内毒素胃肠功能障碍

基于血管内皮细胞外泌体分泌障碍的多柔比星毒性机制研究

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基于血管内皮细胞外泌体分泌障碍的多柔比星毒性机制研究

作者：崔甜甜浙江大学

学位级别：硕士

研究背景:化疗药物引发的心脏毒性一直是临床上备受关注而难以解决的问题,其中蒽环类药物剂量依赖的心脏毒性在临床上具有较高的发生率和致残致死率,限制了其在临床上的广泛应用。随着医疗水平和治疗手段的改善,癌症患者的生存率逐年增... 详细信息

研究背景:化疗药物引发的心脏毒性一直是临床上备受关注而难以解决的问题,其中蒽环类药物剂量依赖的心脏毒性在临床上具有较高的发生率和致残致死率,限制了其在临床上的广泛应用。随着医疗水平和治疗手段的改善,癌症患者的生存率逐年增加。然而,蒽环类化疗药物引发的心律失常、心肌损伤等心脏毒性问题仍是威胁癌症患者健康的隐患,甚至患者在接受化疗后几年到十几年内仍可发生心脏功能障碍。通过对蒽环类药物引发心脏毒性问题的作用机制进行深入探讨,针对心脏保护开展对应策略研究成为研究者们不断前进的方向。多柔比星（doxorubicin,DOX）引发的心脏损伤是多分子多因素共同参与的病理过程。目前,DOX诱发心脏毒性的机制尚不明确。血管内皮细胞位于血管腔内侧,构成了血管内物质和外界交流的屏障,其紧密连接结构的完整以及转运和代谢过程的正常运作,是维持血管稳态的重要因素。血管内皮细胞是许多化疗药物毒性作用靶细胞的理念也被越来越多的研究所证明。关于DOX引发心脏毒性的作用过程中,血管内皮细胞的损伤状况、毒性机制和分子信号的变化规律等尚不清楚。研究目的:本研究以化疗药物DOX诱发血管内皮细胞外泌体分泌障碍为切入点,了解血管内皮细胞在DOX导致的心脏毒性病理进程中的损伤状况,并通过一系列药理学手段对其损伤机制进行深入探讨,揭示外泌体代谢途径在DOX导致的血管内皮细胞损伤中的作用。为临床解决DOX导致的心脏毒性提供新的依据和思路。实验方法和结果:本研究首先通过CCK-8、免疫印迹、免疫荧光等分子生物学方法检测DOX对血管内皮细胞活力以及血管内皮细胞紧密连接状态的影响,确认DOX导致血管内皮细胞毒性的损伤表型。为了进一步了解DOX导致血管内皮细胞损伤的机制,本研究采用转录组学分析考察DOX导致血管内皮细胞损伤前后的差异基因,发现这些基因显著富集于细胞转运和代谢过程,提示这一过程可能在DOX诱发的血管内皮细胞毒性中发挥关键作用。在后续的研究中,我们聚焦于转运和代谢过程中的外泌体代谢途径,首先通过密度梯度超速离心法提取等量细胞上清中的外泌体,确认DOX导致血管内皮细胞外泌体释放量下降。基于这一实验结果,我们从外泌体的生成和分泌两个环节进一步探究详细的作用机制。一方面,构建 CD63-EGFP,Rab5-RFP 和其点突变 Rab5Q79L-mCherry 质粒,并筛选得到HEK293 CD63-EGFP稳定表达细胞株,借助免疫荧光、免疫印迹等分子生物学手段,系统研究了外泌体在细胞内的生物起源MVBs的亚细胞状态。实验结果显示,DOX诱发MVBs粒径变大,绕核成簇分布,表明囊泡蛋白发生聚集;然而DOX未影响MVBs标志蛋白CD63和位于早期内含体的Rab5共定位。因此,我们推测,DOX并非通过影响外泌体蛋白分选进入早期内含体这一过程引起血管内皮细胞外泌体代谢途径损伤。生物信息学分析结果显示,DOX是通过抑制小GTPase家族的Rab27b蛋白表达,阻断MVBs锚定到细胞膜,从而导致外泌体不能释放到细胞外,细胞的转运和代谢过程不能正常运转。使用外泌体抑制剂GW4869和DOX共同处理血管内皮细胞后发现聚集在细胞内的蛋白加剧细胞凋亡。为了逆转DOX导致的血管内皮细胞凋亡,本研究尝试采用褪黑素（melatonin）对其毒理过程进行调控,免疫印迹的结果显示,褪黑素并未直接影响Rab27b的蛋白表达水平,而是通过降低DOX导致的血管内皮细胞凋亡,逆转DOX对血管内皮细胞的毒性作用。结论:DOX诱发的心脏毒性中也会对血管内皮细胞产生毒性,破坏紧密连接,诱发凋亡事件;DOX抑制Rab27b蛋白的表达水平,损伤外泌体代谢途径;而褪黑素通过调控凋亡通路相关蛋白和血管内皮细胞紧密连接蛋白,但并未直接调控Rab27b的表达水平,对DOX诱发的血管内皮细胞的毒性进行有效缓解。

关键词：多柔比星血管内皮细胞心脏毒性外泌体 Rab27b 褪黑素

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监察委员会留置措施程序研究

监察委员会留置措施程序研究

作者：崔甜甜山西财经大学

学位级别：硕士

监察体制改革,是中央根据我国目前反腐败工作面临的新形势和新要求做出的重大政治决定。2018年以习近平为核心的党中央决定成立集中统一的反腐败专责机构——监察委员会。2018年3月20日,我国国家监察法正式出台,建立了全面覆盖国家机关... 详细信息

监察体制改革,是中央根据我国目前反腐败工作面临的新形势和新要求做出的重大政治决定。2018年以习近平为核心的党中央决定成立集中统一的反腐败专责机构——监察委员会。2018年3月20日,我国国家监察法正式出台,建立了全面覆盖国家机关及其公务员的国家监察体系。监察委员会行使的监察权,是传统立法权、行政权、司法权之外的新型权力,这一权力包括监督、调查、处置三项基本职权,谈话、讯问、询问、查询、冻结、调取、查封、扣押、搜查、勘验检查、鉴定、留置十二项措施。其中本文讨论的是留置措施,监察委员会的留置措施是一项约束人身自由的调查措施,具有行政性、强制性、主动性等特性。如果对留置措施的程序没有明确界限以及有效监督制约机制,极易出现不规范使用或滥用的情形,加之《中华人民共和国监察法》中未详细规定留置措施相关程序,导致各地监察委员会采取留置措施时做法不一,故笔者运用比较研究法、实证分析法、社会学分析法等研究方法,从权利保障和权力制约两个大的方面研究留置措施的程序问题:在权利保障方面,一是要通过研究留置措施实施程序、执行程序,保障监察委员会留置职权的有效履行;二是要通过研究留置措施的程序性救济问题,保障留置期间被留置人员的权利;在权力制约方面,则是通过研究留置措施程序中的制约与监督问题,严格规范监察委员会留置措施的适用,完善监察委员会的自我监督与外部监督。本文除绪论外,首先论述了留置措施程序的概念及特征,主要从留置措施及留置措施程序两个方面讨论其概念及特征;核心论述了留置措施的实施程序、执行程序及留置措施程序的监督、制约与救济问题,留置措施的实施程序与执行程序部分详细论述了实施程序与执行程序过程中的各个阶段相关的法律问题;留置措施程序的监督、制约与救济问题部分旨在通过论述留置措施程序的监督问题、留置期间律师介入问题、及设立留置过程中的申诉渠道等问题,建立并完善留置措施的监督制约程序,最大程度保障被留置人在被留置期间的权利;最后论述了留置措施程序与司法程序的衔接问题,主要论述了移送司法的相关问题、留置期间取得的证据证明力问题、留置期限与刑期抵扣的问题。本文主要提出了:一是建议明确设立留置期间申诉渠道;二是建议明确受理申诉申请的监察机关处理申请的期限及上一级监察机关复查的期限;三是建议加强监察委员会的检察院监督机制、内部监督机制等监督制约机制。

关键词：监察委员会留置措施留置措施程序

环境规制对中国制造业技术创新趋向的影响研究

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环境规制对中国制造业技术创新趋向的影响研究

作者：崔甜甜山东财经大学

学位级别：硕士

我国制造业发展迅速,在取得巨大成就的同时也给环境带来了巨大的破坏。政府的环境规制应运而生,环境规制在对企业的污染排放产生一定威慑的同时,也对制造业企业的技术创新产生了一定的影响。学术界中关于环境规制对技术创新影响的研究... 详细信息

我国制造业发展迅速,在取得巨大成就的同时也给环境带来了巨大的破坏。政府的环境规制应运而生,环境规制在对企业的污染排放产生一定威慑的同时,也对制造业企业的技术创新产生了一定的影响。学术界中关于环境规制对技术创新影响的研究莫过于关于“波特假说”的争议,即是否存在适当的环境规制强度可以促使企业进行技术创新。根据经济效益与环保效益产生的多少,技术创新可以分为绿色技术创新与非绿色技术创新;结合环保理念,技术创新质量可以分为非绿色实质性创新、非绿色策略性创新、绿色实质性创新与绿色策略性创新。企业对技术创新类型的选择在本质上是对不同种类型技术创新所产生的成本与收益的权衡,所以不同的环境规制强度通过影响不同技术创新类型的成本与收益,从而促使企业对不同的技术创新类型进行选择。本文在文献综述的基础上,通过作用机理分析,对制造业整体的绿色技术创新与非绿色技术创新趋向选择、技术创新质量的趋向选择以及绿色与非绿色技术创新趋向选择的行业异质性提出相应假设;根据相关数据资料,对我国制造业环境规制的成效、绿色技术创新与非绿色技术创新进行现状分析;对提出的假设进行实证检验。本文选取了CNRDS、WIND、CSMAR数据库中A股上市公司的微观数据与《中国环境统计年鉴》、EPS、国家统计局中的行业数据,分别构建核心变量绿色技术创新、非绿色技术创新、非绿色实质性创新、非绿色策略性创新、绿色实质性创新、绿色策略性创新及环境规制,进一步依托绿色专利申请量以及非绿色技术专利申请量分别构建了绿色技术创新与非绿色技术创新的知识存量指标,并根据制造业行业污染物排放强度划分了清洁行业与污染行业,利用系统GMM方法对所提出的理论假设与作用机理进行实证检验。结果发现:就整体制造业而言,环境规制强度影响着企业对绿色技术创新与非绿色技术创新趋向的选择,环境规制水平较弱时,企业倾向于选择提高非绿色技术创新占比;中等强度的环境规制使得企业处于技术创新路径转变的过渡期,此时,企业并不进行任何技术创新路径的选择;环境规制水平较强时,企业倾向于选择提高绿色技术创新占比。出现以上趋向的原因是由于企业在进行技术创新选择时存在知识存量上的路径依赖作用,而高强度的环境规制与高水平的研发投入会进一步的挤出非绿色技术创新,从而加强绿色技术创新的路径依赖作用,并削弱非绿色技术创新的路径依赖作用。严厉的环境规制会诱导企业进行更高质量的技术创新,具体来说,在政府环境规制强度不断增强的过程中,企业提高技术创新质量趋向选择的顺序是非绿色实质性创新、非绿色策略性创新、绿色策略性创新、绿色实质性创新。技术创新选择也具有行业异质性。环境规制水平较弱时,清洁行业与污染行业倾向于提高非绿色技术创新占比,环境规制水平较强时,清洁行业与污染行业倾向于提高非绿色技术创新占比,随着环境规制强度的持续提高,污染行业更快跨越技术创新路径的拐点。根据研究结论,提出了如下建议,适度提高环境规制的严格程度、持续加强环境政策与技术创新政策的联系、继续加大研发投入来转变企业的非绿色技术创新路径、依据行业差异来制定不同环境规制政策。

关键词：环境规制技术选择趋向绿色技术创新非绿色技术创新系统GMM

郑州市消费者对原产地品牌苹果的认知度研究 ——以灵宝苹果为例

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郑州市消费者对原产地品牌苹果的认知度研究 ...

作者：崔甜甜沈阳农业大学

学位级别：硕士

随着国际竞争的加剧,农业品牌价值在各国农业竞争中已起到中流砥柱作用。同时随着国内党的十九大胜利召开,我国乡村振兴新时代已经全面开启,产业兴旺是实现乡村振兴的重要举措,而促进农产品品牌建设是产业兴旺的基础。因此提高消费者品... 详细信息

随着国际竞争的加剧,农业品牌价值在各国农业竞争中已起到中流砥柱作用。同时随着国内党的十九大胜利召开,我国乡村振兴新时代已经全面开启,产业兴旺是实现乡村振兴的重要举措,而促进农产品品牌建设是产业兴旺的基础。因此提高消费者品牌认知度,加强品牌建设是全面实现乡村振兴的必走之路。更是新时代农业发展的要求。近年来河南省灵宝市依托得天独厚的区域自然生态环境大力种植原产地苹果,同时在苹果生长采收等过程中注入当地特有的文化元素,赋予品牌特有的文化价值。依托具有绝对优势的自然生长环境,灵宝原产地苹果品质独特,品牌知名度相对较高,使其品牌价值不断提高。虽然灵宝苹果品牌价值在2017年原产地农产品品牌价值评估中已达114亿,但是相较与其他发展成熟的原产地苹果品牌,比如洛川苹果、烟台苹果消费者品牌认知度较低,品牌辐射范围小,品牌宣传建设滞后等问题。因为品牌具有辐射性,郑州市是河南省的省会城市,会对灵宝原产地苹果品牌的推广起到直接的带动效果。因此选取郑州市消费者为本文调研对象,通过梳理文献资料设计问卷,对消费者个体特征,主观特征（是否愿意购买品牌苹果、是否购买过品牌苹果、是否会再次购买品牌苹果、品牌了解的信息获取渠道）、产品特征（产品标识了解情况、产品原产地特征了解情况质量安全了解情况、品质了解情况、产地来源了解情况、购买便利度了解情况、价格认可情况）、与认知特征（是否认知灵宝原产地苹果品牌、对灵宝原产地苹果品牌了解程度）进行描述性统计分析,以及对个体特征、产品特征分别做与消费者灵宝原产地苹果品牌认知度的交叉分析,同时运用二元logistics模型对影响灵宝原产地苹果品牌认知度的影响因素做实证分析。最终通过前文数据分析的结果得出以下结论:（1）从个体特征来看,女性消费者家庭年收入越高,受教育程度越高,与家中有老人和小孩的消费者对认知灵宝原产地苹果呈正向显著影响;（2）产品标识了解情况,质量安全了解情况与品质了解情况对认知灵宝原产地苹果呈正向显著影响。针对实证分析结果并提出推动河南省灵宝原产地苹果品牌发展相关对策与建议如下:（1）从政府角度与行业协会角度加大宣传力度,提高消费者品牌认知度。例如,积极举办农产品展销会,灵宝原产地品牌宣传与推介会,农博会以及农产品贸易洽谈会。行业协会也应该与灵宝原产地苹果旅游种植园,农家乐,采摘园进行合作,做活灵宝原产地苹果品牌旅游项目;（2）以质量安全、品质独特、价格合理立足市场;（3）推动灵宝原产地苹果品牌建设。设立灵宝原产地苹果品牌专项资金,制定严格的灵宝原产地苹果品牌使用规范,丰富品牌形象,强化消费者的品牌忠诚度。最终达到促进灵宝原产地苹果品牌建设,提升品牌价值。

关键词：灵宝苹果原产地品牌品牌认知度 logistics模型

人体外照射剂量转换系数确定中GATE/MCNPX的应用、比较研究

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人体外照射剂量转换系数确定中GATE/MCNPX的应用、比较研究

作者：崔甜甜苏州大学

学位级别：硕士

外照射是辐射实践过程中最为常见的人体受照方式。利用蒙特卡罗方法模拟体模得到人体器官的剂量转换系数是国际上辐射防护理论研究领域和应用领域的研究热点。随着计算机技术的发展和科学的进步,不断有新的功能更强大的蒙特卡罗模拟软... 详细信息

外照射是辐射实践过程中最为常见的人体受照方式。利用蒙特卡罗方法模拟体模得到人体器官的剂量转换系数是国际上辐射防护理论研究领域和应用领域的研究热点。随着计算机技术的发展和科学的进步,不断有新的功能更强大的蒙特卡罗模拟软件出现。将这类模拟软件应用于辐射防护中并与其他蒙特卡罗软件的模拟结果相比较,不仅为确定人体受照水平提供了一种新的路径和方法,并且得到的数据相比于单个蒙特卡罗软件得到的数据更具有代表性,对精确评估人体在辐射场中接受的辐射剂量和推进新兴蒙特卡罗模拟软件的融合和应用具有重要意义。本文针对常用人体体素模型KTMAN-2(Korean Typical MAN-2)在MCNPX输入文件中的体素数据,应用自编算法实现了向常规图像格式(如CT等)和专用数据格式(如GATE)的双向转换,从而实现了复杂体素模型实时交互可视化。基于验证、比较和应用的目的,在同一体素模型条件下,分别使用GATE和MCNPX模拟六种标准照射方式下不同光子、中子能量的人体器官剂量转换系数,再将两者的计算结果进行比较;并将两者的器官吸收剂量转换系数和ICRP 74号、ICRP116号出版物的推荐值进行比较、分析。主要研究结果和创新如下:(1)通过在GATE和MCNPX程序中计算AP、PA、LLAT、RLAT、ROT、和ISO六种标准照射方式下,不同光子、中子能量的人体器官的吸收剂量,比较两者的计算差异,并系统地分析了本文计算结果与ICRP 74、ICRP 116号出版物参考人在外照射剂量学上的差异。(2)将人体体素模型在MCNP/MCNPX中的体素数据通过自编的Matlab程序处理并转换为CT,该过程解决了在缺乏人体体素模型原始影像数据的情况下,使用其它蒙特卡罗模拟方法进行进一步验证时由于输入文件的差异性而无法进行的问题,为保证剂量计算的精确度提供了一种新方法。(3)本文还研究比较了在光子的外照射中,GATE基于不同的物理电磁模型库Livermore、Penelope和Standard的计算精度,结果表明Livermore相比Penelope和Standard具有更小的误差和更高的稳定性。该结果为GATE在以后相似的研究工作中电磁模型库的选择提供了参考。

关键词：人体体素模型剂量转换系数 GATE/MCNPX KTMAN-2

柑橘黄化脉明病毒和柑橘叶斑驳病毒的侵染性克隆构建

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柑橘黄化脉明病毒和柑橘叶斑驳病毒的侵染性克隆构建

作者：崔甜甜西南大学

学位级别：硕士

柑橘病毒病害每年都会对世界柑橘产业造成严重的经济损失。柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow clearing vein virus,CYVCV)作为2009年我国发现侵染柑橘的一种新病毒,会引起柠檬和酸橙嫩叶脉明、黄化、叶片反卷和皱缩等症状,严重时可导致... 详细信息

柑橘病毒病害每年都会对世界柑橘产业造成严重的经济损失。柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow clearing vein virus,CYVCV)作为2009年我国发现侵染柑橘的一种新病毒,会引起柠檬和酸橙嫩叶脉明、黄化、叶片反卷和皱缩等症状,严重时可导致嫩叶脱落、叶脉坏死,造成树势衰弱、果实产量下降,有时甚至绝收;近几年,该病毒在我国柑橘产区的发生呈现逐年上升趋势,已经成为影响我国柑橘产业尤其是柠檬产业的一个重要问题。柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)是乙型线形病毒科(Betaflexiviridae)柑橘病毒属(Citrivirus)的代表成员,可侵染大多数的柑橘品种,中国于2016年在甜樱桃和猕猴桃上首次发现,后续在柠檬上也有报道。目前对CYVCV和CLBV的分子特性和生物学特性研究较少,而植物病毒侵染性克隆是研究病毒基因功能的重要工具。然而利用大肠杆菌构建基因组较大的病毒全长侵染性克隆时,会出现基因组结构(突变及缺失)不稳定的现象。因此本研究首先分别对CYVCV和CLBV分离物进行了全长cDNA的扩增,然后通过基于酵母转化的同源重组(transformation-associated recombination,TAR)技术分别成功构建了CYVCV和CLBV的基因组全长侵染性克隆,为进一步研究两种病毒的分子生物学特性、致病机理及其载体化应用奠定了基础。所取得的主要研究结果如下:1、病毒侵染性克隆的快速构建体系本研究利用In-Fusion HD Cloning Kit重组连接双元载体DK1317-2骨架和含有酵母相关复制起始位点的片段pYES1L-2117,得到可以在酵母-农杆菌-大肠杆菌中复制和表达的三元穿梭载体pCY(Genbank登录号:MG637043);进而建立了基于pCY及TAR技术的快速克隆体系,然后利用Potato Virus X(PVX)对该体系进行验证,在2周内获得了PVX侵染性克隆。2、CYVCV侵染性克隆构建本研究建立了CYVCV基因组的一步法RT-PCR扩增体系;通过TAR技术克隆至三元载体pCY,成功获得柑橘黄化脉明病毒四川安岳分离物基因组全长cDNA克隆,测序结果表明CYVCV-AY基因组为7529 bp,包含6个开放阅读框,与目前已报道的CYVCV分离株一致。选取一致序列进行提交并命名为:CYVCV-AY(Genbank登录号:MG878869);序列比对结果显示,随机选取的4个CYVCV-AY基因组全长cDNA克隆的核苷酸序列相似性均在99%以上;在系统进化树上,CYVCV-AY的4个克隆均与柑橘来源的CYVCV分离株聚为一簇。通过TAR克隆在国内外首次获得了CYVCV的侵染性cDNA克隆,症状观察及RT-PCR检测结果表明,所获得的pCY-CYVCV具有侵染性。农杆菌介导接种试验表明,接种方式和所选取的寄主对侵染效率有较大影响;所获得的pCY-CYVCV全长cDNA采用农杆菌介导的真空浸润柑橘,其侵染效率比较高。3、CLBV侵染性克隆构建利用所建立的柑橘病毒侵染性克隆的快速构建体系,首次获得了CLBV中国分离株的侵染性克隆HBYD(Genbank登录号:MG572236)。序列测定显示,CLBV-HBYD基因组长度及结构与目前已报道的来自柑橘的CLBV分离株一致,为8747 bp,包含3个开放阅读框,ORF1为5889 nt、ORF2为1089 nt、ORF3为1092 nt,5′端有甲基化帽子结构,3′末端具有poly(A)。全基因组序列比对显示,CLBV-HBYD与已登录的9个CLBV分离物的核酸序列一致性在79%8%,其中与柑橘来源的EU857540一致性最高为98%,与猕猴桃来源的JN983454、JN983455、JN983456和JN900477的一致性均为79%。在系统进化树上,MG572236与柑橘来源的CLBV分离株聚为一簇。在侵染性克隆的基础上,构建了插入亚基因组启动子及GFP基因开放读码框的pCLBV表达载体。

关键词：柑橘黄化脉明病毒柑橘叶斑驳病毒侵染性克隆 TAR克隆穿梭载体

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元胞自动机在模拟细胞行为方面的应用

中国生物医学工程学报 2017年第2期36卷 248-251页

作者：李向阳孙亮崔甜甜苏州大学医学部放射医学与防护学院江苏苏州215000

在生物细胞生长机理以及莫诺德微分方程模型的基础上,推导出生物细胞生长以及底物消耗的微分方程,并基于此建立模拟生物细胞生长的元胞自动机模型(CABCGM)。CABCGM采用二维细胞自动机作为细胞的生长空间,采用Moore型邻域作为细胞的邻居... 详细信息

在生物细胞生长机理以及莫诺德微分方程模型的基础上,推导出生物细胞生长以及底物消耗的微分方程,并基于此建立模拟生物细胞生长的元胞自动机模型(CABCGM)。CABCGM采用二维细胞自动机作为细胞的生长空间,采用Moore型邻域作为细胞的邻居规则,其演化规则根据细胞的生长机理和推导出的动力学微分方程设计。在建立元胞自动机模型的前提下,以Matlab为开发工具来实现模型编程,并进行仿真实验。仿真结果表明,利用元胞自动机建立的生物细胞的生长模型与实际微分方程细胞的生长曲线比较吻合(尤其在前期时间段),故元胞自动机能较好地描述细胞生长的演化行为。

关键词：元胞自动机模型生物细胞细胞行为