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基于TGR5/NLRP3信号通路探讨活血清解灵对非酒精性脂肪性肝炎大鼠炎症反应的影响

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中国现代应用药学 2024年第10期41卷 1324-1331页

作者：李锡晶沈洪昇王璐瑶张桂贤崔晓雪刘伟伟赵秀梅天津市医药科学研究所

目的基于G蛋白偶联胆汁酸受体(G protein-coupled bile acid receptor,TGR5)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor 3,NLRP3)信号通路，探讨活血清解灵干预非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠炎症反应的作用机制。方法将70只SD雄性大鼠随机分为5组，分别为对照组20只，模型组20只，阿托伐他汀阳性药组和活血清解灵高、低剂量组各10只。对照组给予维持饲料，其余各组均给予高脂饲料，通过模型评价确定于第20周末NASH大鼠模型造模成功。造模成功后，对照组和模型组灌胃生理盐水，阿托伐他汀阳性药组，活血清解灵高、低剂量组灌胃给予相应药物，每日1次，连续4周。第24周末处死大鼠，计算肝指数，全自动生化仪检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平，HE、油红O染色观察肝脏组织病理变化，Western blotting、免疫荧光法检测肝脏组织TGR5及NLRP3蛋白表达，ELISA试剂盒检测肝脏组织白细胞介素18(IL-18)及白细胞介素1β(IL-1β)含量。结果活血清解灵能显著改善NASH大鼠一般状态，各剂量组均能显著降低大鼠体质量、肝指数(P<0.01)，血清TG、TC含量和ALT、AST活性水平显著下降(P<0.01)，病理结果提示活血清解灵能明显改善肝脏脂肪变、炎症及气球样变，TGR5蛋白表达显著上升(P<0.01),NLRP3蛋白表达及IL-18、IL-1β含量均显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论活血清解灵能够明显改善NASH大鼠状态，抑制其肝脏脂肪变和炎症反应，其作用机制可能与抑制TGR5/NLRP3信号通路传导密切相关。

关键词：非酒精性脂肪性肝炎活血清解灵 G蛋白偶联胆汁酸受体核苷酸结合寡聚化结构域样受体3

滇龙胆草中香叶醇10-羟化酶基因的克隆、蛋白结构及表达分析

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天然产物研究与开发 2024年

作者：王迎夏赵赛静田维圣崔晓雪黄文倩屠鹏飞史社坡刘晓北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京中医药大学中药学院

本研究基于滇龙胆草转录组数据分析，使用RT-PCR技术克隆获得两条香叶醇10-羟化酶基因，命名为GrG10H1和GrG10H2。使用在线软件对其进行了生物信息学分析，两条基因全长分别为1 548 bp、1 482 bp。系统进化分析显示该基因与细胞色素P45... 详细信息

本研究基于滇龙胆草转录组数据分析，使用RT-PCR技术克隆获得两条香叶醇10-羟化酶基因，命名为GrG10H1和GrG10H2。使用在线软件对其进行了生物信息学分析，两条基因全长分别为1 548 bp、1 482 bp。系统进化分析显示该基因与细胞色素P450家族中CYP76B亚家族亲缘关系最近。通过对该蛋白进行三维结构预测、同源模建和分子对接，分析了GrG10H蛋白活性口袋中可能参与催化功能发挥的关键氨基酸残基。荧光定量PCR表明GrG10H1基因在叶中表达水平最高，茎次之，根最低。而GrG10H2基因在根和叶中表达水平较高，在茎中几乎不表达。本研究还建立了能够生产龙胆苦苷的愈伤组织细胞培养体系，为进一步解析龙胆苦苷生物合成机制奠定了基础。

关键词：滇龙胆草龙胆苦苷生物信息学分析香叶醇10-羟化酶基因克隆

大黄-丹参药对对慢性肾衰竭大鼠结肠黏液屏障功能的影响

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药物评价研究 2024年第4期47卷 746-753页

作者：王宏江茜康利袁玲崔晓雪陈冠王璐瑶王蕾天津市医药科学研究所心脑血管药物研究室天津300020

目的研究大黄-丹参药对对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠结肠黏液屏障功能的影响。方法70只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、尿毒清颗粒组(2.5 g·kg^(-1))和大黄-丹参药对高、低剂量组(生药6.0、3.0 g·kg^(-1)),每组14只。除假手... 详细信息

目的研究大黄-丹参药对对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠结肠黏液屏障功能的影响。方法70只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、尿毒清颗粒组(2.5 g·kg^(-1))和大黄-丹参药对高、低剂量组(生药6.0、3.0 g·kg^(-1)),每组14只。除假手术组外,其余各组大鼠采用5/6肾切除法制备CRF模型。连续ig给药12周后,腹主动脉取血测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;剖取残存肾脏和结肠组织,HE和Masson染色观察大鼠肾组织形态学和纤维化改变;阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色观察结肠黏液层厚度和杯状细胞数量变化;免疫组化观察大鼠结肠组织黏蛋白2(Muc2)阳性表达;采用实时荧光定量(qRT-PCR)法和蛋白免疫印记(Western blotting)法检测大鼠结肠组织Muc2的mRNA和蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠血清Scr、BUN、IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显升高(P<0.01);肾组织中肾小球硬化、肾小管扩张,肾间质可见炎性细胞浸润和纤维化,纤维化评分显著增加(P<0.01);结肠黏液层变薄,杯状细胞减少;结肠组织Muc2阳性表达降低,结肠组织Muc2的mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.01)。与模型组比较,大黄-丹参药对高、低剂量组能显著降低模型大鼠血清Scr、BUN、IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.01);肾组织形态明显改善,肾纤维化评分显著降低(P<0.01);结肠黏液层厚度增加,杯状细胞增多;结肠组织Muc2阳性表达升高,结肠组织Muc2的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论大黄-丹参药对能够有效保护CRF大鼠的残存肾功能,延缓CRF进展;其机制可能与恢复CRF大鼠结肠黏液屏障功能,改善机体炎症状态有关。

关键词：大黄-丹参药对慢性肾衰竭肠黏液屏障黏蛋白2

五子衍宗丸调控睾丸线粒体融合蛋白2减轻内质网应激改善肥胖大鼠生精功能

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药物评价研究 2024年第6期 1240-1248页

作者：刘伟伟李锡晶刘大卫崔晓雪高瑞芳王莲顾娜裴天仙天津市医药科学研究所天津中医药大学药物安全评价中心

目的观察五子衍宗丸对高脂饮食诱导肥胖大鼠生精功能的影响，并从睾丸内质网应激角度探讨可能机制。方法30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和五子衍宗丸低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0 g·kg-1)组。对照组给予普通饮食，其余组给予... 详细信息

目的观察五子衍宗丸对高脂饮食诱导肥胖大鼠生精功能的影响，并从睾丸内质网应激角度探讨可能机制。方法30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和五子衍宗丸低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0 g·kg-1)组。对照组给予普通饮食，其余组给予高脂饲料喂养，16周后各组ig给予相应剂量药物，连续4周；取附睾进行精子功能分析；血清ELISA分析性激素水平变化；苏木素-伊红染色观察睾丸组织病理改变；透射电镜观察睾丸支持细胞线粒体和内质网结构改变；免疫荧光染色检测睾丸线粒体融合蛋白2（Mfn2）及内质网应激标识蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的定位及表达；Western blotting检测睾丸组织Mfn2和蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）通路相关蛋白相对表达。结果与对照组比较，模型组大鼠体质量明显增加（P<0.01），血清雌二醇水平明显升高（P<0.01），睾酮水平明显降低（P<0.01）；睾丸生精细胞排列稀疏，细胞变性；精子活力明显降低（P<0.05），精子畸形率明显升高（P<0.01）；睾丸支持细胞内质网和线粒体肿胀，呈空泡状，部分网膜断裂，Mfn2表达明显降低，GRP78荧光表达明显增加；PERK、活化转录因子-4 （ATF4）和CHOP蛋白量明显升高（P<0.01）。与模型组比较，五子衍宗丸高剂量组体质量减轻明显（P<0.05）；中、高剂量组血清雌二醇水平明显降低（P<0.05、0.01），睾酮水平明显升高（P<0.05、0.01）；高剂量组精子活力明显升高（P<0.05），精子畸形率明显降低（P<0.05）；睾丸病变减轻，排列较致密，支持细胞内质网和线粒体肿胀改善；Mfn2荧光表达逐渐增强，蛋白相对表达明显增加（P<0.05、0.01）,GRP78荧光表达逐渐减弱；低剂量组ATF4蛋白量明显降低（P<0.01），中剂量组PERK、ATF4蛋白量明显降低（P<0.05、0.01），高剂量组PERK、ATF4和CHOP蛋白量均明显降低（P<0.01）。结论五子衍宗丸可改善高脂饮食诱导肥胖引起的大鼠生精障碍，其机制可能与调控睾丸支持细胞Mfn2表达，减轻内质网应激有关。

关键词：五子衍宗丸肥胖精子发生睾丸支持细胞线粒体融合蛋白2 内质网应激

地方政府债务、金融营商环境与实体企业融资约束

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财政科学 2022年第1期 32-48页

作者：陈宝东崔晓雪西安工程大学管理学院

文章基于“财政金融关联”视角,利用2015至2020年省级层面的面板数据,实证检验了地方政府债务、金融营商环境与实体企业融资约束三者间的作用效果。研究结果表明:地方政府债务与企业融资约束存在正向推高关系,而良好的金融营商环境对实... 详细信息

文章基于“财政金融关联”视角,利用2015至2020年省级层面的面板数据,实证检验了地方政府债务、金融营商环境与实体企业融资约束三者间的作用效果。研究结果表明:地方政府债务与企业融资约束存在正向推高关系,而良好的金融营商环境对实体企业融资约束存在负向抑制关系;异质性检验显示,地方政府债务对民营实体企业、中西部实体企业融资约束的推高作用更强;交互效应结果显示,金融营商环境的优化能有效缓解地方政府债务对实体企业融资约束的推高作用。因此,提出改善地区金融营商环境、对差异化企业性质实施优惠帮扶政策以及严控地方政府隐性债务增量是缓解实体企业融资困境,促进地区经济平稳发展的重要措施。

关键词：地方政府债务金融营商环境实体企业融资约束

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几种物理因子对黄芩细胞悬浮培养的影响

科技风 2023年第1期 154-156页

作者：杨静陈娜崔晓雪天津渤海职业技术学院环境与化工学院天津300402

利用组织培养技术和紫外分光光度法等分析手段,通过改变接种量、光照条件和pH等物理因子,研究其对黄芩细胞生长和黄芩苷合成的影响。结果表明采用MS基本培养基,添加1.0mg/L6-BA、2.0mg/LNAA和3%蔗糖,选取2.5%的接种量,pH值6.0,并在25℃... 详细信息

利用组织培养技术和紫外分光光度法等分析手段,通过改变接种量、光照条件和pH等物理因子,研究其对黄芩细胞生长和黄芩苷合成的影响。结果表明采用MS基本培养基,添加1.0mg/L6-BA、2.0mg/LNAA和3%蔗糖,选取2.5%的接种量,pH值6.0,并在25℃条件下进行部分光照培养,最有利于黄芩苷的积累,黄芩苷含量最高可达59.76μg/g。

关键词：黄芩接种量光照条件 pH 黄芩苷

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碳源、氮源和磷源对黄芩细胞悬浮培养的影响

科技风 2023年第2期 63-65,113页

作者：杨静陈娜崔晓雪天津渤海职业技术学院环境与化工学院天津300042

利用组织培养技术和紫外分光光度法等分析手段,通过改变培养基碳源种类和浓度、氮源和磷源浓度,考察其对黄芩细胞生长和黄芩苷合成的影响。结果表明,以蔗糖为碳源,添加3%的蔗糖,培养20天,细胞生物量和黄芩苷的合成达到最大。培养基NH_(4... 详细信息

利用组织培养技术和紫外分光光度法等分析手段,通过改变培养基碳源种类和浓度、氮源和磷源浓度,考察其对黄芩细胞生长和黄芩苷合成的影响。结果表明,以蔗糖为碳源,添加3%的蔗糖,培养20天,细胞生物量和黄芩苷的合成达到最大。培养基NH_(4)^(+)和NO_(3)^(-)总浓度保持60mmol/L,NH_(4)^(+)/NO_(3)^(-)为30∶30时分别得到较高的细胞生物量和黄芩苷的合成量。

关键词：黄芩黄芩苷碳源氮源磷源

西安市金融营商环境的优化与科技型企业研发投入——基于新一线城市的对比分析

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现代商业 2022年第13期 123-125页

作者：崔晓雪陈宝东西安工程大学管理学院陕西西安710048

金融是现代经济的命脉,关系着国家经济的繁荣与发展。本文选取杭州市、西安市、重庆市三大新一线城市,探讨金融营商环境与科技型企业创新投入间影响关系。首先对“金融营商环境”这一概念和我国金融营商环境的发展进行文献论述;其次通... 详细信息

金融是现代经济的命脉,关系着国家经济的繁荣与发展。本文选取杭州市、西安市、重庆市三大新一线城市,探讨金融营商环境与科技型企业创新投入间影响关系。首先对“金融营商环境”这一概念和我国金融营商环境的发展进行文献论述;其次通过数据处理与体系构建,进一步探讨三大城市金融营商环境对科技型企业创新投入的影响机制;最后,分析了优化金融营商环境与促进科技型企业创新发展方面存在的问题,并提出相关的政策性建议。

关键词：新一线城市金融营商环境研发创新

西安市金融营商环境对科技型企业创新投入的影响研究

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现代商业 2022年第8期 33-35页

作者：陈宝东崔晓雪西安工程大学管理学院陕西西安710600

金融是一个国家的经济命脉,而营商环境是国家或地区经济软实力的重要体现。本文通过对金融营商环境与科技型企业创新投入的影响关系进行剖析,分析了西安市金融营商环境与科技型企业创新投入的现状厘清西安市在优化金融营商环境与促进科... 详细信息

金融是一个国家的经济命脉,而营商环境是国家或地区经济软实力的重要体现。本文通过对金融营商环境与科技型企业创新投入的影响关系进行剖析,分析了西安市金融营商环境与科技型企业创新投入的现状厘清西安市在优化金融营商环境与促进科技型企业创新发展方面存在的问题,并提出相关的政策性建议。

关键词：金融营商环境融资研发创新